Name: decellularization and recellularization of whole livers
Uploaded: 2011-02-04T17:45:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Decellularization and Recellularization of Whole Livers at JoVE.com

De auteurs willen graag Jack Milwid bedanken voor het ontwerp van de in vitro perfusie kamer. Dit werk werd ondersteund door subsidies van de Amerikaanse NIH, R01DK59766 en R01DK084053 om MIJN, R00DK080942 aan KU, de Amerikaanse NSF cbet-0853569 aan KU en de Shriners Hospitals for Children te BEU (subsidie ​​niet. 8.503). Erkennen wij ook ondersteuning en de Shriners Hospitals for Children.

1. Lever decellularisatie <ol><li> Oogst een rat lever met poortader canulatie het gebruik en de 18-gauge katheter. Laat de lagere en hogere vena cava open. Houd het orgel gehydrateerd in fosfaat gebufferde zoutoplossing (PBS) in een 10-cm petrischaal. </li><li> Stel een perfusie systeem dat bestaat uit 8-liter reservoir, peristaltische pomp en een opvanginrichting. </li><li> Vul het perfusie-systeem met fosfaat gebufferde zoutoplossing en houd het draaien voor 10 minuten. Vul PBS in een 10-cm petrischaal en verminder...

<ol>
	<li>Kulig, K. M., Vacanti, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hepatic+tissue+engineering.">Hepatic tissue engineering.</a> Transpl Immunol. 12, 303-310 (2004).</li><li>Lutolf, M. P., Hubbell, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synthetic+biomaterials+as+instructive+extracellular+microenvironments+for+morphogenesis+in+tissue+engineering.">Synthetic biomaterials as instructive extracellular microenvironments for morphogenesis in tissue engineering.</a> Nature biotechnology. 23, 47-55 (2005).</li><li>Dahl, S. L., Koh, J., Prabhakar, V., Niklason, L. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Decellularized+native+and+engineered+arterial+scaffolds+for+transplantation.">Decellularized native and engineered arterial scaffolds for transplantation.</a> Cell Transplant. 12, 659-666 (2003).</li><li>Schechner, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Engraftment+of+a+vascularized+human+skin+equivalent.">Engraftment of a vascularized human skin equivalent.</a> FASEB J. 17, 2250-2256 (2003).</li><li>Gilbert, T. W., Sellaro, T. L., Badylak, S. F., F, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Decellularization+of+tissues+and+organs.">Decellularization of tissues and organs.</a> Biomaterials. 27, 3675-3683 (2006).</li><li>Uygun, B. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Organ+reengineering+through+development+of+a+transplantable+recellularized+liver+graft+using+decellularized+liver+matrix.">Organ reengineering through development of a transplantable recellularized liver graft using decellularized liver matrix.</a> Nat Med. , (2010).</li></ol>

De perfusie decellularisatie hier beschreven methode levert een hele lever steiger die dezelfde grove structuur en de vasculaire microarchitectuur van de inheemse lever heeft. De steiger heeft een extracellulaire matrix samenstelling vergelijkbaar is met de inheemse lever. De recellularization methode bereikt herbevolking van de steiger met cellen bij hoge rendement en de cellen blijven haalbare en functionele tijdens de in vitro geteste cultuur periode. Met de toevoeging van nonparenchymal cellen in de lever r...

A correction was made to <a href="http://www.jove.com/Details.php?ID=2394">Decellularization and Recellularization of Whole Livers</a>. There was an error with an author's name. The author's last name had a typo and was corrected to:
Nima Saeidi
instead of:
Nima Saedi.

Erratum: Decellularization and Recellularization of Whole Livers

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Sodium dodecyl sulfate</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma-Aldrich</td>
<td>L4390</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Triton X-100</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma-Aldrich</td>
<td>T8787</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Masterflex L/S Digital Drive</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Cole-Parmer</td>
<td>EW-07523-80</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Masterflex L/S Standard pump head</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Cole-Parmer</td>
<td>EW- 07013-81</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Bubble trap</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Radnoti</td>
<td>130149</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

decellularization and recellularization of whole livers

De lever is een complex orgaan dat constant perfusie vereist voor de levering van voedingsstoffen en zuurstof en de verwijdering van afval om een overleven. Pogingen om opnieuw of de lever microstructuur na te bootsen met een terrein-up benadering met behulp van tissue engineering en microfabricage technieken zijn niet succesvol geweest tot nu toe als gevolg van dit ontwerp uitdaging. Daarnaast zijn synthetische biomaterialen gebruikt om de steigers voor de lever tissue engineering-applicaties te maken is beperkt in het induceren van weefselregeneratie en reparatie voor een groot deel te wijten aan het ontbreken van een specifieke cel binding motieven die zou leiden tot de juiste celfuncties 2. Gedecellulariseerde inheemse weefsels zoals bloedvaten en de huid 3 4 aan de andere kant hebben vele toepassingen gevonden in tissue engineering, en hebben een praktische oplossing voor enkele van de uitdagingen. Het voordeel van gedecellulariseerde inheemse matrix, is dat het behouden, tot op zekere hoogte, de originele samenstelling, en de microstructuur, dus versterking van celhechting en reorganisatie 5. In dit werk beschrijven we de methoden om perfusie-decellularisatie van de lever, zodanig dat een intact lever bioscaffold dat de structuur van de grote bloedvaten behoudt wordt verkregen uit te voeren. Verder beschrijven we methoden om deze bioscaffolds recellularize met volwassen primaire hepatocyten, het creëren van een lever transplantatie die functioneel is in vitro, en heeft het schip toegang nodig is voor transplantatie in vivo.

Watch this Scientific Journal Video about Decellularization and Recellularization of Whole Livers at JoVE.com

Decellularization and Recellularization of Whole Livers

Perfusie decellularisatie is een nieuwe techniek om hele lever scaffolds dat het orgel van de extracellulaire matrix samenstelling en microarchitectuur behoudt produceren. Hierin wordt de werkwijze voor het bereiden gehele orgel steigers met behulp van perfusie decellularisatie en de daaropvolgende herstel van de populatie met hepatocyten beschreven. Functionele en transplanteerbare lever enten kan worden gegenereerd met behulp van deze techniek.

Decellularisatie en Recellularization van Whole Levers

The liver is a complex organ which requires constant perfusion for delivery of nutrients and oxygen and removal of waste in order to survive1. Efforts to ...

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Procedure for Decellularization of Porcine Heart by Retrograde Coronary Perfusion

Procedure voor decellularisatie van Varkens Heart van Retrograde coronaire perfusie

Perfusion-based  whole organ decellularization has recently gained interest in the field of  tissue engineering as a means to create site-specific ...

A Decellularization Methodology for the Production of a Natural Acellular Intestinal Matrix

Een Decellularisatie Methode voor de productie van een natuurlijke Acellular Intestinale Matrix

Successful tissue engineering involves the  combination of scaffolds with appropriate cells in vitro or in vivo.  Scaffolds may be synthetic, ...

Nonhuman Primate Lung Decellularization and Recellularization Using a Specialized Large-organ Bioreactor

There are an insufficient number of lungs available to meet current and future organ transplantation needs. Bioartificial tissue regeneration is an ...

Microfluidic Platform for Measuring Neutrophil Chemotaxis from Unprocessed Whole Blood

Microfluidic Platform voor het meten neutrofielchemotaxis van onverwerkte volbloed

Neutrophils play an essential role in protection against infections and their numbers in the blood are frequently measured in the clinic. Higher ...

Procedure for Decellularization of Rat Livers in an Oscillating-pressure Perfusion Device

Procedure voor Decellularisatie van Rat Levers in een oscillerende druk perfusie Device

Decellularization and recellularization of parenchymal organs may enable the generation of functional organs in vitro, and several protocols for rodent ...

Real-time Monitoring of High Intensity Focused Ultrasound (HIFU) Ablation of In Vitro Canine Livers Using Harmonic Motion Imaging for Focused Ultrasound (HMIFU)

Real-time Monitoring of High Intensity Focused Ultrasound HIFU Ablation of In Vitro Canine Livers Using Harmonic Motion Imaging for Focused Ultrasound HMIFU

Real-time monitoring van High Intensity Focused Ultrasound (HIFU) Ablation van<em&gt; In Vitro</em&gt; Canine Levers behulp Harmonic Motion Imaging voor Focused Ultrasound (HMIFU)

Harmonic Motion Imaging for Focused Ultrasound (HMIFU) is a technique that can perform and monitor high-intensity focused ultrasound (HIFU) ablation. An ...

Fully Automated Centrifugal Microfluidic Device for Ultrasensitive Protein Detection from Whole Blood

Volautomatische centrifugale microfluïdische apparaat voor Ultragevoelige Protein Detection uit volbloed

Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) is a promising method to detect small amount of proteins in biological samples. The devices providing a platform ...

Comparable Decellularization of Fetal and Adult Cardiac Tissue Explants as 3D-like Platforms for In Vitro Studies

Vergelijkbare Decellularization van foetale en volwassen cardiale weefsel explantaten als 3D-achtige platformen voor In Vitro Studies

Current knowledge of extracellular matrix (ECM)-cell communication translates to large two-dimensional (2D) in vitro culture studies where ECM components ...

Two Methods for Decellularization of Plant Tissues for Tissue Engineering Applications

Twee methoden voor Decellularization van plantaardige weefsels voor Tissue Engineering toepassingen

The autologous, synthetic, and animal-derived grafts currently used as scaffolds for tissue replacement have limitations due to low availability, poor ...

Decellularization and Recellularization Methodology for Human Saphenous Veins

Decellularization en Recellularization methodologie voor menselijke Saphenous aderen

Vascular conduits used during most vascular surgeries are allogeneic or synthetic grafts that often lead to complications caused by immunosuppression and ...