Name: postsynaptic recordings at afferent dendrites contacting cochlear inner hair cells: monitoring multivesicular release at a ribbon synapse
Uploaded: 2011-02-10T16:00:00
Duration: 11 min 45 s
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この作品は、聴覚とバランスのためのセンター、ジョンズホプキンス大学にNIDCD DC005211でEGとするEYとNIDCD DC006476に聴覚障害研究財団研究助成金によってサポートされていました。アートワーク著作権ティムフェルプス、ジョンズホプキンス大学。 LGは、初期の原稿を書いた。EYとLGは、解剖やレコーディングを撮影した。すべての著者は模範の数字を提供し、原稿を書くことに貢献した。

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	<li>Glowatzki, E., Fuchs, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transmitter+release+at+the+hair+cell+ribbon+synapse.">Transmitter release at the hair cell ribbon synapse.</a> Nat Neurosci. 5 (2), 147-154 (2002).</li><li>Goutman, J. 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P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expression+of+a+potassium+current+in+inner+hair+cells+during+development+of+hearing+in+mice.">Expression of a potassium current in inner hair cells during development of hearing in mice.</a> Nature. 394 (6690), 281-284 (1998).</li><li>Muller, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Developmental+changes+of+frequency+representation+in+the+rat+cochlea.">Developmental changes of frequency representation in the rat cochlea.</a> Hear Res. 56 (1-2), 1-7 (1991).</li><li>Seal, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sensorineural+deafness+and+seizures+in+mice+lacking+vesicular+glutamate+transporter+3.">Sensorineural deafness and seizures in mice lacking vesicular glutamate transporter 3.</a> Neuron. 57 (2), 263-275 (2008).</li></ol>

利害の衝突は宣言されません。

この手順の重要なステップは解剖です。組織が伸びたり解剖中に損傷している場合は、求心性繊維は生きていけないでしょう。若いラットの組織は、より弾力的と寛容です。私たちは、生後日数が10〜11は解剖するのが最も簡単であり、実験では高い成功率を持っていることがわかります。蝸牛成熟の相当程度は、生後12日目に約14から聞いて始めてラットで、出生後に発生します。したがって、解剖が最も簡単です歳の時に、シナプスは4完全に成熟できない場合があります。 解剖したラットのためここで説明するには、基本的にマウスの蝸牛の小さいサイズで、主な違いは、マウスでも同じです。この手法は、リボンシナプスの性質が遺伝子導入改変マウス15に確認することができます。この手法にさらに修正が含まれています：ラベルの繊維3に細胞内液に蛍光色素を加えること;、前シナプス内有毛細胞とシナプス後求心性神経繊維末端での録音をペアの前と後シナプス細胞間の伝達関数は2を決定することが可能とルーズ細胞の完全性の損失を避けるために、求心性boutonsで細胞外記録を封印。細胞外記録の設定は、全細胞の構成より達成しやすくなりますし、実験は、一般的に長持ちです。

上記の求心端子からの録音に使用する私たちの電気生理学的な設定をしている機器です。

postsynaptic recordings at afferent dendrites contacting cochlear inner hair cells: monitoring multivesicular release at a ribbon synapse

内有毛細胞（IHC）と聴覚の神経線維の間の求心性シナプスでは、単一のリボンシナプス1-4のシナプス活動を記録するための電気生理学的にアクセス可能なサイトを提供しています。感覚細胞のリボンシナプスには、継続的にIHCの膜電位5の段階的変化に応答して変調される率を神経伝達物質を放出する。リボンシナプスは、複数の小胞が振幅1、4、6-11を変化させる興奮性シナプス後電流（EPSCs）を想起させる同時にリリースすることができる多胞体のリリースで動作することが示されている。シナプス前リボンの役割、また多胞体のリリースの根底にある機序は、現在よく理解されています。 IHCは、単一のリボンシナプスを形成するために終了する無髄単で10月20日聴覚の神経線維、およびすべての繊維の接触IHCによって神経支配されています。求心性boutons連絡IHCs（直径約1μm）の小さいサイズが行われる例外的な時間分解能での録音が可能になります。さらに、技術はシナプスでの伝達関数を直接2検討できるように、同時に両方の前とシナプス後細胞から記録するように適合させることができます。このメソッドは、したがって、多胞体のリリースからの感覚細胞のリボンのとらえどころのない機能に、神経伝達の基本的な側面を検討することができる手段を提供します。

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Postsynaptic Recordings at Afferent Dendrites Contacting Cochlear Inner Hair Cells: Monitoring Multivesicular Release at a Ribbon Synapse

哺乳類の蝸牛の内有毛細胞のリボンシナプスにおける聴覚神経線維の樹状突起からのホールセルパッチクランプ記録。

蝸牛内有毛細胞に接触求心性樹状突起でのシナプス後録音：リボンシナプスでのモニタリングの多胞体のリリース

The afferent synapse between the inner hair cell (IHC) and the auditory nerve fiber provides an electrophysiologically accessible site for recording the ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Patch Clamp Recordings in Inner Ear Hair Cells Isolated from Zebrafish

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ヤツメウナギ網様体軸索の急性解離は、個別の機能シナプス前終末のリリース顔膜から録音を有効にする方法

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FM dyes are used to study the synaptic vesicle (SV) cycle. These amphipathic probes have a hydrophilic head and hydrophobic tail, making them ...

Ex Vivo Imaging of Cell-specific Calcium Signaling at the Tripartite Synapse of the Mouse Diaphragm

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Ex Vivoセル固有カルシウム マウス ダイヤフラムの三者のシナプスでシグナル伝達のイメージング

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マウスコクレアの特定周波数領域におけるリボンシナプスの形態学的および機能的評価

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A Plate-Based Assay for the Measurement of Endogenous Monoamine Release in Acute Brain Slices

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