Name: hyperinsulinemic-euglycemic clamp in the conscious rat
Uploaded: 2011-02-07T17:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Hyperinsulinemic-Euglycemic Clamp in the Conscious Rat at JoVE.com

Dit onderzoek werd ondersteund door de Canadese Institutes of Health Research en Genome Canada.JS houdt salaris ondersteuning awards van de Alberta Heritage Foundationfor Medisch Onderzoek, Hart en Stroke Foundation van Canadaand de Canadese Diabetes Association. Met speciale dank aan Dr David Wasserman en Bingle Bracy voor het onderwijs deze procedure om de Shearer laboratorium.

A: Chirurgische catheterisatie van de arteriële en veneuze circulatie Deel 1: arteriële en veneuze katheter voorbereiding <ol><li> Snij 15 cm van de PE-50 (inwendige diameter van 0,58 mm (0.023 &quot;) x een uitwendige diameter van 0.965 mm (0.038&quot;). Snijd een deel van 1mm silastic buis (0,76 mm (0.030 &quot;) interne diameter x 1.65mm (0.065 &quot;) buitendiameter) voor gebruik als fixatie-kraal. Het straatverbod kraal voorkomt dat de rat van het uittrekken van de katheter zodra deze ...

<ol>
	<li>Halseth, A. E., Bracy, D. P., Wasserman, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Limitations+to+basal+and+insulin-stimulated+skeletal+muscle+glucose+uptake+in+the+high-fat-fed+rat.">Limitations to basal and insulin-stimulated skeletal muscle glucose uptake in the high-fat-fed rat.</a> Am J Physiol Endocrinol Metab. 279, E1064-E1071 (2000).</li><li>Halseth, A. E., Bracy, D. P., Wasserman, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Limitations+to+muscle+glucose+uptake+due+to+high+fat+feeding.">Limitations to muscle glucose uptake due to high fat feeding.</a> Am. J. Physiol. 279, E1064-E1071 (2000).</li><li>Muniyappa, R., Lee, S., Chen, H., Quon, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Current+approaches+for+assessing+insulin+sensitivity+and+resistance+in+vivo:+advantages,+limitations,+and+appropriate+usage.">Current approaches for assessing insulin sensitivity and resistance in vivo: advantages, limitations, and appropriate usage.</a> Am J Physiol Endocrinol Metab. 294, 15-26 (2008).</li><li>Cho, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insulin+resistance+and+a+diabetes+mellitus-like+syndrome+in+mice+lacking+the+protein+kinase+Akt2+(PKB+beta).">Insulin resistance and a diabetes mellitus-like syndrome in mice lacking the protein kinase Akt2 (PKB beta).</a> Science. 292, 1728-1731 (2001).</li><li>Dubois, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+SHP-1+protein+tyrosine+phosphatase+negatively+modulates+glucose+homeostasis.">The SHP-1 protein tyrosine phosphatase negatively modulates glucose homeostasis.</a> Nat Med. 12, 549-556 (2006).</li><li>Pacini, G., Thomaseth, K., Ahren, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contribution+to+glucose+tolerance+of+insulin-independent+vs.+insulin-dependent+mechanisms+in+mice.">Contribution to glucose tolerance of insulin-independent vs. insulin-dependent mechanisms in mice.</a> Am J Physiol Endocrinol Metab. 281, 693-703 (2001).</li><li>Herbach, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dominant-negative+effects+of+a+novel+mutated+Ins2+allele+causes+early-onset+diabetes+and+severe+beta-cell+loss+in+Munich+Ins2C95S+mutant+mice.">Dominant-negative effects of a novel mutated Ins2 allele causes early-onset diabetes and severe beta-cell loss in Munich Ins2C95S mutant mice.</a> Diabetes. 56, 1268-1276 (2007).</li><li>Maeda, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diet-induced+insulin+resistance+in+mice+lacking+adiponectin/ACRP30.">Diet-induced insulin resistance in mice lacking adiponectin/ACRP30.</a> Nat Med. 8, 731-737 (2002).</li><li>Potenza, M. A., Marasciulo, F. L., Tarquinio, M., Quon, M. J., Montagnani, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Treatment+of+spontaneously+hypertensive+rats+with+rosiglitazone+and/or+enalapril+restores+balance+between+vasodilator+and+vasoconstrictor+actions+of+insulin+with+simultaneous+improvement+in+hypertension+and+insulin+resistance.">Treatment of spontaneously hypertensive rats with rosiglitazone and/or enalapril restores balance between vasodilator and vasoconstrictor actions of insulin with simultaneous improvement in hypertension and insulin resistance.</a> Diabetes. 55, 3594-3603 (2006).</li><li>Ayala, J. E., Bracy, D. P., McGuinness, O. P., Wasserman, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Considerations+in+the+design+of+hyperinsulinemic-euglycemic+clamps+in+the+conscious+mouse.">Considerations in the design of hyperinsulinemic-euglycemic clamps in the conscious mouse.</a> Diabetes. 55, 390-397 (2006).</li><li>Wasserman, D. H., Ayala, J. E., McGuinness, O. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lost+in+translation.">Lost in translation.</a> Diabetes. 58, 1947-1950 (2009).</li></ol>

In eerste instantie ontwikkeld voor het onderzoek van de gevoeligheid voor insuline bij mensen, heeft de klem procedure nu aangepast aan de andere diersoorten waaronder ratten en muizen. Onderzoeken van diermodellen van insuline-resistentie is een belangrijke hulp in het begrijpen van de pathofysiologie van de gevoeligheid voor insuline en de bijbehorende pathologieën, alsmede het identificeren van therapeutische interventies die klinische waarde 1,2 te hebben. Verschillende methoden om de gevoeligheid voor ...

<table border="1"><tbody><tr valign="top"><td> Naam van het serum </td><td> Vennootschap </td><td> Catalogus nummer </td><td> Commentaar (optioneel) </td></tr><tr valign="top"><td> Intramedic Polyethyleen slang (PE-50) </td><td> Fisher Scientific </td><td> 14 tot 170-12B </td><td> Inwendige diameter van 0,58 mm (0.023 &quot;) x Buitendiameter van 0.965 mm (0.038&quot;) </td></tr><tr valign="top"><td> Dow Corning Silastic Laboratory Tubing </td><td> Fisher Scientific </td><td> 11 tot 189-15C </td><td> Inwendige diameter van 0,76 mm (0.030 &quot;) x Buitendiameter van 1.65mm (0.065&quot;) </td></tr><tr valign="top"><td> Tygon S-50-HL Medical Tubing </td><td> Harvard Apparatuur </td><td> PY2 72-1251 </td><td> Inwendige diameter van 3,2 mm (0,125 &quot;) x Buitendiameter van 4.7mm (0.1875&quot;) </td></tr><tr valign="top"><td> Loctite Super Glue </td><td> Grand &amp; Toy </td><td> 32237 </td><td> Gel Controle </td></tr><tr valign="top"><td> Steriele chirurgische Blade </td><td> VWR </td><td> BD371610 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> Gebogen Micro ontleden Forceps </td><td> George Tiemann &amp; Co </td><td> 160-20 </td><td> x 2 </td></tr><tr valign="top"><td> Rechte Micro ontleden Forceps </td><td> George Tiemann &amp; Co </td><td> 160-15 </td><td> x 2 </td></tr><tr valign="top"><td> Gebogen hemostat </td><td> George Tiemann &amp; Co </td><td> 105-1135 </td><td> x 2 </td></tr><tr valign="top"><td> Rechte hemostat </td><td> George Tiemann &amp; Co </td><td> 105-1130 </td><td> x 2 </td></tr><tr valign="top"><td> Hemostat Tip Guards </td><td> Robbins Instruments, Inc </td><td> 15.09-2-004 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> Rechte Chirurgie Schaar </td><td> George Tiemann &amp; Co </td><td> 105-402 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> VENOJECT multi-sample Luer-adapter </td><td> Terumo Medical Products </td><td> 810127A </td><td> 21 meter, 1 inch </td></tr><tr valign="top"><td> Steriele katheter Introducer </td><td> Becton Dickinson </td><td> 406999 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> 14-gauge stompe naald </td><td> Becton Dickinson </td><td> 511310 </td><td> 14 meter, 2 inch </td></tr><tr valign="top"><td> Steriele hechtmiddelen voor chirurgisch </td><td> Johnson &amp; Johnson Medical Products </td><td> 1679H </td><td> Zijde, grootte 3-0 </td></tr><tr valign="top"><td> Niet-steriele hechtmiddelen voor chirurgisch </td><td> Angiotech Pharmaceuticals, Inc </td><td> SP116 </td><td> Zijde, grootte 4-0 </td></tr><tr valign="top"><td> Wattenstaafjes </td><td> VWR </td><td> 10806-005 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> 4ply gaasjes </td><td> VWR </td><td> CA43845-062 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> Small Animal Draadloze Clippers </td><td> Harvard Apparatuur </td><td> 729063 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> Isofluraan </td><td> Halogene Products Corp </td><td> IPN-45 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> Verdoving Cart </td><td> Benson Medical Industries, Inc </td><td></td><td></td></tr><tr valign="top"><td> Ethanol 70% </td><td> Fisher Scientific </td><td> HC-1000 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> Betadine antiseptische oplossing </td><td> West-Drug Distribution Centre Ltd </td><td> 105267 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> Model 11 Plus-spuitpomp </td><td> Harvard Apparatuur </td><td> 702208 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> Roestvrij stalen buizen koppelingen </td><td> Harvard Apparatuur </td><td> 72-4434 </td><td> 23 meter, 0,3 inch </td></tr><tr valign="top"><td> Roestvrij stalen buizen Plugs </td><td> Harvard Apparatuur </td><td> 72-4436 </td><td> 23 meter, 0,5 inch </td></tr><tr valign="top"><td> Stainless Steel stompe naalden </td><td> Instech Laboratories, Inc </td><td> LS22 </td><td> 22 gauge </td></tr><tr valign="top"><td> 60 Degree Y-Connectors </td><td> Kleine onderdelen </td><td> STCY-22-05 </td><td> 22 gauge </td></tr><tr valign="top"><td> CritSpin Micro-hematocriet Centrifuge </td><td> Iris monster verwerking </td><td> CS12 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> Mini-Centrifuge </td><td> Fisher Scientific </td><td> 05-090-100 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> Micro-Centrifuge buizen </td><td> VWR </td><td> 53550-778 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> 50ml polypropyleen centrifugebuisjes </td><td> VWR</td><td> 89004-364 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> 1ml Plastic Slip Tip Spuiten </td><td> Becton Dickinson </td><td> 309602 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> 3 ml Plastic Luerlok Tip Spuiten </td><td> Becton Dickinson </td><td> 309585 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> Heparine injectie </td><td> West-Drug Distribution Centre Ltd </td><td> 102824 </td><td> Fabrikant: LEO Pharma Inc Conc. 1000 IE </td></tr><tr valign="top"><td> EDTA-oplossing </td><td> Promega Corp </td><td> V4231 </td><td> 0,5 M, pH 8,0 </td></tr><tr valign="top"><td> Zoutoplossing </td><td> West-Drug Distribution Centre Ltd </td><td> ABB7983154 </td><td> Fabrikant: Hospira 0,9% natriumchloride </td></tr><tr valign="top"><td> 50% Dextrose </td><td> Vetoquinol </td><td> 8DEX012D </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> Humuline-R </td><td> Eli Lilly </td><td> HI-210 </td><td> 100U/ml </td></tr><tr valign="top"><td> 1 ml insuline spuiten </td><td> Becton Dickinson </td><td> 309311 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> Fisherbrand * Hemato-Seal Sealant </td><td> Fisher Scientific </td><td> 02-678 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> Fisherbrand * Microhematocrit Capillaire Buizen </td><td> Fisher Scientific </td><td> 22-362-574 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> One Touch Ultra Teststrips </td><td> LifeScan, Inc </td><td> AW 085-314H </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> One Touch Ultra Bloedglucosemeter </td><td> LifeScan, Inc </td><td> AW 085-314 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> Natrium Pentobarbitol </td><td> Ceva Sante Animale </td><td> 1715 138 </td><td> Conc. 54.7mg/ml </td></tr><tr valign="top"><td> Rode Laboratory Labeling Tape </td><td> VWR </td><td> 89097-932 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> Blauwe Laboratory Labeling Tape </td><td> VWR </td><td> 89097-936 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> Waag </td><td> Fisher Scientific </td><td> 01-913-88 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> Draaikolk </td><td> VWR </td><td> 58815-234 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> Timer </td><td> VWR </td><td> 62344-641 </td><td></td></tr></tbody></table>

hyperinsulinemic-euglycemic clamp in the conscious rat

Type 2 diabetes (T2D) neemt snel toe in de prevalentie. Gekenmerkt door een van beide onvoldoende insuline productie of het onvermogen om insuline geproduceerd, T2D resultaten gebruiken bij verhoogde bloedsuikerspiegel. De &quot;gouden standaard&quot; bij de beoordeling van de gevoeligheid voor insuline is een hyperinsulinemische-euglycemic clamp of insuline klem. In deze procedure wordt insuline toegediend met een constante snelheid resulteert in een daling van de bloedglucose. Handhaving van de bloedglucose op een constant niveau, is exogene glucose (D50) toegediend in de veneuze circulatie. De hoeveelheid glucose-infusie om homeostase te behouden is een indicatie van de gevoeligheid voor insuline. Hier tonen we de basis klem procedure in de chronisch gecatheteriseerd, ongeremd, bewuste rat. Dit model maakt het bloed worden verzameld met een minimale belasting van het dier. Na de inductie van de anesthesie, is een middellijn incisie gemaakt en de linker a. carotis communis en rechts halsslagader worden gecatheteriseerd. Ingevoegde katheters worden gespoeld met gehepariniseerde zoutoplossing, daarna exteriorized en beveiligd. Huisdieren zijn toegestaan ​​om te herstellen voor 4-5 dagen voorafgaand aan de experimenten, met gewichtstoename dagelijks gecontroleerd. Alleen die dieren die gewicht weer naar pre-operatie niveaus worden gebruikt voor experimenten. Op de dag van het experiment, zijn ratten vastte en verbonden met pompen die insuline en D50. Baseline glucose wordt beoordeeld vanuit de arteriële lijn en gebruikt een benchmark gedurende het experiment (euglycemia). Hierna wordt insuline toegediend met een constante snelheid in de veneuze circulatie. Overeenkomen met de daling van de bloedglucose, is D50 toegediend. Als de snelheid van de D50 infusie is groter dan de snelheid van opname, zal een stijging van de glucose-optreden. Evenzo, als het tarief onvoldoende is om het hele lichaam de opname van glucose match, zal een daling optreden. Titratie van glucose gaat door totdat een stabiele glucosewaarden worden bereikt. Glucose niveaus en glucose-infuus tarieven tijdens deze stabiele periode worden geregistreerd en gerapporteerd. Resultaten geven een index van gehele lichaam insuline gevoeligheid. De techniek kan worden verfijnd voor specifieke experimentele eisen te voldoen. Het wordt verder versterkt door het gebruik van radioactieve tracers die weefsel-specifieke insuline-gestimuleerde glucose-opname en het hele lichaam glucose omzet kan bepalen.

Watch this Scientific Journal Video about Hyperinsulinemic-Euglycemic Clamp in the Conscious Rat at JoVE.com

Hyperinsulinemic-Euglycemic Clamp in the Conscious Rat

De hyperinsulinemische-euglycemic clamp is de &quot;gouden standaard&quot; voor de beoordeling van de werking van insuline. Insuline wordt toegediend met een constante snelheid te stimuleren de opname van glucose. De hoeveelheid van exogene glucose-infusie om deze daling tegen te gaan is een indicatie van de gevoeligheid voor insuline. Hier is de procedure wordt uitgevoerd op een bewuste, ongebreidelde rat.

Hyperinsulinemische-Euglycemic Klem in de Conscious Rat

Type 2 diabetes (T2D) is rapidly rising in prevalence. Characterized by either inadequate insulin production or the inability to utilize insulin produced, ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Hyperinsulinemic-euglycemic Clamps in Conscious, Unrestrained Mice

Hyperinsulinemische-euglycemic Klemmen in Bewust, ongeremde Muizen

Type 2 diabetes is characterized by a defect in insulin action. The hyperinsulinemic-euglycemic clamp, or insulin clamp, is widely considered the "gold ...

Angiogenesis in the Ischemic Rat Lung

Angiogenese in het ischemische Rat Lung

The  adult lung is perfused by both the systemic bronchial artery and the entire  venous return flowing through the pulmonary arteries. In most lung ...

Slow-release Drug Delivery through Elvax 40W to the Rat Retina: Implications for the Treatment of Chronic Conditions

Slow-release Drug Delivery via Elvax 40W aan de Rat Retina: Implicaties voor de behandeling van chronische voorwaarden

Diseases of the retina are difficult to treat as the retina lies deep within the eye. Invasive methods of drug delivery are often needed to treat these ...

Catheterization of the Carotid Artery and Jugular Vein to Perform Hemodynamic Measures, Infusions and Blood Sampling in a Conscious Rat Model

Catheterisatie van de halsslagader en de halsader aan hemodynamische maatregelen uitvoeren, Infusions en Blood Sampling in een Conscious Rat Model

The success of a small animal model to study critical illness is, in part, dependent on the ability of the model to simulate the human condition. ...

Transcutaneous Assessment of Renal Function in Conscious Rodents

Transcutane beoordeling van de nierfunctie in Conscious Knaagdieren

Glomerular filtration rate (GFR) is the gold standard to assess overall kidney function. However, traditional methods to evaluate GFR are cumbersome and ...

The Dimethylnitrosamine Induced Liver Fibrosis Model in the Rat

De dimethylnitrosamine geïnduceerde leverfibrose Model in het Rat

Four to six week old, male Wistar rats were used to produce animal models of liver fibrosis. The process requires four weeks of administration of 10 mg/kg ...

Method of Direct Segmental Intra-hepatic Delivery Using a Rat Liver Hilar Clamp Model

Wijze van Direct Segmentale Intra-lever Delivery Met behulp van een Rat Liver Hilar Clamp Model

Major hepatic surgery with inflow occlusion, and liver transplantation, necessitate a period of warm ischemia, and a period of reperfusion leading to ...

Re-Arterialized Rat Partial Liver Transplantation with an in vivo Vessel-Oriented 70% Hepatectomy

Re-Arterialized Rat Partial Liver Transplantation with an in vivo Vessel-Oriented 70% Hepatectomy

Opnieuw Arterialized Rat gedeeltelijke lever transplantatie met een in vivo vaartuig georiënteerde 70% Hepatectomy

Split liver transplantation and living liver donor liver transplantation were developed in the clinic to utilize liver organs in a more efficient manner. ...

Assessment of Respiratory Function in Conscious Mice by Double-chamber Plethysmography

Beoordeling van de ademhalingsfunctie in bewuste muizen door Double-kamer Plethysmography

Air volume changes created by a conscious subject breathing spontaneously within a body box are at the basis of plethysmography, a technique used to ...

Repetitive Blood Sampling from the Subclavian Vein of Conscious Rat

Repetitieve bloedafname uit de subclavia-ader van bewuste rat

Rats are widely used in pharmacokinetics (PK) and toxicokinetic (TK) studies that need to collect a certain amount of blood at specific time points to ...