Name: changes in mammary gland morphology and breast cancer risk in rats
Uploaded: 2010-10-16T17:00:00
Duration: 9 min 36 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Changes in Mammary Gland Morphology and Breast Cancer Risk in Rats at JoVE.com

NCI (U54 CA00100970), NCI (1 CA150040 R03-01), ACS (116602-PF-09-018-01-CNE)

1. הסרת בלוטת החלב בטן הכנת הר שלם <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להרדימו על פי הנחיות IACUC. פין החיה על גבו מהרגליים שלה עם מחטים, או קלטת הרגליים על הלוח את פני השטח, ולנגב את העור רטוב עם אתנול (EtOH). הרם את העור קצת עם מלקחיים במספריים חדים לעשות חתך קו האמצע לתוך העור מתחיל בין השניים # 5 הפטמות לחתוך לכיוון הצוואר. בצע חתך Y הפוכה מן קו האמצע לכיוון הרגליים האחוריות. אם בלוטות החלב החזה גם להיות שנאספו, לעשות גם חתך Y מתוך קו האמצע בין זוג # 2 הפטמות כלפי הרגליים הקדמיות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנתח העור לפתוח במספריים בצד אחד של החתך Y הפוכה לחשוף את בלוטת החלב # 4 בטן; בלוטות החלב מחוברים לעור. הצמד את העור עם מחטים על הלוח את פני השטח, כדי לחשוף לחלוטין את בלוטת. עבודה צד אחד, בלוטת באותה תקופה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנתח את בלוטת החלב חינם מן העור או במספריים חדים ו / או אזמל, החל באזור הפרוקסימלי קרוב לפטמה ועבודה לקראת סוף דיסטלי של בלוטת כלפי עמוד השדרה של החיה. (זה יכול לקחת מספר דקות, במיוחד עכברוש מבוגר יותר.) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להפיץ מיד את בלוטת מנותקת לשקופית זכוכית שכותרתו כראוי (להשתמש בעט ראוי סמן קבע ו / או &quot;עט יהלום&quot;), ולהפיץ את בלוטת המקביל בזהירות לגודלו המקורי וצורתם באתרם. שקופיות הזכוכית חייב להיות גדול יותר בלוטת. לאחר הפצת בלוטת לשקופית, ולתת לו לשבת על השולחן למשך זמן מה, כך בלוטת מקלות לשקופית, אבל לא נותנים לו להתייבש. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שים את השקופית לתוך צנצנת המכילה מקבע של Carnoy (75% חומצה אצטית קרחונית, אתנול אבסולוטי 25% = EtOH), תן לו לקבל קבוע בטמפרטורת החדר (RT) בשכונה לרתוח במשך 2 ימים או יותר. שקופיות ניתן גם להשאיר מקבע למשך זמן ארוך יותר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שטפו את השקופיות EtOH 70% במשך שעה 1 ב RT. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שטפו במים מזוקקים למשך 30 דקות ב RT. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כתם אלום כרמינה כתם *) עבור 2 ימים או יותר (עד שתראה כי בלוטות הלימפה יש מוכתמת דרך; להסתכל על הצד האחורי של השקופית). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשטוף בסדרה הגוברת של EtOH, 1 שעה בכל אחד: 70% -&gt; 95% -&gt; 100%. לאחר לשטוף האחרון מוחלט EtOH את בלוטות קסילן. בואו לשבת למכסה המנוע קטר ב RT לפחות 2 ימים. זה השלב האחרון הוא ניקוי של delipidation משמעות בלוטת החלב של כרית שומן החלב, ולהגדיל הבאים בשקיפות. Fattier בלוטת הוא יותר זמן נדרש ניקוי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הר עם כיסוי תלושי באמצעות התקשורת הרכבה, כגון Permount. בואו שקופיות הבאר היבשה (מספר ימים) לפני התבוננות במיקרוסקופ סטריאו. * אלום כרמינה הכתם: מקום 1 גרם ארגמן (Sigma C1022) ו 2.5 גרם אשלגן אלומיניום גופרתי (Sigma A7167) 500 מ&quot;ל מים מזוקקים להרתיח במשך 20 דקות. התאם את נפח סופי 500 מ&quot;ל מים. סינון במקרר. הפתרון יכול לשמש במשך מספר חודשים. בטל כאשר צבע הופך חלש. </li></ol> 2. ניתוח של החלב מורפולוגיה הר שלם בלוטת בלוטת החלב כולו מורפולוגיה mounts מנותח על פי הקצה הנקודות הבאות ואת תוצאות בקורלציה עם הסיכון לסרטן השד. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בלוטת החלב שלמה הר ב PND 21 (טרום התבגרותם גיל): <ul style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אפיתל צמיחה: <ul style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מרחק הפטמה לסוף עץ אפיתל (במילימטרים), נמדד באמצעות סרגל </li></ul></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> פוטנציאל לשינוי ממאיר: <ul style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מספר TEBs (ניצנים מסוף סוף), מנה תחת מיקרוסקופ אור. TEBs הם מבנים בולבוסי הגדול ממוקם רק בסוף דיסטלי של עץ אפיתל החלב </li></ul></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בידול: <ul style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Ab1 (מכתשיים ניצן) ציון (0-5). ניצנים מכתשיים פרושים על פני האפיתל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> AB2 ציון (0-5) </li></ul></li></ul> Mounts שלמים הם הבקיע תחת מיקרוסקופ אור. ערכים הציון מ ab1 ו AB2 מתווספים עבור ציון הבידול הסופי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בלוטת החלב שלמה הר שנאספו PND 50 (שלאחר התבגרותם גיל): <ul style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אפיתל צמיחה: <ul style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מרחק הצומת לימפה לסוף עץ אפיתל (במילימטרים), נמדד באמצעות סרגל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מרחק מקצה העץ אפיתל לסוף כרית שומן, נמדד באמצעות סרגל. </li></ul></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> פוטנציאל לשינוי ממאיר: <ul style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מספר TEBs, מנה תחת מיקרוסקופ אור </li></ul></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בידול: <ul style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Ab1 ציון (0-5) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> AB2 ציון (0-5) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> האוניות ציון (0-5) </li></ul></li></ul> Mounts שלמים הם הבקיע תחת מיקרוסקופ אור. בידול יהיה מעריך בשתי דרכים. ראשית, ערכי את הציון מ ab1, AB2 ו האוניות מתווספים עבור ציון התמיינות סופית. בנוסף, היחס בין ציון האוניות ab1 + ציון AB2 יחושב. ABS לבדל את האוניות, ואת גבוה היחס בין האוניות ו-ABS, מובחן יותר בלוטת הוא. </li></ol> 3. מישוש ומדידה סרטן השד אצל חולדות מתאם ל מורפולוגיה בלוטת החלב <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי להתחיל בהליך זה, להחזיק את העכברוש על ידי לתפוס את כל הגוף עם כף היד על הגב, עם האצבע מאחורי הראש ואת האגודל והאצבע השניה תחת השחי הנגדי. הפעל את העכברוש כך שוכב על האחוריים שלה, למשש לזהות גידולים כל החלב; גידולים מוחשית צריך להרגיש כמו &quot;גוש&quot;. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הבא להשתמש קליפר למדוד את רוחב, אורך וגובה של הגידול. חשב את נפח הגידול באמצעות עוצמת אליפסה, הנוסחה = 1/6πabc, שם &#39;a&#39; = רוחב, = &#39;ב&#39; אורך, &#39;c&#39; גובה =. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ידנית להקליט את המיקום והגודל של הגידול במחברת על בסיס שבועי. נתונים אלה יועברו גיליון מאוחר יותר. </li></ol> 4. נציג תוצאות דיסקציה זהירה של כרית שומן החלב ועיבוד שלה wholemount יאפשר הערכת מצב התפתחותי של בלוטת החלב. כאשר כל שלב הוא נעשה בצורה נכונה, את העץ כולו אפיתל החלב נראה בבירור בתוך כרית שומן, וזה מאפשר קביעה קל של מספר TEBs וחישוב צפיפות של ניצנים ואת האוניות מכתשיים. משגים ב wholemounts הכנת עשויים לכלול אי לנתח את כרית השומן שלם, תיקון מספיק, וניקוי לקוי. הערכת מורפולוגיה בלוטת החלב יספק מידע על המספר הנוכחי של מבנים יכול להצמיח גידולים החלב (TEBs), מידת הבידול של המבנים אפיתל (ניצנים מכתשיים ו האוניות), ולמדוד את הצמיחה (התארכות ductal). חשוב להפריד TEBs כדי מסתיים במסוף; השנייה ממוקמים בקצה הדיסטלי של האפיתל, בדומה TEBs, אך הם קטנים יותר TEBs ואינם להצמיח גידולים ממאירים. מסתיים Terminal נראים גם בתוך העץ אפיתל. <img src="/files/ftp_upload/2260/2260fig1.jpg" alt="איור 1" /> איור 1:. תוצאה נציג מוכן היטב לעלות בלוטת החלב שלמה כל הרכיבים של בלוטת כבר ניתח כראוי מכתים ארגמן הוא אופטימלי. <img src="/files/ftp_upload/2260/2260fig2.jpg" alt="איור 2" /> איור 2:. תוצאה נציג הר מוכן גרוע בלוטת החלב כולו בלוטת כבר ניתח כראוי (החלק הדיסטלי של בלוטת חסר), לא היה מתוח כראוי delipidation לא קרה לגמרי.

<ol>
	<li>Rasmussen, S. B., Young, L. J. T., Smith, G. H., Ip, M. M., Asch, B. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preparing+mammary+gland+whole+mounts+form+mice.">Preparing mammary gland whole mounts form mice.</a> Methods in Mammary Gland Biology and Breast Cancer Research. , 75-85 (2000).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Consensus+statements+from+Mammary+Gland+Whole+Mount+Round+Robin+meeting.">Consensus statements from Mammary Gland Whole Mount Round Robin meeting.</a> , (2009).</li><li>Hilakivi-Clarke, L., Clarke, R., Onojafe, I., Raygada, M., Cho, E., &amp;amp, L. i. p. p. m. a. n., E, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+maternal+diet+high+in+n-6+polyunsaturated+fats+alters+mammary+gland+development,+puberty+onset,+and+breast+cancer+risk+among+female+rat+offspring.">A maternal diet high in n-6 polyunsaturated fats alters mammary gland development, puberty onset, and breast cancer risk among female rat offspring.</a> Proc Natl Acad Sci. 94, 9372-9377 (1997).</li><li>Russo, I. H., Russo, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mammary+gland+neoplasia+in+long-term+rodent+studies.">Mammary gland neoplasia in long-term rodent studies.</a> Environ. Health Perspect. 104 (9), 938-967 (1996).</li><li>Hilakivi-Clarke, L., de Assis, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fetal+origins+of+breast+cancer.">Fetal origins of breast cancer.</a> TRENDS in Endocrinol and Metabol. 17 (9), 340-348 (2006).</li><li>Hilakivi-Clarke, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nutritional+modulation+of+terminal+end+buds:+its+relevance+to+breast+cancer+prevention.">Nutritional modulation of terminal end buds: its relevance to breast cancer prevention.</a> Curr Cancer Drug Targets. 7 (4), 465-474 (2007).</li><li>Silva Idos, S., De Stavola, B., Mccormack, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Collaborative+Group+On+Pre-Natal+Risk+Factors+And+Subsequent+Risk+Of+Breast+Cancer.+Birth+size+and+breast+cancer+risk:+re-analysis+of+individual+participant+data+from+32+studies.">Collaborative Group On Pre-Natal Risk Factors And Subsequent Risk Of Breast Cancer. Birth size and breast cancer risk: re-analysis of individual participant data from 32 studies.</a> PloS Medicine. 5, e193-e193 (2008).</li><li>Warri, A., Saarinen, N. M., Makela, S., Hilakivi-Clarke, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+early+life+genistein+exposures+in+modifying+breast+cancer+risk.">The role of early life genistein exposures in modifying breast cancer risk.</a> Br J Cancer. 98, 1485-1493 (2008).</li><li>Russo, J., Hu, Y. F., Yang, X., Russo, I. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Developmental,+cellular,+and+molecular+basis+of+human+breast+cancer.">Developmental, cellular, and molecular basis of human breast cancer.</a> J Natl Cancer Inst Monogr. , 17-37 (2000).</li><li>Oza, A. M., Boyd, N. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mammographic+parenchymal+patterns:+A+marker+of+breast+cancer+risk.">Mammographic parenchymal patterns: A marker of breast cancer risk.</a> Epidemiological Reviews. 15, 196-208 (1993).</li></ol>

אין ניגודי אינטרסים הכריז.

הערכה של בלוטת החלב מורפולוגיים נקודות קצה ואת הצמיחה של העץ אפיתל יכול לשמש כדי לחזות אם מניפולציות חייו המוקדמים תזונתיים, או מניפולציות אחרות לשנות בסביבה ברחם או הורמונלי לפני גיל הבגרות המינית, לשנות את הסיכון לסרטן השד מאוחר יותר. מאז סרטן השד בבני אדם היא יזמה במבנים החלב (יחידות מסוף אונתית ductal, TDLUs) דומה TEBs בחולדות, טכניקה זו יכולה לשמש כדי לקבוע את הפוטנציאל של החיים חשיפות מוקדם כדי להשפיע על הסיכון לסרטן השד. יתר על כן, אצל נשים mammographic צפיפות גבוהה מגבירה את הסיכון לסרטן השד על ידי קיפול 4-6, והערכת הצמיחה של עץ אפיתל החלב יכול לשמש כדי לזהות גורמים הקובעים צפיפות mammographic וגורמים אשר להפחית את הצפיפות. כדי להשיג מידע זה, בלוטת החלב צריך להיות גזור באופן מלא, מתוח כהלכה על זכוכית שקופית כך שכל מרכיביו ניתן דמיינו תחת מיקרוסקופ. בנוסף, ראוי מכתים ארגמן ו delipidation ב קסילן תספק mounts כל המתאימים הערכת הסיכון לסרטן השד.

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Glacial acetic acid</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>EM</td>
<td>AX0073-9</td>
<td>Carnoy's Fixative</td>
</tr>
<tr>
<td>Absolute ethanol</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>The Waner-Graham Co.</td>
<td>64-17-5</td>
<td>Carnoy's Fixative</td>
</tr>
<tr>
<td>Carmine</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>C1022</td>
<td>Carmine solution</td>
</tr>
<tr>
<td>Aluminum potassium sulfate</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>A7167</td>
<td>Carmine solution</td>
</tr>		</tbody>
		</table>
		</div>

changes in mammary gland morphology and breast cancer risk in rats

מחקרים במודלים של מכרסמים של סרטן השד מראים כי חשיפה לגורמים תזונתיים / הורמונלי במהלך ברחם ותקופות התבגרותם, כאשר בלוטת החלב עובר דוגמנות נרחב מחדש דוגמנות, לשנות את הרגישות קרצינוגן-Induced גידולים החלב. ממצאים דומים תוארו בבני אדם: למשל, משקל לידה גבוה מגביר את הסיכון מאוחר יותר לפתח סרטן שד, ועל הצריכה של סויה בילדות מפחיתה הסיכון לסרטן השד. הוא חשב כי אלה שינויים בתזונה לפני ואחרי לידה לגרום שינויים מורפולוגיים מתמשך בבלוטת החלב אשר בתורו לשנות את הסיכון לסרטן השד בשלב מאוחר יותר בחיים. אלה שינויים מורפולוגיים צפוי לשקף שינויים epigenetic, כגון שינויים מתילציה DNA, ההיסטונים וביטוי מירנה כי אז להשפיע על שעתוק הגנים. במאמר זה אנו מתארים כיצד שינויים במורפולוגיה בלוטת החלב יכול לנבא את הסיכון לסרטן השד אצל חולדות. פרוטוקול שלנו במיוחד מתאר כיצד לנתח ולהסיר את בלוטת החלב בטן עכברוש ואיך להכין mounts בלוטת החלב כולו. הוא גם מתאר כיצד לנתח מורפולוגיה בלוטת החלב פי שלוש נקודות קצה (מספר ניצנים סוף סופני, התארכות בידול אפיתל) וכדי להשתמש בנתונים כדי לחזות את הסיכון לפתח סרטן השד.

Watch this Scientific Journal Video about Changes in Mammary Gland Morphology and Breast Cancer Risk in Rats at JoVE.com

Changes in Mammary Gland Morphology and Breast Cancer Risk in Rats

פרוטוקול שלנו מתאר כיצד לנתח את בלוטת החלב בטן עכברוש ואיך להכין mounts בלוטת החלב כולו. הוא גם מתאר כיצד לנתח מורפולוגיה בלוטת החלב באמצעות שלוש נקודות קצה (מספר ניצנים סוף סופני, התארכות בידול אפיתל) ולהשתמש התוצאות הללו כדי לחזות את הסיכון לסרטן השד אצל חולדות אשר נחשפו שינויים תזונתיים<em&gt; בתוך הרחם</em&gt; או במהלך prepuberty.

שינויים במורפולוגיה בלוטת החלב ואת הסיכון לסרטן השד אצל חולדות

Studies in rodent models of breast cancer show that exposures to dietary/hormonal factors during the in utero and pubertal periods, when the mammary gland ...

Research

JoVE Journal

Biology

Patch Clamp and Perfusion Techniques for Studying Ion Channels Expressed in Xenopus oocytes

Patch Clamp and Perfusion Techniques for Studying Ion Channels Expressed in Xenopus oocytes

הצמד תיקון וטכניקות זלוף עבור לימוד תעלות יונים מתבטא Xenopus ביציות

The protocol presented here is designed to study the activation of the large conductance, voltage- and Ca2+-activated K+ (BK) channels. The protocol may ...

Evaluation of Mammary Gland Development and Function in Mouse Models

הערכת התפתחות בלוטת החלב פונקציה ועל מודלים עכבר

The human mammary gland is composed of 15-20 lobes that secrete milk into a branching duct system opening at the nipple. Those lobes are themselves ...

Quantitative Measurement of Invadopodia-mediated Extracellular Matrix Proteolysis in Single and Multicellular Contexts

מדידת כמותית של Proteolysis מטריקס invadopodia בתיווך בקשרים יחידים ורבים תאיים

Cellular invasion into local tissues is a process important in development and homeostasis.  Malregulated invasion and subsequent cell movement is ...

An Analytical Tool that Quantifies Cellular Morphology Changes from Three-dimensional Fluorescence Images

כלי אנליטי שמכמת שינויי מורפולוגיה תאיים מתמונות פלואורסצנציה תלת ממדים

The most common software analysis tools available for measuring fluorescence images are for two-dimensional (2D) data that rely on manual settings for ...

Combined Immunofluorescence and DNA FISH on 3D-preserved Interphase Nuclei to Study Changes in 3D Nuclear Organization

Immunofluorescence שילוב ודגי DNA על 3D-השתמרו גרעיני Interphase לחקר שינויים בארגון גרעיני 3D

Fluorescent in situ hybridization using DNA probes  on 3-dimensionally preserved nuclei followed by 3D confocal microscopy (3D DNA  FISH) represents the ...

Intraductal Injection for Localized Drug Delivery to the Mouse Mammary Gland

הזרקת intraductal עבור משלוח סמים מקומיים לעכבר החלב בלוטת

Herein we describe a protocol to deliver various reagents to the mouse mammary gland via intraductal injections. Localized drug delivery and knock-down of ...

Indirect Immunofluorescence on Frozen Sections of Mouse Mammary Gland

Immunofluorescence עקיף על סעיפים קפואים של עכבר בלוטת החלב

Indirect immunofluorescence is used to detect and locate proteins of interest in a tissue. The protocol presented here describes a complete and simple ...

Comparison of Three Different Methods for Determining Cell Proliferation in Breast Cancer Cell Lines

השוואה של שלוש שיטות שונות לקביעת שגשוג תאים בשורות תאי סרטן השד

Measuring cell proliferation can be performed by a number of different methods, each with varying levels of sensitivity, reproducibility and compatibility ...

Isolation of Intact, Whole Mouse Mammary Glands for Analysis of Extracellular Matrix Expression and Gland Morphology

בידוד של בלוטות מוגדלות ללא פגע, כל עכבר לניתוח של בלוטת מורפולוגיה וביטוי מטריצה חוץ-תאית

The goal of this procedure was to harvest the #4 abdominal mammary glands from female nulliparous mice in order to assess ECM expression and ductal ...