Name: using bioluminescent imaging to investigate synergism between streptococcus pneumoniae and influenza a virus in infant mice
Uploaded: 2011-04-14T11:00:00
Duration: 10 min 47 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Using Bioluminescent Imaging to Investigate Synergism Between Streptococcus pneumoniae and Influenza A Virus in Infant Mice at JoVE.com

Авторы хотели бы выразить признательность технических консультаций от Дэвида Briles (Университет штата Алабама в Бирмингеме, Алабама, США). Мы хотели бы поблагодарить Иветт Чэнь, сотрудник животных из Университета Мельбурна, и Дэвид Тейлор, менеджер фонда животных, за полезные советы и обсуждения, касающиеся благополучия животных и этики и развитие вмешательства критерии и гуманного конечных точек для экспериментов, описанных В этой рукописи. Odilia Wijburg и Патрик Чтение поддерживаются NHMRC РД Райт стипендий, Кирсти Короткий при поддержке ГСК последипломного поддержке гранта и стипендии Пузей.

<ol>
	<li>Brundage, J. F., Shanks, G. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deaths+from+bacterial+pneumonia+during+1918-19+influenza+pandemic.">Deaths from bacterial pneumonia during 1918-19 influenza pandemic.</a> Emerg Infect Dis. 14, 1193-1199 (2008).</li><li>Petersdorf, R. G., Fusco, J. J., Harter, D. H., Albrink, W. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pulmonary+infections+complicating+Asian+influenza.">Pulmonary infections complicating Asian influenza.</a> AMA Arch Intern Med. 103, 262-272 (1959).</li><li>Diavatopoulos, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influenza+A+virus+facilitates+Streptococcus+pneumoniae+transmission+and+disease.">Influenza A virus facilitates Streptococcus pneumoniae transmission and disease.</a> Faseb J. , (2010).</li><li>Orihuela, C. J., Gao, G., Francis, K. P., Yu, J., Tuomanen, E. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissue-specific+contributions+of+pneumococcal+virulence+factors+to+pathogenesis.">Tissue-specific contributions of pneumococcal virulence factors to pathogenesis.</a> J Infect Dis. 190, 1661-1669 (2004).</li><li>Kadurugamuwa, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Noninvasive+monitoring+of+pneumococcal+meningitis+and+evaluation+of+treatment+efficacy+in+an+experimental+mouse+model.">Noninvasive monitoring of pneumococcal meningitis and evaluation of treatment efficacy in an experimental mouse model.</a> Mol Imaging. 4, 137-142 (2005).</li><li>Smith, M. W., Schmidt, J. E., Rehg, J. E., Orihuela, C. J., McCullers, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+pro-+and+anti-inflammatory+molecules+in+a+mouse+model+of+pneumococcal+pneumonia+after+influenza.">Induction of pro- and anti-inflammatory molecules in a mouse model of pneumococcal pneumonia after influenza.</a> Comp Med. 57, 82-89 (2007).</li><li>Owen, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nasal-associated+lymphoid+tissue+and+olfactory+epithelium+as+portals+of+entry+for+Burkholderia+pseudomallei+in+murine+melioidosis.">Nasal-associated lymphoid tissue and olfactory epithelium as portals of entry for Burkholderia pseudomallei in murine melioidosis.</a> J Infect Dis. 199, 1761-1770 (2009).</li><li>Luker, G. D., Leib, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Luciferase+real-time+bioluminescence+imaging+for+the+study+of+viral+pathogenesis.">Luciferase real-time bioluminescence imaging for the study of viral pathogenesis.</a> Methods Mol Biol. 292, 285-296 (2005).</li><li>Hutchens, M., Luker, G. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Applications+of+bioluminescence+imaging+to+the+study+of+infectious+diseases.">Applications of bioluminescence imaging to the study of infectious diseases.</a> Cell Microbiol. 9, 2315-2322 (2007).</li></ol>

Производство видео-статья была организована суппорт наук о жизни.

В естественных изображений с машиной ИВИС это уникальная методика, позволяющая реальном времени визуализации микробного патогенеза 4, 6-9. Здесь мы покажем, применение этой технологии для понимания синергизма между S. пневмонии и гриппа детской мышей. Из неинвазивных характер этой техники, мы были в состоянии контролировать прогрессирование инфекции в каждой отдельной мыши с течением времени. Это позволило нам документ кинетики пневмококковой передачи среди со-размещался детский мышах 3. Неинвазивный характер этой техники позволяет исследователям использовать меньшее количество животных в эксперименте и, следовательно, уменьшить животных использования. Кроме того, можно использовать ИВИС машины для визуализации распространения инфекции на ранее неизвестных очагов инфекции в организме, а также сайты, не легко, отобранных вскрытия (например, среднего уха). Перед началом визуализации экспериментов мы подтвердили, что колонизация уровней биолюминесцентного EF3030 штамма были сопоставимы с уровнями колонизации родителей EF3030 напряжение путем перечисления жизнеспособные ткани рассчитывать в гомогенатах. Кроме того, мы впервые подтвердили, что заражение вирусом гриппа привела к увеличению нагрузки биолюминесцентных EF3030 в носоглотке колониальных животных, как показано с родителями EF3030 деформации (результаты не показаны). Хотя технология ИВИС прост в эксплуатации и генерирует воспроизводимые и легкими для понимания данных, эксперименты должны быть тщательно спланированы так, что чувствительность и полезность технологии достигает максимального уровня. Например, чувствительность камеры ИВИС зависит от глубины и прозрачности ткани 8, который по нашему опыту, повышает предел обнаружения сигналов биолюминесцентного, происходящих из легких. Кроме того, темный мех и пигментированной кожи уменьшает светопропускание на целых 10 раза (по сравнению с безволосых мышей) 8. При разработке этого метода, мы оптимизировали этот протокол для использования с 5 до 14 дней старые C57BL / 6 мышей и с тех пор показали, что ИВИС может быть использован для обнаружения колонизации 20 дней старые C57BL / 6 мышей с биолюминесцентного С. EF3030 пневмонии. Тем не менее, обнаружение сигналов может быть увеличена, если эти эксперименты выполняются в обнаженном или BALB / с мышами. Тем не менее, камера ИВИС представляет собой новый подход для мониторинга, характеристики и в конечном итоге понять в естественных условиях развития пневмококковой инфекции следующие гриппа вирусной инфекции.

using bioluminescent imaging to investigate synergism between streptococcus pneumoniae and influenza a virus in infant mice

В 1918 пандемии вируса гриппа, в результате которого погибли около 50 миллионов человек во всем мире, большинство из погибших не были результатом заражения вирусом гриппа в одиночку. Вместо этого, большинство людей, как полагают, поддавшись вторичной бактериальной инфекции, преимущественно вызванной бактерией Streptococcus пневмонии (пневмококк). Синергетические связи между инфекций, вызванных вирусом гриппа и пневмококковой инфекции была впоследствии наблюдалось в 1957 азиатской пандемического вируса гриппа, а также во время сезонных вспышек вируса (см. обзор в 1, 2). Здесь мы опишем протокол, используемый для исследования механизма (ы), которые могут быть вовлечены в повышение заболеваемости в результате одновременного вируса гриппа А и С. пневмонии инфекции. Мы разработали младенческая мышиной модели надежно и воспроизводимо демонстрации последствий вируса гриппа, заражение мышей колонизировали с С. пневмонии. Используя этот протокол, мы предоставили первый понимание кинетики пневмококковой передачи между входящими в жилье, новорожденных мышах в естественных изображений 3.

Watch this Scientific Journal Video about Using Bioluminescent Imaging to Investigate Synergism Between Streptococcus pneumoniae and Influenza A Virus in Infant Mice at JoVE.com

Using Bioluminescent Imaging to Investigate Synergism Between Streptococcus pneumoniae and Influenza A Virus in Infant Mice

Одновременное инфицирование вирусом гриппа типа А является одним из факторов, обуславливающих индукции инвазивных пневмококковых инфекций во время бессимптомной<em&gt; Пневмококк</em&gt; Перевозки. Здесь мы описываем смешанный метод инфекции, используя младенческая мышей для расследования синергизм между этими двумя возбудителей инфекций дыхательных путей.

Использование изображений Биолюминесцентный по расследованию синергизм между Пневмококк И вируса гриппа А в младенческой Мыши

During the 1918 influenza virus pandemic, which killed approximately 50 million people worldwide, the majority of fatalities were not the result of ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Using Bioluminescent Imaging to Investigate Synergism Between Streptococcus pneumoniae and Influenza A Virus in Infant Mice

Live Cell Imaging of Bacillus subtilis and Streptococcus pneumoniae using Automated Time-lapse Microscopy

Live Cell Imaging of Bacillus subtilis and Streptococcus pneumoniae using Automated Time-lapse Microscopy

Живая изображений Ячейка Сенная Bacillus И Пневмококк С использованием средства аварийного Покадровый микроскопии

During the last few years scientists became increasingly aware that average data obtained from microbial population based experiments are not ...

Bioluminescent Bacterial Imaging In Vivo

Bioluminescent Bacterial Imaging In Vivo

Bioluminescent Бактериальные изображений<em&gt; В Vivo</em

This video describes the use of whole body bioluminesce imaging (BLI) for the study of bacterial trafficking in live mice, with an emphasis on the use of ...

Characterization of Inflammatory Responses During Intranasal Colonization with Streptococcus pneumoniae

Characterization of Inflammatory Responses During Intranasal Colonization with Streptococcus pneumoniae

Характеристика воспалительных реакций во время интраназальной колонизации стрептококковой пневмонией

Nasopharyngeal colonization by Streptococcus pneumoniae is a prerequisite to invasion to the lungs or bloodstream1. This organism is capable of colonizing ...

Monitoring Changes in Membrane Polarity, Membrane Integrity, and Intracellular Ion Concentrations in Streptococcus pneumoniae Using Fluorescent Dyes

Monitoring Changes in Membrane Polarity, Membrane Integrity, and Intracellular Ion Concentrations in Streptococcus pneumoniae Using Fluorescent Dyes

Мониторинг изменения мембранного полярность, мембраны целостности и внутриклеточных концентрации ионов в<em&gt; Пневмококк</em&gt; Использование флуоресцентных красителей

Membrane depolarization and ion fluxes are events that have been studied extensively in biological systems due to their ability to profoundly impact ...

Capsular Serotyping of Streptococcus pneumoniae Using the Quellung Reaction

Capsular Serotyping of Streptococcus pneumoniae Using the Quellung Reaction

Капсульная серотипирования<em&gt; Пневмококк</em&gt; Использование реакции реакция набухания капсулы

There are over 90 different capsular serotypes of Streptococcus pneumoniae (the pneumococcus). As well as being a tool for understanding pneumococcal ...

Capsular Serotyping of Streptococcus pneumoniae by Latex Agglutination

Capsular Serotyping of Streptococcus pneumoniae by Latex Agglutination

Капсульная серотипирования<em&gt; Пневмококк</em&gt; По латексной агглютинации

Latex agglutination reagents are widely used in microbial diagnosis, identification and serotyping. Streptococcus pneumoniae (the pneumococcus) is a major ...

Influenza Virus Propagation in Embryonated Chicken Eggs

Грипп Вирус Распространение в куриные эмбрионы

Influenza infection is associated with about 36,000 deaths and more than 200,000 hospitalizations every year in the United States. The continuous ...

Neutrophil Isolation and Analysis to Determine their Role in Lymphoma Cell Sensitivity to Therapeutic Agents

Нейтрофильная Выделение и анализ для определения их роли в клеточной лимфомы чувствительность к терапевтических агентов

Neutrophils are the most abundant (40% to 75%) type of white blood cells and among the first inflammatory cells to migrate towards the site of ...

Influenza A Virus Studies in a Mouse Model of Infection

Исследования вирусов гриппа A в мышиной модели инфекции

Influenza viruses cause over 500,000 deaths worldwide1 and are associated with an annual cost of 12 - 14 billion USD in the United States alone ...

Measuring Influenza Neutralizing Antibody Responses to A(H3N2) Viruses in Human Sera by Microneutralization Assays Using MDCK-SIAT1 Cells

Measuring Influenza Neutralizing Antibody Responses to AH3N2 Viruses in Human Sera by Microneutralization Assays Using MDCK-SIAT1 Cells

Измерения гриппа, нейтрализуя антитело ответы на A(H3N2) вирусов в человеческой сыворотки, Microneutralization Assays клетки с помощью MDCK-SIAT1

Neutralizing antibodies against hemagglutinin (HA) of influenza viruses are considered the main immune mechanism that correlates with protection for ...