Name: using bioluminescent imaging to investigate synergism between streptococcus pneumoniae and influenza a virus in infant mice
Uploaded: 2011-04-14T11:00:00
Duration: 10 min 47 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Using Bioluminescent Imaging to Investigate Synergism Between Streptococcus pneumoniae and Influenza A Virus in Infant Mice at JoVE.com

Les auteurs tiennent à remercier les conseils techniques de David Briles (Université d&#39;Alabama à Birmingham, AL, USA). Nous tenons à remercier Yvette Chen, le directeur de la protection des animaux de l&#39;Université de Melbourne, et David Taylor, le directeur de l&#39;animalerie, pour des suggestions utiles et des discussions concernant le bien-être animal et éthique et le développement de critères d&#39;intervention et de points d&#39;extrémité humain pour les expériences décrites dans ce manuscrit. Odilia Wijburg et Patrick de lecture sont soutenus par une bourse NHMRC RD Wright, Kirsty court est soutenu par un soutien de GSK Postgraduate de subvention et une bourse Puzey.

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	<li>Brundage, J. F., Shanks, G. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deaths+from+bacterial+pneumonia+during+1918-19+influenza+pandemic.">Deaths from bacterial pneumonia during 1918-19 influenza pandemic.</a> Emerg Infect Dis. 14, 1193-1199 (2008).</li><li>Petersdorf, R. G., Fusco, J. J., Harter, D. H., Albrink, W. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pulmonary+infections+complicating+Asian+influenza.">Pulmonary infections complicating Asian influenza.</a> AMA Arch Intern Med. 103, 262-272 (1959).</li><li>Diavatopoulos, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influenza+A+virus+facilitates+Streptococcus+pneumoniae+transmission+and+disease.">Influenza A virus facilitates Streptococcus pneumoniae transmission and disease.</a> Faseb J. , (2010).</li><li>Orihuela, C. J., Gao, G., Francis, K. P., Yu, J., Tuomanen, E. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissue-specific+contributions+of+pneumococcal+virulence+factors+to+pathogenesis.">Tissue-specific contributions of pneumococcal virulence factors to pathogenesis.</a> J Infect Dis. 190, 1661-1669 (2004).</li><li>Kadurugamuwa, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Noninvasive+monitoring+of+pneumococcal+meningitis+and+evaluation+of+treatment+efficacy+in+an+experimental+mouse+model.">Noninvasive monitoring of pneumococcal meningitis and evaluation of treatment efficacy in an experimental mouse model.</a> Mol Imaging. 4, 137-142 (2005).</li><li>Smith, M. W., Schmidt, J. E., Rehg, J. E., Orihuela, C. J., McCullers, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+pro-+and+anti-inflammatory+molecules+in+a+mouse+model+of+pneumococcal+pneumonia+after+influenza.">Induction of pro- and anti-inflammatory molecules in a mouse model of pneumococcal pneumonia after influenza.</a> Comp Med. 57, 82-89 (2007).</li><li>Owen, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nasal-associated+lymphoid+tissue+and+olfactory+epithelium+as+portals+of+entry+for+Burkholderia+pseudomallei+in+murine+melioidosis.">Nasal-associated lymphoid tissue and olfactory epithelium as portals of entry for Burkholderia pseudomallei in murine melioidosis.</a> J Infect Dis. 199, 1761-1770 (2009).</li><li>Luker, G. D., Leib, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Luciferase+real-time+bioluminescence+imaging+for+the+study+of+viral+pathogenesis.">Luciferase real-time bioluminescence imaging for the study of viral pathogenesis.</a> Methods Mol Biol. 292, 285-296 (2005).</li><li>Hutchens, M., Luker, G. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Applications+of+bioluminescence+imaging+to+the+study+of+infectious+diseases.">Applications of bioluminescence imaging to the study of infectious diseases.</a> Cell Microbiol. 9, 2315-2322 (2007).</li></ol>

La production de cette vidéo a été parrainé par l&#39;article Caliper Life Sciences.

L&#39;imagerie in vivo avec la machine IVIS est une méthodologie unique qui permet la visualisation en temps réel de pathogenèse microbienne 4, 6-9. Ici, nous montrons l&#39;application de cette technologie à la compréhension de la synergie entre S. le virus de la grippe pneumoniae et chez des souris nouveau-né. En raison de la nature non-invasive de cette technique, nous avons été en mesure de surveiller la progression de l&#39;infection dans chaque souris au cours du temps. Cela nous a permis de documenter la cinétique de transmission pneumocoque chez les souriceaux de co-logés 3. La nature non invasive de cette technique permet aux chercheurs d&#39;utiliser moins d&#39;animaux par expérience et donc de réduire l&#39;utilisation des animaux. Il est également possible d&#39;utiliser la machine IVIS pour visualiser la dissémination de l&#39;infection à des sites jusqu&#39;alors inconnue de l&#39;infection dans le corps, ainsi que des sites pas facilement échantillonnées par dissection (tels que l&#39;oreille moyenne). Avant de commencer les expériences d&#39;imagerie, nous avons confirmé que les niveaux de colonisation de la bioluminescence EF3030 souche étaient comparables aux niveaux de colonisation de la société mère EF3030 souche en énumérant comptent viable dans des homogénats de tissu. De plus, nous avons d&#39;abord confirmé que l&#39;infection par le virus de la grippe a entraîné une charge accrue des bioluminescents EF3030 dans le nasopharynx de colonisé animaux comme l&#39;a démontré avec le parent EF3030 souche (résultats non présentés). Bien que la technologie IVIS est facile à utiliser et génère reproductible et facile à comprendre les données, les expériences doivent être soigneusement conçues de telle sorte que la sensibilité et l&#39;utilité de la technologie est maximisée. Par exemple, la sensibilité de la caméra IVIS est affectée par la profondeur et l&#39;opacité du tissu 8, qui dans notre expérience, augmente la limite de détection de signaux bioluminescents provenant des poumons. En outre, la fourrure et la peau pigmentée noire réduit la transmission de lumière par autant que 10 fois (par rapport à des souris sans poils) 8. Tout en développant cette méthode, nous avons optimisé ce protocole pour l&#39;utilisation de 5 à 14 jours C57BL ancien / 6 souris et ont depuis démontré que IVIS peut être utilisé pour détecter la colonisation de la vieille C57BL 20 jours / 6 souris avec S. bioluminescents pneumoniae EF3030. Cependant, la détection du signal peut être augmenté lorsque ces expériences sont réalisées chez la souris nude ou BALB / c. Néanmoins, la caméra IVIS représente une nouvelle approche pour suivre, caractériser et finalement comprendre le développement in vivo de la maladie pneumococcique suivants virus influenza A.

using bioluminescent imaging to investigate synergism between streptococcus pneumoniae and influenza a virus in infant mice

Durant la pandémie de 1918 virus de la grippe, qui a tué environ 50 millions de personnes dans le monde, la majorité des accidents mortels ne sont pas le résultat d&#39;une infection par le virus de la grippe seul. Au lieu de cela, la plupart des individus sont supposés avoir succombé à une infection bactérienne secondaire, principalement causée par la bactérie Streptococcus pneumoniae (le pneumocoque). La relation synergique entre les infections causées par le virus de la grippe et le pneumocoque a été ensuite observée durant la pandémie de grippe 1957 virus asiatique, ainsi que pendant les épidémies saisonnières du virus (revue en 1, 2). Ici, nous décrivons un protocole utilisé pour étudier le mécanisme (s) qui peuvent être impliqués dans la morbidité a augmenté en raison de la grippe Un virus simultanées et S. l&#39;infection pneumoniae. Nous avons développé un modèle murin d&#39;enfant de façon fiable et reproductible de démontrer les effets de l&#39;infection par le virus de la grippe de souris colonisées par S. pneumoniae. En utilisant ce protocole, nous avons fourni un premier aperçu de la cinétique de transmission pneumocoque entre co-logés, en utilisant des souris néonatales imagerie in vivo 3.

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Using Bioluminescent Imaging to Investigate Synergism Between Streptococcus pneumoniae and Influenza A Virus in Infant Mice

Une infection concomitante par le virus grippal A est l&#39;un des facteurs impliqués dans l&#39;induction de la maladie invasive à pneumocoques pendant asymptomatiques<em&gt; Streptococcus pneumoniae</emChariot&gt;. Nous décrivons ici une méthode d&#39;infection mixte avec des souriceaux d&#39;enquêter sur la synergie entre ces deux agents pathogènes respiratoires.

Utiliser l&#39;imagerie Bioluminescent chargé d&#39;enquêter sur une synergie entre Streptococcus pneumoniae Et virus Influenza A de souriceaux

During the 1918 influenza virus pandemic, which killed approximately 50 million people worldwide, the majority of fatalities were not the result of ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

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Imagerie de cellules vivantes de la<emBacillus subtilis> Et Streptococcus pneumoniae À l&#39;aide automatisée de microscopie time-lapse

During the last few years scientists became increasingly aware that average data obtained from microbial population based experiments are not ...

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Membrane depolarization and ion fluxes are events that have been studied extensively in biological systems due to their ability to profoundly impact ...

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Capsulaire sérotypage des<em&gt; Streptococcus pneumoniae</em&gt; Utilisation de la réaction Quellung

There are over 90 different capsular serotypes of Streptococcus pneumoniae (the pneumococcus). As well as being a tool for understanding pneumococcal ...

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Latex agglutination reagents are widely used in microbial diagnosis, identification and serotyping. Streptococcus pneumoniae (the pneumococcus) is a major ...

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Influenza infection is associated with about 36,000 deaths and more than 200,000 hospitalizations every year in the United States. The continuous ...

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Neutrophiles Isolement et analyse pour déterminer leur rôle dans le lymphome cellulaire Sensibilité aux agents thérapeutiques

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Influenza viruses cause over 500,000 deaths worldwide1 and are associated with an annual cost of 12 - 14 billion USD in the United States alone ...

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Grippe neutralisante d’anticorps aux virus a (H3N2) dans le sérum humain par micro-neutralisation de mesure des analyses utilisant des cellules de MDCK-SIAT1

Neutralizing antibodies against hemagglutinin (HA) of influenza viruses are considered the main immune mechanism that correlates with protection for ...