Name: preparation of acute hippocampal slices from rats and transgenic mice for the study of synaptic alterations during aging and amyloid pathology
Uploaded: 2011-03-23T14:15:00
Duration: 14 min 57 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Preparation of Acute Hippocampal Slices from Rats and Transgenic Mice for the Study of Synaptic Alterations during Aging and Amyloid Pathology at JoVE.com

العمل بدعم من منحة المعاهد الوطنية للصحة AG027297 ، وهي جائزة من الحبل الشوكي والثقة كنتاكي رئيس أبحاث الإصابات ، وهدية من مؤسسة Kleberg.

<ol>
	<li>Norris, C. M., Halpain, S., Foster, T. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alterations+in+the+balance+of+protein+kinase/phosphatase+activities+parallel+reduced+synaptic+strength+during+aging.">Alterations in the balance of protein kinase/phosphatase activities parallel reduced synaptic strength during aging.</a> J Neurophysiol. 80, 1567-1570 (1998).</li><li>Norris, C. M., Korol, D. L., Foster, T. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+susceptibility+to+induction+of+long-term+depression+and+long-term+potentiation+reversal+during+aging.">Increased susceptibility to induction of long-term depression and long-term potentiation reversal during aging.</a> J Neurosci. 16, 5382-5392 (1996).</li><li>Norris, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hippocampal+'zipper'+slice+studies+reveal+a+necessary+role+for+calcineurin+in+the+increased+activity+of+L-type+Ca(2+)+channels+with+aging.">Hippocampal 'zipper' slice studies reveal a necessary role for calcineurin in the increased activity of L-type Ca(2+) channels with aging.</a> Neurobiol Aging. 31, 328-338 (2010).</li><li>Burke, S. N., Barnes, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Senescent+synapses+and+hippocampal+circuit+dynamics.">Senescent synapses and hippocampal circuit dynamics.</a> Trends Neurosci. 33, 153-161 (2010).</li><li>Foster, T. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calcium+homeostasis+and+modulation+of+synaptic+plasticity+in+the+aged+brain.">Calcium homeostasis and modulation of synaptic plasticity in the aged brain.</a> Aging Cell. 6, 319-325 (2007).</li><li>Foster, T. C., Norris, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Age-associated+changes+in+Ca(2+)-dependent+processes:+relation+to+hippocampal+synaptic+plasticity.">Age-associated changes in Ca(2+)-dependent processes: relation to hippocampal synaptic plasticity.</a> Hippocampus. 7, 602-612 (1997).</li><li>Thibault, O., Gant, J. C., Landfield, P. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expansion+of+the+calcium+hypothesis+of+brain+aging+and+Alzheimer's+disease:+minding+the+store.">Expansion of the calcium hypothesis of brain aging and Alzheimer's disease: minding the store.</a> Aging Cell. 6, 307-317 (2007).</li><li>Demuro, A., Parker, I., Stutzmann, G. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calcium+signaling+and+amyloid+toxicity+in+Alzheimer+disease.">Calcium signaling and amyloid toxicity in Alzheimer disease.</a> J Biol Chem. 285, 12463-12468 (2010).</li><li>Green, K. N., LaFerla, F. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Linking+calcium+to+Abeta+and+Alzheimer's+disease.">Linking calcium to Abeta and Alzheimer's disease.</a> Neuron. 59, 190-194 (2008).</li><li>Kumar, A., Thinschmidt, J. S., Foster, T. C., King, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aging+effects+on+the+limits+and+stability+of+long-term+synaptic+potentiation+and+depression+in+rat+hippocampal+area+CA1.">Aging effects on the limits and stability of long-term synaptic potentiation and depression in rat hippocampal area CA1.</a> J Neurophysiol. 98, 594-601 (2007).</li><li>Norris, C. M., Halpain, S., Foster, T. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reversal+of+age-related+alterations+in+synaptic+plasticity+by+blockade+of+L-type+Ca2++channels.">Reversal of age-related alterations in synaptic plasticity by blockade of L-type Ca2+ channels.</a> J Neurosci. 18, 3171-3179 (1998).</li><li>Norris, C. M., Scheff, S. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recovery+of+afferent+function+and+synaptic+strength+in+hippocampal+CA1+following+traumatic+brain+injury.">Recovery of afferent function and synaptic strength in hippocampal CA1 following traumatic brain injury.</a> J Neurotrauma. 26, 2269-2278 (2009).</li><li>Sama, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interleukin-1beta-dependent+signaling+between+astrocytes+and+neurons+depends+critically+on+astrocytic+calcineurin/NFAT+activity.">Interleukin-1beta-dependent signaling between astrocytes and neurons depends critically on astrocytic calcineurin/NFAT activity.</a> J Biol Chem. 283, 21953-21964 (2008).</li><li>Ye, H., Jalini, S., Mylvaganam, S., Carlen, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activation+of+large-conductance+Ca(2+)-activated+K(+)+channels+depresses+basal+synaptic+transmission+in+the+hippocampal+CA1+area+in+APP+(swe/ind)+TgCRND8+mice.">Activation of large-conductance Ca(2+)-activated K(+) channels depresses basal synaptic transmission in the hippocampal CA1 area in APP (swe/ind) TgCRND8 mice.</a> Neurobiol Aging. 31, 591-604 (2010).</li><li>Bear, M. F., Malenka, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synaptic+plasticity:+LTP+and+LTD.">Synaptic plasticity: LTP and LTD.</a> Curr Opin Neurobiol. 4, 389-399 (1994).</li><li>Foster, T. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Involvement+of+hippocampal+synaptic+plasticity+in+age-related+memory+decline.">Involvement of hippocampal synaptic plasticity in age-related memory decline.</a> Brain Res Brain Res Rev. 30, 236-249 (1999).</li><li>Foster, T. C., Kumar, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Susceptibility+to+induction+of+long-term+depression+is+associated+with+impaired+memory+in+aged+Fischer+344+rats.">Susceptibility to induction of long-term depression is associated with impaired memory in aged Fischer 344 rats.</a> Neurobiol Learn Mem. 87, 522-535 (2007).</li><li>Hsu, K. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alterations+in+the+balance+of+protein+kinase+and+phosphatase+activities+and+age-related+impairments+of+synaptic+transmission+and+long-term+potentiation.">Alterations in the balance of protein kinase and phosphatase activities and age-related impairments of synaptic transmission and long-term potentiation.</a> Hippocampus. 12, 787-802 (2002).</li><li>Vouimba, R. M., Foy, M. R., Foy, J. G., Thompson, R. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=17beta-estradiol+suppresses+expression+of+long-term+depression+in+aged+rats.">17beta-estradiol suppresses expression of long-term depression in aged rats.</a> Brain Res Bull. 53, 783-787 (2000).</li><li>Abdul, H. M., Furman, J. L., Sama, M. A., Mathis, D. M., Norris, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NFATs+and+Alzheimer's+Disease.">NFATs and Alzheimer's Disease.</a> Mol Cell Pharmacol. 2, 7-14 (2010).</li><li>Abdul, H. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cognitive+decline+in+Alzheimer's+disease+is+associated+with+selective+changes+in+calcineurin/NFAT+signaling.">Cognitive decline in Alzheimer's disease is associated with selective changes in calcineurin/NFAT signaling.</a> J Neurosci. 29, 12957-12969 (2009).</li><li>Anantharaman, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Beta-amyloid+mediated+nitration+of+manganese+superoxide+dismutase:+implication+for+oxidative+stress+in+a+APPNLH/NLH+X+PS-1P264L/P264L+double+knock-in+mouse+model+of+Alzheimer's+disease.">Beta-amyloid mediated nitration of manganese superoxide dismutase: implication for oxidative stress in a APPNLH/NLH X PS-1P264L/P264L double knock-in mouse model of Alzheimer's disease.</a> Am J Pathol. 168, 1608-1618 (2006).</li><li>Gengler, S., Hamilton, A., Holscher, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synaptic+plasticity+in+the+hippocampus+of+a+APP/PS1+mouse+model+of+Alzheimer's+disease+is+impaired+in+old+but+not+young+mice.">Synaptic plasticity in the hippocampus of a APP/PS1 mouse model of Alzheimer's disease is impaired in old but not young mice.</a> PLoS One. 5, e9764-e9764 (2010).</li><li>Stringer, J. L., Lothman, E. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+effects+of+extracellular+calcium+concentrations+on+hippocampal+pyramidal+cell+responses.">In vitro effects of extracellular calcium concentrations on hippocampal pyramidal cell responses.</a> Exp Neurol. 101, 132-146 (1988).</li><li>Landfield, P. W., Pitler, T. A., Applegate, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effects+of+high+Mg2+-to-Ca2++ratios+on+frequency+potentiation+in+hippocampal+slices+of+young+and+aged+rats.">The effects of high Mg2+-to-Ca2+ ratios on frequency potentiation in hippocampal slices of young and aged rats.</a> J Neurophysiol. 56, 797-811 (1986).</li><li>Ames, A., Sakanoue, M., Endo, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NA,+K,+CA,+MG,+AND+C1+CONCENTRATIONS+IN+CHOROID+PLEXUS+FLUID+AND+CISTERNAL+FLUID+COMPARED+WITH+PLASMA+ULTRAFILTRATE.">NA, K, CA, MG, AND C1 CONCENTRATIONS IN CHOROID PLEXUS FLUID AND CISTERNAL FLUID COMPARED WITH PLASMA ULTRAFILTRATE.</a> J Neurophysiol. 27, 672-681 (1964).</li><li>Gant, J. C., Sama, M. M., Landfield, P. W., Thibault, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+and+simultaneous+emergence+of+multiple+hippocampal+biomarkers+of+aging+is+mediated+by+Ca2+-induced+Ca2++release.">Early and simultaneous emergence of multiple hippocampal biomarkers of aging is mediated by Ca2+-induced Ca2+ release.</a> J Neurosci. 26, 3482-3490 (2006).</li><li>Thibault, O., Hadley, R., Landfield, P. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Elevated+postsynaptic+[Ca2+]i+and+L-type+calcium+channel+activity+in+aged+hippocampal+neurons:+relationship+to+impaired+synaptic+plasticity.">Elevated postsynaptic [Ca2+]i and L-type calcium channel activity in aged hippocampal neurons: relationship to impaired synaptic plasticity.</a> J Neurosci. 21, 9744-9756 (2001).</li><li>Thibault, O., Landfield, P. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increase+in+single+L-type+calcium+channels+in+hippocampal+neurons+during+aging.">Increase in single L-type calcium channels in hippocampal neurons during aging.</a> Science. 272, 1017-1020 (1996).</li><li>Stutzmann, G. E., Caccamo, A., LaFerla, F. M., Parker, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dysregulated+IP3+signaling+in+cortical+neurons+of+knock-in+mice+expressing+an+Alzheimer's-linked+mutation+in+presenilin1+results+in+exaggerated+Ca2++signals+and+altered+membrane+excitability.">Dysregulated IP3 signaling in cortical neurons of knock-in mice expressing an Alzheimer's-linked mutation in presenilin1 results in exaggerated Ca2+ signals and altered membrane excitability.</a> J Neurosci. 24, 508-513 (2004).</li><li>Stutzmann, G. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enhanced+ryanodine+receptor+recruitment+contributes+to+Ca2++disruptions+in+young,+adult,+and+aged+Alzheimer's+disease+mice.">Enhanced ryanodine receptor recruitment contributes to Ca2+ disruptions in young, adult, and aged Alzheimer's disease mice.</a> J Neurosci. 26, 5180-5189 (2006).</li><li>Lee, H. K., Min, S. S., Gallagher, M., Kirkwood, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NMDA+receptor-independent+long-term+depression+correlates+with+successful+aging+in+rats.">NMDA receptor-independent long-term depression correlates with successful aging in rats.</a> Nat Neurosci. 8, 1657-1659 (2005).</li><li>McNaughton, B. L., Douglas, R. M., Goddard, G. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synaptic+enhancement+in+fascia+dentata:+cooperativity+among+coactive+afferents.">Synaptic enhancement in fascia dentata: cooperativity among coactive afferents.</a> Brain Res. 157, 277-293 (1978).</li></ol>

وقد رعت إنتاج هذه المادة عن طريق الفيديو لايكا مايكروسيستمز.

سوف الخطوات المذكورة في هذا البروتوكول مساعدة ضمان أن تتم تشريح الدماغ على الاقل وبسرعة وكفاءة في العمر ، كما هو الحال في الفئران البالغين الشبان. كما نقوم بتوفير تفاصيل كافية للمبتدئين لإعداد الدراسات الخاصة بها على شريحة والكمونية LTD. إذا استكشاف مزيد من الشيخوخة والتغيرات في وظيفة ميلادي متشابك واللدونة هو واحد من أهدافك ، هناك اثنين على الأقل من القضايا المنهجية الأخرى ، وألمح إليها أعلاه ، التي تستحق مزيدا من الدراسة. وقد عرض لأول مرة ، ومختبرات عدة كا 2 + : + Mg2 نسبة في تسجيل ACSF يمكن أن يكون لها تأثير ملحوظ على تحريض اللدونة متشابك في قرن آمون شرائح 2،10،24،25. CSF في الثدييات ، كا 2 + : + Mg2 النسبة واحدة تقريبا (انظر على سبيل المثال 26). ومع ذلك ، ACSF كا 2 + : + Mg2 تستخدم عادة نسب أقرب إلى 2 في الدراسات شريحة وظيفة متشابك واللدونة. في الدراسات في وقت مبكر ، ربما تم تكييفها لتحسين هذه الممارسة تحريض الكمونية ، ثم أصبح لاحقا الروتيني لجميع الدراسات اللدونة. ومع ذلك ، يمكن أن تكون هذه الممارسة الإشكالية في دراسات الشيخوخة وميلادي بسبب الخلافات جيدا تتميز الخلايا العصبية في كاليفورنيا 2 + التنظيم. على وجه التحديد ، كا 2 + تدفق و / أو كا 2 + من صنع كا 2 + هو ارتفاع في الافراج عن الفئران الذين تتراوح أعمارهم بين و / أو نموذج الفئران ميلادي أثناء تنشيط الخلايا العصبية 3،27-31. تحريض المحدودة هي حساسة بشكل خاص للتغيرات طفيفة في مستويات الكالسيوم ACSF + 2. لدينا بروتوكول ، والذي يستخدم 2mm وكا 2 + و 2 ملي Mg2 + والنتائج عادة في LTD عن العمر ، ولكن ليس صغار الحيوانات البالغة 2 ، في حين أن الدراسات باستخدام كا 2 + : Mg2 + نسبة أقرب إلى اثنين ، وقد لاحظ LTD قوية لدى البالغين في عدم وجود فارق السن 2،10 أو بالتزامن مع خفض المحدودة في الفئران عمرها 32 عاما. هذه الملاحظات تسليط الضوء على الحاجة إلى النظر بعناية ACSF كا 2 + و + Mg2 المستويات عند مقارنة كا 2 + التي تعتمد على الحيوانات في اللدونة البالغين المسنين والشباب. المسألة الثانية تتعلق التبعية المنهجية قوية من الكمونية على الاستقطاب بعد المشبكي 33 و ممكن الشيخوخة / اختلافات في التركيب الوراثي قوة متشابك. يتم ضبط عموما في تجربة نموذجية الكمونية ، والأساس LTP كثافة التحفيز لإنتاج نصف الحد الأقصى (أو ثلاثة أرباع القصوى) الكامن الاستثاري بعد المشبكي السعة. المشكلة المحتملة هي أن الجرذان والفئران الذين تتراوح أعمارهم بين APP/PS1 عادة تظهر انخفاض القوة النسبية متشابك مع نظرائهم الاصغر نوع و / أو البرية ، وهذا يعني أن القيم الأساس الكامن الاستثاري بعد المشبكي سيكون أيضا أصغر في الجرذان والفئران الذين تتراوح أعمارهم بين APP/PS1. ربما أصغر EPSPs تترجم إلى أقل الاستقطاب من خلال التحفيز الكمونية ، مما أدى إلى انخفاض احتمال لإحداث LTP 33. وبسبب هذا الخلط المحتملة ، فإنه من الصعب تحديد ما إذا كانت هذه الحيوانات تظهر عجزا الإنتاجية ، وعجز اللدونة أو كليهما. وهذا هو ، قد آليات تحريض الكمونية في العمر والفئران / أو APP/PS1 سليمة وظيفيا (أي العجز اللدونة) ، ولكن حفز كاف (العجز الإنتاجية) في ظل هذه الظروف. هذا التمييز ضروري ، وآليات لنقل البيانات وآليات لدونة قد تستجيب بشكل مختلف للغاية لمعالجة دوائية محددة. ونحن نحاول الحد من تأثير انخفاض الإنتاجية في الحث الكمونية التي تطبيع السعة الكامن الاستثاري بعد المشبكي على نفس المستوى (مثل بالسيارات 1) في جميع شرائح قبل LTP التحفيز. استراتيجيات أخرى قد تكون فعالة وكذلك (مثل استخدام التيار الكهربائي أو المشبك الحالية لمعادلة غشاء المحتملة عبر مجموعات خلال التحفيز الكمونية) ، وينبغي النظر فيها عند التحقيق الكمونية في هذه النماذج الحيوانية.

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> اسم كاشف </td><td> شركة </td><td> فهرس العدد </td></tr><tr><td> كلوريد الصوديوم </td><td> الصياد </td><td> BP358 - 1 </td></tr><tr><td> بوكل </td><td> الصياد </td><td> BP366 - 500 </td></tr><tr><td> KH 2 PO 4 (أحادي القاعدة) </td><td> سيغما </td><td> P5379 - 100G </td></tr><tr><td> MgSO 4 </td><td> سيغما </td><td> M2643 - 500G </td></tr><tr><td> CaCl 2 (ثنائي الهيدرات) </td><td> سيغما </td><td> C3306 - 250G </td></tr><tr><td> NaHCO 3 </td><td> الصياد </td><td> S233 - 500 </td></tr><tr><td> C 6 H 12 O 6 (سكر العنب) </td><td> الصياد </td><td> BP350 - 1 </td></tr></tbody></table> الجدول 1. الكواشف المطلوبة <table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> اسم المعدات </td><td> شركة </td><td> فهرس العدد </td><td> تعليقات </td></tr><tr><td> مخروطي قوارير </td><td> الصياد </td><td> FB - 500 - 2000 FB - 500 - 1000 </td><td></td></tr><tr><td> الحوض عوامات </td><td></td><td></td><td> المستخدمة في وسائل الاعلام بالاكسجين. متوفرة في معظم محلات الحيوانات الأليفة </td></tr><tr><td> 50 مل من الدورق الزجاجي </td><td> الصياد </td><td> 02 - 540G </td><td> لstorarge الدماغ في ACSF </td></tr><tr><td> Parafilm </td><td> الصياد </td><td> 13-374-10 </td><td></td></tr><tr><td> الحيوانات الصغيرة المقصلة </td><td> العالم الدقة الثمينة (WPI) </td><td> DCAP - M </td><td></td></tr><tr><td> شقة ورقة منشفة </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> # 11 الريشة شفرة جراحية </td><td> الصياد </td><td> 08-916 - 5B </td><td></td></tr><tr><td> Beebee العظام المقص </td><td> أدوات العلوم الدقيقة (FST) </td><td> 16044-10 </td><td></td></tr><tr><td> Lempert Rongeurs </td><td> Roboz </td><td> RS - 8321 </td><td> استخدام الفئران </td></tr><tr><td> فريدمان ، بيرسون Rongeurs </td><td> FST </td><td> 16020-14 </td><td> استخدام الفئران أو الجرذان </td></tr><tr><td> الحصين أداة </td><td> FST </td><td> 10099-15 </td><td></td></tr><tr><td> ملعقة </td><td></td><td></td><td> ملعقة صغيرة من البلاستيك وسوف نفعل </td></tr><tr><td> ملعقة الصيدلي </td><td> الصياد </td><td> 21-401 - 25A </td><td> ملعقة الصيدلي </td></tr><tr><td> مقص جراحي قزحية </td><td> FST </td><td> 14058-09 </td><td></td></tr><tr><td> pipets نقل البلاستيك </td><td> الصياد </td><td> 13-711-43 </td><td></td></tr><tr><td> 110mm رقة تصفية Whatman </td><td> الصياد </td><td> 09 - 805E </td><td> Whatman القط. 1001-110 </td></tr><tr><td> الزجاج طبق بتري </td><td> الصياد </td><td></td><td></td></tr><tr><td> ايكا VT1000P المختصر بالاهتزاز مشراح </td><td> Vibratome </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 0.1mm FA - 10 S شفرة الريشة </td><td> تيد بيلا </td><td> 121-9 </td><td> 0.1mm FA - 10 S شفرة الريشة </td></tr><tr><td> البورسليكات الماصة باستور الزجاج (لمبة مع المطاط) </td><td> الصياد </td><td> 13-678 - 20A </td><td> لنقل شرائح : يتم تقسيم تلميح قبالة الحرارة ومصقول لافتتاح أكبر </td></tr><tr><td> 35 مم طبق الثقافة Polysterine </td><td> كورنينج </td><td> 430588 </td><td> المستخدمة لجمع شرائح بعد تشريح </td></tr></tbody></table> الجدول 2. أدوات ومواد للتشريح <table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> معدات / مواد </td><td> شركة </td><td> تعليقات (اختياري) </td></tr><tr><td> عقد الغرفة </td><td> عرف بني </td><td></td></tr><tr><td> P - 97 أفقي الماصة بولير </td><td> شركة سوتر الصك </td><td></td></tr><tr><td> الاهتزاز العزلة الجدول </td><td> تقنية تصنيع شركة (TMC) </td><td></td></tr><tr><td> قفص فاراداي </td><td> عرف بني </td><td></td></tr><tr><td> بيركس مضخة زجاجة مع أسلحة شخصية القاع (المنتج # 1220 - 1L) </td><td> كورنينج </td><td></td></tr><tr><td> الجاذبية contolled مجموعة الرابعة مع منظم (المنتج # 2C8891) </td><td> باكستر </td><td></td></tr><tr><td> خط وسط فراغ </td><td></td><td> متوفرة في معظم المختبرات الحديثة </td></tr><tr><td> 95 O 2 ٪ / 5 ٪ ثاني أكسيد الكربون غاز 2 ميكس </td><td> ضريبةشركة T - الإجمالي </td><td></td></tr><tr><td> TygonTM معمل الأنابيب ل/ 2 O CO 2 التسليم </td><td> فيشر العلمية </td><td> غير سامة وغير المؤكسدة ، ويأتي في مجموعة متنوعة من الأحجام. </td></tr><tr><td> كسوف E600FN مجهر </td><td> نيكون </td><td> مع أهداف 10x و40X ، بالقرب من تصفية infared ، وGFP ، DS - Red2 مرشحات </td></tr><tr><td> بارد كاميرا رقمية التقط ES </td><td> Photometrics </td><td> بارد كاميرا رقمية التقط ES </td></tr><tr><td> X - سايت اضاءة نيون </td><td> EXFO </td><td> X - سايت اضاءة نيون </td></tr><tr><td> منهاج المجهر </td><td> Siskiyou </td><td> تجميع مخصص </td></tr><tr><td> RC - 22 غاطسة تسجيل الغرفة (المنتج # 64-0228) </td><td> نذير الثمينة (WI) </td><td> يتطلب P - 1 ومحول منصة المسرح (المنتج # 64-0277 من وارنر) </td></tr><tr><td> TC2BIP 2/3Ch تحكم في درجة الحرارة </td><td> خلية Microcontrols </td><td> TC2BIP 2/3Ch تحكم في درجة الحرارة </td></tr><tr><td> 4 مصغرة المختصر المحور مناور </td><td> Siskiyou </td><td></td></tr><tr><td> أسلاك البلاتين إيريديوم (0.002 بوصة) (البند رقم PTT0203) </td><td> WPI </td><td></td></tr><tr><td> A365 التحفيز المعزل </td><td> WPI </td><td> A365 التحفيز المعزل </td></tr><tr><td> Multiclamp مكبر للصوت 700b </td><td> محوار الآلات </td><td></td></tr><tr><td> Digidata 1322A A / د المحول </td><td> محوار الآلات </td><td></td></tr><tr><td> PClamp البرمجيات </td><td> محوار الآلات </td><td></td></tr><tr><td> كمبيوتر شخصي (بنتيوم 4) </td><td> ديل </td><td></td></tr></tbody></table> المعدات الكهربية الجدول 3. والمواد

preparation of acute hippocampal slices from rats and transgenic mice for the study of synaptic alterations during aging and amyloid pathology

إعداد شريحة القوارض الحصين وربما كان الأكثر استخداما على نطاق واسع أداة لتحقيق وظيفة متشابك الثدييات واللدونة. ويمكن استخراج الحصين بسرعة وبسهولة من الجرذان والفئران وشرائح تبقى قابلة للحياة لعدة ساعات في الاوكسيجين السائل النخاعي الاصطناعي. وعلاوة على ذلك ، يتم تطبيقها بسهولة electrophysisologic التقنيات الأساسية للتحقيق في وظيفة متشابك في قرن آمون شرائح وقدمت بعض من أفضل المؤشرات الحيوية للإدراكيا. شريحة الحصين فهو يحظى بشعبية خاصة لدراسة آليات اللدونة متشابك المشاركة في التعلم والذاكرة. وكثيرا ما تستخدم التغييرات في تحريض بعيدة المدى والاكتئاب (LTP و LTD) من فعالية متشابك في قرن آمون شرائح (أو نقص منه) لوصف النمط الظاهري العصبية للحيوانات معرفيا ، ضعف و / أو لتقييم آلية عمل nootropic المركبات. توضح هذه المقالة الإجراءات التي نستخدمها لإعداد شرائح الحصين من الجرذان والفئران المعدلة وراثيا لدراسة التعديلات متشابك المرتبطة بالشيخوخة الدماغ ومرض الزهايمر (ميلادي) 1-3. ويمكن استخدام الجرذان والفئران الذين تتراوح أعمارهم بين نموذج ميلادي يقدم مجموعة فريدة من التحديات التي تواجه الباحثين الذين اعتادوا على استخدام الفئران الأصغر سنا و / أو الفئران في أبحاثهم. الفئران الذين تتراوح أعمارهم بين الجماجم وسمكا والنسيج الضام من اشد الأصغر الجرذان والفئران ، والتي يمكن تأخير استخراج الدماغ و / أو التشريح وبالتالي ينفي أو المبالغة الحقيقية العمر الاختلافات في وظيفة متشابك واللدونة. أمراض الشيخوخة واميلويد قد يؤدي الى تفاقم الضرر أيضا الحصين لحقت به خلال إجراء تشريح ، مما يعقد مجددا وجود أي استنتاجات المستخلصة من تقييم فيزيولوجي. هنا ، نحن مناقشة الخطوات التي اتخذت خلال إجراء تشريح للحد من هذه المشاكل. وتقدم أمثلة من الردود متشابك المكتسبة في &quot;صحية&quot; و &quot;غير صحية&quot; شرائح من الجرذان والفئران ، وكذلك ممثل التجارب اللدونة متشابك. وتناقش أيضا التأثير المحتمل للعوامل المنهجية الأخرى على وظيفة متشابك في هذه النماذج الحيوانية (مثل مكونات الحل تسجيل والمعلمات التحفيز). وينبغي في حين أن التركيز في هذه المقالة على استخدام الجرذان والفئران المعدلة وراثيا العمر ، علم وظائف الأعضاء المبتدئين لشريحة تجد ما يكفي من التفاصيل هنا للبدء في الدراسات الخاصة بها ، وذلك باستخدام مجموعة متنوعة من النماذج القوارض.

Watch this Scientific Journal Video about Preparation of Acute Hippocampal Slices from Rats and Transgenic Mice for the Study of Synaptic Alterations during Aging and Amyloid Pathology at JoVE.com

Preparation of Acute Hippocampal Slices from Rats and Transgenic Mice for the Study of Synaptic Alterations during Aging and Amyloid Pathology

توضح هذه المقالة الإجراءات اللازمة لإعداد شرائح الحصين من الجرذان والفئران المعدلة وراثيا لدراسة التعديلات متشابك الدماغ المرتبطة بالشيخوخة والأمراض المرتبطة بالعمر الاعصاب ، مثل مرض الزهايمر.

إعداد شرائح الحصين الحادة من الجرذان والفئران المعدلة وراثيا لدراسة التعديلات متشابك وامراض الشيخوخة خلال اميلويد

The rodent hippocampal slice preparation is perhaps the most broadly used tool for investigating mammalian synaptic function and plasticity. The ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Preparation of Oligomeric &beta;-amyloid1-42 and Induction of Synaptic Plasticity Impairment on Hippocampal Slices

Preparation of Oligomeric ÃƒÅ½Ã‚Â²-amyloid1-42 and Induction of Synaptic Plasticity Impairment on Hippocampal Slices

إعداد Oligomeric β اميلويد 1-42 والتعريفي للعاهة اللدونة متشابك على شرائح الحصين

Impairment of synaptic connections is likely to underlie the subtle amnesic changes occurring at the early stages of Alzheimer s Disease (AD). ...

Vibrodissociation of Neurons from Rodent Brain Slices to Study Synaptic Transmission and Image Presynaptic Terminals

Vibrodissociation من الخلايا العصبية من الدماغ القوارض شرائح لدراسة نقل صورة متشابك ومحطات قبل المشبكي

Mechanical dissociation of neurons from the central nervous system has the advantage that presynaptic boutons remain attached to the isolated neuron of ...

Preparation of Acute Subventricular Zone Slices for Calcium Imaging

إعداد شرائح الحاد المنطقة Subventricular للتصوير الكالسيوم

The subventricular zone (SVZ) is one of the two neurogenic zones in the postnatal brain. The SVZ contains densely packed cells, including neural ...

Dual Electrophysiological Recordings of Synaptically-evoked Astroglial and Neuronal Responses in Acute Hippocampal Slices

تسجيلات الكهربية المزدوجة للSynaptically-استجابات Astroglial والخلايا العصبية في الحصين شرائح الحاد

Astrocytes form together with neurons tripartite synapses, where they integrate and modulate neuronal activity. Indeed, astrocytes sense neuronal inputs ...

Stereotaxic Infusion of Oligomeric Amyloid-beta into the Mouse Hippocampus

تسريب التجسيمي من بلازميدة قليلة القسيمات اميلويد بيتا في الحصين ماوس

Alzheimer&#8217;s disease is a neurodegenerative disease affecting the aging population. A key neuropathological feature of the disease is the ...

Investigation of Synaptic Tagging/Capture and Cross-capture using Acute Hippocampal Slices from Rodents

التحقيق في متشابك وسم / القبض على والصليب التقاط باستخدام الحاد شرائح الحصين من القوارض

Synaptic tagging and capture (STC) and cross-tagging are two important mechanisms at cellular level that explain how synapse-specificity and associativity ...

Preparation of Acute Brain Slices Using an Optimized N-Methyl-D-glucamine Protective Recovery Method

Preparation of Acute Brain Slices Using an Optimized N-Methyl-D-glucamine Protective Recovery Method

إعداد شرائح الدماغ الحادة باستخدام محسن N-الميثيل-د-أسلوب استرداد واقية جلوكاميني

This protocol is a practical guide to the N-methyl-D-glucamine (NMDG) protective recovery method of brain slice preparation. Numerous recent studies have ...

Recording Synaptic Plasticity in Acute Hippocampal Slices Maintained in a Small-volume Recycling-, Perfusion-, and Submersion-type Chamber System

تسجيل اللدونة متشابك في شرائح هيبوكامبال الحاد تحتفظ في صغيرة الحجم-إعادة التدوير، ونضح-، وغمر من نوع نظام الدائرة

Even though experiments on brain slices have been in use since 1951, problems remain that reduce the probability of achieving a stable and successful ...

Single Synapse Indicators of Glutamate Release and Uptake in Acute Brain Slices from Normal and Huntington Mice

مؤشرات سينابس واحدة من الإفراج عن الغلوتامات والابوجدافي في شرائح الدماغ الحادة من الفئران العادية وهنتنغتون

Synapses are highly compartmentalized functional units that operate independently on each other. In Huntington&#39;s disease (HD) and other ...

Preparation of Acute Human Hippocampal Slices for Electrophysiological Recordings

إعداد شرائح فرس النهر البشري الحادة للتسجيلات الكهربية

Epilepsy affects about 1% of the world population and leads to a severe decrease in quality of life due to ongoing seizures as well as high risk for ...