Name: isolation and expansion of the adult mouse neural stem cells using the neurosphere assay
Uploaded: 2010-11-20T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Isolation and Expansion of the Adult Mouse Neural Stem Cells Using the Neurosphere Assay at JoVE.com

وأيد هذا العمل من خلال تمويل من مؤسسة Overstreet.

<p class="jove_title"&gt; الجزء 1 : عاديه إعداد قبل الشروع في تشريح :</p&gt;<ol&gt;<liمستعد&gt; متوسطة الحجم المناسب لمجلس الأمن القومي الشامل ، عن طريق المزج NeuroCult NSC بصل متوسطة والمكملات NeuroCult انتشار NSC بنسبة 9:1 ، على التوالي. ويمكن أيضا أن يكون مجلس الأمن القومي المتوسطة المحرز في المختبر ، استنادا للنمو تشكيل مجلس الأمن ال?...

<ol>
	<li>Louis, S. A., Reynolds, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurosphere+and+Neural+Colony-Forming+Cell+Assays.">Neurosphere and Neural Colony-Forming Cell Assays.</a> Protocols for Neural Cell Culture. 10, 1-28 (2010).</li><li>Reynolds, B. A., Weiss, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+of+neurons+and+astrocytes+from+isolated+cells+of+the+adult+mammalian+central+nervous+system.">Generation of neurons and astrocytes from isolated cells of the adult mammalian central nervous system.</a> Science. 255, 1707-1710 (1992).</li><li>Sen, A., Kallos, M. S., Behie, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+tissue+dissociation+protocol+for+scaled-up+production+of+neural+stem+cells+in+suspension+bioreactors.">New tissue dissociation protocol for scaled-up production of neural stem cells in suspension bioreactors.</a> Tissue Eng. 10, 904-913 (2004).</li><li>Morshead, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neural+stem+cells+in+the+adult+mammalian+forebrain:+a+relatively+quiescent+subpopulation+of+subependymal+cells.">Neural stem cells in the adult mammalian forebrain: a relatively quiescent subpopulation of subependymal cells.</a> Neuron. 13, 1071-1082 (1994).</li><li>Golmohammadi, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+analysis+of+the+frequency+and+distribution+of+stem+and+progenitor+cells+in+the+adult+mouse+brain.">Comparative analysis of the frequency and distribution of stem and progenitor cells in the adult mouse brain.</a> Stem Cells. 26, 979-987 (2008).</li><li>Dontu, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+propagation+and+transcriptional+profiling+of+human+mammary+stem/progenitor+cells.">In vitro propagation and transcriptional profiling of human mammary stem/progenitor cells.</a> Genes Dev. 17, 1253-1270 (2003).</li><li>Messina, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+expansion+of+adult+cardiac+stem+cells+from+human+and+murine+heart.">Isolation and expansion of adult cardiac stem cells from human and murine heart.</a> Circ Res. 95, 911-921 (2004).</li><li>Ignatova, T. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+cortical+glial+tumors+contain+neural+stem-like+cells+expressing+astroglial+and+neuronal+markers+in+vitro.">Human cortical glial tumors contain neural stem-like cells expressing astroglial and neuronal markers in vitro.</a> Glia. 39, 193-206 (2002).</li><li>Galli, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+characterization+of+tumorigenic,+stem-like+neural+precursors+from+human+glioblastoma.">Isolation and characterization of tumorigenic, stem-like neural precursors from human glioblastoma.</a> Cancer Res. 64, 7011-7021 (2004).</li><li>Reynolds, B. A., Rietze, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neural+stem+cells+and+neurospheres--re-evaluating+the+relationship.">Neural stem cells and neurospheres--re-evaluating the relationship.</a> Nat Methods. 2, 333-336 (2005).</li><li>Louis, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enumeration+of+Neural+Stem+and+Progenitor+Cells+in+the+Neural+Colony+Forming+Cell+Assay.">Enumeration of Neural Stem and Progenitor Cells in the Neural Colony Forming Cell Assay.</a> Stem Cells. , (2008).</li></ol>

اكتسبت مقايسة neurosphere 2 اهتماما واسعا في الأوساط البحثية ، ليس فقط لعزل ودراسة الجهاز العصبي المركزي من NSCs 4-5 ولكن أيضا لعزل أنواع أخرى من الخلايا الجذعية من الأنسجة المفترضة عديدة ، مثل سرطان الثدي والقلب 6 7 و للتعرف على سرطان الثدي والمخ والخلايا ال?...

* لجعل HEM ، مزيج 110L علبة and160ml MEM من HEPES 1M وتقديمهم إلى حجم 8.75 لتر باستخدام الماء المقطر. تعيين النهائي إلى 7.4 PH وتخزينه في 4 درجات مئوية.

isolation and expansion of the adult mouse neural stem cells using the neurosphere assay

وكان أول وصف العزلة والتوسع في الخلايا الجذعية العصبية المفترضة (NSCs) من دماغ الفئران رينولدز الكبار بحلول عام 1992 وايس توظيف المعرفة كيميائيا منظومة الثقافة المصل الحرة المعروفة باسم مقايسة neurosphere (NSA). في هذا الاختبار ، فإن غالبية أنواع الخلايا المتمايزة تموت في غضون بضعة أيام للثقافة ولكن مجموعة صغيرة من الخلايا السليفة عامل النمو استجابة الخضوع الانتشار النشط في وجود عامل نمو البشرة (EGF) و / عامل النمو الأساسي ليفية (bFGF). هذه الخلايا شكل مستعمرات خلايا غير متمايزة تسمى neurospheres ، والذي بدوره يمكن subcultured توسيع مجموعة من الخلايا الجذعية العصبية. وعلاوة على ذلك ، يمكن أن يكون ذلك حافزا للتمييز الخلايا ، توليد ثلاثة أنواع رئيسية من الخلايا العصبية في الجهاز العصبي المركزي أي ، النجمية ، وoligodendrocytes. هذا الاختبار يوفر أداة لا تقدر بثمن لتوريد متناسقة ، مصدر متجدد السلائف CNS غير متمايزة ، والتي يمكن استخدامها في المختبر في الدراسات ، وكذلك لأغراض علاجية. هذا الفيديو يوضح طريقة لإنشاء وكالة الامن القومي وتوسيع NSCs من المنطقة المحيطة بالبطين الماوس الكبار ، ويقدم رؤى التقنية لضمان تحقيق الثقافات يمكن لأحد أن neurosphere استنساخه. الإجراء يشمل حصاد الدماغ من الماوس الكبار ، والتشريح الدقيقة في المنطقة المحيطة بالبطين ، وإعداد الأنسجة والثقافة في وكالة الامن القومي. هو أول الأنسجة التي تحصد هضمها كيميائيا باستخدام التربسين - EDTA ثم فصلها آليا في مجلس الأمن القومي لتحقيق المتوسطة تعليق خلية واحدة ومطلي أخيرا في وكالة الامن القومي. بعد 7-10 أيام في الثقافة ، مما أدى neurospheres الأولية مستعدون للثقافة فرعية للوصول الى كمية من الخلايا المطلوبة لإجراء التجارب في المستقبل.

Watch this Scientific Journal Video about Isolation and Expansion of the Adult Mouse Neural Stem Cells Using the Neurosphere Assay at JoVE.com

Isolation and Expansion of the Adult Mouse Neural Stem Cells Using the Neurosphere Assay

هذا البروتوكول الفيديو يوضح طريقة الفحص neurosphere لتوليد وتوسيع الخلايا الجذعية العصبية من المنطقة المحيطة بالبطين الماوس الكبار ، ويقدم رؤى التقنية لضمان تحقيق الثقافات يمكن لأحد أن neurosphere استنساخه.

العزل والتوسع في الخلايا الجذعية العصبية الكبار باستخدام الفحص Neurosphere

Isolation and expansion of the putative neural stem cells (NSCs) from the adult murine brain was first described by Reynolds and Weiss in 1992 employing a ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Establishing Embryonic Mouse Neural Stem Cell Culture Using the Neurosphere Assay

تأسيس الخلايا الجذعية الجنينية الماوس العصبية الثقافة باستخدام الفحص Neurosphere

In mammalians, stem cells acts as a source of undifferentiated cells to maintain cell genesis and renewal in different tissues and organs during the life ...

Isolation and Expansion of Human Glioblastoma Multiforme Tumor Cells Using the Neurosphere Assay

العزل والتوسع في الإنسان خلايا الورم ورم أرومي دبقي الأشكال باستخدام الفحص Neurosphere

Stem-like cells have been isolated in tumors such as breast, lung, colon, prostate and brain. A critical issue in all these tumors, especially in ...

The Neuroblast Assay: An Assay for the Generation and Enrichment of Neuronal Progenitor Cells from Differentiating Neural Stem Cell Progeny Using Flow Cytometry

الفحص Neuroblast: والفحص للانشاء وإثراء خلايا متعلق بالخلايا العصبية السلف من التفريق العصبية الجذعية آله الخلية باستخدام التدفق الخلوي

Neural stem cells (NSCs) can be isolated and expanded in large-scale, using the neurosphere assay and differentiated into the three major cell types of ...

Expansion of Embryonic and Adult Neural Stem Cells by In Utero Electroporation or Viral Stereotaxic Injection

Expansion of Embryonic and Adult Neural Stem Cells by In Utero Electroporation or Viral Stereotaxic Injection

توسيع الجنينية والكبار الخلايا الجذعية العصبية من قبل<em&gt; في الرحم</em&gt; الصعق الكهربائي أو حقن التجسيمي الفيروسية

Somatic stem cells can divide to generate additional stem cells (expansion) or more differentiated cell types (differentiation), which is fundamental for ...

Isolation and Culture of Neural Crest Cells from Embryonic Murine Neural Tube

العزلة والثقافة من الخلايا العصبية كريست من الأنبوبة العصبية الجنينية الفئران

The embryonic neural crest (NC) is a multipotent progenitor population that originates at the dorsal aspect of the neural tube, undergoes an epithelial to ...

Growing Neural Stem Cells from Conventional and Nonconventional Regions of the Adult Rodent Brain

تزايد الخلايا الجذعية العصبية من المناطق التقليدية وغير التقليدية من الدماغ الكبار القوارض

Recent work demonstrates that central nervous system (CNS) regeneration and tumorigenesis involves populations of stem cells (SCs) resident within the ...

One Mouse, Two Cultures: Isolation and Culture of Adult Neural Stem Cells from the Two Neurogenic Zones of Individual Mice

ماوس واحدة، واثنين من الثقافات: العزلة وثقافة الكبار الخلايا الجذعية العصبية من المناطق العصبية اثنان من الفئران الفردية

The neurosphere assay and the adherent monolayer culture system are valuable tools to determine the potential (proliferation or differentiation) of adult ...

Cell Sorting of Neural Stem and Progenitor Cells from the Adult Mouse Subventricular Zone and Live-imaging of their Cell Cycle Dynamics

فرز خلية العصبية الجذعية وخلايا السلف من الفأر Subventricular المنطقة الكبار وحية على التصوير من حيوية دورة الخلية الخاصة

Neural stem cells (NSCs) in the subventricular zone of the lateral ventricles (SVZ) sustain olfactory neurogenesis throughout life in the mammalian brain. ...

Isolation and Culture of Adult Neural Stem Cells from the Mouse Subcallosal Zone

العزلة والثقافة من الخلايا الجذعية البالغة العصبية من المنطقة تحت الثفني ماوس

Adult neural stem cells (aNSCs) can be used for the regeneration of damaged brain tissue. NSCs have the potential for differentiation and proliferation ...

A Neurosphere Assay to Evaluate Endogenous Neural Stem Cell Activation in a Mouse Model of Minimal Spinal Cord Injury

الفحص نيوروسفيري لتقييم تنشيط الخلايا الجذعية العصبية الذاتية في نموذج الفأر من إصابات النخاع الشوكي الحد الأدنى

Neural stem cells (NSCs) in the adult mammalian spinal cord are a relatively mitotically quiescent population of periventricular cells that can be studied ...