Name: postsynaptic recordings at afferent dendrites contacting cochlear inner hair cells: monitoring multivesicular release at a ribbon synapse
Uploaded: 2011-02-10T16:00:00
Duration: 11 min 45 s
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इस काम EY बहरापन रिसर्च फाउंडेशन अनुसंधान अनुदान द्वारा समर्थित किया गया था और DC006476 NIDCD DC005211 NIDCD द्वारा सुनवाई और शेष के लिए केंद्र, जॉन्स हॉपकिन्स विश्वविद्यालय के लिए ईजी और. कलाकृति कॉपीराइट टिम फेल्प्स, जॉन्स हॉपकिन्स विश्वविद्यालय. एलजी प्रारंभिक पांडुलिपि लिखा था, EY और एलजी विच्छेदन और रिकॉर्डिंग फिल्माया. सभी लेखकों कापी आंकड़े प्रदान और पांडुलिपि लिखने के लिए योगदान.

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	<li>Glowatzki, E., Fuchs, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transmitter+release+at+the+hair+cell+ribbon+synapse.">Transmitter release at the hair cell ribbon synapse.</a> Nat Neurosci. 5 (2), 147-154 (2002).</li><li>Goutman, J. D., Glowatzki, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Time+course+and+calcium+dependence+of+transmitter+release+at+a+single+ribbon+synapse.">Time course and calcium dependence of transmitter release at a single ribbon synapse.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 104 (41), 16341-16346 (2007).</li><li>Yi, E., Roux, I., Glowatzki, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dendritic+HCN+channels+shape+excitatory+postsynaptic+potentials+at+the+inner+hair+cell+afferent+synapse+in+the+mammalian+cochlea.">Dendritic HCN channels shape excitatory postsynaptic potentials at the inner hair cell afferent synapse in the mammalian cochlea.</a> J Neurophysiol. 103 (5), 2532-2543 (2010).</li><li>Grant, L., Yi, E., Glowatzki, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Two+modes+of+release+shape+the+postsynaptic+response+at+the+inner+hair+cell+ribbon+synapse.">Two modes of release shape the postsynaptic response at the inner hair cell ribbon synapse.</a> J Neurosci. 30 (12), 4210-4220 (2010).</li><li>LoGiudice, L., Matthews, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+ribbons+at+sensory+synapses.">The role of ribbons at sensory synapses.</a> Neuroscientist. 15 (4), 380-391 (2009).</li><li>Singer, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coordinated+multivesicular+release+at+a+mammalian+ribbon+synapse.">Coordinated multivesicular release at a mammalian ribbon synapse.</a> Nat Neurosci. 7 (8), 826-833 (2004).</li><li>Keen, E. C., Hudspeth, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transfer+characteristics+of+the+hair+cell's+afferent+synapse.">Transfer characteristics of the hair cell's afferent synapse.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 103 (14), 5537-5542 (2006).</li><li>Li, G. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+unitary+event+underlying+multiquantal+EPSCs+at+a+hair+cell's+ribbon+synapse.">The unitary event underlying multiquantal EPSCs at a hair cell's ribbon synapse.</a> J Neurosci. 29 (23), 7558-7568 (2009).</li><li>Singer, J. H., Diamond, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vesicle+depletion+and+synaptic+depression+at+a+mammalian+ribbon+synapse.">Vesicle depletion and synaptic depression at a mammalian ribbon synapse.</a> J Neurophysiol. 95 (5), 3191-3198 (2006).</li><li>Suryanarayanan, A., Slaughter, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synaptic+transmission+mediated+by+internal+calcium+stores+in+rod+photoreceptors.">Synaptic transmission mediated by internal calcium stores in rod photoreceptors.</a> J Neurosci. 26 (6), 1759-1766 (2006).</li><li>Neef, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Probing+the+mechanism+of+exocytosis+at+the+hair+cell+ribbon+synapse.">Probing the mechanism of exocytosis at the hair cell ribbon synapse.</a> J Neurosci. 27 (47), 12933-12944 (2007).</li><li>Tritsch, N. X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+origin+of+spontaneous+activity+in+the+developing+auditory+system.">The origin of spontaneous activity in the developing auditory system.</a> Nature. 450 (7166), 50-55 (2007).</li><li>Kros, C. J., Ruppersberg, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expression+of+a+potassium+current+in+inner+hair+cells+during+development+of+hearing+in+mice.">Expression of a potassium current in inner hair cells during development of hearing in mice.</a> Nature. 394 (6690), 281-284 (1998).</li><li>Muller, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Developmental+changes+of+frequency+representation+in+the+rat+cochlea.">Developmental changes of frequency representation in the rat cochlea.</a> Hear Res. 56 (1-2), 1-7 (1991).</li><li>Seal, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sensorineural+deafness+and+seizures+in+mice+lacking+vesicular+glutamate+transporter+3.">Sensorineural deafness and seizures in mice lacking vesicular glutamate transporter 3.</a> Neuron. 57 (2), 263-275 (2008).</li></ol>

ब्याज की कोई संघर्ष की घोषणा की.

इस प्रक्रिया में महत्वपूर्ण कदम विच्छेदन है. यदि ऊतक या फैला विच्छेदन के दौरान क्षतिग्रस्त, अभिवाही फाइबर जीवित नहीं होगी. युवा चूहों से ऊतक अधिक लोचदार और क्षमा है. हम पाते हैं कि प्रसव के बाद दिन 10 से 11 के लिए काटना आसान कर रहे हैं और प्रयोगों उच्च सफलता दर है. कर्णावत परिपक्वता का एक महत्वपूर्ण डिग्री postnatally के लिए प्रसव के बाद दिन भर से 14 12 सुना शुरुआत चूहों के साथ होता है . इसलिए, उम्र में जहां विच्छेदन आसान है, synapses पूरी तरह परिपक्व नहीं हो 4 हो सकता है. चूहों के लिए यहाँ वर्णित विच्छेदन अनिवार्य रूप से चूहों, माउस कोक्लीअ के छोटे आकार के किया जा रहा है मुख्य अंतर के लिए एक ही है. इस तकनीक रिबन synapses के गुण transgenically संशोधित 15 चूहों में जांच करने के लिए अनुमति देता है. इस तकनीक के लिए इसके अलावा संशोधनों में शामिल हैं: लेबल 3 तंतुओं को intracellular समाधान के लिए एक फ्लोरोसेंट रंजक जोड़ने, presynaptic भीतर बाल सेल और postsynaptic अभिवाही bouton के साथ बनती रिकॉर्डिंग, की अनुमति पहले और बाद synaptic कोशिकाओं के बीच हस्तांतरण समारोह 2 निर्धारित किया और ढीली अभिवाही BOUTONS पर कोशिकी रिकॉर्डिंग मुहर सेलुलर अखंडता के नुकसान से बचने के लिए. कोशिकी रिकॉर्डिंग विन्यास पूरे सेल विन्यास की तुलना में आसान पाने के लिए है और प्रयोगों आम तौर पर कर रहे हैं लंबे समय तक टिकाऊ है.

ऊपर हमारे electrophysiological अभिवाही टर्मिनलों से रिकॉर्डिंग के लिए इस्तेमाल किया setups में उपकरणों की है.

postsynaptic recordings at afferent dendrites contacting cochlear inner hair cells: monitoring multivesicular release at a ribbon synapse

अभिवाही synapse भीतर बाल सेल (आईएचसी) और श्रवण तंत्रिका फाइबर के बीच एक एकल रिबन 1-4 synapse के postsynaptic गतिविधि की रिकॉर्डिंग के लिए एक electrophysiologically सुलभ साइट प्रदान करता है. संवेदी कोशिकाओं के रिबन synapses neurotransmitter लगातार रिहाई दर जो आईएचसी झिल्ली 5 संभावित में वर्गीकृत परिवर्तन के जवाब में modulated है. रिबन synapses multivesicular विज्ञप्ति जारी की, जहां एक साथ कई vesicles जारी किया जा सकता है amplitudes 1, 4, 6-11 बदलती के उत्तेजक postsynaptic धाराओं (EPSCs) पैदा द्वारा संचालित दिखाया गया है. न तो वर्तमान में presynaptic रिबन, और न ही multivesicular रिलीज अंतर्निहित तंत्र की भूमिका अच्छी तरह से समझ में आ रहा है. आईएचसी 10-20 श्रवण तंत्रिका फाइबर, और unmyelinated एक एकल रिबन synapse फार्म समाप्त एकल के साथ हर फाइबर आईएचसी संपर्कों द्वारा innervated है. अभिवाही BOUTONS संपर्क IHCs (व्यास में लगभग 1 सुक्ष्ममापी) के छोटे आकार असाधारण अस्थायी समाधान के साथ रिकॉर्डिंग करने के लिए सक्षम बनाता है बनाया जा. इसके अलावा, इस तकनीक दोनों पूर्व और postsynaptic कोशिकाओं से एक साथ, synapse में हस्तांतरण समारोह 2 सीधे अध्ययन करने के लिए रिकॉर्ड की अनुमति अनुकूलित किया जा सकता है. इसलिए इस पद्धति का एक साधन है जिसके द्वारा neurotransmission के मौलिक पहलुओं का अध्ययन किया जा सकता है प्रदान करता है multivesicular रिलीज से संवेदी कोशिकाओं में रिबन की मायावी समारोह.

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Postsynaptic Recordings at Afferent Dendrites Contacting Cochlear Inner Hair Cells: Monitoring Multivesicular Release at a Ribbon Synapse

भीतर स्तनधारी कोक्लीअ में बाल सेल रिबन synapse में श्रवण तंत्रिका फाइबर dendrites से पूरे सेल पैच दबाना रिकॉर्डिंग.

अभिवाही Dendrites cochlear इनर बालों की कोशिकाओं के संपर्क में postsynaptic रिकॉर्डिंग: एक रिबन Synapse पर निगरानी Multivesicular रिलीज

The afferent synapse between the inner hair cell (IHC) and the auditory nerve fiber provides an electrophysiologically accessible site for recording the ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Patch Clamp Recordings in Inner Ear Hair Cells Isolated from Zebrafish

Zebrafish भीतरी कान के बालों की कोशिकाओं में पैच दबाना रिकॉर्डिंग पृथक से

Patch  clamp analyses of the voltage-gated channels in sensory hair cells isolated  from a variety of species have been described previously1-4 but this  ...

Simultaneous Long-term Recordings at Two Neuronal Processing Stages in Behaving Honeybees

व्यवहार मधुमक्खियों में दो Neuronal चरणों प्रसंस्करण पर एक साथ लंबे समय तक रिकॉर्डिंग

In both mammals and insects neuronal information is processed in different higher and lower order brain centers. These centers are coupled via convergent ...

Acute Dissociation of Lamprey Reticulospinal Axons to Enable Recording from the Release Face Membrane of Individual Functional Presynaptic Terminals

एक प्रकार की मछली Reticulospinal axons की तीव्र हदबंदी व्यक्तिगत कार्यात्मक presynaptic टर्मिनलों की रिलीज अंकित झिल्ली से रिकॉर्डिंग सक्षम

Synaptic transmission is an extremely rapid process. Action potential driven influx of Ca2+&#160;into the presynaptic terminal, through voltage-gated ...

High-Resolution Quantitative Immunogold Analysis of Membrane Receptors at Retinal Ribbon Synapses

उच्च संकल्प मात्रात्मक immunogold झिल्ली रिसेप्टर्स के रेटिना रिबन synapses पर विश्लेषण

Retinal ganglion cells (RGCs) receive excitatory glutamatergic input from bipolar cells. Synaptic excitation of RGCs is mediated postsynaptically by NMDA ...

Combined Recording of Mechanically Stimulated Afferent Output and Nerve Terminal Labelling in Mouse Hair Follicle Lanceolate Endings

माउस बाल कूप भाले के आकार अंत में यंत्रवत् प्रेरित अभिवाही आउटपुट और तंत्रिका टर्मिनल लेबलिंग के संयुक्त रिकॉर्डिंग

A novel dissection and recording technique is described for monitoring afferent firing evoked by mechanical displacement of hairs in the mouse pinna. The ...

Electroconvulsive Seizures in Rats and Fractionation of Their Hippocampi to Examine Seizure-induced Changes in Postsynaptic Density Proteins

चूहों और उनके Hippocampi के अंश में Electroconvulsive बरामदगी Postsynaptic घनत्व प्रोटीन में जब्ती प्रेरित परिवर्तन की जांच करने के लिए

Electroconvulsive seizure (ECS) is an experimental animal model of electroconvulsive therapy, the most effective treatment for severe depression. ECS ...

FM Dye Cycling at the Synapse: Comparing High Potassium Depolarization, Electrical and Channelrhodopsin Stimulation

Synapse में एफएम डाई सायक्लिंग: उच्च पोटेशियम ध्रुवीकरण, बिजली और Channelrhodopsin उत्तेजना की तुलना

FM dyes are used to study the synaptic vesicle (SV) cycle. These amphipathic probes have a hydrophilic head and hydrophobic tail, making them ...

Ex Vivo Imaging of Cell-specific Calcium Signaling at the Tripartite Synapse of the Mouse Diaphragm

Ex Vivo Imaging of Cell-specific Calcium Signaling at the Tripartite Synapse of the Mouse Diaphragm

पूर्व वीवो सेल-विशिष्ट कैल्शियम के त्रिपक्षीय Synapse में सिग्नलिंग माउस डायाफ्राम की इमेजिंग

The electrical activity of cells in tissues can be monitored by electrophysiological techniques, but these are usually limited to the analysis of ...

Morphological and Functional Evaluation of Ribbon Synapses at Specific Frequency Regions of the Mouse Cochlea

माउस Cochlea के विशिष्ट आवृत्ति क्षेत्रों में रिबन Synapses के Morphological और कार्यात्मक मूल्यांकन

Cochlear inner hair cells (IHCs) transmit acoustic signals to spiral ganglion neurons (SGNs) through ribbon synapses. Several experimental studies have ...

A Plate-Based Assay for the Measurement of Endogenous Monoamine Release in Acute Brain Slices

तीव्र मस्तिष्क स्लाइस में अंतर्जात Monoamine रिलीज के माप के लिए एक प्लेट आधारित परख

Monoamine neurotransmitters are associated with numerous neurologic and psychiatric ailments. Animal models of such conditions have shown alterations in ...