Name: stable isotopic profiling of intermediary metabolic flux in developing and adult stage caenorhabditis elegans
Uploaded: 2011-02-27T14:00:00
Duration: 12 min 10 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Stable Isotopic Profiling of Intermediary Metabolic Flux in Developing and Adult Stage Caenorhabditis elegans at JoVE.com

עבודה זו מומנה בחלקה על ידי המכונים הלאומיים לבריאות (K08-DK073545 ו NICHD בחסות מוגבלות שכלית ו התפתחותית מרכז המחקר החוקר ניו פרס), קרן בפילדלפיה, אוניברסיטת פנסילבניה פרס מק &#39;קייב (עמיתי ירושלים), כמו גם את טריסטן מאלן קרן (עמיתי ירושלים ואת שלי). התוכן הוא באחריות הבלעדית של הכותבים ולא בהכרח מייצגים את הדעות הרשמיות של מכוני הבריאות הלאומיים.

<ol>
	<li>Hope, I. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> C. elegans: A practical approach. , (1999).</li><li>Dingley, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mitochondrial+respiratory+chain+dysfunction+variably+increases+oxidant+stress+in+Caenorhabditis+elegans.">Mitochondrial respiratory chain dysfunction variably increases oxidant stress in Caenorhabditis elegans.</a> Mitochondrion. 10, 125-136 (2010).</li><li>Jones, B. N., Gilligan, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=o-Phthaldialdehyde+precolumn+derivatization+and+reversed-phase+high-performance+liquid+chromatography+of+polypeptide+hydrolysates+and+physiological+fluids.">o-Phthaldialdehyde precolumn derivatization and reversed-phase high-performance liquid chromatography of polypeptide hydrolysates and physiological fluids.</a> Journal of chromatography. 266, 471-482 (1983).</li><li>Falk, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Metabolic+pathway+profiling+of+mitochondrial+respiratory+chain+mutants+in+C.+elegans.">Metabolic pathway profiling of mitochondrial respiratory chain mutants in C. elegans.</a> Molecular genetics and metabolism. 93, 388-397 (2008).</li><li>Yudkoff, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measuring+in+vivo+ureagenesis+with+stable+isotopes.">Measuring in vivo ureagenesis with stable isotopes.</a> Molecular genetics and metabolism. 100, 37-41 (2010).</li><li>Tsang, W. Y., Sayles, L. C., Grad, L. I., Pilgrim, D. B., Lemire, B. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mitochondrial+respiratory+chain+deficiency+in+Caenorhabditis+elegans+results+in+developmental+arrest+and+increased+life+span.">Mitochondrial respiratory chain deficiency in Caenorhabditis elegans results in developmental arrest and increased life span.</a> J Biol Chem. 276, 32240-32246 (2001).</li></ol>

אין ניגודי אינטרסים הכריז.

יישום ספקטרומטריית מסה כדי למדוד שפע איזוטופי של מטבוליטים מתווך מעניק תמונה מפורטת להפליא של שינויים ביוכימיים קריטי 5. הנה, סיפקנו פרוטוקולים מפורטים לניצול במתודולוגיה זו רגישה וספציפית להעריך מטבולית השטף כמתווך החיה מודל צדדי גנטית, C. elegans. ואכן, להזנת בעלי חיים החיים עם איזוטופ יציב שכותרתו מבשרי מטבוליות (כגון 13-C-גלוקוז) מאפשר תובנה הרומן לתוך השטף מסלול מטבולי מתווך כאשר מודדים העשרת איזוטופים של מטבוליטים במורד הזרם. פיתחנו מתודולוגיה אמינה לקבל ניתוח החזקה של השטף דרך הגליקוליזה, מטבוליזם pyruvate, ואת מחזור חומצה tricarboxylic. זו יכולה להיות מושגת הן חיות נמאס איזוטופ יציב מראשית שלבי התפתחות הזחל או לתחילת בתקופה שלאחר mitotic הבוגרת. העשרת איזוטופים במינים שונים המטבוליט ניתן ללמוד יחד עם פרופיל שלם חינם תולעת חומצת אמינו על ידי כרומטוגרפיה ביצועים גבוהים נוזלי, כפי שתואר לעיל 4, כדי לקבוע העשרת איזוטופים מוחלט מינים שונים של אלאנין תולעת בחינם, aspartate, גלוטמט, גלוטמין ו. ואכן, דפוסים עקביים של העשרת איזוטופים מתקבלים כאשר מודדים חומצת אמינו ו analytes חומצה אורגנית aliquots של 1,000 עד 2,000 תולעים צעירות סינכרוני מבוגר. מתודולוגיה כזאת יכולה להבחין ברגישות השטף מתווך חריגה בגן מבוססי זנים מוטציה גרעינית המיטוכונדריה יחסית wild-type תולעים. טכניקה זו בעלת ערך לחקור שינויים השטף במסלולים ביוכימיים מסוימים של רלוונטיות הטעויות המולדות נפוץ של חילוף החומרים. בפרט, את הניצול של גלוקוז שכותרתו עם איזוטופ יציב מודיע השטף פחמן באמצעות מסלולים מטבוליים המרכזי של הרלוונטיות למחלה המיטוכונדריה. ואכן, הנתונים שלנו מצביעים על היישום של מתודולוגיה כזאת יכולה להבחין ברגישות השטף מתווך חריגה גרעינית גן מבוססי זן המיטוכונדריה מורכבים למקטע השלישי מוטציה (ISP-1 (qm150)) ביחס ל wild-type תולעים. חשוב להכיר כי מאז החשיפה איזוטופי הושלמה על פני תקופה של שנה עד מספר ימים, העשרת איזוטופים לכמת מייצג &quot;מצב יציב&quot; העשרה ערך ולא השטף לכימות על פני תקופה מוגדרת של זמן יכול להיות נחוש בתא מבוססי מודלים חשופים איזוטופ לתקופה של דקות עד שעות. מגבלה נוספת הפוטנציאל של חוקר השטף מסלול במהלך פיתוח נמטודות מתייחס באורכים שונים של התפתחות הזחל המתרחשים שמוטציות בפרט. לדוגמה, רבים מוטציות המיטוכונדריה חמורים ידועים כגורמים לעצור את השלב השלישי הזחל (L3) 6. לפיכך, ניתוח ההתאגדות איזוטופ רק חיות לשרוד לבגרות לא יכול להיות מייצג של האוכלוסייה כולה מוטציה. עם זאת, המתודולוגיה זה יכול להיות מותאם על מנת להעריך ההתאגדות איזוטופי של מטבוליטים מתווך בשלב הזחל ספציפיים (כגון L2), ולא מחכה חיות להגיע לשלב הבוגר. באופן דומה, חיות להיכנס בשלב הזחל חלופה המכונה dauer סביר שינו באופן משמעותי את השטף (סביר התחתון) מטבולית יחסית בעלי חיים להמשיך ישירות דרך ארבעה שלבים הזחל. מחקר עתידי יכול גם להתבצע ישירות להעריך ההתאגדות איזוטופי בחיות dauer שלב של רקע גנטי שונה. חשיפת בעלי חיים איזוטופ יציב לתקופת זמן קבועה (כאן, 24 עד 48 שעות) בתחילת פעם חיות הגיעו לשלב הבוגר הצעיר (כמפורט בפרוטוקול B) מסיר את ההשפעה של תקופות התפתחותי משתנה. בעוד 13 C-גלוקוז רק חוקר מטבוליזם הגליקוליזה, pyruvate ושטף tricarboxylic מחזור חומצה, קליעים נותבים איזוטופים אחרים שעלולים להיות העריכו לחקור השטף מסלול ביוכימי דרך מסלולים אחרים של עניין נמטודות. לדוגמה, 15 N-גליצין עלול להיות מנוצל על מנת להעריך מחזור חומצת אמינו נמטודות. מגבלה נוספת הפוטנציאל של גישה זו היא רמת הרגישות של זיהוי המטבוליט. הניסיון שלנו מצביע על מינימום של 500 נמטודות מבוגרים צעירים נדרשים בהצלחה לכמת ההתאגדות איזוטופי על ידי שיטות HPLC ו - GC / MS מועסק כאן. שימוש של מכשירים עם רגישות רבה יותר, כגון כרומטוגרפיה נוזלית אולטרה ביצועים (UPLC), רשאי להתיר הפחתה נוספת של מספר בעלי חיים למד, למרות שאנו צופים זה סביר לאפשר quantitation אמין של מטבוליטים ושילוב איזוטופי לתוך מינים המטבוליט מפני תולעים יחיד. למדנו אוכלוסיות תולעת של 1,000 בעלי חיים לכל ניסוי, אשר מצאנו באופן מהימן לזהות מטבוליטים שפע נמוך כל זן. אולם, מטבוליטים מסוימים, כגון גאבא, יכול להיות רק לכמת באופן אמין אוכלוסיות הרבה יותר גדול של נמטודות, בסדר גודל של1x10 6 חיות 4. לסיכום, אפיון איזוטופ יציב מספק פולשנית ובטוחה (לא רדיואקטיבי) הגישה כבר זמן רב מנוצל ללימוד הטעויות המולדות של חילוף החומרים. יישום מתודולוגיה זו ג elegans מספק את קיבולת הרומן לחקור in vivo, בזמן אמת, שינויים מטבוליים המתרחשים ברמת חיים שלם, אשר עלול לגרום הפרעות גנטיות מן הפרט ו / או סוכן חשיפות תרופתי.

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>S. basal</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>1 - page 59</td>
<td>Protocols A and B</td>
</tr>
<tr>
<td>Cholesterol</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>C-8503</td>
<td>Protocol B</td>
</tr>
<tr>
<td>OP50 E. coli</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Caenorhabditis Genetics Center</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Protocols A and C</td>
</tr>
<tr>
<td>K12 E. coli</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Caenorhabditis Genetics Center</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Protocol B</td>
</tr>
<tr>
<td>NGM agar</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Research Products INT</td>
<td>N81800-1000.0</td>
<td>Protocols A, B, and C</td>
</tr>
<tr>
<td>13C glucose (universally labeled)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Cambridge Isotope labs</td>
<td>CLM-1396</td>
<td>Protocol A and C</td>
</tr>
<tr>
<td>13C glucose (1,6 labeled)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Cambridge Isotope labs</td>
<td>CLM-2717</td>
<td>Protocol B</td>
</tr>
<tr>
<td>60% Perchloric acid (PCA)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fisher</td>
<td>MK2766500</td>
<td>Protocols A and B</td>
</tr>
<tr>
<td>&epsilon;-aminocaproic acid (Internal Standard)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>A-2504</td>
<td>Protocols A and B</td>
</tr>
<tr>
<td>MTBSTFA</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Regis</td>
<td>270243</td>
<td>Protocol E</td>
</tr>
<tr>
<td>Acetonitrile</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Regis</td>
<td>270010</td>
<td>Protocol E</td>
</tr>
<tr>
<td>AG 1-X8, 100-200, Chloride form resin</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>BIO-RAD</td>
<td>140-1441</td>
<td>Protocols A and B (organic acid extraction)</td>
</tr>
<tr>
<td>AG 50W-X8, 100-200, Hydrogen form resin</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>BIO-RAD</td>
<td>142-1441</td>
<td>Protocols A and B (amino acid extraction)</td>
</tr>
<tr>
<td>NaHCO3</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>S-8875</td>
<td>Protocol C</td>
</tr>
<tr>
<td>NaOH</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>S8045</td>
<td>Protocol C</td>
</tr>
<tr>
<td>3N HCl</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>320331</td>
<td>Protocol D</td>
</tr>
<tr>
<td>1N HCl</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>320331</td>
<td>Protocol A</td>
</tr>
<tr>
<td>0.1 N HCl</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>320331</td>
<td>Protocol D</td>
</tr>
<tr>
<td>4N NH4OH</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>30501</td>
<td>Protocol D</td>
</tr>
<tr>
<td>4N KOH</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>484016</td>
<td>Protocols A and B</td>
</tr>
<tr>
<td>Deionized water</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Milli Q Biocel</td>
<td>ZMQA60F01</td>
<td>Protocol D</td>
</tr>
<tr>
<td>Helium</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Airgas</td>
<td>24001364</td>
<td>Protocol C2</td>
</tr>
<tr>
<td>SMZ-800 Zoom Stereo-Microscope</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>NIKON</td>
<td>NI MNA41000</td>
<td>Protocols A, B, and C</td>
</tr>
<tr>
<td>pH meter</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fisher</td>
<td>S68167</td>
<td>Protocols A and B</td>
</tr>
<tr>
<td>Table top centrifuge - 5804R</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Eppendorf</td>
<td>05-400-93</td>
<td>Protocols A and B</td>
</tr>
<tr>
<td>Incubated platform shaker</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>New Brunswick</td>
<td>M1324-0004</td>
<td>Protocol B</td>
</tr>
<tr>
<td>Mini LabRoller Rotator</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Labnet</td>
<td>H-5500</td>
<td>Protocols A and B</td>
</tr>
<tr>
<td>Pestles</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Kontes</td>
<td>K749520-0090</td>
<td>Protocols A and B</td>
</tr>
<tr>
<td>Drill</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Kontes</td>
<td>K749540-0000</td>
<td>Protocols A and B</td>
</tr>
<tr>
<td>1 L glass beaker</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fisher</td>
<td>02-539P</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>1 L Erlenmeyer Flasks</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>VWR</td>
<td>89000-368</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>25 mL Erlenmeyer Flasks</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>VWR</td>
<td>89000-356</td>
<td>Protocol B</td>
</tr>
<tr>
<td>7ml round-bottom glass tubes + rubber stopper</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>VWR</td>
<td>VT6431</td>
<td>Protocols A, B, and C1,C2</td>
</tr>
<tr>
<td>10 ml round-bottom glass tubes + rubber stopper</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>VWR</td>
<td>VT6430</td>
<td>Protocol C2</td>
</tr>
<tr>
<td>Blue top tubes</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Labco</td>
<td>438B</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>50 ml conical plastic tubes</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Falcon</td>
<td>14-959-49A</td>
<td>All protocols</td>
</tr>
<tr>
<td>1.5 ml microfuge tubes</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fisher</td>
<td>02-681-320</td>
<td>Protocols A and B</td>
</tr>
<tr>
<td>Syringes (1 mL, 10 mL, 20 mL)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>BD Medical</td>
<td>301025, 301029, 301031</td>
<td>Protocols C1 and C2</td>
</tr>
<tr>
<td>25 gauge needles</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fisher</td>
<td>22-253-131</td>
<td>Protocols C1 and C2</td>
</tr>
<tr>
<td>Poly-Prep Chromatography Columns</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>BIO-RAD</td>
<td>731-1550</td>
<td>Protocol D</td>
</tr>
<tr>
<td>Pasteur pipettes</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>VWR</td>
<td>14673-043</td>
<td>Protocol D</td>
</tr>
<tr>
<td>60mm Petri dishes</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>VWR</td>
<td>25373-085</td>
<td>Protocol C</td>
</tr>
<tr>
<td>Glass chamber (cut bottom of 1 L flask) fitted with grease-sealed 3-way stopcock</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Custom Made in Glass Shop</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Protocol C</td>
</tr>
<tr>
<td>Optically transparent glass plate</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Custom Made in Glass Shop</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Protocol C</td>
</tr>
<tr>
<td>Reacti-Vap III Evaporator</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Thermo Scientific</td>
<td>18826</td>
<td>Protocol D</td>
</tr>
<tr>
<td>Cotton</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>VWR</td>
<td>14224-516</td>
<td>Protocol D</td>
</tr>
<tr>
<td>High Vacuum Grease</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Dow Corning</td>
<td>1597418</td>
<td>Protocol C1</td>
</tr>
<tr>
<td>Aluminum Foil</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fisher</td>
<td>01-213-18</td>
<td>Protocol B</td>
</tr>
<tr>
<td>Timer</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>ISC Bioexpress</td>
<td>T-2504-5</td>
<td>Protocol C</td>
</tr>
<tr>
<td>Gas-Ratio Mass Spectrometer</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Thermophinigan</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Protocol D</td>
</tr>
<tr>
<td>GC-MS</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>HP</td>
<td>5980/5971</td>
<td>Protocol D</td>
</tr>
<tr>
<td>GC-MS</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Agilent</td>
<td>6980N/5973N</td>
<td>Protocol D</td>
</tr>
<tr>
<td>HPLC</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Varian</td>
<td>9010</td>
<td>Protocol D</td>
</tr>		</tbody>
		</table>
		</div>

stable isotopic profiling of intermediary metabolic flux in developing and adult stage caenorhabditis elegans

פרופיל איזוטופים יציבים אפשרה רב בחקירות רגישות של ההשלכות המטבולית של מוטציות גנטיות ו / או טיפול תרופתי דגמי הסלולר יונקים. כאן אנו מתארים שיטות לבצע אפיון מפורט איזוטופים יציבים של מטבוליזם הביניים ו השטף מטבולית נמטודות, Caenorhabditis elegans. שיטות מתוארים על פרופיל שלם חינם תולעת חומצות אמינו, פחמן דו חמצני שכותרתו, חומצות אורגניות שכותרתו, וחומצות אמינו שכותרתו בבעלי חיים חשופים איזוטופים יציבים גם על הצמיחה נמטודות התקשורת צלחות אגר או תחילת כמבוגרים צעירים בהתפתחות המוקדמת תוך חשיפה לטיפולים תרופתיים שונים בתרבות נוזל. חומצות אמינו הן חינם לכמת ידי כרומטוגרפיה נוזלית ביצועים גבוהים (HPLC) ב aliquots התולעת כל חילוץ בחומצה perchloric 4%. תווית אוניברסלי 13 C-גלוקוז או 1,6 - 13 C-2 גלוקוז מנוצל כמבשר איזוטופים יציבים אשר שכותרתו פחמן לייחס ידי ספקטרומטריית מסה של פחמן דו חמצני (שניהם אטמוספרי מומס), כמו גם מטבוליטים מעיד על השטף דרך הגליקוליזה , pyruvate חילוף החומרים ואת מחזור חומצה tricarboxylic. תוצאות נציג כלולים להדגים השפעות זמן חשיפה איזוטופ, פרוטוקולים שונים סליקה חיידקי, שיבוש שיטות חלופיות תולעת wild-type נמטודות, כמו גם את מידת יחסי ההתאגדות איזוטופי של המיטוכונדריה מורכבים III מוטציה תולעים (ISP-1 (qm150) ) ביחס ל wild-type תולעים. יישום פרופיל איזוטופים יציבים נמטודות חיים מספק יכולת הרומן לחקור ברמה כל חיה בזמן אמת שינויים מטבוליים אשר נגרמים על ידי הפרעות גנטיות הפרט ו / או טיפול תרופתי.

Watch this Scientific Journal Video about Stable Isotopic Profiling of Intermediary Metabolic Flux in Developing and Adult Stage Caenorhabditis elegans at JoVE.com

Stable Isotopic Profiling of Intermediary Metabolic Flux in Developing and Adult Stage Caenorhabditis elegans

פרופיל איזוטופים יציבים ידי ניתוח כרומטוגרפיה מסת הגז spectrometric של השטף מטבולית מתווך מתואר נמטודות,<em&gt; Caenorhabditis elegans</em&gt;. שיטות מפורטים להערכת העשרת איזוטופים של פחמן דו חמצני, חומצות אורגניות וחומצות אמינו בעקבות חשיפת איזוטופ או במהלך הפיתוח על צלחות אגר או במהלך הבגרות בתרבות נוזל.

פרופיל איזוטופים יציבים של שטף מטבולית מתווך בשלב פיתוח למבוגרים Caenorhabditis elegans</em

Stable isotopic profiling has long permitted sensitive investigations of the metabolic consequences of genetic mutations and/or pharmacologic therapies in ...

Research

JoVE Journal

Biology

Stable Isotopic Profiling of Intermediary Metabolic Flux in Developing and Adult Stage Caenorhabditis elegans

Generation of Stable Transgenic C. elegans Using Microinjection

הדור של Stable טראנסגנטי C. elegans שימוש Microinjection

Transgenic Caenorhabditis elegans can be readily created via microinjection of a DNA plasmid solution into the gonad 1.  The plasmid DNA rearranges to ...

Isolation and In vitro Activation of Caenorhabditis elegans Sperm

Isolation and In vitro Activation of Caenorhabditis elegans Sperm

בידוד במבחנה הפעלת Caenorhabditis elegans זרע

Males and hermaphrodites are the two naturally found sexual forms in the nematode C. elegans. The amoeboid sperm are produced by both males and ...

Solid Plate-based Dietary Restriction in Caenorhabditis elegans

Solid Plate-based Dietary Restriction in Caenorhabditis elegans

Solid פלייט מבוססי הגבלת תזונתיים ב Caenorhabditis elegans</em

Reduction of food intake without malnutrition or starvation is known to increase lifespan and delay the onset of various age-related diseases in a wide ...

Time-lapse Microscopy of Early Embryogenesis in Caenorhabditis elegans

Time-lapse Microscopy of Early Embryogenesis in Caenorhabditis elegans

זמן לשגות מיקרוסקופית של העובר בשלב מוקדם Caenorhabditis elegans

Caenorhabditis elegans has often been used as a model system in studies of early developmental processes.  The transparency of the 
embryos, the genetic ...

Basic Caenorhabditis elegans Methods: Synchronization and Observation

Basic Caenorhabditis elegans Methods: Synchronization and Observation

בסיסי<em&gt; Caenorhabditis elegans</em&gt; שיטות: סנכרון תצפית

Research into the molecular and developmental biology of the nematode Caenorhabditis elegans was begun in the early seventies by Sydney Brenner and it has ...

Prostaglandin Extraction and Analysis in Caenorhabditis elegans

Prostaglandin Extraction and Analysis in Caenorhabditis elegans

הפקה וניתוח בפרוסטגלנדין<em&gt; Elegans Caenorhabditis</em

Caenorhabditis elegans is emerging as a powerful animal model to study the biology of lipids1-9. Prostaglandins are an important class of eicosanoids, ...

Cultivation of Caenorhabditis elegans in Three Dimensions in the Laboratory

Cultivation of Caenorhabditis elegans in Three Dimensions in the Laboratory

טיפוח<em&gt; Elegans Caenorhabditis</em&gt; ב בשלושה ממדים במעבדה

The use of genetic model organisms such as Caenorhabditis elegans has led to seminal discoveries in biology over the last five decades. Most of what we ...

Combined Nucleotide and Protein Extractions in Caenorhabditis elegans

Combined Nucleotide and Protein Extractions in Caenorhabditis elegans

משולב נוקלאוטיד שיחולץ חלבון ב Caenorhabditis elegans

A single biological sample holds a plethora of information, and it is now common practice to simultaneously investigate several macromolecules to capture ...

Measurement of Oxygen Consumption Rates in Intact Caenorhabditis elegans

Measurement of Oxygen Consumption Rates in Intact Caenorhabditis elegans

מדידה של קצב הצריכה של חמצן בשלם Caenorhabditis elegans

Optimal mitochondrial function is critical for healthy cellular activity, particularly in cells that have high energy demands like those in the nervous ...

Purification and Analysis of Caenorhabditis elegans Extracellular Vesicles

Purification and Analysis of Caenorhabditis elegans Extracellular Vesicles

טיהור וניתוח מסחטות של האלקאים ושלפוחיות

The secretion of small membrane-bound vesicles into the external environment is a fundamental physiological process of all cells. These extracellular ...