Name: establishing embryonic mouse neural stem cell culture using the neurosphere assay
Uploaded: 2011-01-11T20:10:00
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1. बेसिक विच्छेदन के लिए आगे बढ़ने से पहले सेट अप: <ol><li> पूरा एनएससी मध्यम की उपयुक्त मात्रा 09:01 के अनुपात में NeuroCult एनएससी बेसल मध्यम और NeuroCult एनएससी प्रसार पूरक मिश्रण, क्रमशः द्वारा तैयार की है. </li><li> मध्यम एक 37 ...

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	<li>Reynolds, B. A., Weiss, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+of+neurons+and+astrocytes+from+isolated+cells+of+the+adult+mammalian+central+nervous+system.">Generation of neurons and astrocytes from isolated cells of the adult mammalian central nervous system.</a> Science. 255, 1707-1710 (1992).</li><li>Morshead, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neural+stem+cells+in+the+adult+mammalian+forebrain:+a+relatively+quiescent+subpopulation+of+subependymal+cells.">Neural stem cells in the adult mammalian forebrain: a relatively quiescent subpopulation of subependymal cells.</a> Neuron. 13, 1071-1082 (1994).</li><li>Craig, C. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+growth+factor+expansion+of+endogenous+subependymal+neural+precursor+cell+populations+in+the+adult+mouse+brain.">In vivo growth factor expansion of endogenous subependymal neural precursor cell populations in the adult mouse brain.</a> J Neurosci. 16, 2649-2658 (1996).</li><li>Golmohammadi, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+analysis+of+the+frequency+and+distribution+of+stem+and+progenitor+cells+in+the+adult+mouse+brain.">Comparative analysis of the frequency and distribution of stem and progenitor cells in the adult mouse brain.</a> Stem Cells. 26, 979-987 (2008).</li><li>Azari, H., Rahman, M., Sharififar, S., BA, R. e. y. n. o. l. d. s. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+Expansion+of+the+Adult+Mouse+Neural+Stem+Cells+Using+the+Neurosphere+Assay.">Isolation and Expansion of the Adult Mouse Neural Stem Cells Using the Neurosphere Assay.</a> J Vis Exp. , (2010).</li><li>Reynolds, B. A., Rietze, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neural+stem+cells+and+neurospheres--re-evaluating+the+relationship.">Neural stem cells and neurospheres--re-evaluating the relationship.</a> Nat Methods. 2, 333-336 (2005).</li><li>Louis, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enumeration+of+neural+stem+and+progenitor+cells+in+the+neural+colony-forming+cell+assay.">Enumeration of neural stem and progenitor cells in the neural colony-forming cell assay.</a> Stem Cells. 26, 988-996 (2008).</li></ol>

neurosphere परख अलगाव और अपनी सादगी और reproducibility की वजह से तंत्रिका स्टेम कोशिकाओं 1-5 के विस्तार के लिए पसंद की विधि है. इस परख undifferentiated सीएनएस अग्रदूत साबित कोशिकाओं है, जो इन विट्रो में और vivo अध्ययन में दोन?...

* हेम बनाने के लिए, 1M HEPES के सदस्य and160ml की 110L पैकेट मिश्रण और 8.75 एल आसुत जल का उपयोग करने के लिए मात्रा लाने. 7.4 अंतिम पीएच सेट और यह 4 पर स्टोर डिग्री सेल्सियस

establishing embryonic mouse neural stem cell culture using the neurosphere assay

Mammalians में स्टेम कोशिकाओं undifferentiated कोशिकाओं के एक स्रोत के जानवर के जीवन काल के दौरान सेल और विभिन्न ऊतकों और अंगों में उत्पत्ति नवीकरण को बनाए रखने के रूप में कार्य करता है. वे संभवतः कोशिकाओं है कि उम्र बढ़ने की प्रक्रिया में या चोट और बीमारी की प्रक्रिया में खो रहे हैं जगह ले सकता है. तंत्रिका स्टेम सेल (एनएससी) के अस्तित्व में पहली बार वयस्क स्तनधारी केंद्रीय तंत्रिका तंत्र (CNS) प्रणाली के एक उपन्यास सीरम मुक्त संस्कृति प्रणाली, neurosphere परख (एनएसए) का उपयोग रेनॉल्ड्स और Weiss (1992) के द्वारा वर्णित किया गया था. इस परख का प्रयोग, यह भी है को अलग करने और भ्रूण सीएनएस के विभिन्न क्षेत्रों से एनएससी का विस्तार संभव है. इन विट्रो विस्तारित एनएससी में इन multipotent हैं और सीएनएस के तीन प्रमुख प्रकार की कोशिकाओं को जन्म दे सकते हैं. जबकि एनएसए अपेक्षाकृत प्रदर्शन करने के लिए आसान लगता है, यहाँ का प्रदर्शन प्रक्रियाओं को ध्यान क्रम में विश्वसनीय और संगत परिणामों को प्राप्त करने के लिए आवश्यक है. इस वीडियो को व्यावहारिक एनएसए उत्पन्न करने के लिए और भ्रूण दिन से एनएससी का विस्तार 14-माउस मस्तिष्क के ऊतकों को दर्शाता है और तकनीकी जानकारी प्रदान करता है तो एक प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य neurosphere संस्कृतियों प्राप्त कर सकते हैं. प्रक्रिया E14 माउस भ्रूण, मस्तिष्क microdissection कटाई फसल ganglionic एनएससी माध्यम से काटा ऊतक के eminences पृथक्करण के लिए एक एकल कक्ष निलंबन लाभ, और अंत में एनएसए संस्कृति में कोशिकाओं चढ़ाना भी शामिल है. संस्कृति में 5-7 दिनों के बाद, जिसके परिणामस्वरूप प्राथमिक neurospheres आगे भविष्य प्रयोगों के लिए एनएससी की संख्या का विस्तार करने के लिए passaged हैं.

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Establishing Embryonic Mouse Neural Stem Cell Culture Using the Neurosphere Assay

यह वीडियो neurosphere परख के अलगाव और भ्रूण 14 माउस मस्तिष्क दिन के ganglionic eminences से तंत्रिका स्टेम कोशिकाओं के विस्तार के लिए आवेदन प्रोटोकॉल को दर्शाता है.

भ्रूण माउस तंत्रिका स्टेम सेल संस्कृति की स्थापना Neurosphere परख का उपयोग

In mammalians, stem cells acts as a source of undifferentiated cells to maintain cell genesis and renewal in different tissues and organs during the life ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Dissection and Culture of Commissural Neurons from Embryonic Spinal Cord

विच्छेदन और भ्रूणीय स्पाइनल कॉर्ड से Commissural न्यूरॉन्स की संस्कृति

Commissural neurons have been widely used to investigate the mechanisms underlying axon guidance during embryonic spinal cord development. The cell bodies ...

Isolation and Expansion of the Adult Mouse Neural Stem Cells Using the Neurosphere Assay

अलगाव और वयस्क माउस तंत्रिका स्टेम सेल के विस्तार Neurosphere परख का उपयोग

Isolation and expansion of the putative neural stem cells (NSCs) from the adult murine brain was first described by Reynolds and Weiss in 1992 employing a ...

Localizing Protein in 3D Neural Stem Cell Culture: a Hybrid Visualization Methodology

3D तंत्रिका स्टेम सेल संस्कृति में localizing प्रोटीन: एक हाइब्रिड विज़ुअलाइज़ेशन पद्धति

The importance of 3-dimensional (3D) topography in influencing neural stem and progenitor cell (NPC) phenotype is widely acknowledged yet challenging to ...

Neural-Colony Forming Cell Assay: An Assay To Discriminate Bona Fide Neural Stem Cells from Neural Progenitor Cells

सेल परख बनाने तंत्रिका कालोनी: एक सदाशयी तंत्रिका पूर्वपुस्र्ष कोशिकाओं से तंत्रिका स्टेम सेल भेदभाव की परख

The neurosphere assay (NSA) is one of the most frequently used methods to isolate, expand and also calculate the frequency of neural stem cells (NSCs). ...

Surgical Transplantation of Mouse Neural Stem Cells into the Spinal Cords of Mice Infected with Neurotropic Mouse Hepatitis Virus

Neurotropic माउस हेपेटाइटिस वायरस से संक्रमित चूहों की रीढ़ की हड्डी डोरियों में माउस तंत्रिका स्टेम सेल के प्रत्यारोपण शल्य चिकित्सा

Mice infected with the neurotropic JHM strain of mouse hepatitis virus (MHV) develop pathological and clinical outcomes similar to patients with the ...

The Neuroblast Assay: An Assay for the Generation and Enrichment of Neuronal Progenitor Cells from Differentiating Neural Stem Cell Progeny Using Flow Cytometry

Neuroblast परख: पीढ़ी और neuronal पूर्वपुस्र्ष कोशिकाओं का संवर्धन फर्क तंत्रिका स्टेम सेल संतान से फ्लो का प्रयोग के लिए एक परख

Neural stem cells (NSCs) can be isolated and expanded in large-scale, using the neurosphere assay and differentiated into the three major cell types of ...

Isolation and Culture of Rat Embryonic Neural Cells: A Quick Protocol

अलगाव और चूहा भ्रूण तंत्रिका कोशिकाओं की संस्कृति: एक त्वरित प्रोटोकॉल

We are describing a quick method to dissociate and culture hippocampal or cortical neurons from E15-17 rat embryos. The procedure can be applied ...

Isolation and Culture of Neural Crest Cells from Embryonic Murine Neural Tube

अलगाव और भ्रूण murine तंत्रिका ट्यूब से तंत्रिका शिखा कोशिकाओं की संस्कृति

The embryonic neural crest (NC) is a multipotent progenitor population that originates at the dorsal aspect of the neural tube, undergoes an epithelial to ...

Quantitative Measurement of Relative Retinoic Acid Levels in E8.5 Embryos and Neurosphere Cultures Using the F9 RARE-Lacz Cell-based Reporter Assay

E8.5 भ्रूण और neurosphere संस्कृतियों में सापेक्ष retinoic एसिड स्तर के मात्रात्मक मापन F9 दुर्लभ lacZ सेल आधारित रिपोर्टर परख का उपयोग

Retinoic acid (RA) is an important developmental morphogen that coordinates anteroposterior and dorsoventral axis patterning, somitic differentiation, ...

Enumeration of Neural Stem Cells Using Clonal Assays

तंत्रिका स्टेम कोशिकाओं के गणन क्लोनल assays का उपयोग

Neural stem cells (NSCs) have the ability to self-renew and generate the three major neural lineages &#8212; astrocytes, neurons and oligodendrocytes. ...