Name: an introduction to worm lab: from culturing worms to mutagenesis
Uploaded: 2011-01-11T22:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about An Introduction to Worm Lab: from Culturing Worms to Mutagenesis at JoVE.com

Bu çalışma, NSF hibe İOK # 0615996 tarafından finanse edilmektedir.

Bölüm 1: nematod büyüme ortamının hazırlanması (NGM) Petri kapları C. elegans ve P. Deneysel nematod pacificus genellikle nematodu Büyüme Orta (NGM) 1 içeren 6 cm Petri kapları laboratuvarda kültür. Worms, 20 ° C&#39;de tutulur, ama bir sıcaklık aralığında (4 ila ° C - 25 ° C) inkübe nematod türleri ve deneysel tasarım bağlı. NGM ile plakaları hazırlamak için, standart, steril teknikleri, mantar ve bakteri bulaşmasını önl...

<ol>
	<li>Brenner, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Genetics. 77 (1), 71-71 (1974).</li><li>Anderson, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Methods Cell Biol. 48, 31-31 (1995).</li><li>Yandell, M. D., Edgar, L. G., Wood, W. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 91 (4), 1381-1381 (1994).</li><li>Pires-daSilva, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> WormBook. , 1-1 (2005).</li><li>Kenning, C., Kipping, I., Sommer, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> J. Genesis. 40 (3), 176-176 (2004).</li><li>Sommer, R. J., Carta, L. K., Kim, S. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Fundamental and Applied Nematology. 19 (6), 511-511 (1996).</li><li>Pires-daSilva, A., Sommer, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Genes &#38; development. 18 (10), 1198-1198 (2004).</li><li>Wei, A., Yuan, A., Fawcett, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Nucleic acids research. 30 (20), 110-110 (2002).</li><li>Jorgensen, E. M., Mango, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Nat Rev Genet. 3 (5), 356-356 (2002).</li></ol>

Mutagenez çeşitli deneysel model organizmaların genetik çalışmalar için yaygın olarak istihdam edilen bir tekniktir. Mutagenez deneyler genellikle bir genin 2 işlevini tanımlamak için kullanılır. Pa sadece burada açıklanan mutagenez prosedürleri kullanılabilir pacificus değil, aynı zamanda C elegans ve ilgili diğer nematod türü. Burada iki yöntem, EMS ve TMP / UV mutagenez açıklar. EMS genom 3,8 boyunca nokta mutasyonl...

an introduction to worm lab: from culturing worms to mutagenesis

Ultraviyole ışığı ile birlikte (TMP / UV) etil metan sülfonat (EMS) ve 4, 5 &#39;, 8-Trimethylpsoralen: Bu protokol, laboratuvar ve nasıl iki alternatif yöntemler kullanarak onları mutagenize nematod korumak için prosedürler açıklanmaktadır. Nematodlar, çünkü kendinden gübreleme hermafroditlerde ve hayvan başına ahfadının yüzlerce üretebilir erkek oluşmaktadır basit vücut planı ve çiftleşme sistemi, genetik çalışmalar için güçlü bir biyolojik sistemler. Nematod, bakteri çim içeren agar plaklarına korunur ve kolay bir plakadan bir pick kullanarak başka bir transfer edilebilir. TMP / UV esas silmeler indükler EMS, nokta mutasyonları ve küçük delesyonlar ikna etmek için yaygın olarak kullanılan bir alkilleyici ajandır. Nematod kullanılan türlerin bağlı olarak, EMS ve TMP konsantrasyonları optimize edilmesi gerekecektir. Nematod Pristionchus pacificus resesif mutasyonlar izole etmek için, F2 nesil hayvanlar görsel fenotipleri için tarandı. Bu yöntemleri göstermek için, solucanlar mutagenized ve koordinasyonsuz (UNC), Dumpy (dpy) ve Trafo (Tra) mutantlar aradı.

Watch this Scientific Journal Video about An Introduction to Worm Lab: from Culturing Worms to Mutagenesis at JoVE.com

An Introduction to Worm Lab: from Culturing Worms to Mutagenesis

Tarama fenotipik defekti olan mutantlar için, belirli bir biyolojik süreç fonksiyonu genleri tanımlamak için basit bir yöntem. Bu yazıda, kültür serbest yaşayan solucanlar (örneğin, nasıl tarif<em&gt; Pristionchus pacificus</em&gt;) Laboratuvar ve iki farklı mutagenez yöntemleri, EMS ve TMP / UV göstermektedir.

Solucan Lab An Introduction to: Kültürleme Worms Mutagenez

This protocol describes procedures to maintain nematodes in the laboratory and how to mutagenize them using two alternative methods: ethyl methane ...

Research

JoVE Journal

Biology

Homemade Site Directed Mutagenesis of Whole Plasmids

Tüm Plazmidler Homemade Sitesi Yönetmen Mutagenez

Site directed mutagenesis of whole plasmids is a simple way to create slightly different variations of an original plasmid. With this method the cloned ...

Single Oocyte Bisulfite Mutagenesis

Tek Oosit Bisülfit Mutagenez

Epigenetics encompasses all heritable and reversible modifications to chromatin that alter gene accessibility, and thus are the primary mechanisms for ...

Regular Care and Maintenance of a Zebrafish (Danio rerio) Laboratory: An Introduction

Regular Care and Maintenance of a Zebrafish Danio rerio Laboratory: An Introduction

Bir Zebra balığı Düzenli Bakım ve Onarım (<em&gt; Br.rerio</em&gt;) Laboratuvar: An Introduction

This protocol describes regular care and maintenance of a zebrafish laboratory. Zebrafish are now gaining popularity in genetics, pharmacological and ...

Introduction to Solid Supported Membrane Based Electrophysiology

Elektrofizyoloji Tabanlı Katı Desteklenen Membran Giriş

The electrophysiological method we present is based on a solid supported membrane (SSM) composed of an octadecanethiol layer chemisorbed on a gold coated ...

In vivo Reprogramming of Adult Somatic Cells to Pluripotency by Overexpression of Yamanaka Factors

In vivo Reprogramming of Adult Somatic Cells to Pluripotency by Overexpression of Yamanaka Factors

Induced pluripotent stem (iPS) cells that result from the reprogramming of somatic cells to a pluripotent state by forced expression of defined factors ...

An in vivo Crosslinking Approach to Isolate Protein Complexes From Drosophila Embryos

An in vivo Crosslinking Approach to Isolate Protein Complexes From Drosophila Embryos

Bir In vivo</emŞu Protein Kompleksler yalıtmak için> Çapraz yaklaşım Drosophila Embriyolar

Many cellular processes are controlled by multisubunit protein complexes. Frequently these complexes form transiently and require native environment to ...

Culturing Caenorhabditis elegans in Axenic Liquid Media and Creation of Transgenic Worms by Microparticle Bombardment

Culturing Caenorhabditis elegans in Axenic Liquid Media and Creation of Transgenic Worms by Microparticle Bombardment

Kültürleme<em&gt; Caenorhabditis elegans</em &gt; Mikroparçacık bombardımanı ile aksenik Sıvı Medya ve Transgenik Worms Yaratılış

In this protocol, we present the required materials, and the procedure for making modified&#160;C. elegans&#160;Habituation and Reproduction media ...

Using Mouse Mammary Tumor Cells to Teach Core Biology Concepts: A Simple Lab Module

Çekirdek Biyoloji Kavramları öğretmek için Fare Meme Tümör Hücreleri kullanma: Basit Lab Modülü

Undergraduate biology students are required to learn, understand and apply a variety of cellular and molecular biology concepts and techniques in ...

Measuring Lactase Enzymatic Activity in the Teaching Lab

Laktaz enzim etkinliğin ölçülmesi öğretim laboratuarında

Understanding how enzymes work, and relating this to real life examples, is critical to a wide range of undergraduate degrees in the biological and ...

Magnetic-Activated Cell Sorting Strategies to Isolate and Purify Synovial Fluid-Derived Mesenchymal Stem Cells from a Rabbit Model

Manyetik aktif hücre stratejileri yalıtmak ve Sinovyal sıvı elde edilen mezenkimal kök hücre bir tavşan modelinden arındırmak için sıralama

Mesenchymal stem cells (MSCs) are the main cell source for cell-based therapy. MSCs from articular cavity synovial fluid could potentially be used for ...