Name: hyperinsulinemic-euglycemic clamp in the conscious rat
Uploaded: 2011-02-07T17:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Hyperinsulinemic-Euglycemic Clamp in the Conscious Rat at JoVE.com

מחקר זה נתמך על ידי מכוני הבריאות הקנדי למחקר הגנום Canada.JS מחזיק תמיכה משכורת פרסים מן המחקר למורשת אלברטה רפואי Foundationfor, לב ושבץ קרן של Canadaand איגוד הסוכרת הקנדית. תודה מיוחדת לד&quot;ר דוד וסרמן Bracy Bingle להוראת נוהל זה למעבדה שירר.

ת: צנתור עורקי כירורגי של Circulation ו ורידי חלק 1: עורקים צנתר ורידי הכנה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חותכים 15 ס&quot;מ של PE-50 (קוטר פנימי של 0.58 מ&quot;מ (0.023 &quot;) x קוטר חיצוני של 0.965 מ&quot;מ (0.038&quot;). Cut קטע 1mm של צינורות silastic (0.7...

<ol>
	<li>Halseth, A. E., Bracy, D. P., Wasserman, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Limitations+to+basal+and+insulin-stimulated+skeletal+muscle+glucose+uptake+in+the+high-fat-fed+rat.">Limitations to basal and insulin-stimulated skeletal muscle glucose uptake in the high-fat-fed rat.</a> Am J Physiol Endocrinol Metab. 279, E1064-E1071 (2000).</li><li>Halseth, A. E., Bracy, D. P., Wasserman, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Limitations+to+muscle+glucose+uptake+due+to+high+fat+feeding.">Limitations to muscle glucose uptake due to high fat feeding.</a> Am. J. Physiol. 279, E1064-E1071 (2000).</li><li>Muniyappa, R., Lee, S., Chen, H., Quon, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Current+approaches+for+assessing+insulin+sensitivity+and+resistance+in+vivo:+advantages,+limitations,+and+appropriate+usage.">Current approaches for assessing insulin sensitivity and resistance in vivo: advantages, limitations, and appropriate usage.</a> Am J Physiol Endocrinol Metab. 294, 15-26 (2008).</li><li>Cho, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insulin+resistance+and+a+diabetes+mellitus-like+syndrome+in+mice+lacking+the+protein+kinase+Akt2+(PKB+beta).">Insulin resistance and a diabetes mellitus-like syndrome in mice lacking the protein kinase Akt2 (PKB beta).</a> Science. 292, 1728-1731 (2001).</li><li>Dubois, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+SHP-1+protein+tyrosine+phosphatase+negatively+modulates+glucose+homeostasis.">The SHP-1 protein tyrosine phosphatase negatively modulates glucose homeostasis.</a> Nat Med. 12, 549-556 (2006).</li><li>Pacini, G., Thomaseth, K., Ahren, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contribution+to+glucose+tolerance+of+insulin-independent+vs.+insulin-dependent+mechanisms+in+mice.">Contribution to glucose tolerance of insulin-independent vs. insulin-dependent mechanisms in mice.</a> Am J Physiol Endocrinol Metab. 281, 693-703 (2001).</li><li>Herbach, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dominant-negative+effects+of+a+novel+mutated+Ins2+allele+causes+early-onset+diabetes+and+severe+beta-cell+loss+in+Munich+Ins2C95S+mutant+mice.">Dominant-negative effects of a novel mutated Ins2 allele causes early-onset diabetes and severe beta-cell loss in Munich Ins2C95S mutant mice.</a> Diabetes. 56, 1268-1276 (2007).</li><li>Maeda, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diet-induced+insulin+resistance+in+mice+lacking+adiponectin/ACRP30.">Diet-induced insulin resistance in mice lacking adiponectin/ACRP30.</a> Nat Med. 8, 731-737 (2002).</li><li>Potenza, M. A., Marasciulo, F. L., Tarquinio, M., Quon, M. J., Montagnani, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Treatment+of+spontaneously+hypertensive+rats+with+rosiglitazone+and/or+enalapril+restores+balance+between+vasodilator+and+vasoconstrictor+actions+of+insulin+with+simultaneous+improvement+in+hypertension+and+insulin+resistance.">Treatment of spontaneously hypertensive rats with rosiglitazone and/or enalapril restores balance between vasodilator and vasoconstrictor actions of insulin with simultaneous improvement in hypertension and insulin resistance.</a> Diabetes. 55, 3594-3603 (2006).</li><li>Ayala, J. E., Bracy, D. P., McGuinness, O. P., Wasserman, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Considerations+in+the+design+of+hyperinsulinemic-euglycemic+clamps+in+the+conscious+mouse.">Considerations in the design of hyperinsulinemic-euglycemic clamps in the conscious mouse.</a> Diabetes. 55, 390-397 (2006).</li><li>Wasserman, D. H., Ayala, J. E., McGuinness, O. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lost+in+translation.">Lost in translation.</a> Diabetes. 58, 1947-1950 (2009).</li></ol>

פיתחה בתחילה לחקירה של הרגישות לאינסולין אצל בני אדם, ההליך מהדק עתה מותאם מינים אחרים כולל חולדות מעבדה ועכברים. במודלים של בעלי חיים חקירות של תנגודת לאינסולין מספק סיוע משמעותי בהבנת הפתופיזיולוגיה של רגישות לאינסולין פתולוגיות הקשורות כמו גם זיהוי התערבויות טי...

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr valign="top"><td> שם מגיב </td><td> חברה </td><td> מספר קטלוגי </td><td> הערות (אופציונלי) </td></tr><tr valign="top"><td> Tubing Intramedic פוליאתילן (PE-50) </td><td> פישר סיינטיפיק </td><td> 14-170-12B </td><td> קוטר פנימי של 0.58 מ&quot;מ (0.023 &quot;) x קוטר חיצוני של 0.965 מ&quot;מ (0.038&quot;) </td></tr><tr valign="top"><td> Dow Corning Silastic Tubing מעבדה </td><td> פישר סיינטיפיק </td><td> 11-189-15C </td><td> קוטר פנימי של 0.76 מ&quot;מ (0.030 &quot;) x קוטר חיצוני של 1.65mm (0.065&quot;) </td></tr><tr valign="top"><td> Tygon S-50-HL רפואי Tubing </td><td> הרווארד Apparatus </td><td> PY2 72-1251 </td><td> קוטר פנימי של 3.2mm (0.125 &quot;) x קוטר חיצוני של 4.7mm (0.1875&quot;) </td></tr><tr valign="top"><td> Loctite Super Glue </td><td> Grand &amp; Toy </td><td> 32237 </td><td> ג&#39;ל בקרה </td></tr><tr valign="top"><td> להב כירורגי סטרילי </td><td> VWR </td><td> BD371610 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> Curved מלקחיים הביתור Micro </td><td> ג&#39;ורג&#39; Tiemann ושות&#39; </td><td> 160-20 </td><td> x 2 </td></tr><tr valign="top"><td> מלקחיים הביתור מיקרו סטרייט </td><td> ג&#39;ורג&#39; Tiemann ושות&#39; </td><td> 160-15 </td><td> x 2 </td></tr><tr valign="top"><td> Curved Hemostat </td><td> ג&#39;ורג&#39; Tiemann ושות&#39; </td><td> 105-1135 </td><td> x 2 </td></tr><tr valign="top"><td> סטרייט Hemostat </td><td> ג&#39;ורג&#39; Tiemann ושות&#39; </td><td> 105-1130 </td><td> x 2 </td></tr><tr valign="top"><td> עצה Hemostat משמרות </td><td> רובינס מכשירים, Inc </td><td> 15.09-2-004 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> כירורגיה מספריים סטרייט </td><td> ג&#39;ורג&#39; Tiemann ושות&#39; </td><td> 105-402 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> VENOJECT Multi-Sample Luer מתאם </td><td> Terumo מוצרים רפואיים </td><td> 810127A </td><td> 21 מד, 1 פנימה </td></tr><tr valign="top"><td> צנתר סטרילי ההיכרויות </td><td> בקטון דיקינסון </td><td> 406999 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> 14 מד בלאנט מחט </td><td> בקטון דיקינסון </td><td> 511310 </td><td> 14 מד, 2 פנימה </td></tr><tr valign="top"><td> תפר כירורגי סטרילי </td><td> ג&#39;ונסון &amp; ג&#39;ונסון מוצרים רפואיים </td><td> 1679H </td><td> משי, בגודל 3-0 </td></tr><tr valign="top"><td> לא סטריליים כירורגי תפר </td><td> Angiotech Pharmaceuticals, Inc </td><td> SP116 </td><td> משי, בגודל 4-0 </td></tr><tr valign="top"><td> ספוגיות כותנה </td><td> VWR </td><td> 10806-005 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> גזה רפידות 4ply </td><td> VWR </td><td> CA43845-062 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> בעלי חיים קטנים קליפרס Cordless </td><td> הרווארד Apparatus </td><td> 729063 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> Isoflurane </td><td> Halocarbon מוצרים קורפ </td><td> IPN-45 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> הרדמה לעגלה </td><td> בנסון תעשיות רפואיות בע&quot;מ </td><td></td><td></td></tr><tr valign="top"><td> 70% אתנול </td><td> פישר סיינטיפיק </td><td> HC-1000 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> אנטיספטי בבטאדין פתרון </td><td> הפצה המערבי והתרופות מרכז בע&quot;מ </td><td> 105267 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> דגם 11 פלוס משאבת מזרק </td><td> הרווארד Apparatus </td><td> 702208 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> Tubing נירוסטה מצמדים </td><td> הרווארד Apparatus </td><td> 72-4434 </td><td> 23 מד, 0.3 פנימה </td></tr><tr valign="top"><td> Tubing נירוסטה Plugs </td><td> הרווארד Apparatus </td><td> 72-4436 </td><td> 23 מד, 0.5 פנימה </td></tr><tr valign="top"><td> נירוסטה בלאנט מחטים </td><td> Instech Laboratories, Inc </td><td> LS22 </td><td> 22 מד </td></tr><tr valign="top"><td> 60 תואר ה-Y מחברים </td><td> חלקים קטנים </td><td> STCY-22-05 </td><td> 22 מד </td></tr><tr valign="top"><td> CritSpin Micro-המטוקריט צנטריפוגה </td><td> איריס עיבוד המדגם </td><td> CS12 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> מיני צנטריפוגה </td><td> פישר סיינטיפיק </td><td> 05-090-100 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> צנטריפוגה צינורות Micro </td><td> VWR </td><td> 53550-778 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> 50 מ&quot;ל צנטריפוגות צינורות פוליפרופילן </td><td> VWR</td><td> 89004-364 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> 1ml פלסטיק עצה סליפ מזרקים </td><td> בקטון דיקינסון </td><td> 309602 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> 3ml פלסטיק Luerlok מזרקים עצה </td><td> בקטון דיקינסון </td><td> 309585 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> קרישה הפארין בהזרקה </td><td> הפצה המערבי והתרופות מרכז בע&quot;מ </td><td> 102824 </td><td> יצרן: ליאו פארמה בע&quot;מ קונצרט כלשהו. 1000 IU </td></tr><tr valign="top"><td> EDTA פתרון </td><td> Promega קורפ </td><td> V4231 </td><td> 0.5 מ &#39;, pH 8.0 </td></tr><tr valign="top"><td> מלוח </td><td> הפצה המערבי והתרופות מרכז בע&quot;מ </td><td> ABB7983154 </td><td> יצרן: נתרן כלוריד Hospira 0.9% </td></tr><tr valign="top"><td> 50% דקסטרוז </td><td> Vetoquinol </td><td> 8DEX012D </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> Humulin-R </td><td> אלי לילי </td><td> HI-210 </td><td> 100U/ml </td></tr><tr valign="top"><td> אינסולין מזרקים 1ml </td><td> בקטון דיקינסון </td><td> 309311 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> Fisherbrand * המטו-Seal איטום </td><td> פישר סיינטיפיק </td><td> 02-678 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> Fisherbrand * Microhematocrit צינורות נימי </td><td> פישר סיינטיפיק </td><td> 22-362-574 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> One Touch Ultra רצועות הבדיקה </td><td> LifeScan, Inc </td><td> AW 085-314H </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> אחת דם Ultra Touch גלוקוז Meter </td><td> LifeScan, Inc </td><td> 085 AW-314B </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> Pentobarbitol נתרן </td><td> Ceva סנטה Animale </td><td> 1715 138 </td><td> קונצרט כלשהו. 54.7mg/ml </td></tr><tr valign="top"><td> האדום מעבדה Tape תיוג </td><td> VWR </td><td> 89097-932 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> סימון כחול מעבדה Tape </td><td> VWR </td><td> 89097-936 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> לשקול את סולם </td><td> פישר סיינטיפיק </td><td> 01-913-88 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> מערבולת </td><td> VWR </td><td> 58815-234 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> שעון עצר </td><td> VWR </td><td> 62344-641 </td><td></td></tr></tbody></table>

hyperinsulinemic-euglycemic clamp in the conscious rat

סוכרת מסוג 2 (T2D) במהירות העולה שכיחות. מאופיין בייצור אינסולין או לקוי או חוסר היכולת לנצל מיוצר אינסולין, התוצאות T2D ברמות גלוקוז גבוהות בדם. &quot;תקן הזהב&quot; בהערכת הרגישות לאינסולין הוא מהדק hyperinsulinemic-euglycemic או מהדק אינסולין. בהליך זה, אינסולין הוא החדיר בקצב קבוע וכתוצאה מכך לירידת רמת הסוכר בדם. כדי לשמור על רמת הסוכר בדם ברמה קבועה, גלוקוז אקסוגניים (D50) הוא החדיר לתוך מחזור הדם הורידי. כמות הגלוקוז חדורים לשמור על הומאוסטזיס מעיד על הרגישות לאינסולין. כאן, אנו מציגים את ההליך מהדק בסיסי החולדה צינתור כרוניים, מעצורים מודע. מודל זה מאפשר לדם להיאסף עם מתח מינימלי לחיה. בעקבות אינדוקציה של הרדמה, חתך קו האמצע הוא עשה את עורק התרדמה השמאלי משותפת וריד הנכונים צינתור. קטטר מוכנס סמוקות עם מלוחים heparinized, exteriorized אז ומאובטחת. בעלי חיים מותר להתאושש במשך 4-5 ימים לפני ניסויים, עם עלייה במשקל במעקב יומיומי. רק בעלי חיים אלה להחזיר משקל טרום ניתוח רמות משמשים לניסויים. ביום הניסוי, חולדות הם צמו ומחובר משאבות אינסולין המכיל D50. גלוקוז Baseline מוערכת מקו עורקי ומשמש אמת מידה לאורך הניסוי (euglycemia). בעקבות זאת, אינסולין הוא החדיר בקצב קבוע לתוך מחזור הדם הורידי. כדי להתאים את ירידת רמת הסוכר בדם, הוא החדיר D50. אם קצב עירוי D50 עולה על שיעור ספיגת, עלייה ברמת הגלוקוז תתרחש. באופן דומה, אם שיעור אינו מספיק כדי להתאים את ספיגת הגלוקוז בגוף כולו, ירידה תתרחש. טיטרציה של גלוקוז ממשיך עד קריאות גלוקוז יציבה מושגות. רמות הגלוקוז ואת שיעורי עירוי גלוקוז יציבה בתקופה זו נרשמות ודיווח. תוצאות מספקים מדד של רגישות הגוף לאינסולין. הטכניקה יכולה להיות מעודן כדי לעמוד בדרישות הניסוי הספציפי. זה עוד יותר משופר על ידי שימוש קליעים נותבים רדיואקטיבי שיכול לקבוע אינסולין גירוי ספציפי רקמות ספיגת הגלוקוז, כמו גם המחזור כולו הגלוקוז בגוף.

Watch this Scientific Journal Video about Hyperinsulinemic-Euglycemic Clamp in the Conscious Rat at JoVE.com

Hyperinsulinemic-Euglycemic Clamp in the Conscious Rat

מהדק hyperinsulinemic-euglycemic הוא &quot;תקן הזהב&quot; להערכת פעילות האינסולין. אינסולין הוא החדיר בקצב קבוע מגרה ספיגת הגלוקוז. כמות הגלוקוז אקסוגניים חדורים לפעול נגד זה טיפה מעיד על הרגישות לאינסולין. כאן ההליך מבוצע על חולדה, מודע מעצורים.

Hyperinsulinemic-Euglycemic קלאמפ של עכברוש המודע

Type 2 diabetes (T2D) is rapidly rising in prevalence. Characterized by either inadequate insulin production or the inability to utilize insulin produced, ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Hyperinsulinemic-euglycemic Clamps in Conscious, Unrestrained Mice

Hyperinsulinemic-euglycemic Clamps ב, עכברים מודעת בלתי מרוסנת

Type 2 diabetes is characterized by a defect in insulin action. The hyperinsulinemic-euglycemic clamp, or insulin clamp, is widely considered the "gold ...

Angiogenesis in the Ischemic Rat Lung

באנגיוגנזה ריאות עכברוש איסכמי

The  adult lung is perfused by both the systemic bronchial artery and the entire  venous return flowing through the pulmonary arteries. In most lung ...

Slow-release Drug Delivery through Elvax 40W to the Rat Retina: Implications for the Treatment of Chronic Conditions

משלוח שחרור איטי תרופות דרך Elvax 40W לרשתית העכברוש: ​​השלכות לטיפול במצבים כרוניים

Diseases of the retina are difficult to treat as the retina lies deep within the eye. Invasive methods of drug delivery are often needed to treat these ...

Catheterization of the Carotid Artery and Jugular Vein to Perform Hemodynamic Measures, Infusions and Blood Sampling in a Conscious Rat Model

צנתור של עורק התרדמה וצוואר הווריד לבצע צעדים המודינמית, חליטות ודגימת דם במודל עכברוש מודע

The success of a small animal model to study critical illness is, in part, dependent on the ability of the model to simulate the human condition. ...

Transcutaneous Assessment of Renal Function in Conscious Rodents

הערכת Transcutaneous של תפקוד כלייתי במכרסמי Conscious

Glomerular filtration rate (GFR) is the gold standard to assess overall kidney function. However, traditional methods to evaluate GFR are cumbersome and ...

The Dimethylnitrosamine Induced Liver Fibrosis Model in the Rat

מודל הפיברוזיס Dimethylnitrosamine מושרה בחולדה

Four to six week old, male Wistar rats were used to produce animal models of liver fibrosis. The process requires four weeks of administration of 10 mg/kg ...

Method of Direct Segmental Intra-hepatic Delivery Using a Rat Liver Hilar Clamp Model

שיטה של ​​המגזרים הישירים Intra-כבדית משלוח באמצעות מודל קלאמפ עכברוש הכבד hilar

Major hepatic surgery with inflow occlusion, and liver transplantation, necessitate a period of warm ischemia, and a period of reperfusion leading to ...

Re-Arterialized Rat Partial Liver Transplantation with an in vivo Vessel-Oriented 70% Hepatectomy

Re-Arterialized Rat Partial Liver Transplantation with an in vivo Vessel-Oriented 70% Hepatectomy

מחדש Arterialized השתלת הכבד חלקית עכברוש עם ויוו מונחה כלי 70% Hepatectomy

Split liver transplantation and living liver donor liver transplantation were developed in the clinic to utilize liver organs in a more efficient manner. ...

Assessment of Respiratory Function in Conscious Mice by Double-chamber Plethysmography

הערכה של תפקוד מערכת הנשימה בעכברים בהכרה על ידי כפול-תא Plethysmography

Air volume changes created by a conscious subject breathing spontaneously within a body box are at the basis of plethysmography, a technique used to ...

Repetitive Blood Sampling from the Subclavian Vein of Conscious Rat

דגימת דם חוזרת מהווריד הסובקלבי של חולדה מודעת

Rats are widely used in pharmacokinetics (PK) and toxicokinetic (TK) studies that need to collect a certain amount of blood at specific time points to ...