Name: hyperinsulinemic-euglycemic clamp in the conscious rat
Uploaded: 2011-02-07T17:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Hyperinsulinemic-Euglycemic Clamp in the Conscious Rat at JoVE.com

Bu çalışma Kanada Sağlık Araştırma ve Genom Canada.JS Enstitüleri tarafından desteklenen Alberta Mirası Foundationfor Tıbbi Araştırma, Kalp ve İnme Vakfı Canadaand Kanada Diyabet Derneği maaş desteği ödül tutar. Dr David Shearer laboratuar için bu yordamı öğretim Wasserman ve Bingle Bracy özel teşekkürler.

A: Arter ve Venöz Dolaşım Cerrahi Kateterizasyon Bölüm 1: Arter ve Venöz Kateter Hazırlık <ol><li> 15 cm kesin PE-50 (0,58 mm iç çapı (0,023) x dış çapı 0,965 mm (.038 &quot;). Kes bir 1mm silastik tüp bölümü (iç çap x 1.65mm 0.76mm (0.030&quot;) boncuk frenleyici olarak kullanmak için (0,065 &quot;) dış çapı). frenleyici boncuk yapıldıktan sonra kateter çekerek sıçan önler. </li><li> Mikro diseksiyon forseps ipuçları frenleyici boncuk lümen içine yerleşti...

<ol>
	<li>Halseth, A. E., Bracy, D. P., Wasserman, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Limitations+to+basal+and+insulin-stimulated+skeletal+muscle+glucose+uptake+in+the+high-fat-fed+rat.">Limitations to basal and insulin-stimulated skeletal muscle glucose uptake in the high-fat-fed rat.</a> Am J Physiol Endocrinol Metab. 279, E1064-E1071 (2000).</li><li>Halseth, A. E., Bracy, D. P., Wasserman, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Limitations+to+muscle+glucose+uptake+due+to+high+fat+feeding.">Limitations to muscle glucose uptake due to high fat feeding.</a> Am. J. Physiol. 279, E1064-E1071 (2000).</li><li>Muniyappa, R., Lee, S., Chen, H., Quon, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Current+approaches+for+assessing+insulin+sensitivity+and+resistance+in+vivo:+advantages,+limitations,+and+appropriate+usage.">Current approaches for assessing insulin sensitivity and resistance in vivo: advantages, limitations, and appropriate usage.</a> Am J Physiol Endocrinol Metab. 294, 15-26 (2008).</li><li>Cho, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insulin+resistance+and+a+diabetes+mellitus-like+syndrome+in+mice+lacking+the+protein+kinase+Akt2+(PKB+beta).">Insulin resistance and a diabetes mellitus-like syndrome in mice lacking the protein kinase Akt2 (PKB beta).</a> Science. 292, 1728-1731 (2001).</li><li>Dubois, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+SHP-1+protein+tyrosine+phosphatase+negatively+modulates+glucose+homeostasis.">The SHP-1 protein tyrosine phosphatase negatively modulates glucose homeostasis.</a> Nat Med. 12, 549-556 (2006).</li><li>Pacini, G., Thomaseth, K., Ahren, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contribution+to+glucose+tolerance+of+insulin-independent+vs.+insulin-dependent+mechanisms+in+mice.">Contribution to glucose tolerance of insulin-independent vs. insulin-dependent mechanisms in mice.</a> Am J Physiol Endocrinol Metab. 281, 693-703 (2001).</li><li>Herbach, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dominant-negative+effects+of+a+novel+mutated+Ins2+allele+causes+early-onset+diabetes+and+severe+beta-cell+loss+in+Munich+Ins2C95S+mutant+mice.">Dominant-negative effects of a novel mutated Ins2 allele causes early-onset diabetes and severe beta-cell loss in Munich Ins2C95S mutant mice.</a> Diabetes. 56, 1268-1276 (2007).</li><li>Maeda, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diet-induced+insulin+resistance+in+mice+lacking+adiponectin/ACRP30.">Diet-induced insulin resistance in mice lacking adiponectin/ACRP30.</a> Nat Med. 8, 731-737 (2002).</li><li>Potenza, M. A., Marasciulo, F. L., Tarquinio, M., Quon, M. J., Montagnani, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Treatment+of+spontaneously+hypertensive+rats+with+rosiglitazone+and/or+enalapril+restores+balance+between+vasodilator+and+vasoconstrictor+actions+of+insulin+with+simultaneous+improvement+in+hypertension+and+insulin+resistance.">Treatment of spontaneously hypertensive rats with rosiglitazone and/or enalapril restores balance between vasodilator and vasoconstrictor actions of insulin with simultaneous improvement in hypertension and insulin resistance.</a> Diabetes. 55, 3594-3603 (2006).</li><li>Ayala, J. E., Bracy, D. P., McGuinness, O. P., Wasserman, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Considerations+in+the+design+of+hyperinsulinemic-euglycemic+clamps+in+the+conscious+mouse.">Considerations in the design of hyperinsulinemic-euglycemic clamps in the conscious mouse.</a> Diabetes. 55, 390-397 (2006).</li><li>Wasserman, D. H., Ayala, J. E., McGuinness, O. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lost+in+translation.">Lost in translation.</a> Diabetes. 58, 1947-1950 (2009).</li></ol>

Başlangıçta insanlarda insülin duyarlılığı araştırılması için geliştirilmiş, kelepçe prosedürü şimdi laboratuvar sıçan ve fareler de dahil olmak üzere diğer türler adapte edilmiştir. Insülin direncinin araştırılması hayvan modellerinde insülin hassasiyeti ile ilgili patolojiler patofizyolojisi anlamanın yanı sıra klinik değeri 1,2 olan terapötik girişimlerin belirlenmesi önemli bir yardım sağlar. Hayvanlarda insülin duyarlılığını değerlendirmek için çeşitli y?...

<table border="1"><tbody><tr valign="top"><td> Reaktifin Adı </td><td> Şirket </td><td> Katalog numarası </td><td> Yorumlar (isteğe bağlı) </td></tr><tr valign="top"><td> Intramedic Polietilen Boru (PE-50) </td><td> Fisher Scientific </td><td> 14-170-12B </td><td> İç çapı 0,58 mm (0,023 &quot;) x 0,965 mm Dış çap (0,038) </td></tr><tr valign="top"><td> Dow Corning silastik Laboratuvar Boru </td><td> Fisher Scientific </td><td> 11-189-15C </td><td> İç çapı 0,76 mm (0.030 &quot;) x Dış çapı 1.65mm (0.065&quot;) </td></tr><tr valign="top"><td> Tygon S-50-HL Tıp Boru </td><td> Harvard Apparatus </td><td> PY2 72-1251 </td><td> 3.2mm (0.125 &quot;) İç çapı 4.7mm x Dış Çap (0,1875&quot;) </td></tr><tr valign="top"><td> Loctite Super Glue </td><td> Grand &amp; Oyuncak </td><td> 32237 </td><td> Jel Kontrol </td></tr><tr valign="top"><td> Steril Cerrahi Bıçak </td><td> VWR </td><td> BD371610 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> Eğimli mikro Diseksiyon Forseps </td><td> George Tiemann &amp; Co. </td><td> 160-20 </td><td> x 2 </td></tr><tr valign="top"><td> Düz Mikro Diseksiyon Forseps </td><td> George Tiemann &amp; Co. </td><td> 160-15 </td><td> x 2 </td></tr><tr valign="top"><td> Eğimli Hemostat </td><td> George Tiemann &amp; Co. </td><td> 105-1135 </td><td> x 2 </td></tr><tr valign="top"><td> Düz Hemostat </td><td> George Tiemann &amp; Co. </td><td> 105-1130 </td><td> x 2 </td></tr><tr valign="top"><td> Hemostat İpucu Muhafızları </td><td> Robbins Instruments, Inc. </td><td> 15.09-2-004 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> Düz Cerrahi Makas </td><td> George Tiemann &amp; Co. </td><td> 105-402 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> VENOJECT Multi-Örnek Luer Adaptör </td><td> Terumo Tıbbi Ürünler </td><td> 810127A </td><td> 21 gauge, 1 inç </td></tr><tr valign="top"><td> Steril Kateter Introducer </td><td> Becton Dickinson </td><td> 406999 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> 14-gauge Blunt İğne </td><td> Becton Dickinson </td><td> 511310 </td><td> 14 göstergesi, 2 inç </td></tr><tr valign="top"><td> Steril Cerrahi Sütür </td><td> Johnson &amp; Johnson Medikal Ürünler </td><td> 1679H </td><td> İpek, boyutu 3-0 </td></tr><tr valign="top"><td> Non-Steril Cerrahi Sütür </td><td> Angiotech Pharmaceuticals, Inc. </td><td> SP116 </td><td> İpek, boyutu 4-0 </td></tr><tr valign="top"><td> Pamuk Swablar </td><td> VWR </td><td> 10806-005 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> 4ply tül Dokunmatik Yüzeyleri </td><td> VWR </td><td> CA43845-062 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> Küçük Hayvan akülü Clippers </td><td> Harvard Apparatus </td><td> 729063 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> İsofluranın </td><td> Halokarbon Ürünler Corp. </td><td> IPN-45 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> Anestezik Sepetim </td><td> Benson Tıp Industries, Inc. </td><td></td><td></td></tr><tr valign="top"><td> % 70 Etanol </td><td> Fisher Scientific </td><td> HC-1000 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> Betadine Antiseptik Çözümü </td><td> Batı İlaç Dağıtım Merkezi Ltd. </td><td> 105267 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> Model 11 Plus Şırınga Pompa </td><td> Harvard Apparatus </td><td> 702208 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> Paslanmaz Çelik Boru Bareller </td><td> Harvard Apparatus </td><td> 72-4434 </td><td> 23 gauge, 0.3 inç </td></tr><tr valign="top"><td> Paslanmaz Çelik Boru Fiş </td><td> Harvard Apparatus </td><td> 72-4436 </td><td> 23 gauge, 0.5 inç </td></tr><tr valign="top"><td> Paslanmaz Çelik Blunt İğneler </td><td> Instech Laboratories, Inc. </td><td> LS22 </td><td> 22 gauge </td></tr><tr valign="top"><td> 60 Derece Y-Konnektörler </td><td> Küçük Parçalar </td><td> STCY-22-05 </td><td> 22 gauge </td></tr><tr valign="top"><td> CritSpin Micro-Hematokrit Santrifüj </td><td> İris Örnek İşleme </td><td> CS12 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> Mini Santrifüj </td><td> Fisher Scientific </td><td> 05-090-100 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> Mikro Santrifüj Tüpleri </td><td> VWR </td><td> 53550-778 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> 50ml polipropilen santrifüj tüplerine </td><td> VWR</td><td> 89004-364 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> 1ml Plastik Kayma İpucu Şırınga </td><td> Becton Dickinson </td><td> 309602 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> 3ml Plastik Luerlok İpucu Şırınga </td><td> Becton Dickinson </td><td> 309585 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> Heparin Antikoagülan Enjeksiyon </td><td> Batı İlaç Dağıtım Merkezi Ltd. </td><td> 102824 </td><td> Üretici: LEO Pharma A.Ş. Conc. 1000 IU </td></tr><tr valign="top"><td> EDTA Çözüm </td><td> Promega Corp. </td><td> V4231 </td><td> 0.5 M, pH 8.0 </td></tr><tr valign="top"><td> Tuzlu </td><td> Batı İlaç Dağıtım Merkezi Ltd. </td><td> ABB7983154 </td><td> Üretici: Hospira% 0.9 Sodyum Klorür </td></tr><tr valign="top"><td> 50% Dekstroz </td><td> Vetoquinol </td><td> 8DEX012D </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> Humulin-R </td><td> Eli Lilly </td><td> HI-210 </td><td> 100U/ml </td></tr><tr valign="top"><td> 1ml İnsülin Şırınga </td><td> Becton Dickinson </td><td> 309311 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> Fisherbrand * Hemato-Seal Mastik </td><td> Fisher Scientific </td><td> 02-678 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> Fisherbrand * Mikrohematokrit Kapiler Tüp </td><td> Fisher Scientific </td><td> 22-362-574 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> One Touch Ultra Test Stripleri </td><td> LifeScan, Inc. </td><td> AW 085-314H </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> One Touch Ultra Kan Şekeri Ölçüm </td><td> LifeScan, Inc. </td><td> AW 085-314B </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> Pentobarbitol Sodyum </td><td> Ceva Sante Animale </td><td> 1715 138 </td><td> Kons. 54.7mg/ml </td></tr><tr valign="top"><td> Red Laboratuvar Etiketleme Tape </td><td> VWR </td><td> 89097-932 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> Mavi Laboratuvar Etiketleme Bandı </td><td> VWR </td><td> 89097-936 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> Ölçek tartılır </td><td> Fisher Scientific </td><td> 01-913-88 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> Girdap </td><td> VWR </td><td> 58815-234 </td><td></td></tr><tr valign="top"><td> Timer </td><td> VWR </td><td> 62344-641 </td><td></td></tr></tbody></table>

hyperinsulinemic-euglycemic clamp in the conscious rat

Tip 2 diyabet (T2D) prevalansı hızla artıyor. Yetersiz insülin üretimi ya da yüksek kan glikoz düzeyleri insülin üretilen T2D sonuçları yararlanmak için yetersizlik ile karakterizedir. Insülin duyarlılığı değerlendirilmesinde &quot;altın standart&quot; bir hiperinsülinemik öglisemik kelepçe veya insülin kelepçe. Bu prosedürde, insülin, kan şekeri bir düşüş sonucunda sabit bir hızla doluyor. Kan şekeri sabit bir seviyede korumak için, eksojen glikoz (D50) venöz dolaşıma demlenir. Homeostazı korumak için aşılanmış glikoz miktarı insülin duyarlılığını göstermektedir. Burada, kronik kateterize dizginlenmemiş, bilinçli sıçan, temel kelepçe prosedürü göstermektedir. Bu model, hayvana en az stres ile kan toplanmasına izin verir. Anestezi indüksiyonu takiben, orta hat kesi yapılır ve sol karotis arter ve sağ juguler ven kateterize. Eklenen sonra exteriorized ve güvenli bir kateter heparinli serum fizyolojik ile temizlendi. Hayvanlar günlük olarak takip kilo alımı, deneyler için 4-5 gün önce kurtarmak için izin verilir. Sadece, ameliyat öncesi seviyelere ağırlığı yeniden bu hayvanların deneyler için kullanılır. Deney günü, sıçan, oruç tuttuklarını ve insülin ve D50 içeren pompalara bağlı. Temel glikoz arteriyel hattan değerlendirildi ve deney (euglycemia) boyunca bir kriter kullanılır. Bunu takiben, insülin venöz dolaşıma sabit bir hızla doluyor. Damla kan şekeri maç için, D50 demlenir. D50 infüzyon hızı alımını oranından daha büyükse, glikoz bir artış meydana gelecektir. Benzer şekilde, bu oran tüm vücut glukoz alımı maç için yetersiz ise, bir düşüş meydana gelecektir. Istikrarlı şekeri elde edilir kadar glikoz Titrasyon devam ediyor. Bu istikrarlı döneminde kan şekeri düzeyleri ve glukoz infüzyon oranları kaydedilir ve raporlanır. Sonuçlar tüm vücut insülin duyarlılığı bir dizin sağlar. Bu teknik spesifik deneysel gereksinimlerini karşılamak için rafine edilebilir. Bu doku spesifik insülin ile uyarılmış glukoz alımı yanı sıra tüm vücut glukoz ciro belirleyebilirsiniz radyoaktif izleyiciler tarafından daha da geliştirilmiştir.

Watch this Scientific Journal Video about Hyperinsulinemic-Euglycemic Clamp in the Conscious Rat at JoVE.com

Hyperinsulinemic-Euglycemic Clamp in the Conscious Rat

Hiperinsülinemik öglisemik kelepçe insülin eylem değerlendirmesi için &quot;altın standart&quot;. İnsülin, glukoz alımını teşvik sabit bir hızla doluyor. Bu düşüşün karşı aşılanmış eksojen glukoz miktarı insülin duyarlılığını göstermektedir. İşte prosedür bilinçli bir dizginlenmemiş sıçan yapılır.

Bilinçli Rat hiperinsülinemik öglisemik Kelepçe

Type 2 diabetes (T2D) is rapidly rising in prevalence. Characterized by either inadequate insulin production or the inability to utilize insulin produced, ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Hyperinsulinemic-euglycemic Clamps in Conscious, Unrestrained Mice

Bilinçli Mesnetlenmemiş Fare hiperinsülinemik öglisemik Kelepçeleri

Type 2 diabetes is characterized by a defect in insulin action. The hyperinsulinemic-euglycemic clamp, or insulin clamp, is widely considered the "gold ...

Angiogenesis in the Ischemic Rat Lung

İskemik Sıçan Akciğer Angiogenezis

The  adult lung is perfused by both the systemic bronchial artery and the entire  venous return flowing through the pulmonary arteries. In most lung ...

Slow-release Drug Delivery through Elvax 40W to the Rat Retina: Implications for the Treatment of Chronic Conditions

Rat Retina için Elvax 40W ile yavaş salınımlı İlaç Dağıtım: Kronik Koşullar Tedavisinde Etkileri

Diseases of the retina are difficult to treat as the retina lies deep within the eye. Invasive methods of drug delivery are often needed to treat these ...

Catheterization of the Carotid Artery and Jugular Vein to Perform Hemodynamic Measures, Infusions and Blood Sampling in a Conscious Rat Model

Karotis Arter ve Ven Juguler kateterizasyon bir Bilinçli Rat Modelinde, İnfüzyonları ve Kan Örnekleme hemodinamik Tedbirleri Gerçekleştirme

The success of a small animal model to study critical illness is, in part, dependent on the ability of the model to simulate the human condition. ...

Transcutaneous Assessment of Renal Function in Conscious Rodents

Bilinçli Kemirgenler Böbrek Fonksiyon Transkutanöz Değerlendirmesi

Glomerular filtration rate (GFR) is the gold standard to assess overall kidney function. However, traditional methods to evaluate GFR are cumbersome and ...

The Dimethylnitrosamine Induced Liver Fibrosis Model in the Rat

Rat Dimethylnitrosamine Başlatılan Karaciğer Fibrozis Modeli

Four to six week old, male Wistar rats were used to produce animal models of liver fibrosis. The process requires four weeks of administration of 10 mg/kg ...

Method of Direct Segmental Intra-hepatic Delivery Using a Rat Liver Hilar Clamp Model

Bir Sıçan Karaciğer Hilar Kelepçe Modeli Kullanılarak Doğrudan Segmental İçi hepatik Dağıtım Yöntemi

Major hepatic surgery with inflow occlusion, and liver transplantation, necessitate a period of warm ischemia, and a period of reperfusion leading to ...

Re-Arterialized Rat Partial Liver Transplantation with an in vivo Vessel-Oriented 70% Hepatectomy

Re-Arterialized Rat Partial Liver Transplantation with an in vivo Vessel-Oriented 70% Hepatectomy

Yeniden Arterialized sıçan kısmi karaciğer nakli bir vivo içinde gemi odaklı % 70 ile Hepatectomy

Split liver transplantation and living liver donor liver transplantation were developed in the clinic to utilize liver organs in a more efficient manner. ...

Assessment of Respiratory Function in Conscious Mice by Double-chamber Plethysmography

Solunum fonksiyon çift-odası pletismografisi tarafından bilinçli farelerde değerlendirilmesi

Air volume changes created by a conscious subject breathing spontaneously within a body box are at the basis of plethysmography, a technique used to ...

Repetitive Blood Sampling from the Subclavian Vein of Conscious Rat

Bilinçli Sıçan Subklaviyen Veninden Tekrarlayan Kan Örneklemesi

Rats are widely used in pharmacokinetics (PK) and toxicokinetic (TK) studies that need to collect a certain amount of blood at specific time points to ...