Name: an introduction to worm lab: from culturing worms to mutagenesis
Uploaded: 2011-01-11T22:00:00
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Este trabajo ha sido financiado por la NSF subvención IOB # 0615996.

Parte 1: Preparación de medios de cultivo de nematodos (NGM) placas de Petri Nematodos experimentales, como C. elegans y P. pacificus se suelen cultivar en el laboratorio de 6 cm placas de Petri que contenían medio de nematodos Crecimiento (NGM) 1. Los gusanos se mantienen a 20 ° C, pero se pueden incubar en un rango de temperaturas (entre 4 ° C - 25 ° C), dependiendo de las especies de nematodos y el diseño experimental. Para preparar platos con NGM, las té...

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Mutagénesis es una técnica ampliamente utilizada para los estudios genéticos en varios organismos modelo experimental. Experimentos de mutagénesis se utilizan a menudo para identificar la función de un gen 2. Los procedimientos de mutagénesis descritos aquí pueden ser utilizados no sólo para P. pacificus, sino también para C. elegans y otras especies de nematodos relacionados. Aquí se describen dos métodos, EMS y mutagénesis TMP / UV. EMS es una susta...

an introduction to worm lab: from culturing worms to mutagenesis

Este protocolo describe los procedimientos para mantener los nematodos en el laboratorio y la forma de mutagenizar utilizando dos métodos alternativos: etil metano sulfonato (EMS) y 4 &quot;, 5, 8 trimetilpsoraleno-combinada con la luz ultravioleta (TMP / UV). Los nematodos son potentes sistemas biológicos para estudios de genética, debido a su plan de cuerpo simple y el sistema de apareamiento, que se compone de auto-fertilización de los hermafroditas y los hombres que pueden generar cientos de progenie por animal. Los nematodos son mantenidos en placas de agar que contiene un césped de bacterias y se pueden transferir fácilmente a partir de un plato a otro con un pico. EMS es un agente alquilante comúnmente utilizadas para inducir mutaciones puntuales y deleciones pequeñas, mientras que TMP / UV induce principalmente supresiones. Dependiendo de las especies de nematodos que se utiliza, las concentraciones de EMS y TMP tendrá que ser optimizada. Para aislar las mutaciones recesivas del nematodo Pristionchus pacificus, los animales de la generación F2 fueron examinados visualmente para fenotipos. Para ilustrar estos métodos, mutagénesis gusanos y buscó falta de coordinación (UNC), Cochambrosa (dpy) y transformador (TRA) mutantes.

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An Introduction to Worm Lab: from Culturing Worms to Mutagenesis

La detección de mutantes con defectos fenotípicos es un método sencillo para identificar los genes que funcionan en un determinado proceso biológico. En este artículo se describe cómo los gusanos que viven la cultura libre (por ejemplo,<em&gt; Pristionchus pacificus</em&gt;) En el laboratorio y mostrar dos métodos diferentes de mutagénesis, EMS y TMP / UV.

Introducción al Laboratorio de Worm: El cultivo de gusanos de Mutagénesis

This protocol describes procedures to maintain nematodes in the laboratory and how to mutagenize them using two alternative methods: ethyl methane ...

Research

JoVE Journal

Biology

Homemade Site Directed Mutagenesis of Whole Plasmids

Mutagénesis dirigida casera de plásmidos enteros

Site directed mutagenesis of whole plasmids is a simple way to create slightly different variations of an original plasmid. With this method the cloned ...

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Single Oocyte Bisulfite Mutagenesis

Único ovocito Mutagénesis bisulfito

Epigenetics encompasses all heritable and reversible modifications to chromatin that alter gene accessibility, and thus are the primary mechanisms for ...

Regular Care and Maintenance of a Zebrafish (Danio rerio) Laboratory: An Introduction

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Cuidado y mantenimiento regulares de un pez cebra (<em&gt; Danio rerio</em&gt;) Laboratorio: Introducción

This protocol describes regular care and maintenance of a zebrafish laboratory. Zebrafish are now gaining popularity in genetics, pharmacological and ...

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The electrophysiological method we present is based on a solid supported membrane (SSM) composed of an octadecanethiol layer chemisorbed on a gold coated ...

In vivo Reprogramming of Adult Somatic Cells to Pluripotency by Overexpression of Yamanaka Factors

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Induced pluripotent stem (iPS) cells that result from the reprogramming of somatic cells to a pluripotent state by forced expression of defined factors ...

An in vivo Crosslinking Approach to Isolate Protein Complexes From Drosophila Embryos

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Un In vivo Enfoque de reticulación para aislar Complejos de Proteína Desde Drosophila Los embriones

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Culturing Caenorhabditis elegans in Axenic Liquid Media and Creation of Transgenic Worms by Microparticle Bombardment

Culturing Caenorhabditis elegans in Axenic Liquid Media and Creation of Transgenic Worms by Microparticle Bombardment

El cultivo<em&gt; Caenorhabditis elegans</em &gt; En axénico Liquid Media y Creación de transgénicos Worms por bombardeo de micropartículas

In this protocol, we present the required materials, and the procedure for making modified&#160;C. elegans&#160;Habituation and Reproduction media ...

Using Mouse Mammary Tumor Cells to Teach Core Biology Concepts: A Simple Lab Module

El uso de células tumorales mamarias de ratón para enseñar conceptos básicos de biología: Un módulo de laboratorio simple

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Measuring Lactase Enzymatic Activity in the Teaching Lab

Medición de actividad enzimática de la lactasa en el laboratorio de enseñanza

Understanding how enzymes work, and relating this to real life examples, is critical to a wide range of undergraduate degrees in the biological and ...

Magnetic-Activated Cell Sorting Strategies to Isolate and Purify Synovial Fluid-Derived Mesenchymal Stem Cells from a Rabbit Model

Célula activada por el magnético clasificación estrategias para aislar y purificar sinovial líquido mesenquimales células madre derivadas de un modelo de conejo

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