Name: a mouse model of in utero transplantation
Uploaded: 2011-01-27T17:00:00
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재생 의학 임상 연구원 교육 그랜트를 위해 캘리포니아 공과 대학 (), 국립 과학 재단 (MW), 이레네 Perstein 수상 (TCM), 외과의 미국 대학 (TCM), 미국 소아 외과 협회 (: 우리는 자금 출처를 인정하고 싶습니다 TCM), 그리고 천 (TCM)의 월.

1. 사출 Pipettes의 준비 <ol><li> 유리 피펫의 분리가 15 초 (교정에 대한 제조 업체의 지침을 참조) 내에서 발생하는 등 피펫 끌어당기는을 보정합니다. 피펫은 구분 테이퍼를해야합니다. </li><li> 테이퍼의 처음부터 피펫의 끝에 거리는 1.05cm에 1.04cm입니다 같은 피펫의 끝을 잘라. 피펫의 길이는 피펫 오리피스의 구경에 반비례합니다. 이상 피펫을 만드 는게 아니라 주사 중에 파손 더 쉽습니다 약한 ?...

<ol>
	<li>Flake, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Treatment+of+X-linked+severe+combined+immunodeficiency+by+in+utero+transplantation+of+paternal+bone+marrow.">Treatment of X-linked severe combined immunodeficiency by in utero transplantation of paternal bone marrow.</a> N Engl J Med. 335, 1806-1810 (1996).</li><li>Wengler, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In-utero+transplantation+of+parental+CD34+haematopoietic+progenitor+cells+in+a+patient+with+X-linked+severe+combined+immunodeficiency+(SCIDXI).">In-utero transplantation of parental CD34 haematopoietic progenitor cells in a patient with X-linked severe combined immunodeficiency (SCIDXI).</a> Lancet. 348, 1484-1487 (1996).</li><li>Flake, A. W., Zanjani, E. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=in+utero+hematopoietic+stem+cell+transplantation:+ontogenic+opportunities+and+biologic+barriers.">in utero hematopoietic stem cell transplantation: ontogenic opportunities and biologic barriers.</a> Blood. 94, 2179-2191 (1999).</li><li>Merianos, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Maternal+alloantibodies+induce+a+postnatal+immune+response+that+limits+engraftment+following+in+utero+hematopoietic+cell+transplantation+in+mice.">Maternal alloantibodies induce a postnatal immune response that limits engraftment following in utero hematopoietic cell transplantation in mice.</a> J Clin Invest. 119, 2590-2600 (2009).</li><li>Peranteau, W. H., Endo, M., Adibe, O. O., Flake, A. 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F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+chimerism+threshold+predicts+sustained+engraftment+and+NK-cell+tolerance+in+prenatal+allogeneic+chimeras.">Early chimerism threshold predicts sustained engraftment and NK-cell tolerance in prenatal allogeneic chimeras.</a> Blood. 112, 5245-5253 (2008).</li><li>Mackenzie, T. C., Shaaban, A. F., Radu, A., Flake, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Engraftment+of+bone+marrow+and+fetal+liver+cells+after+in+utero+transplantation+in+MDX+mice.">Engraftment of bone marrow and fetal liver cells after in utero transplantation in MDX mice.</a> J Pediatr Surg. 37, 1058-1064 (2002).</li><li>Hayashi, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mixed+chimerism+following+in+utero+hematopoietic+stem+cell+transplantation+in+murine+models+of+hemoglobinopathy.">Mixed chimerism following in utero hematopoietic stem cell transplantation in murine models of hemoglobinopathy.</a> Exp Hematol. 31, 176-184 (2003).</li><li>Bouchard, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+transgene+expression+in+cardiac+and+skeletal+muscle+following+fetal+administration+of+adenoviral+or+adeno-associated+viral+vectors+in+mice.">Long-term transgene expression in cardiac and skeletal muscle following fetal administration of adenoviral or adeno-associated viral vectors in mice.</a> J Gene Med. 5, 941-950 (2003).</li><li>Meza, N. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rescue+of+pyruvate+kinase+deficiency+in+mice+by+gene+therapy+using+the+human+isoenzyme.">Rescue of pyruvate kinase deficiency in mice by gene therapy using the human isoenzyme.</a> Mol Ther. 17, 2000-2009 (2009).</li><li>MacKenzie, T. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficient+transduction+of+liver+and+muscle+after+in+utero+injection+of+lentiviral+vectors+with+different+pseudotypes.">Efficient transduction of liver and muscle after in utero injection of lentiviral vectors with different pseudotypes.</a> Mol Ther. 6, 349-358 (2002).</li><li>MacKenzie, T. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transduction+of+satellite+cells+after+prenatal+intramuscular+administration+of+lentiviral+vectors.">Transduction of satellite cells after prenatal intramuscular administration of lentiviral vectors.</a> J Gene Med. 7, 50-58 (2005).</li><li>Sabatino, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Persistent+expression+of+hF.IX+After+tolerance+induction+by+in+utero+or+neonatal+administration+of+AAV-1-F.IX+in+hemophilia+B+mice.">Persistent expression of hF.IX After tolerance induction by in utero or neonatal administration of AAV-1-F.IX in hemophilia B mice.</a> Mol Ther. 15, 1677-1685 (2007).</li><li>Mellor, A. L., Munn, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunology+at+the+maternal-fetal+interface:+lessons+for+T+cell+tolerance+and+suppression.">Immunology at the maternal-fetal interface: lessons for T cell tolerance and suppression.</a> Annu Rev Immunol. 18, 367-391 (2000).</li><li>Billingham, R. E., Brent, L., Medawar, P. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Actively+acquired+tolerance+of+foreign+cells.">Actively acquired tolerance of foreign cells.</a> Nature. 172, 603-606 (1953).</li><li>Endo, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gene+transfer+to+ocular+stem+cells+by+early+gestational+intraamniotic+injection+of+lentiviral+vector.">Gene transfer to ocular stem cells by early gestational intraamniotic injection of lentiviral vector.</a> Mol Ther. 15, 579-587 (2007).</li><li>Waddington, S. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+transgene+expression+by+administration+of+a+lentivirus-based+vector+to+the+fetal+circulation+of+immuno-competent+mice.">Long-term transgene expression by administration of a lentivirus-based vector to the fetal circulation of immuno-competent mice.</a> Gene Ther. 10, 1234-1240 (2003).</li><li>Schachtner, S., Buck, C., Bergelson, J., Baldwin, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Temporally+regulated+expression+patterns+following+in+utero+adenovirus-mediated+gene+transfer.">Temporally regulated expression patterns following in utero adenovirus-mediated gene transfer.</a> Gene Ther. 6, 1249-1257 (1999).</li></ol>

50 년 전, 빌링햄, 브렌트, 그리고 Medawar 외국 단백질에 면역 내성을 유발 생쥐에 utero 이식에 사용됩니다. 16은 그 이후,이 기술의 몇 가지 유사 콘텐츠는 면역학 및 줄기 세포 생물학 질문을 해결하기 위해 사용되었습니다. 여기에 자세한 프로토콜은 IUT에 가장 접근 방법 중 하나입니다. 태아 간은 쉽게 시각 목표를 제공하며 포털과 간장 정맥을 통해 순환 체계?...

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		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Pipettes</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Kimble</td>
<td>71900-100</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Pipette puller</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sutter Instruments Company</td>
<td>Model P-30</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Microinjector</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Narishige</td>
<td>IM-300</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Pipette sharpener</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sutter Instruments Company</td>
<td>Model BV-10</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

a mouse model of in utero transplantation

utero의 줄기 세포와 바이러스의 이식은 인간의 태아에서 선천성 질환 치료를위한 엄청난 잠재력을 가지고 있습니다. 예를 들어, 조혈 줄기 세포의 utero 이식 (IUT)에 성공적으로 여러 가지 다른 조건에서 심한 결합 면역 결핍. 1,2 환자 치료에 사용되고 있습니다, 그러나, IUT는 성공하지 않고 시도했습니다. 3이 혼합 결과를 감안할 때, 가용성 간세포 이식 및 유전자 치료의 생물 학적 sequelae을 공부하는 효율이 아닌 인간의 모델이 분야의 발전을 위해 중요합니다. 우리와 다른 야생 형 생쥐 4-7과 유전 질환있는 사람 모두 utero에 이식 조혈 줄기 세포의 성공적인 engraftment에 영향을 미치는 요인 연구를 IUT의 마우스 모델을 사용하고 있습니다. 8,9 태아의 환경은 또한에 대한 상당한 이점을 제공 utero의 유전자 치료에 성공. 예를 들어, adenoviral 10 전달, 태아에 12,13 adeno - 관련 11 retroviral, 10 바이러스 및 lentiviral 벡터는 장기적인 유전자 발현과 주입의 사이트에서 멀리 떨어진 여러 장기의 도입 결과입니다. utero에 유전자 치료는 따라서 이러한 근육 영양 장애 또는 낭성 섬유증과 같은 단일 유전자 질환에 대한 가능한 치료 전략으로 간주됩니다. IUT의 또 다른 잠재적인 장점은 특정 항원에 면역 내성을 유발하는 능력입니다. 으로 혈우병,이 단백질에 내성의 초기 개발 결과에 팩터 IX의 도입과 생쥐에서 본. 14 잠재적인 인간의 치료법을 조사에서의 사용뿐만 아니라, IUT의 마우스 모델은 발달과 줄기 세포 생물학의 기본적인 질문을 연구하는 강력한 도구가 될 수 있습니다. 예를 들어, 하나는 유도 또는 억제 특정 유전자 발현을 정의 임신 성 단계에서 발달 경로를 조작하는 여러 작은 분자를 제공할 수 있습니다. 이러한 변경의 영향은 초기 이식 후 다양한 timepoints에서 평가하실 수 있습니다. 또한, 하나는 비 조사 및 교란되지 않은 호스트 환경에서 줄기 세포 분화 연구를 태아 환경에 pluripotent 또는 혈통 특정 전구 세포를 이식 수 있습니다. IUT의 마우스 모델은 이미 면역학 분야, 그리고 발달과 줄기 세포 생물학 내에 많은 통찰력을 제공하고 있습니다. 이 동영상 기반의 프로토콜에서는, 우리는 마우스 fetuses의 IUT를 수행하기위한 단계별 접근 방식을 설명하고 중요한 단계이 기술의 잠재적인 함정을 설명합니다.

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A Mouse Model of in Utero Transplantation

의 마우스 모델<em&gt; utero에</em&gt; 이식은 태아의 줄기 세포 이식 및 유전자 치료의 가능성 임상 응용을 연구하는 데 사용할 수있는 다양한 도구입니다. 이 프로토콜에서는, 우리는이 기술을 수행하는 일반적인 접근 방법을 제시

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