Name: isolation and expansion of the adult mouse neural stem cells using the neurosphere assay
Uploaded: 2010-11-20T12:30:00
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<p class="jove_title"&gt; भाग 1: विच्छेदन के लिए आगे बढ़ने से पहले मूल की स्थापना:</p&gt;<ol&gt;<li&gt; पूरा एनएससी मध्यम की समुचित मात्रा 09:01 के अनुपात में NeuroCult एनएससी बेसल मध्यम और NeuroCult एनएससी प्रसार पूरक मिश्रण, क्रमशः द्वारा तैयार की है. एनएस...

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	<li>Louis, S. A., Reynolds, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurosphere+and+Neural+Colony-Forming+Cell+Assays.">Neurosphere and Neural Colony-Forming Cell Assays.</a> Protocols for Neural Cell Culture. 10, 1-28 (2010).</li><li>Reynolds, B. A., Weiss, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+of+neurons+and+astrocytes+from+isolated+cells+of+the+adult+mammalian+central+nervous+system.">Generation of neurons and astrocytes from isolated cells of the adult mammalian central nervous system.</a> Science. 255, 1707-1710 (1992).</li><li>Sen, A., Kallos, M. S., Behie, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+tissue+dissociation+protocol+for+scaled-up+production+of+neural+stem+cells+in+suspension+bioreactors.">New tissue dissociation protocol for scaled-up production of neural stem cells in suspension bioreactors.</a> Tissue Eng. 10, 904-913 (2004).</li><li>Morshead, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neural+stem+cells+in+the+adult+mammalian+forebrain:+a+relatively+quiescent+subpopulation+of+subependymal+cells.">Neural stem cells in the adult mammalian forebrain: a relatively quiescent subpopulation of subependymal cells.</a> Neuron. 13, 1071-1082 (1994).</li><li>Golmohammadi, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+analysis+of+the+frequency+and+distribution+of+stem+and+progenitor+cells+in+the+adult+mouse+brain.">Comparative analysis of the frequency and distribution of stem and progenitor cells in the adult mouse brain.</a> Stem Cells. 26, 979-987 (2008).</li><li>Dontu, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+propagation+and+transcriptional+profiling+of+human+mammary+stem/progenitor+cells.">In vitro propagation and transcriptional profiling of human mammary stem/progenitor cells.</a> Genes Dev. 17, 1253-1270 (2003).</li><li>Messina, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+expansion+of+adult+cardiac+stem+cells+from+human+and+murine+heart.">Isolation and expansion of adult cardiac stem cells from human and murine heart.</a> Circ Res. 95, 911-921 (2004).</li><li>Ignatova, T. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+cortical+glial+tumors+contain+neural+stem-like+cells+expressing+astroglial+and+neuronal+markers+in+vitro.">Human cortical glial tumors contain neural stem-like cells expressing astroglial and neuronal markers in vitro.</a> Glia. 39, 193-206 (2002).</li><li>Galli, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+characterization+of+tumorigenic,+stem-like+neural+precursors+from+human+glioblastoma.">Isolation and characterization of tumorigenic, stem-like neural precursors from human glioblastoma.</a> Cancer Res. 64, 7011-7021 (2004).</li><li>Reynolds, B. A., Rietze, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neural+stem+cells+and+neurospheres--re-evaluating+the+relationship.">Neural stem cells and neurospheres--re-evaluating the relationship.</a> Nat Methods. 2, 333-336 (2005).</li><li>Louis, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enumeration+of+Neural+Stem+and+Progenitor+Cells+in+the+Neural+Colony+Forming+Cell+Assay.">Enumeration of Neural Stem and Progenitor Cells in the Neural Colony Forming Cell Assay.</a> Stem Cells. , (2008).</li></ol>

neurosphere 2 परख अलगाव और 4-5 सीएनएस से एनएससी के अध्ययन के लिए न केवल, लेकिन यह भी कई ऊतकों से ख्यात स्टेम 6 स्तन और 7 दिल जैसे, कोशिकाओं के अन्य प्रकार के अलगाव के लिए अनुसंधान समुदाय में व्यापक ध्?...

* हेम बनाने के लिए, 1M HEPES के सदस्य and160ml की 110L पैकेट मिश्रण और 8.75 एल आसुत जल का उपयोग करने के लिए मात्रा लाने. 7.4 अंतिम पीएच सेट और यह 4 पर स्टोर डिग्री सेल्सियस

isolation and expansion of the adult mouse neural stem cells using the neurosphere assay

अलगाव और ख्यात वयस्क murine मस्तिष्क से तंत्रिका स्टेम सेल (एनएससी) के विस्तार के पहले रेनॉल्ड्स और Weiss द्वारा वर्णित किया गया था 1992 में एक रासायनिक परिभाषित सीरम मुक्त संस्कृति neurosphere परख (एनएसए) के रूप में जाना जाता है प्रणाली को रोजगार. इस परख में, विभेदित सेल प्रकार के बहुमत संस्कृति के कुछ दिनों के भीतर मर जाते हैं, लेकिन वृद्धि कारक उत्तरदायी अग्रदूत साबित कोशिकाओं की एक छोटी सी आबादी epidermal वृद्धि कारक (EGF) और / बुनियादी fibroblastic वृद्धि कारक (bFGF) की उपस्थिति में सक्रिय प्रसार से गुजरना. इन कोशिकाओं undifferentiated neurospheres नामक कोशिकाओं, जो बारी में तंत्रिका स्टेम कोशिकाओं के पूल का विस्तार subcultured किया जा सकता है की कालोनियों के रूप में. इसके अलावा, कोशिकाओं के लिए अंतर प्रेरित किया जा सकता है, सीएनएस यानी न्यूरॉन्स, astrocytes, और oligodendrocytes के तीन प्रमुख प्रकार की कोशिकाओं पैदा. इस परख के लिए एक सुसंगत, undifferentiated सीएनएस व्यापारियों, जो इन विट्रो अध्ययन में और भी उपचारात्मक उद्देश्यों के लिए के लिए इस्तेमाल किया जा सकता के अक्षय स्रोत की आपूर्ति के लिए एक अमूल्य उपकरण प्रदान करता है. यह वीडियो एनएसए उत्पन्न करने के लिए और वयस्क माउस periventricular क्षेत्र से एनएससी का विस्तार विधि को दर्शाता है, और तकनीकी अंतर्दृष्टि प्रदान करता है सुनिश्चित करने के लिए के लिए एक प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य neurosphere संस्कृतियों प्राप्त कर सकते हैं. प्रक्रिया वयस्क माउस, periventricular क्षेत्र के सूक्ष्म - विच्छेदन, ऊतक तैयारी में एनएसए और संस्कृति से मस्तिष्क संचयन शामिल हैं. पहले काटा ऊतक रासायनिक एनएससी माध्यम trypsin - EDTA और तो यंत्रवत् अलग उपयोग कर एक एकल कक्ष निलंबन को प्राप्त करने और अंत में एनएसए में चढ़ाया पचा. संस्कृति में 7-10 दिनों के बाद, जिसके परिणामस्वरूप प्राथमिक neurospheres subculture के लिए भविष्य के प्रयोगों के लिए आवश्यक कोशिकाओं की मात्रा तक पहुँचने के लिए तैयार हैं.

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Isolation and Expansion of the Adult Mouse Neural Stem Cells Using the Neurosphere Assay

यह वीडियो प्रोटोकॉल neurosphere परख करने के लिए पैदा करते हैं और वयस्क माउस periventricular क्षेत्र से तंत्रिका स्टेम कोशिकाओं का विस्तार विधि दर्शाता है, और तकनीकी अंतर्दृष्टि प्रदान करता है सुनिश्चित करने के लिए के लिए एक प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य neurosphere संस्कृतियों प्राप्त कर सकते हैं.

अलगाव और वयस्क माउस तंत्रिका स्टेम सेल के विस्तार Neurosphere परख का उपयोग

Isolation and expansion of the putative neural stem cells (NSCs) from the adult murine brain was first described by Reynolds and Weiss in 1992 employing a ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Establishing Embryonic Mouse Neural Stem Cell Culture Using the Neurosphere Assay

भ्रूण माउस तंत्रिका स्टेम सेल संस्कृति की स्थापना Neurosphere परख का उपयोग

In mammalians, stem cells acts as a source of undifferentiated cells to maintain cell genesis and renewal in different tissues and organs during the life ...

Isolation and Expansion of Human Glioblastoma Multiforme Tumor Cells Using the Neurosphere Assay

अलगाव और Neurosphere परख का प्रयोग मानव Glioblastoma मल्टीफार्मी ट्यूमर कोशिकाओं का विस्तार

Stem-like cells have been isolated in tumors such as breast, lung, colon, prostate and brain. A critical issue in all these tumors, especially in ...

The Neuroblast Assay: An Assay for the Generation and Enrichment of Neuronal Progenitor Cells from Differentiating Neural Stem Cell Progeny Using Flow Cytometry

Neuroblast परख: पीढ़ी और neuronal पूर्वपुस्र्ष कोशिकाओं का संवर्धन फर्क तंत्रिका स्टेम सेल संतान से फ्लो का प्रयोग के लिए एक परख

Neural stem cells (NSCs) can be isolated and expanded in large-scale, using the neurosphere assay and differentiated into the three major cell types of ...

Expansion of Embryonic and Adult Neural Stem Cells by In Utero Electroporation or Viral Stereotaxic Injection

Expansion of Embryonic and Adult Neural Stem Cells by In Utero Electroporation or Viral Stereotaxic Injection

भ्रूण और वयस्क तंत्रिका स्टेम कोशिकाओं के द्वारा विस्तार<em&gt; Utero में</em&gt; Electroporation या वायरल Stereotaxic इंजेक्शन

Somatic stem cells can divide to generate additional stem cells (expansion) or more differentiated cell types (differentiation), which is fundamental for ...

Isolation and Culture of Neural Crest Cells from Embryonic Murine Neural Tube

अलगाव और भ्रूण murine तंत्रिका ट्यूब से तंत्रिका शिखा कोशिकाओं की संस्कृति

The embryonic neural crest (NC) is a multipotent progenitor population that originates at the dorsal aspect of the neural tube, undergoes an epithelial to ...

Growing Neural Stem Cells from Conventional and Nonconventional Regions of the Adult Rodent Brain

वयस्क कृंतक मस्तिष्क के पारंपरिक और nonconventional क्षेत्र से तंत्रिका स्टेम कोशिकाओं से बढ़

Recent work demonstrates that central nervous system (CNS) regeneration and tumorigenesis involves populations of stem cells (SCs) resident within the ...

One Mouse, Two Cultures: Isolation and Culture of Adult Neural Stem Cells from the Two Neurogenic Zones of Individual Mice

एक माउस, दो संस्कृतियों: अलगाव और वयस्क तंत्रिका की संस्कृति व्यक्तिगत चूहों के दो तंत्रिकाजन्य क्षेत्रों से स्टेम सेल

The neurosphere assay and the adherent monolayer culture system are valuable tools to determine the potential (proliferation or differentiation) of adult ...

Cell Sorting of Neural Stem and Progenitor Cells from the Adult Mouse Subventricular Zone and Live-imaging of their Cell Cycle Dynamics

सेल वयस्क माउस subventricular क्षेत्र से तंत्रिका स्टेम और पूर्वपुस्र्ष कोशिकाओं की छंटनी और उनके सेल चक्र गतिशीलता का लाइव-इमेजिंग

Neural stem cells (NSCs) in the subventricular zone of the lateral ventricles (SVZ) sustain olfactory neurogenesis throughout life in the mammalian brain. ...

Isolation and Culture of Adult Neural Stem Cells from the Mouse Subcallosal Zone

अलगाव और वयस्क तंत्रिका स्टेम कोशिकाओं की संस्कृति माउस Subcallosal जोन से

Adult neural stem cells (aNSCs) can be used for the regeneration of damaged brain tissue. NSCs have the potential for differentiation and proliferation ...

A Neurosphere Assay to Evaluate Endogenous Neural Stem Cell Activation in a Mouse Model of Minimal Spinal Cord Injury

एक Neurosphere परख का मूल्यांकन करने के लिए अंतर्जात तंत्रिका कोशिका सक्रियकरण कम रीढ़ की हड्डी की चोट के एक माउस मॉडल में स्टेम

Neural stem cells (NSCs) in the adult mammalian spinal cord are a relatively mitotically quiescent population of periventricular cells that can be studied ...