Name: stable isotopic profiling of intermediary metabolic flux in developing and adult stage caenorhabditis elegans
Uploaded: 2011-02-27T14:00:00
Duration: 12 min 10 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Stable Isotopic Profiling of Intermediary Metabolic Flux in Developing and Adult Stage Caenorhabditis elegans at JoVE.com

Dit werk werd deels gefinancierd door de National Institutes of Health (K08-DK073545 en NICHD gesponsorde verstandelijke beperking Research Center New Investigator Award), The Philadelphia Foundation, en de Universiteit van Pennsylvania McCabe award (MJF), evenals de Tristan Mullen Fonds (MJF en MY). De inhoud is uitsluitend de verantwoordelijkheid van de auteurs en niet noodzakelijkerwijs het officiële standpunt van de National Institutes of Health.

<ol>
	<li>Hope, I. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> C. elegans: A practical approach. , (1999).</li><li>Dingley, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mitochondrial+respiratory+chain+dysfunction+variably+increases+oxidant+stress+in+Caenorhabditis+elegans.">Mitochondrial respiratory chain dysfunction variably increases oxidant stress in Caenorhabditis elegans.</a> Mitochondrion. 10, 125-136 (2010).</li><li>Jones, B. N., Gilligan, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=o-Phthaldialdehyde+precolumn+derivatization+and+reversed-phase+high-performance+liquid+chromatography+of+polypeptide+hydrolysates+and+physiological+fluids.">o-Phthaldialdehyde precolumn derivatization and reversed-phase high-performance liquid chromatography of polypeptide hydrolysates and physiological fluids.</a> Journal of chromatography. 266, 471-482 (1983).</li><li>Falk, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Metabolic+pathway+profiling+of+mitochondrial+respiratory+chain+mutants+in+C.+elegans.">Metabolic pathway profiling of mitochondrial respiratory chain mutants in C. elegans.</a> Molecular genetics and metabolism. 93, 388-397 (2008).</li><li>Yudkoff, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measuring+in+vivo+ureagenesis+with+stable+isotopes.">Measuring in vivo ureagenesis with stable isotopes.</a> Molecular genetics and metabolism. 100, 37-41 (2010).</li><li>Tsang, W. Y., Sayles, L. C., Grad, L. I., Pilgrim, D. B., Lemire, B. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mitochondrial+respiratory+chain+deficiency+in+Caenorhabditis+elegans+results+in+developmental+arrest+and+increased+life+span.">Mitochondrial respiratory chain deficiency in Caenorhabditis elegans results in developmental arrest and increased life span.</a> J Biol Chem. 276, 32240-32246 (2001).</li></ol>

Toepassing van massaspectrometrie voor abundantie te meten in intermediaire metabolieten biedt een prachtig gedetailleerd beeld van de kritische biochemische veranderingen 5. Hier hebben we gedetailleerde protocollen voor de exploitatie van deze zeer gevoelige en specifieke methode voor de tussenpersoon metabole flux beoordelen in het genetisch veelzijdige model van, C. elegans. Sterker nog, voeding levende dieren met een stabiele isotoop gemerkte metabole precursors (zoals 13 C-glucose) maakt nieuwe inzicht in de intermediair metabole route flux bij het ​​meten van isotopische verrijking in downstream metabolieten. We hebben betrouwbare methode om robuuste analyse van de flux te verkrijgen door middel van glycolyse, pyruvaat metabolisme en de citroenzuur-cyclus. Dit kan worden bereikt, zowel in dieren gevoed met stabiele isotopen vanaf de vroege larvale ontwikkelingsstadia of aan het begin in de post-mitotische volwassen periode. Isotopische verrijking in verschillende metaboliet soorten kunnen bestudeerd worden in combinatie met hele worm vrije aminozuren profilering van high performance liquid chromatografie, zoals eerder beschreven vier, de absolute isotopische verrijking te bepalen in verschillende soorten van vrije worm alanine, aspartaat, glutamaat en glutamine. Inderdaad, zijn consistent patroon van isotopische verrijking verkregen bij het meten van aminozuren en organische zuren analyten in hoeveelheden van 1.000 tot 2.000 jong volwassene synchroon wormen. Een dergelijke methode kan abnormale intermediair flux gevoelig discrimineren in de nucleaire gen-gebaseerde mitochondriale mutante stammen in vergelijking met wild-type wormen. Deze techniek houdt waarde flux veranderingen te onderzoeken in specifieke biochemische pathways van belang om gemeenschappelijke aangeboren stofwisselingsziekten. In het bijzonder het gebruik van glucose gelabeld met een stabiele isotoop koolstof informeert flux door de centrale metabolische wegen die van belang zijn mitochondriale ziekte. Inderdaad, onze gegevens suggereren toepassing van deze methode kan gevoelig abnormale intermediair flux discrimineren op een nucleair gen-gebaseerde mitochondriale complex III subeenheid mutante stam (isp-1 (qm150)) ten opzichte van wild-type wormen. Het is belangrijk te erkennen dat, omdat blootstelling aan isotopen is voltooid over een periode van een tot enkele dagen, gekwantificeerd isotopische verrijking is een &quot;steady state&quot; verrijking waarde in plaats van meetbare flux gedurende een bepaalde periode als zou kunnen worden bepaald in cel-gebaseerde modellen blootgesteld aan isotoop voor een periode van minuten tot uren. Een andere mogelijke beperking van ondervragen pad flux in de loop van de nematode ontwikkeling heeft betrekking op verschillende lengtes van larvale ontwikkeling die zich voordoen in het bijzonder mutante stammen. Bijvoorbeeld, zijn vele ernstige mitochondriale mutaties bekend te arresteren veroorzaken op de derde (L3) larvale stadium 6. Zo kan de analyse van isotopen incorporatie alleen bij dieren die overleven tot volwassen leeftijd niet representatief voor de gehele bevolking mutant. Zou echter kunnen deze methodiek worden aangepast aan isotoop opname te beoordelen in intermediaire metabolieten op een bepaalde larvale stadium (zoals L2) in plaats van te wachten voor de dieren om het volwassen stadium te bereiken. Zo hebben dieren die het alternatieve larvale stadium bekend als Dauer waarschijnlijk gaan significant veranderd (waarschijnlijk lager) metabole flux ten opzichte van dieren die direct doorgaan door de vier larvale stadia. Toekomstig onderzoek kan ook worden uitgevoerd om isotoop opname rechtstreeks te beoordelen in Dauer stadium dieren van verschillende genetische achtergronden. Blootstellen van dieren stabiele isotoop voor een vaste periode (hier 24 tot 48 uur) begint zodra dieren bereikte de jonge volwassen stadium (zoals beschreven in Protocol B) wordt het effect van de variabele ontwikkeling periodes. Terwijl de 13 C-glucose alleen ondervraagt ​​glycolyse, pyruvaat metabolisme en tricarbonzuur cyclus flux, kunnen andere isotopen tracers mogelijk worden beoordeeld om biochemische route flux ondervragen via andere routes van interesse in nematoden. Bijvoorbeeld, 15 N-glycine worden gebruikt om aminozuur omzet in nematoden te beoordelen. Een andere mogelijke beperking van deze aanpak is het niveau van de gevoeligheid van de metaboliet detectie. Onze ervaring suggereert een minimum van 500 jonge volwassen aaltjes nodig zijn om isotopen integratie succesvol te kwantificeren door de HPLC en GC / MS-methoden hier werkzaam. Gebruik van instrumenten met een grotere gevoeligheid, zoals de ultra performance vloeistofchromatografie (UPLC), toestaan ​​dat verdere verlaging van de onderzochte dier-nummer, ook al verwachten we dit waarschijnlijk om een ​​betrouwbare kwantificering van metabolieten en isotopische integratie mogelijk te maken in de metaboliet soorten uit enkele wormen. We bestudeerden worm populaties van 1.000 dieren per experiment, dat vonden we om een ​​betrouwbare lage abundantie metabolieten te detecteren in elke stam. Echter, sommige metabolieten, zoals GABA, alleen betrouwbaar worden gekwantificeerd in veel grotere populaties van nematoden, in de orde van1x10 6 dieren 4. Samengevat, stabiele isotoop profilering zorgt voor een niet-invasieve en veilige (niet-radioactief) benadering die al lang gebruikt om aangeboren stofwisselingsziekten te bestuderen. De toepassing van deze methodologie op C. elegans biedt de nieuwe capaciteit te onderzoeken in vivo, real-time, metabole veranderingen die zich voordoen op het gehele dier niveau, dat kan het gevolg zijn van individuele genetische aandoeningen en / of farmacologisch middel blootstelling.

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>S. basal</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>1 - page 59</td>
<td>Protocols A and B</td>
</tr>
<tr>
<td>Cholesterol</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>C-8503</td>
<td>Protocol B</td>
</tr>
<tr>
<td>OP50 E. coli</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Caenorhabditis Genetics Center</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Protocols A and C</td>
</tr>
<tr>
<td>K12 E. coli</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Caenorhabditis Genetics Center</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Protocol B</td>
</tr>
<tr>
<td>NGM agar</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Research Products INT</td>
<td>N81800-1000.0</td>
<td>Protocols A, B, and C</td>
</tr>
<tr>
<td>13C glucose (universally labeled)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Cambridge Isotope labs</td>
<td>CLM-1396</td>
<td>Protocol A and C</td>
</tr>
<tr>
<td>13C glucose (1,6 labeled)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Cambridge Isotope labs</td>
<td>CLM-2717</td>
<td>Protocol B</td>
</tr>
<tr>
<td>60% Perchloric acid (PCA)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fisher</td>
<td>MK2766500</td>
<td>Protocols A and B</td>
</tr>
<tr>
<td>&epsilon;-aminocaproic acid (Internal Standard)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>A-2504</td>
<td>Protocols A and B</td>
</tr>
<tr>
<td>MTBSTFA</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Regis</td>
<td>270243</td>
<td>Protocol E</td>
</tr>
<tr>
<td>Acetonitrile</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Regis</td>
<td>270010</td>
<td>Protocol E</td>
</tr>
<tr>
<td>AG 1-X8, 100-200, Chloride form resin</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>BIO-RAD</td>
<td>140-1441</td>
<td>Protocols A and B (organic acid extraction)</td>
</tr>
<tr>
<td>AG 50W-X8, 100-200, Hydrogen form resin</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>BIO-RAD</td>
<td>142-1441</td>
<td>Protocols A and B (amino acid extraction)</td>
</tr>
<tr>
<td>NaHCO3</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>S-8875</td>
<td>Protocol C</td>
</tr>
<tr>
<td>NaOH</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>S8045</td>
<td>Protocol C</td>
</tr>
<tr>
<td>3N HCl</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>320331</td>
<td>Protocol D</td>
</tr>
<tr>
<td>1N HCl</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>320331</td>
<td>Protocol A</td>
</tr>
<tr>
<td>0.1 N HCl</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>320331</td>
<td>Protocol D</td>
</tr>
<tr>
<td>4N NH4OH</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>30501</td>
<td>Protocol D</td>
</tr>
<tr>
<td>4N KOH</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>484016</td>
<td>Protocols A and B</td>
</tr>
<tr>
<td>Deionized water</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Milli Q Biocel</td>
<td>ZMQA60F01</td>
<td>Protocol D</td>
</tr>
<tr>
<td>Helium</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Airgas</td>
<td>24001364</td>
<td>Protocol C2</td>
</tr>
<tr>
<td>SMZ-800 Zoom Stereo-Microscope</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>NIKON</td>
<td>NI MNA41000</td>
<td>Protocols A, B, and C</td>
</tr>
<tr>
<td>pH meter</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fisher</td>
<td>S68167</td>
<td>Protocols A and B</td>
</tr>
<tr>
<td>Table top centrifuge - 5804R</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Eppendorf</td>
<td>05-400-93</td>
<td>Protocols A and B</td>
</tr>
<tr>
<td>Incubated platform shaker</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>New Brunswick</td>
<td>M1324-0004</td>
<td>Protocol B</td>
</tr>
<tr>
<td>Mini LabRoller Rotator</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Labnet</td>
<td>H-5500</td>
<td>Protocols A and B</td>
</tr>
<tr>
<td>Pestles</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Kontes</td>
<td>K749520-0090</td>
<td>Protocols A and B</td>
</tr>
<tr>
<td>Drill</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Kontes</td>
<td>K749540-0000</td>
<td>Protocols A and B</td>
</tr>
<tr>
<td>1 L glass beaker</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fisher</td>
<td>02-539P</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>1 L Erlenmeyer Flasks</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>VWR</td>
<td>89000-368</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>25 mL Erlenmeyer Flasks</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>VWR</td>
<td>89000-356</td>
<td>Protocol B</td>
</tr>
<tr>
<td>7ml round-bottom glass tubes + rubber stopper</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>VWR</td>
<td>VT6431</td>
<td>Protocols A, B, and C1,C2</td>
</tr>
<tr>
<td>10 ml round-bottom glass tubes + rubber stopper</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>VWR</td>
<td>VT6430</td>
<td>Protocol C2</td>
</tr>
<tr>
<td>Blue top tubes</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Labco</td>
<td>438B</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>50 ml conical plastic tubes</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Falcon</td>
<td>14-959-49A</td>
<td>All protocols</td>
</tr>
<tr>
<td>1.5 ml microfuge tubes</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fisher</td>
<td>02-681-320</td>
<td>Protocols A and B</td>
</tr>
<tr>
<td>Syringes (1 mL, 10 mL, 20 mL)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>BD Medical</td>
<td>301025, 301029, 301031</td>
<td>Protocols C1 and C2</td>
</tr>
<tr>
<td>25 gauge needles</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fisher</td>
<td>22-253-131</td>
<td>Protocols C1 and C2</td>
</tr>
<tr>
<td>Poly-Prep Chromatography Columns</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>BIO-RAD</td>
<td>731-1550</td>
<td>Protocol D</td>
</tr>
<tr>
<td>Pasteur pipettes</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>VWR</td>
<td>14673-043</td>
<td>Protocol D</td>
</tr>
<tr>
<td>60mm Petri dishes</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>VWR</td>
<td>25373-085</td>
<td>Protocol C</td>
</tr>
<tr>
<td>Glass chamber (cut bottom of 1 L flask) fitted with grease-sealed 3-way stopcock</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Custom Made in Glass Shop</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Protocol C</td>
</tr>
<tr>
<td>Optically transparent glass plate</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Custom Made in Glass Shop</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Protocol C</td>
</tr>
<tr>
<td>Reacti-Vap III Evaporator</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Thermo Scientific</td>
<td>18826</td>
<td>Protocol D</td>
</tr>
<tr>
<td>Cotton</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>VWR</td>
<td>14224-516</td>
<td>Protocol D</td>
</tr>
<tr>
<td>High Vacuum Grease</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Dow Corning</td>
<td>1597418</td>
<td>Protocol C1</td>
</tr>
<tr>
<td>Aluminum Foil</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fisher</td>
<td>01-213-18</td>
<td>Protocol B</td>
</tr>
<tr>
<td>Timer</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>ISC Bioexpress</td>
<td>T-2504-5</td>
<td>Protocol C</td>
</tr>
<tr>
<td>Gas-Ratio Mass Spectrometer</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Thermophinigan</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Protocol D</td>
</tr>
<tr>
<td>GC-MS</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>HP</td>
<td>5980/5971</td>
<td>Protocol D</td>
</tr>
<tr>
<td>GC-MS</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Agilent</td>
<td>6980N/5973N</td>
<td>Protocol D</td>
</tr>
<tr>
<td>HPLC</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Varian</td>
<td>9010</td>
<td>Protocol D</td>
</tr>		</tbody>
		</table>
		</div>

stable isotopic profiling of intermediary metabolic flux in developing and adult stage caenorhabditis elegans

Stabiele isotopen profilering is al lang toegestaan ​​gevoelige onderzoeken van de metabole gevolgen van genetische mutaties en / of farmacologische behandelingen in cellulaire en zoogdieren modellen. We beschrijven hier gedetailleerde methoden om stabiele isotopen profilering van intermediaire metabolisme en metabole flux uit te voeren in de nematode, Caenorhabditis elegans. Methoden beschreven voor het profileren van hele worm vrije aminozuren, gelabeld koolstofdioxide, gemerkt organische zuren, en gelabeld aminozuren in de dieren blootgesteld aan stabiele isotopen, hetzij vanaf de vroege ontwikkeling op nematode groeimedia agar platen of begin als jonge volwassenen maar blootgesteld aan diverse farmacologische behandelingen in vloeibare cultuur. Vrije aminozuren worden gekwantificeerd door de hoge prestatie vloeistofchromatografie (HPLC) geheel worm porties gewonnen in 4% perchloorzuur. Universeel label 13 C-glucose of 1,6 - 13 C 2-glucose wordt gebruikt als de stabiele isotopen voorloper van wie het label koolstof wordt opgespoord door middel van massaspectrometrie in koolstofdioxide (zowel atmosferische en opgelost), alsmede in metabolieten indicatie van de flux door de glycolyse , pyruvaat metabolisme, en de citroenzuur-cyclus. Representatieve resultaten zijn opgenomen om effecten van de isotoop belichtingstijd, verschillende bacteriële clearing protocollen, en alternatieve worm verstoring methoden aan te tonen in wild-type nematoden, evenals de relatieve omvang van isotopische incorporatie in het mitochondriale complex III mutant wormen (isp-1 (qm150) ) ten opzichte van wild-type wormen. Toepassing van stabiele isotopen profilering in het leven nematoden biedt een nieuwe mogelijkheid om te onderzoeken op het hele dier niveau real-time metabole veranderingen die veroorzaakt worden door individuele genetische stoornissen en / of farmacologische therapieën.

Watch this Scientific Journal Video about Stable Isotopic Profiling of Intermediary Metabolic Flux in Developing and Adult Stage Caenorhabditis elegans at JoVE.com

Stable Isotopic Profiling of Intermediary Metabolic Flux in Developing and Adult Stage Caenorhabditis elegans

Stabiel isotopische profilering door middel van gaschromatografie massaspectrometrische analyse van intermediaire metabole flux wordt beschreven in de nematode,<em&gt; Caenorhabditis elegans</em&gt;. Methoden worden voor het beoordelen van isotopen verrijking in kooldioxide, organische zuren en aminozuren na isotoop blootstelling zowel tijdens de ontwikkeling op agar platen of tijdens de volwassenheid in vloeibare cultuur.

Stabiele Isotopen Profilering van Intermediair metabole flux in het ontwikkelen en volwassen stadium Caenorhabditis elegans</em

Stable isotopic profiling has long permitted sensitive investigations of the metabolic consequences of genetic mutations and/or pharmacologic therapies in ...

Research

JoVE Journal

Biology

Stable Isotopic Profiling of Intermediary Metabolic Flux in Developing and Adult Stage Caenorhabditis elegans

Generation of Stable Transgenic C. elegans Using Microinjection

Generatie van Stable transgene C. elegans Met behulp van micro-injectie

Transgenic Caenorhabditis elegans can be readily created via microinjection of a DNA plasmid solution into the gonad 1.  The plasmid DNA rearranges to ...

Isolation and In vitro Activation of Caenorhabditis elegans Sperm

Isolation and In vitro Activation of Caenorhabditis elegans Sperm

Isolatie en In vitro Activering van Caenorhabditis elegans Sperma

Males and hermaphrodites are the two naturally found sexual forms in the nematode C. elegans. The amoeboid sperm are produced by both males and ...

Solid Plate-based Dietary Restriction in Caenorhabditis elegans

Solid Plate-based Dietary Restriction in Caenorhabditis elegans

Solid Plate-based dieetbeperking in Caenorhabditis elegans</em

Reduction of food intake without malnutrition or starvation is known to increase lifespan and delay the onset of various age-related diseases in a wide ...

Time-lapse Microscopy of Early Embryogenesis in Caenorhabditis elegans

Time-lapse Microscopy of Early Embryogenesis in Caenorhabditis elegans

Time-lapse microscopie van de vroege embryogenese in Caenorhabditis elegans

Caenorhabditis elegans has often been used as a model system in studies of early developmental processes.  The transparency of the 
embryos, the genetic ...

Basic Caenorhabditis elegans Methods: Synchronization and Observation

Basic Caenorhabditis elegans Methods: Synchronization and Observation

Basis-<em&gt; Caenorhabditis elegans</em&gt; Methoden: Synchronisatie-en-

Research into the molecular and developmental biology of the nematode Caenorhabditis elegans was begun in the early seventies by Sydney Brenner and it has ...

Prostaglandin Extraction and Analysis in Caenorhabditis elegans

Prostaglandin Extraction and Analysis in Caenorhabditis elegans

Prostaglandine-extractie en analyse in<em&gt; Caenorhabditis elegans</em

Caenorhabditis elegans is emerging as a powerful animal model to study the biology of lipids1-9. Prostaglandins are an important class of eicosanoids, ...

Cultivation of Caenorhabditis elegans in Three Dimensions in the Laboratory

Cultivation of Caenorhabditis elegans in Three Dimensions in the Laboratory

teelt van<em&gt; Caenorhabditis elegans</em&gt; In drie dimensies in het Laboratorium

The use of genetic model organisms such as Caenorhabditis elegans has led to seminal discoveries in biology over the last five decades. Most of what we ...

Combined Nucleotide and Protein Extractions in Caenorhabditis elegans

Combined Nucleotide and Protein Extractions in Caenorhabditis elegans

Gecombineerde Nucleotide en eiwit extracties in Caenorhabditis elegans

A single biological sample holds a plethora of information, and it is now common practice to simultaneously investigate several macromolecules to capture ...

Measurement of Oxygen Consumption Rates in Intact Caenorhabditis elegans

Measurement of Oxygen Consumption Rates in Intact Caenorhabditis elegans

Meting van zuurstof verbruik in Intact Caenorhabditis elegans

Optimal mitochondrial function is critical for healthy cellular activity, particularly in cells that have high energy demands like those in the nervous ...

Purification and Analysis of Caenorhabditis elegans Extracellular Vesicles

Purification and Analysis of Caenorhabditis elegans Extracellular Vesicles

Zuivering en analyse van Caenorhabditis elegans Extracellular Blaasjes

The secretion of small membrane-bound vesicles into the external environment is a fundamental physiological process of all cells. These extracellular ...