Name: respirometric oxidative phosphorylation assessment in saponin-permeabilized cardiac fibers
Uploaded: 2011-02-28T18:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Respirometric Oxidative Phosphorylation Assessment in Saponin-permeabilized Cardiac Fibers at JoVE.com

وأيد هذه الدراسة من قبل المعاهد الكندية لأبحاث الصحة وكندا الجينوم. JS يحمل جوائز دعم راتب من مؤسسة التراث ألبرتا للأبحاث الطبية ، والقلب والسكتة الدماغية مؤسسة كندا وجمعية السكري الكندية. والمختبر أن نعترف المساعدة التقنية من آلات Oroboros خلال الاستحواذ على تقنية الألياف سابونين - permeabilized.

1. تحضير كاشف <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مستعدة الحل الاسترخاء والمحافظة (RP الحل) كما هو موضح سابقا مع تعديلات طفيفة 1. باختصار ، الحل RP يتكون من EGTA 2.77mM 2 CaK ، 7.23mM K EGTA 2 ، إيميدازول 20mM ، dithiothreitol 0.5mM ، توراين 20mM ، 50mM K - MES ، 6.56 MgCl 2 ?...

<ol>
	<li>Saks, V. A., Veksler, V. I., Kuznetsov, A. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Permeabilized+cell+and+skinned+fiber+techniques+in+studies+of+mitochondrial+function+in+vivo.">Permeabilized cell and skinned fiber techniques in studies of mitochondrial function in vivo.</a> Mol Cell Biochem. 184, 81-100 (1998).</li><li>Gnaiger, E., Kuznetsov, A. V., Schneeberger, S., Heldmaier, G., Klingenspor, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mitochondria+in+the+cold.">Mitochondria in the cold.</a> Life in the Cold. , 431-442 (2000).</li><li>Rasmussen, H. N., Rasmussen, U. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oxygen+solubilities+of+media+used+in+electrochemical+respiration+measurements.">Oxygen solubilities of media used in electrochemical respiration measurements.</a> Anal Biochem. 319, 105-113 (2003).</li><li>Visscher, G. D. e., Rooker, S., Jorens, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pentobarbital+fails+to+reduce+cerebral+oxygen+consumption+early+after+non-hemorrhagic+closed+head+injury+in+rats.">Pentobarbital fails to reduce cerebral oxygen consumption early after non-hemorrhagic closed head injury in rats.</a> J Neurotrauma. 22, 793-806 (2005).</li><li>Kuznetsov, A. V., Veksler, V., Gellerich, F. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+mitochondrial+function+in+situ+in+permeabilized+muscle+fibers,+tissues+and+cells.">Analysis of mitochondrial function in situ in permeabilized muscle fibers, tissues and cells.</a> Nat Protoc. 3, 965-976 (2008).</li><li>Gnaiger, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oxygen+conformance+of+cellular+respiration.+A+perspective+of+mitochondrial+physiology.">Oxygen conformance of cellular respiration. A perspective of mitochondrial physiology.</a> Adv Exp Med Biol. 543, 39-55 (2003).</li><li>Gnaiger, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Capacity+of+oxidative+phosphorylation+in+human+skeletal+muscle:+new+perspectives+of+mitochondrial+physiology.">Capacity of oxidative phosphorylation in human skeletal muscle: new perspectives of mitochondrial physiology.</a> Int J Biochem Cell Biol. 41, 1837-1845 .</li><li>Sena, S., Hu, P., Zhang, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impaired+insulin+signaling+accelerates+cardiac+mitochondrial+dysfunction+after+myocardial+infarction.">Impaired insulin signaling accelerates cardiac mitochondrial dysfunction after myocardial infarction.</a> J Mol Cell Cardiol. 46, 910-918 (2009).</li><li>Boudina, S., Sena, S., O'Neill, B. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reduced+mitochondrial+oxidative+capacity+and+increased+mitochondrial+uncoupling+impair+myocardial+energetics+in+obesity.">Reduced mitochondrial oxidative capacity and increased mitochondrial uncoupling impair myocardial energetics in obesity.</a> Circulation. 112, 2686-2695 (2005).</li><li>Lenaz, G., Genova, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Structure+and+organization+of+mitochondrial+respiratory+complexes:+a+new+understanding+of+an+old+subject.">Structure and organization of mitochondrial respiratory complexes: a new understanding of an old subject.</a> Antioxid Redox Signal. 12, 961-1008 .</li><li>Lemieux, H., Hoppel, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mitochondria+in+the+human+heart.">Mitochondria in the human heart.</a> J Bioenerg Biomembr. 41, 99-106 (2009).</li><li>O, . <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Retarded+diffusion+of+ADP+in+cardiomyocytes:+possible+role+of+mitochondrial+outer+membrane+and+creatine+kinase+in+cellular+regulation+of+oxidative+phosphorylation.">Retarded diffusion of ADP in cardiomyocytes: possible role of mitochondrial outer membrane and creatine kinase in cellular regulation of oxidative phosphorylation.</a> Biochim Biophys Acta. 1144, 134-148 (1993).</li><li>Endo, M., Kitazawa, T., Morad, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=E-C+coupling+studies+in+skinned+cardiac+fibers.">E-C coupling studies in skinned cardiac fibers.</a> Biophysical Aspects of Cardiac Muscle. , 307-327 (1978).</li><li>Veksler, V. I., Kuznetsov, A. V., Sharov, V. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mitochondrial+respiratory+parameters+in+cardiac+tissue:+a+novel+method+of+assessment+by+using+saponin-skinned+fibers.">Mitochondrial respiratory parameters in cardiac tissue: a novel method of assessment by using saponin-skinned fibers.</a> Biochim Biophys Acta. 892, 191-196 (1987).</li><li>Bangham, A. D., Horne, R. W., Glauert, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Action+of+saponin+on+biological+cell+membranes.">Action of saponin on biological cell membranes.</a> Nature. , 196-952 (1962).</li><li>Daum, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lipids+of+mitochondria.">Lipids of mitochondria.</a> Biochim Biophys Acta. 822, 1-42 (1985).</li><li>Milner, D. J., Mavroidis, M., Weisleder, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Desmin+cytoskeleton+linked+to+muscle+mitochondrial+distribution+and+respiratory+function.">Desmin cytoskeleton linked to muscle mitochondrial distribution and respiratory function.</a> J Cell Biol. 150, 1283-1298 (2000).</li><li>Skladal, D., Sperl, W., Schranzhofer, R., Skladal, E., Gellerich, F., Wyss, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preservation+of+mitochondrial+functions+in+human+skeletal+muscle+during+storage+in+high+energy+preservation+solution+(HEPS).">Preservation of mitochondrial functions in human skeletal muscle during storage in high energy preservation solution (HEPS).</a> What is Controlling Life?. , 268-271 (1994).</li><li>Kuznetsov, A. V., Wiedemann, F. R., Winkler, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+saponin-permeabilized+muscle+fibers+for+the+diagnosis+of+mitochondrial+diseases.">Use of saponin-permeabilized muscle fibers for the diagnosis of mitochondrial diseases.</a> Biofactors. 7, 221-223 (1998).</li><li>Gnaiger, E., Dykens, J., Will, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Polarographic+oxygen+sensors,+the+oxygraph+and+high-resolution+respirometry+to+assess+mitochondrial+function.">Polarographic oxygen sensors, the oxygraph and high-resolution respirometry to assess mitochondrial function.</a> Drug-Induced Mitochondrial Dysfunction. , 327-352 (2008).</li></ol>

وسابونين - permeabilized تقنية الألياف القلبية يقدم حلا وسطا بين فريد في المختبر والمجراة في تقييم الميتوكوندريا من استهلاك الأوكسجين OXPHOS. تشمل زيادة مزايا هذه التقنية أهمية فسيولوجية مقارنة الميتوكوندريا المعزولة والعمارة الخليوي هي الحفاظ عليها. في حين أن غشاء الب...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>100% Ethanol</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fisher Scientific</td>
<td>HC600</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>70% Ethanol</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fisher Scientific</td>
<td>HC-1000</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Adenosine 5&#x2032;-diphosphate monopotassium salt dihydrate (ADP)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>A5285</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Albumin from bovine serum essentially fatty acid&#x2013;free</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>A-6003</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Antimycin A</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>A8674</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Ascobic acid</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>A4403</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Adenosine 5&#x2032;-triphosphate disodium salt hydrate (ATP)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>A2383</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Atractyloside</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>A6882</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Calcium carbonate</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>C4830</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Carbonyl cyanide p-(trifluoromethoxy) phenylhydrazone (FCCP)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>C2920</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Cytochrome c</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>C7752</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Digitonin</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>D141</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Dithiothreitol</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>D9779</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Ethylene glycol-bis-(2-aminoethylether)-N,N,N&#x2032;,N&#x2032;-tetraacetic acid (EGTA)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>E4378</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Glutamic acid</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>27647</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>HEPES</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>H4034</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Imidazole</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>I5513</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Ketamine</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Pfizer</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Ketaset</td>
</tr>
<tr>
<td>Lactobionic acid</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>153516</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Magnesium chloride (MgCl2)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>M9272</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Magnesium chloride hexahydrate (MgCl2&#x2219;6H2O)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>M9272</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Malic acid</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>M1000</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>MES</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>M3671</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>N,N,N&#x2019;,N&#x2019;-Tetramethyl- pphenylenediamine Dihydrochloride (TMPD)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>T3134</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Oligomycin</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>O4876</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Phosphocreatine</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>P7936</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Potassium Chloride</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>P9541</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Potassium Hydroxide</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>P5958</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Potassium cyanide</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fluka</td>
<td>60178</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Potassium phosphate monobasic</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>P5655</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Rotenone</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>R8875</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Saponin</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>47036</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Sodium Pentobarbital</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Ceva Sante Animale</td>
<td>1715 138</td>
<td>Conc. 54.7 mg/ml</td>
</tr>
<tr>
<td>Sodium pyruvate</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>P2256</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Succinic acid</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>S3674</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Sucrose</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>S7903</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Taurine</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>T8691</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Xylazine</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Bayer</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Rompun</td>
</tr>
<tr>
<td>ddH2O</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Ice</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Oroboros Oxygraph-2k</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Oroboros Instruments</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Kimwipes</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>VWR</td>
<td>21905-026</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>15ml polypropylene centrifuge tubes</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>VWR</td>
<td>89004-368</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>50ml polypropylene centrifuge tubes</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>VWR</td>
<td>89004-364</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Straight Jewelers Forceps</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>George Tiemann &amp; Co.</td>
<td>160-50B</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Curved Jewelers Forceps</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>George Tiemann &amp; Co.</td>
<td>160-57B</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Straight Surgery Scissors</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>George Tiemann &amp; Co.</td>
<td>105-402</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Sterile Surgical Blade</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>VWR</td>
<td>BD371610</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>0.45-&mu;m Syringe filters</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>VWR</td>
<td>CA28145-485</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>pH meter</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>VWR</td>
<td>CA11388-308</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Glass Petri dishes</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>VWR</td>
<td>89000-300</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>12-well Polystyrene Tissue Culture Plates</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>VWR</td>
<td>82050-926</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Plate Stirrer</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>VWR</td>
<td>97042-594</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Fisherbrand Microbars</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fisher Scientific</td>
<td>14-511-67</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Weigh Scale</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>VWR</td>
<td>CA11278-162</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>10&mu;l Hamilton Micro Syringe</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fisher Scientific</td>
<td>14-815-1</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>25&#x03BC;l Hamilton Micro Syringe</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fisher Scientific</td>
<td>14-824-7</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>50&mu;l Hamilton Micro Syringe</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fisher Scientific</td>
<td>14-824-5</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Nalgene Squeeze Bottles</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Wilkem Scientific</td>
<td>LNA2407-1000</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Polystyrene Weighing Dishes</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>VWR</td>
<td>89106-750</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Dissecting Microscope</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Olympus</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

respirometric oxidative phosphorylation assessment in saponin-permeabilized cardiac fibers

التحقيق في وظيفة الميتوكوندريا يمثل معيارا هاما للفسيولوجيا القلب كما تشارك في استقلاب الميتوكوندريا والطاقة ، والاكسدة ، موت الخلايا المبرمج ، والشيخوخة ، encephalomyopathies الميتوكوندريا وسمية المخدرات. ونظرا لهذا ، والتقنيات لقياس وظيفة القلب الميتوكوندريا هي في الطلب. أسلوب واحد أن يعمل هذا النهج التكاملي لقياس وظيفة الميتوكوندريا هي respirometric الفسفرة المؤكسدة (OXPHOS) التحليل. يتمحور مبدأ تقييم OXPHOS respirometric حول قياس تركيز الأوكسجين الاستفادة من وجود القطب كلارك. كما يستهلك حزمة الألياف permeabilized تركيز الأكسجين الأكسجين ، وانخفاض في غرفة مغلقة. المعايرة باستخدام بروتوكولات مختارة الركيزة - مانع uncoupler ، يتم توفير الإلكترونات إلى مواقع محددة من سلسلة نقل الإلكترون ، مما يسمح للتقييم وظيفة الميتوكوندريا. وتستخدم تقنيات لتحليل التحضيرية التي تسبق respirometric وظيفة الميتوكوندريا والميكانيكية والكيميائية لpermeabilize في غمد الليف العضلي من ألياف العضلات. permeabilization الكيميائية تستخدم لثقب انتقائي سابونين غشاء الخلية مع الحفاظ على الهيكل الخلوي. هذه الورقة توضح بدقة الخطوات المتبعة في إعداد سابونين البشرة ألياف القلب لقياس استهلاك الأوكسجين لتقييم OXPHOS الميتوكوندريا. بالإضافة إلى ذلك ، حل المشاكل ، وكذلك تقديم المشورة ركائز محددة ، ويتم توفير مثبطات uncouplers التي يمكن استخدامها لتحديد وظيفة الميتوكوندريا في مواقع محددة من سلسلة نقل الإلكترون. الأهم من ذلك ، قد يكون وصف بروتوكول تطبيقها بسهولة على أنسجة القلب والهيكل العظمي من مختلف النماذج الحيوانية وعينات الإنسان.

Watch this Scientific Journal Video about Respirometric Oxidative Phosphorylation Assessment in Saponin-permeabilized Cardiac Fibers at JoVE.com

Respirometric Oxidative Phosphorylation Assessment in Saponin-permeabilized Cardiac Fibers

سابونين - permeabilized إعداد الألياف بالتزامن مع تحليل respirometric الفسفرة المؤكسدة يوفر تقييم تكاملية وظيفة الميتوكوندريا. يمكن تنفس الميتوكوندريا في الدول الفيزيولوجية المرضية وتعكس التأثيرات التنظيمية المختلفة بما في ذلك التفاعلات الميتوكوندريا ، مورفولوجيا والكيمياء الحيوية.

Respirometric تقييم الفسفرة المؤكسدة في سابونين - permeabilized ألياف القلب

Investigation of mitochondrial function represents an important parameter of cardiac physiology as mitochondria are involved in energy metabolism, ...

Research

JoVE Journal

Biology

Patch Clamp and Perfusion Techniques for Studying Ion Channels Expressed in Xenopus oocytes

Patch Clamp and Perfusion Techniques for Studying Ion Channels Expressed in Xenopus oocytes

أعربت المشبك التصحيح وتقنيات الإرواء لدراسة في قنوات ايون القيطم البويضات

The protocol presented here is designed to study the activation of the large conductance, voltage- and Ca2+-activated K+ (BK) channels. The protocol may ...

Bioengineering Human Microvascular Networks in Immunodeficient Mice

الهندسة الحيوية شبكات الاوعية الدموية الدقيقة الإنسان في الفئران العوز المناعي

The future of tissue engineering and cell-based therapies for tissue regeneration will likely rely on our ability to generate functional vascular networks ...

Intravital Microscopy of the Microcirculation in the Mouse Cremaster Muscle for the Analysis of Peripheral Stem Cell Migration

حيوي داخلي المجهري للدوران الأوعية الدقيقة في العضلات المشمرة ماوس لتحليل الهجرة الجذعية الطرفية المحمولة

In the era of intravascular cell application protocols in the context of regenerative cell therapy, the underlying mechanisms of stem cell migration to ...

Assessment of Calcium Sparks in Intact Skeletal Muscle Fibers

تقييم الكالسيوم سباركس السليمة في ألياف العضلات الهيكلية

Maintaining homeostatic Ca2+ signaling is a fundamental physiological process in living cells. Ca2+ sparks are the elementary units of Ca2+ signaling in ...

Analysis of Oxidative Stress in Zebrafish Embryos

تحليل الاكسدة في الزرد الأجنة

High levels of reactive oxygen species (ROS) may cause a change of cellular redox state towards oxidative stress condition. This situation causes ...

siRNA Screening to Identify Ubiquitin and Ubiquitin-like System Regulators of Biological Pathways in Cultured Mammalian Cells

سيرنا فحص لتحديد اليوبيكويتين واليوبيكويتين مثل المنظمين نظام مقررات تمهيدية البيولوجية في خلايا الثدييات مثقف

Post-translational modification of proteins with ubiquitin and ubiquitin-like molecules (UBLs) is emerging as a dynamic cellular signaling network that ...

In Vitro Synthesis of Modified mRNA for Induction of Protein Expression in Human Cells

In Vitro Synthesis of Modified mRNA for Induction of Protein Expression in Human Cells

في المختبر توليف التعديل مرنا للتحريض التعبير البروتين في الخلايا البشرية

The exogenous delivery of coding synthetic messenger RNA (mRNA) for induction of protein synthesis in desired cells has enormous potential in the fields ...

Method for the Assessment of Effects of a Range of Wavelengths and Intensities of Red/near-infrared Light Therapy on Oxidative Stress In Vitro

Method for the Assessment of Effects of a Range of Wavelengths and Intensities of Red/near-infrared Light Therapy on Oxidative Stress In Vitro

طريقة لتقييم الآثار المترتبة على مجموعة من موجات وشدة الأحمر / الأشعة تحت الحمراء القريبة العلاج بالضوء على الإجهاد التأكسدي<em&gt; في المختبر</em

Red/near-infrared light therapy (R/NIR-LT), delivered by laser or light emitting diode (LED), improves functional and morphological outcomes in a range of ...

Measuring Oxidative Stress Resistance of Caenorhabditis elegans in 96-well Microtiter Plates

Measuring Oxidative Stress Resistance of Caenorhabditis elegans in 96-well Microtiter Plates

قياس مقاومة الاكسدة من<em&gt; انواع معينة ايليجانس</em&gt; في 96-جيدا لوحات عيار مكروي

Oxidative stress, which is the result of an imbalance between production and detoxification of reactive oxygen species, is a major contributor to chronic ...

Assessment of Myofilament Ca2+ Sensitivity Underlying Cardiac Excitation-contraction Coupling

Assessment of Myofilament Ca2+ Sensitivity Underlying Cardiac Excitation-contraction Coupling

تقييم خيط عضلي كاليفورنيا<sup&gt; 2+</sup&gt; الحساسية الكامنة وراء القلب الإثارة، تقلص اقتران

Heart failure and cardiac arrhythmias are the leading causes of mortality and morbidity worldwide. However, the mechanism of pathogenesis and myocardial ...