Name: a 96 well microtiter plate-based method for monitoring formation and antifungal susceptibility testing of candida albicans biofilms
Uploaded: 2010-10-21T00:00:00
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प्रयोगशाला में biofilm से संबंधित काम अनुदान द्वारा वित्त पोषित है दंत चिकित्सा और craniofacial रिसर्च और नेशनल इंस्टीट्यूट ऑफ एलर्जी और संक्रामक रोगों JLL (आर) के लिए राष्ट्रीय संस्थान से R21DE017294 और R21AI080930 गिने. सामग्री केवल लेखकों की ज़िम्मेदारी है और करता NIDCR, NIAID या एनआईएच की आधिकारिक दृश्य जरूरी नहीं प्रतिनिधित्व करते हैं.

1. सी. तैयार albicans सी. albicans के एक जोखिम समूह 1/BSL1 सूक्ष्मजीव है . हमेशा इस सूक्ष्मजीव के साथ काम करने के लिए अच्छा सड़न रोकनेवाला / बाँझ तकनीक और उपयोग biohazard सामग्री के समुचित निपटान के लिए संस्...

<ol>
	<li>Bachmann, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+activity+of+caspofungin+against+Candida+albicans+biofilms.">In vitro activity of caspofungin against Candida albicans biofilms.</a> Antimicrob Agents Chemother. 46, 3591-3596 (2002).</li><li>Hawser, S. P., Norris, H., Jessup, C. J., Ghannoum, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+a+2,3-bis(2-methoxy-4-nitro-5-sulfophenyl)-5-[(phenylamino)carbonyl]-2H-t+etrazolium+hydroxide+(XTT)+colorimetric+method+with+the+standardized+National+Committee+for+Clinical+Laboratory+Standards+method+of+testing+clinical+yeast+isolates+for+susceptibility+to+antifungal+agents.">Comparison of a 2,3-bis(2-methoxy-4-nitro-5-sulfophenyl)-5-[(phenylamino)carbonyl]-2H-t etrazolium hydroxide (XTT) colorimetric method with the standardized National Committee for Clinical Laboratory Standards method of testing clinical yeast isolates for susceptibility to antifungal agents.</a> J Clin Microbiol. 36, 1450-1452 (1998).</li><li>Kuhn, D. M., Balkis, M., Chandra, J., Mukherjee, P. K., Ghannoum, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Uses+and+limitations+of+the+XTT+assay+in+studies+of+Candida+growth+and+metabolism.">Uses and limitations of the XTT assay in studies of Candida growth and metabolism.</a> J Clin Microbiol. 41, 506-508 (2003).</li><li>Kuhn, D. M., George, T., Chandra, J., Mukherjee, P. K., Ghannoum, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antifungal+susceptibility+of+Candida+biofilms:+Unique+efficacy+of+amphotericin+B+lipid+formulations+and+echinocandins.">Antifungal susceptibility of Candida biofilms: Unique efficacy of amphotericin B lipid formulations and echinocandins.</a> Antimicrob. Agents Chemother. 46, 1773-1780 (2002).</li><li>Nobile, C. J., Mitchell, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=C.+albicans+transcription+factor+Bcr1p:+a+regulator+of+cell-surface+genes+and+biofilm+formation.">C. albicans transcription factor Bcr1p: a regulator of cell-surface genes and biofilm formation.</a> Current Biol. 15, 1150-1155 (2005).</li><li>Ramage, G., Saville, S. P., Thomas, D. P., Lopez-Ribot, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Candida+biofilms:+an+update.">Candida biofilms: an update.</a> Eukaryot Cell. 4, 633-638 (2005).</li><li>Ramage, G., Vande Walle, K., Wickes, B. L., p, B. L., Lopez-Ribot, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Standardized+method+for+in+vitro+antifungal+susceptibility+testing+of+Candida+albicans+biofilms.">Standardized method for in vitro antifungal susceptibility testing of Candida albicans biofilms.</a> Antimicrob Agents Chemother. 45, 2475-2479 (2001).</li><li>Bachmann, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antifungal+combinations+against+Candida+albicans+biofilms+in+vitro.">Antifungal combinations against Candida albicans biofilms in vitro.</a> Antimicrob Agents Chemother. 47, 3657-3659 (2003).</li><li>Ramage, G., VandeWalle, K., Bachmann, S. P., Wickes, B. L., Lopez-Ribot, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+pharmacodynamic+properties+of+three+antifungal+agents+against+preformed+Candida+albicans+biofilms+determined+by+time-kill+studies.">In vitro pharmacodynamic properties of three antifungal agents against preformed Candida albicans biofilms determined by time-kill studies.</a> Antimicrob Agents Chemother. 46, 3634-3636 (2002).</li><li>Ramage, G., VandeWalle, K., Wickes, B. L., L&#243;pez-Ribot, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characteristics+of+biofilm+formation+by+Candida+albicans.">Characteristics of biofilm formation by Candida albicans.</a> Rev. Iberoam. Micol. 18, 163-170 (2001).</li><li>Tellier, R., Krajden, M., Grigoriew, G. A., Campbell, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Innovative+endpoint+determination+system+for+antifungal+susceptibility+testing+of+yeasts.">Innovative endpoint determination system for antifungal susceptibility testing of yeasts.</a> Antimicrob Agents Chemother. 36, 1619-1625 (1992).</li><li>Nett, J., Andes, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Candida+albicans+biofilm+development,+modeling+a+host-pathogen+interaction.">Candida albicans biofilm development, modeling a host-pathogen interaction.</a> Curr Opin Microbiol. 9, 340-345 (2006).</li></ol>

यहाँ हम एक सरल, तेजी से, किफायती और अत्यधिक प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य Candida के एक वर्णमिति विधि है कि XTT का उपयोग biofilm के भीतर कोशिकाओं के चयापचय गतिविधियों के उपाय के साथ मिलकर biofilms के गठन के लिए 96 अच्छ?...

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		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Sabouraud-dextrose agar</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Becton Dickinson</td>
<td>211584</td>
<td>To prepare plates for fresh subcultures of fungal isolates</td>
</tr>
<tr>
<td>YPD: Yeast peptone dextrose</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>US Biological </td>
<td>Y2076</td>
<td>Medium for propagation of overnight liquid cultures</td>
</tr>
<tr>
<td>RPMI-1640 without sodium bicarbonate supplemented with L-glutamine</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Cellgro</td>
<td>50-020-PB</td>
<td>Liquid medium for biofilm formation</td>
</tr>
<tr>
<td>Morpholinepropanesulfonic acid (MOPS)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fisher</td>
<td>BP308</td>
<td>To buffer RPMI 1640</td>
</tr>
<tr>
<td>Phosphate buffered saline, PBS</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>P4417</td>
<td>Buffer for washes</td>
</tr>
<tr>
<td>XTT sodium salt</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>X4251</td>
<td>See above for preparation instructions</td>
</tr>
<tr>
<td>Ringer's lactate</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Hospira</td>
<td>NDC0409-7953-09</td>
<td>For preparation of XTT solution</td>
</tr>
<tr>
<td>Menadione</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>M5625</td>
<td>Caution: hazardous by skin contact, inhalation or ingestion</td>
</tr>
<tr>
<td>Petri dishes</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fisher</td>
<td>08-757-12</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>15 ml conical centrifuge tubes</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Corning</td>
<td>430790</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>50 ml conical centrifuge tubes</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Corning</td>
<td>430828</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>96 well microtiter plates: Polystyrene, flat-bottomed, tissue culture treated</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Corning</td>
<td>3595</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Multichannel pipette and tips</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Eppendorf</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Incubator</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Any</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Microtiter plate reader</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Any</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

a 96 well microtiter plate-based method for monitoring formation and antifungal susceptibility testing of candida albicans biofilms

Candida albicans समझौता रोगियों और कैंडिडिआसिस के एक विस्तार जनसंख्या में फंगल संक्रमण का सबसे लगातार कारण बनी हुई है अब अमेरिकी अस्पतालों में तीसरे सबसे आम संक्रमण है. कैंडिडिआसिस के विभिन्न अभिव्यक्तियों biofilm गठन, दोनों मेजबान के ऊतकों और / या चिकित्सा उपकरणों (यानी कैथेटर) पर के साथ जुड़े रहे हैं. Biofilm गठन नकारात्मक नैदानिक ​​निहितार्थ किया जाता है, के रूप में biofilms कोशिकाओं के भीतर मेजबान प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया से और antifungals की कार्रवाई से संरक्षित कर रहे हैं. हम एक सरल, तेज और मजबूत सी. के गठन के लिए इन विट्रो में मॉडल विकसित किया है 96 अच्छी तरह से microtiter प्लेट, जो भी biofilm रोधी संवेदनशीलता परीक्षण के लिए इस्तेमाल किया जा सकता का उपयोग albicans biofilms . इस परख के readout वर्णमिति metabolically सक्रिय कवक biofilm कोशिकाओं द्वारा XTT कमी (एक tetrazolium नमक) पर आधारित है,. एक ठेठ प्रयोग रोधी संवेदनशीलता परीक्षण के लिए एक अतिरिक्त 24 घंटे के साथ biofilm गठन के लिए लगभग 24 घंटे लगते हैं. अपनी सादगी और आमतौर पर उपलब्ध प्रयोगशाला सामग्री और उपकरणों के उपयोग की वजह से, इस तकनीक biofilm अनुसंधान democratizes और फंगल biofilms के रोधी संवेदनशीलता परीक्षण के मानकीकरण की दिशा में एक महत्वपूर्ण कदम का प्रतिनिधित्व करता है.

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A 96 Well Microtiter Plate-based Method for Monitoring Formation and Antifungal Susceptibility Testing of Candida albicans Biofilms

हम के गठन के लिए एक सरल, तेजी से और मजबूत विधि का वर्णन<em&gt; Candida albicans</em&gt; Biofilms के भीतर कोशिकाओं की रोधी संवेदनशीलता परीक्षण में 96 अच्छी तरह से microtiter प्लेट और इसकी उपयोगिता का उपयोग biofilms.

निगरानी संरचना और रोधी संवेदनशीलता के परीक्षण के लिए एक 96 खैर microtiter प्लेट आधारित विधि Candida albicans Biofilms

Candida albicans remains the most frequent cause of fungal infections in an expanding population of compromised patients and candidiasis is now the third ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

A 96 Well Microtiter Plate-based Method for Monitoring Formation and Antifungal Susceptibility Testing of Candida albicans Biofilms

Microtiter Dish Biofilm Formation Assay

Microtiter डिश biofilm गठन परख

Biofilms are communities of microbes attached to surfaces, which can be found in medical, industrial and natural settings.  In fact, life in a biofilm ...

In vitro Biofilm Formation in an 8-well Chamber Slide

In vitro Biofilm Formation in an 8-well Chamber Slide

इन विट्रो biofilm गठन में एक चैंबर 8 अच्छी तरह से स्लाइड में

The chronic nature of many diseases is attributed to the formation of bacterial biofilms which are recalcitrant to traditional antibiotic therapy. ...

Antimicrobial Susceptibility Testing of Mycobacterium Tuberculosis Complex for First and Second Line Drugs by Broth Dilution in a Microtiter Plate Format

पहली और दूसरी लाइन ड्रग्स के लिए माइकोबैक्टीरियम क्षयरोग परिसर के रोगाणुरोधी संवेदनशीलता एक microtiter प्लेट स्वरूप में शोरबा कमजोर पड़ने द्वारा परीक्षण

The rapid detection of antimicrobial resistance is important in the effort to control the increase in resistant Mycobacterium 
tuberculosis (Mtb). ...

Preparation of a Blood Culture Pellet for Rapid Bacterial Identification and Antibiotic Susceptibility Testing

रैपिड बैक्टीरियल पहचान और एंटीबायोटिक संवेदनशीलता परीक्षण के लिए एक रक्त संस्कृति गोली की तैयारी

Bloodstream infections and sepsis are a major cause of morbidity and mortality. The successful outcome of patients suffering from bacteremia depends on a ...

A Reference Broth Microdilution Method for Dalbavancin In Vitro Susceptibility Testing of Bacteria that Grow Aerobically

A Reference Broth Microdilution Method for Dalbavancin In Vitro Susceptibility Testing of Bacteria that Grow Aerobically

Dalbavancin के लिए एक संदर्भ रसा Microdilution विधि<em&gt; इन विट्रो</emAerobically उगने वाले बैक्टीरिया की&gt; संवेदनशीलता परीक्षण

Antimicrobial susceptibility testing (AST) is performed to assess the in vitro activity of antimicrobial agents against various bacteria. The AST results, ...

Visualization of Biofilm Formation in Candida albicans Using an Automated Microfluidic Device

Visualization of Biofilm Formation in Candida albicans Using an Automated Microfluidic Device

Candida albicans में फिल्म निर्माण के दृश्य एक स्वचालित Microfluidic डिवाइस का उपयोग

Candida albicans is the most common fungal pathogen of humans, causing about 15% of hospital-acquired sepsis cases. A major virulence attribute of C. ...

Deep Dermal Injection As a Model of Candida albicans Skin Infection for Histological Analyses

Deep Dermal Injection As a Model of Candida albicans Skin Infection for Histological Analyses

ऊतकवैज्ञानिक विश्लेषण के लिए Candida albicans त्वचा संक्रमण के एक मॉडल के रूप में डीप चमड़े का इंजेक्शन

The skin is an extremely extended organ of the body and, due to this large surface, it is continuously exposed to microorganisms. Skin damage can easily ...

Daily Phototherapy with Red Light to Regulate Candida albicans Biofilm Growth

Daily Phototherapy with Red Light to Regulate Candida albicans Biofilm Growth

लाल बत्ती के साथ दैनिक फोटोथेरेपी Candida albicans Biofilm विकास को विनियमित करने के लिए

Here, we present a protocol to assess the outcomes of per diem red light treatment on the growth of Candida albicans biofilm. To increase the planktonic ...

Clarifying and Imaging Candida albicans Biofilms

Clarifying and Imaging Candida albicans Biofilms

स्पष्ट और इमेजिंग कैंडिडा एल्बिकान बायोफिल्म्स

The microbial fungus Candida albicans can undergo a change from commensal colonization to virulence that is strongly correlated with its ability to switch ...

Rose Bengal-Mediated Photodynamic Therapy to Inhibit Candida albicans

Rose Bengal-Mediated Photodynamic Therapy to Inhibit Candida albicans

गुलाब बंगाल-मध्यस्थता Photodynamic थेरेपी कैंडिडा अल्बिकन्स को बाधित करने के लिए

Invasive Candida albicans infection is a significant opportunistic fungal infection in humans because it is one of the most common colonizers of the gut, ...