Name: an isolated retinal preparation to record light response from genetically labeled retinal ganglion cells
Uploaded: 2011-01-26T23:00:00
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इस काम के हिस्से में R01EY012949 एनआईएच, R21EY018885, EY0707133 T32 से अनुदान द्वारा समर्थित किया गया था. हम अपने तकनीकी सहायता के लिए डार्विन रुको धन्यवाद.

पशु का प्रयोग करें वक्तव्य: पशु के लिए प्रयोगशाला पशु की देखभाल और उपयोग के लिए गाइड में वर्णित दिशा निर्देशों के साथ अनुसार में परवाह थे, मिनेसोटा संस्थागत पशु की देखभाल और उपयोग समिति के वि?...

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	<li>Wassle, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Parallel+processing+in+the+mammalian+retina.">Parallel processing in the mammalian retina.</a> Nat Rev Neurosci. 5, 747-757 (2004).</li><li>Schmidt, T. M., Taniguchi, K., Kofuji, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intrinsic+and+extrinsic+light+responses+in+melanopsin-expressing+ganglion+cells+during+mouse+development.">Intrinsic and extrinsic light responses in melanopsin-expressing ganglion cells during mouse development.</a> J Neurophysiol. 100, 371-384 (2008).</li><li>Huberman, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+identification+of+an+On-Off+direction-selective+retinal+ganglion+cell+subtype+reveals+a+layer-specific+subcortical+map+of+posterior+motion.">Genetic identification of an On-Off direction-selective retinal ganglion cell subtype reveals a layer-specific subcortical map of posterior motion.</a> Neuron. 62, 327-334 (2009).</li><li>Siegert, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+address+book+for+retinal+cell+types.">Genetic address book for retinal cell types.</a> Nat Neurosci. 12, 1197-1204 (2009).</li><li>Schmidt, T. M., Kofuji, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+and+morphological+differences+among+intrinsically+photosensitive+retinal+ganglion+cells.">Functional and morphological differences among intrinsically photosensitive retinal ganglion cells.</a> J Neurosci. 29, 476-482 (2009).</li><li>Newman, E. A., Bartosch, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+eyecup+preparation+for+the+rat+and+mouse.">An eyecup preparation for the rat and mouse.</a> J Neurosci Methods. 93, 169-175 (1999).</li><li>Haverkamp, S., Inta, D., Monyer, H., Wassle, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expression+analysis+of+green+fluorescent+protein+in+retinal+neurons+of+four+transgenic+mouse+lines.">Expression analysis of green fluorescent protein in retinal neurons of four transgenic mouse lines.</a> Neuroscience. 160, 126-139 (2009).</li><li>Zhang, D. Q., Zhou, T. R., McMahon, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+heterogeneity+of+retinal+dopaminergic+neurons+underlying+their+multiple+roles+in+vision.">Functional heterogeneity of retinal dopaminergic neurons underlying their multiple roles in vision.</a> J Neurosci. 27, 692-699 (2007).</li><li>Hu, E. H., Dacheux, R. F., Bloomfield, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+flattened+retina-eyecup+preparation+suitable+for+electrophysiological+studies+of+neurons+visualized+with+trans-scleral+infrared+illumination.">A flattened retina-eyecup preparation suitable for electrophysiological studies of neurons visualized with trans-scleral infrared illumination.</a> J Neurosci Methods. 103, 209-216 (2000).</li><li>Wu, S. M., Gao, F., Pang, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synaptic+circuitry+mediating+light-evoked+signals+in+dark-adapted+mouse+retina.">Synaptic circuitry mediating light-evoked signals in dark-adapted mouse retina.</a> Vision Res. 44, 3277-3288 (2004).</li></ol>

इस तकनीक को एक अलग रेटिना से किसी भी रेटिना नाड़ीग्रन्थि सेल रिकॉर्डिंग के लिए लागू है. हालांकि ऊपर प्रयोग किया जाता माउस लाइन में आंतरिक रूप से सहज, melanopsin-व्यक्त RGCs EGFP 2, 5 के साथ लेबल रहे हैं, इस प्रोटोक?...

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		<div>
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		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Ames&#x2019; Medium</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>A1420</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Collagenase</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Whorthington Biochemical</td>
<td>LS005273</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Hyaluronidase</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Whorthington Biochemical</td>
<td>LS002592</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Sodium Bicarbonate</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>S5761</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>AlexaFluor 594 Hydrazyde</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>A10442</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Neurobiotin</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Vector Laboratories</td>
<td>SP1120</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Electrodes</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sutter Instruments</td>
<td>BF120-69-10</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Forceps</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fine Science Tools</td>
<td>11252-30</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Ophthalmologic Scissor</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fine Science Tools</td>
<td>15000-00</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Streptavidin 594</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>S32356</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Vectashield</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Vector Laboratories</td>
<td>H-1000</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Goat Serum</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Jackson ImmunoResearch</td>
<td>005-000-001</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Triton X-100</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>T8787</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Paraformaldehyde</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Electron Microscopy Sciences</td>
<td>19210</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

an isolated retinal preparation to record light response from genetically labeled retinal ganglion cells

हड्डीवाला दृष्टि में पहला कदम जगह ले जब प्रकाश 1 रेटिना के रॉड और कोन photoreceptors को उत्तेजित करता है. यह जानकारी तो क्या और पर बंद रास्ते के रूप में जाना जाता है में अलग है. photoreceptors संकेत द्विध्रुवी कोशिकाओं को प्रकाश जानकारी (BCS), जो (BCS) प्रकाश की तीव्रता में बढ़ जाती है या कम हो जाती है (BCS के बाहर) के जवाब में बिगाड़ना. प्रकाश सूचना के इस अलगाव रेटिना नाड़ीग्रन्थि कोशिकाओं (RGCs) है, जो या तो भीतर plexiform (आईपीएल) परत है, जहां वे ऑफ BCS से प्रत्यक्ष उत्तेजक इनपुट प्राप्त ऑफ sublamina में stratifying dendrites के स्तर पर बनाए रखा है, या में stratifying आईपीएल में sublamina, जहां वे BCS में से प्रत्यक्ष उत्तेजक इनपुट प्राप्त है. रोशनी में (और रास्ते के बाहर) में बढ़ जाती है या कम हो जाती है के बारे में जानकारी के इस अलगाव संरक्षित है और समानांतर में मस्तिष्क को संकेत है. RGCs रेटिना के उत्पादन की कोशिकाओं रहे हैं, और इस प्रकार एक महत्वपूर्ण सेल करने के क्रम में अध्ययन करने के लिए समझने के लिए कैसे प्रकाश जानकारी मस्तिष्क में दृश्य नाभिक के लिए संकेत है. हाल के दशकों में माउस आनुवंशिकी के क्षेत्र में अग्रिम फ्लोरोसेंट संवाददाता माउस लाइनों जहां विशिष्ट RGC आबादी एक फ्लोरोसेंट प्रोटीन के साथ लेबल रहे हैं RGC 2 3 4 उपप्रकारों और विशिष्ट electrophysiological रिकॉर्डिंग के लिए लक्ष्यीकरण की पहचान के लिए अनुमति देने की एक किस्म में हुई है. यहाँ, हम एक अक्षुण्ण, अलग रेटिना तैयारी में fluorescently लेबल नाड़ीग्रन्थि कोशिकाओं से प्रकाश प्रतिक्रियाओं रिकॉर्डिंग के लिए एक विधि प्रस्तुत करते हैं. यह पृथक रेटिना तैयारी RGCs जहां वृक्ष के समान कुंज बरकरार है और पूरे RGC वृक्ष के समान कुंज भर में जानकारी संरक्षित कर रहे हैं से रिकॉर्डिंग के लिए अनुमति देता है. इस विधि नाड़ीग्रन्थि सेल subtypes के एक किस्म में लागू होता है और एकल कोशिका शारीरिक तकनीक की एक विस्तृत विविधता के लिए उत्तरदायी है.

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An Isolated Retinal Preparation to Record Light Response from Genetically Labeled Retinal Ganglion Cells

यह लेख कैसे काटना और माउस में अलग रेटिना तैयारी से रिकॉर्ड की एक विवरण प्रदान करता है. विशेष रूप में, हम वर्णन कैसे एक fluorescently लेबल नाड़ीग्रन्थि सेल की आबादी से प्रकाश प्रतिक्रियाओं को रिकॉर्ड करने के लिए और बाद में पहचान और उसके आकारिकी का विश्लेषण.

एक अलग रेटिना के लिए आनुवंशिक लेबल रेटिना नाड़ीग्रन्थि कोशिकाओं से हल्की प्रतिक्रिया रिकॉर्ड तैयार

The first steps in vertebrate vision take place when light stimulates the rod and cone photoreceptors of the retina 1.  This information is then ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Patch Clamp Recordings from Mouse Retinal Neurons in a Dark-adapted Slice Preparation

पैच एक डार्क अनुकूलित स्लाइस तैयारी में माउस रेटिना न्यूरॉन्स से दबाना रिकॉर्डिंग

Our visual experience is initiated when the visual pigment in our retinal photoreceptors absorbs photons of light energy and initiates a cascade of ...

Transfection of Mouse Retinal Ganglion Cells by in vivo Electroporation

Transfection of Mouse Retinal Ganglion Cells by in vivo Electroporation

माउस रेटिनल नाड़ीग्रन्थि कोशिकाओं के द्वारा अभिकर्मक Vivo में Electroporation

The targeting and refinement of RGC projections to the midbrain is a popular and powerful model system for studying how precise patterns of neural ...

An Optic Nerve Crush Injury Murine Model to Study Retinal Ganglion Cell Survival

एक ऑप्टिक तंत्रिका क्रश चोट murine रेटिनल नाड़ीग्रन्थि सेल जीवन रक्षा अध्ययन मॉडल

Injury to the optic nerve can lead to axonal degeneration, followed by a gradual death of retinal ganglion cells (RGCs), which results in irreversible ...

Simultaneous Whole-cell Recordings from Photoreceptors and Second-order Neurons in an Amphibian Retinal Slice Preparation

एक एम्फ़िबियाई रेटिना स्लाइस तैयारी में photoreceptors और दूसरा आदेश न्यूरॉन्स से एक साथ पूरे सेल रिकॉर्डिंग

One of the central tasks in retinal neuroscience  is to understand the circuitry of retinal neurons and how those connections are  responsible for shaping ...

Implementing Dynamic Clamp with Synaptic and Artificial Conductances in Mouse Retinal Ganglion Cells

माउस रेटिनल नाड़ीग्रन्थि कोशिकाओं में Synaptic और कृत्रिम conductances साथ गतिशील क्लैंप को लागू

Ganglion cells are the output neurons of the  retina and their activity reflects the integration of multiple synaptic inputs  arising from specific neural ...

Retrograde Labeling of Retinal Ganglion Cells in Adult Zebrafish with Fluorescent Dyes

फ्लोरोसेंट रंगों के साथ वयस्क zebrafish में रेटिनल नाड़ीग्रन्थि कोशिकाओं के प्रतिगामी लेबलिंग

As retrograde labeling retinal ganglion cells (RGCs) can isolate RGCs somata from dying sites, it has become the gold standard for counting RGCs in RGCs ...

Single-cell RNA-Seq of Defined Subsets of Retinal Ganglion Cells

रीटिनल नाड़ीग्रन्थि कोशिकाओं के परिभाषित सैकट्स के सिंगल-सेल आरएनए-सैक

The discovery of cell type-specific markers can provide insight into cellular function and the origins of cellular heterogeneity. With a recent push for ...

Optical Coherence Tomography: Imaging Mouse Retinal Ganglion Cells In Vivo

Optical Coherence Tomography: Imaging Mouse Retinal Ganglion Cells In Vivo

ऑप्टिकल जुटना टोमोग्राफी: इमेजिंग माउस रेटिना नाड़ीग्रंथि कोशिकाओं में Vivo

Structural changes in the retina are common manifestations of ophthalmic diseases. Optical coherence tomography (OCT) enables their identification in ...

Partial Optic Nerve Transection in Rats: A Model Established with a New Operative Approach to Assess Secondary Degeneration of Retinal Ganglion Cells

आंशिक ऑप्टिक चूहों में तंत्रिका Transection: एक नया ऑपरेटिव दृष्टिकोण के साथ स्थापित एक मॉडल रेटिना नाड़ीग्रंथि कोशिकाओं के माध्यमिक उत्थान का आकलन करने के लिए

Previous studies have shown that the secondary degeneration of retinal ganglion cells (RGCs) occurs commonly in glaucoma. Partial optic nerve transection ...

Preparation of Mouse Retinal Cryo-sections for Immunohistochemistry

इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री के लिए माउस रेटिना लयाओ-अनुभागों की तैयारी

Preparation of high-quality mouse eye sections for immunohistochemistry (IHC) is critical for assessing the retinal structure and function and for ...