Name: quantification of dsdna using the hitachi f-7000 fluorescence spectrophotometer and picogreen dye
Uploaded: 2010-11-05T17:00:00
Duration: 7 min 44 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Quantification of dsDNA using the Hitachi F-7000 Fluorescence Spectrophotometer and PicoGreen Dye at JoVE.com

1. إعداد صك <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بدوره على مقياس التألق الطيفي والسماح لالاحماء لمدة 1 ساعة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> باستخدام Excel إنشاء ملف مع المعايير ونموذج البيانات ، كما هو مبين في الشكل (1) وحفظه في قيم مفصولة بفواصل &quot;CSV&quot; تنسيق. <img src="/files/ftp_upload/2465/2465fig1.jpg" alt="الشكل 1" /> الشكل 1. المعايير وبيانات العينات. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعداد مقياس التألق على النحو التالي : <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> انقر على <img src="/files/ftp_upload/2465/2465icon1.jpg" alt="رمز 1" /> زر ، وهذا فتح نافذة أسلوب التحليل ، كما هو موضح في الشكل رقم 2. <img src="/files/ftp_upload/2465/2465fig2.jpg" alt="الشكل 2" /> الشكل 2. نافذة تحليل الأسلوب ، التبويب عام. بإجراء التحديدات التالية : <ul style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في الميدان &quot;القياس&quot; ، حدد قياس الشدة الضوئية من سحب أسفل القائمة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في الحقل &quot;المشغل&quot; ، أدخل اسم المشغل المناسبة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ليست هناك حاجة لإدخال المعلومات في هذا المجال &quot;الصك&quot;. يتم تحديد هذا تلقائيا بواسطة البرنامج. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في &quot;المعاينة&quot; حقل غير نشط عند استخدام قارئ microplate. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إدخال أية تعليقات التي قد تريد تضمينها في التقرير في هذا المجال &quot;تعليقات&quot;. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في الميدان &quot;ملحقة&quot; ، أدخل المعلومات المتعلقة الملحقات المستخدمة في هذا الاختبار. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لاحظ الأزرار على الجانب الأيمن من النافذة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> &quot;تحميل&quot; الزر يتيح تحميل أساليب التحليل التي تم حفظها سابقا. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> &quot;حفظ&quot; زر يسمح بتحديث مجموعة من المعلمات اختبار أو الطريقة التي تم حفظها سابقا التحليل وتحميلها ، وذلك باستخدام نفس الاسم. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> &quot;حفظ باسم&quot; الزر يتيح توفير مجموعة جديدة من المعلمات اختبار أو أسلوب التحليل تحت الاسم المطلوب. </li></ul> الآن انقر فوق علامة التبويب &quot;الكميات&quot; ، انظر الشكل رقم 3 وجعل التحديدات التالية. <img src="/files/ftp_upload/2465/2465fig3.jpg" alt="الشكل 3" /> الشكل 3. نافذة تحليل الأسلوب ، التبويب الكميات. <ul style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في الميدان &quot;الكميات نوع&quot; ، حدد الطول الموجي. يشير هذا وسوف تتاح القراءة مضان باستخدام الطول الموجي المحدد. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في الميدان &quot;معايرة نوع&quot; ، حدد 1 ترتيب الحادي والعشرين. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في الحقل &quot;عدد من موجات&quot; ، حدد 1. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في الميدان &quot;تركيز وحدة&quot; ، أدخل نانوغرام / مل. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إجازة غير محددة خانات &quot;لمعايرة يدوي&quot; و &quot;القوة من خلال منحنى الصفر&quot;. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في &quot;الأرقام العشرية بعد نقطة&quot; الحقل ، حدد 2. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في الميدان &quot;السفلى تركيز الحد&quot; ، أدخل 0. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في &quot;أعالي تركيز مجال الحد ، أدخل 10000. </li></ul> الآن انقر على علامة التبويب &quot;الصك&quot; وجعل التحديدات التالية. <img src="/files/ftp_upload/2465/2465fig4.jpg" alt="الشكل 4" /> الشكل 4. تحليل أسلوب النافذة ، التبويب الصك <ul style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في &quot;وضع البيانات :&quot; حقل ، حدد الإسفار. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> &quot;سرعة التقطيع&quot; حقل غير نشط في هذا الوقت ، يتم استخدامه فقط لقياس تفسفر. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في الميدان &quot;الموجي النمط&quot; ، حدد كلا WL الثابتة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في الميدان &quot;EX / WL1&quot; دخول 480nm. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في &quot;EM / WL1&quot; حقل إدخال 520nm. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> كافة الحقول الأخرى بموجب EX وEM غير نشطة في هذا الوقت. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في &quot;شق EX&quot; حقل حدد 5.0nm سحب من أسفل القائمة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في &quot;شق EM&quot; حقل حدد 5.0nm سحب من أسفل القائمة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إجازة غير محددة المربع أمام &quot;الجهد PMT 1 - 1000V&quot; الميدان. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في &quot;PMT الجهد&quot; الحقل ، حدد 700V سحب من أسفل القائمة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في &quot;كالك سيارات الإحصائية. رقم&quot; حقل حدد 2. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في مجال &quot;يعيد&quot; حدد 1. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في الميدان &quot;تكامل الوقت&quot; حدد 0.1s &lt;/ لى&gt; <li style=";text-align:right;direction:rtl"> في الحقل &quot;تأخير&quot; أو تحديد دخول 0s. </li></ul> انقر فوق علامة التبويب &quot;مراقب&quot;. <img src="/files/ftp_upload/2465/2465fig5.jpg" alt="الشكل 5" /> الشكل 5. تحليل أسلوب النافذة ، التبويب مراقب. <ul style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في &quot;محور Y&quot; ، &quot;الحد الأقصى :&quot; حقل ، حدد 10000 </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في &quot;محور Y&quot; ، &quot;الحد الأدنى :&quot; حقل ، حدد 0. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حدد المربع الموجود على يسار &quot;فتح تجهيز البيانات بعد الحصول على البيانات&quot;. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إجازة غير محددة المربع الموجود على يسار &quot;طباعة التقرير بعد الحصول على البيانات&quot; ، إلا إذا كنت تريد التقرير المراد طباعتها تلقائيا بعد الانتهاء من القراءات. </li></ul> انقر فوق علامة التبويب &quot;تقرير&quot; ، انظر الشكل 6. <img src="/files/ftp_upload/2465/2465fig6.jpg" alt="الشكل 6" /> الشكل 6. تحليل أسلوب النافذة ، تبويب التقرير. <ul style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في الميدان &quot;إخراج&quot; ، حدد تقرير طباعة من القائمة المنسدلة. هل يمكن أيضا تحديد &quot;استخدام تعليمات Microsoft Excel&quot; إذا كنت تريد أن البيانات التي تم تصديرها إلى Excel ، أو &quot;مولد طباعة ورقة استخدام&quot; في حالة استخدام الوظيفة اختياري على مولد تقرير البرنامج الذي سيسمح توليد مخصص التقارير المقدمة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> انقر فوق خانات للعناصر التي تريد إدراجها في التقرير. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لحفظ جميع المعلمات في تحديد علامات تبويب مختلفة من النافذة &quot;تحليل أسلوب&quot; ، انقر مرة أخرى على علامة التبويب &quot;عام&quot; وحفظها تحت اسم ملف ومكان حيث يمكن العثور عليها لاستخدامها في المستقبل ، وانقر على &quot; موافق &quot;الزر لإغلاق هذه النافذة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> هذا اكتمال إعداد المعلمات اختبار الصك. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الآن سنقوم بإعداد microplate القارئ. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> انقر على <img src="/files/ftp_upload/2465/2465icon2.jpg" alt="رمز 2" /> زر ، والذي سيجلب إطار الإعداد MPR على القمة. </li></ul> حدد آبار للمواصفات والعينات في إطار التبويب MPR / اللوحة الإعداد ، كما هو مبين في الشكل 7. <img src="/files/ftp_upload/2465/2465fig7.jpg" alt="الشكل 7" /> الشكل 7. MPR إطار الإعداد ، التبويب اللوحة. <ul style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> انقر على موقف A1 واسحب الماوس لE1 ، ثم انقر على <img src="/files/ftp_upload/2465/2465icon3.jpg" alt="رمز 3" /> الزر. وهذا اختيار المواقف التي ستستخدم لهذه المعايير. وسيتم تسليط الضوء تلك المواقف في اللون الأخضر. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الآن نحن بحاجة لتحديد المواقف F1 لH3 للعينات. انقر واسحب الماوس بدءا F1 في الموقف ، لوضع H3 ثم انقر على <img src="/files/ftp_upload/2465/2465icon4.jpg" alt="رمز 4" /> زر ، وتسليط الضوء على هذا تلك المواقف في اللون الأصفر. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ثم كرر العملية نفسها للمناصب لE3 A2 ، لتحديد تلك المواقف لقياسات العينات. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الآن ، دعونا تحميل ملف الفاصلة المفصولة متغير (CSV) ملف معدة مسبقا مع المعايير والمعلومات نموذج. </li></ul> انقر على &quot;حسنا المعلومات&quot; التبويب &quot;نافذة الإعداد MPR&quot; ، كما هو مبين في الشكل 8. <img src="/files/ftp_upload/2465/2465fig8.jpg" alt="الشكل 8" /> الشكل 8. MPR إطار الإعداد ، حسنا التبويب معلومات. <ul style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ثم انقر على <img src="/files/ftp_upload/2465/2465icon5.jpg" alt="رمز 5" /> الزر. وهناك نافذة مفتوحة ويندوز اكسبلورر الذي كما هو مبين في الشكل 9 ، الأمر الذي سيتيح تحديد مكان وجود &quot;حسنا information.csv&quot; ملف وتحميله. <img src="/files/ftp_upload/2465/2465fig9.jpg" alt="الشكل 9" /> الرقم 9. كذلك تحميل معلومات العينة. بعد تحميل &quot;حسنا معلومات&quot; الملف ، فإن &quot;المعلومات حسنا&quot; تبدو كما هو مبين في الشكل 10 <img src="/files/ftp_upload/2465/2465fig10.jpg" alt="الرقم 10" /> الرقم 10. تحميل معلومات العينة جيدا. </li></ul></li></ol></li></ol> 2. Picogreen تحضير عينة الفحص <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعداد 1X TE العازلة (10 ملي تريس ، حمض الهيدروكلوريك ، 1 ملم EDTA) وذلك بإضافة 1 مل من 20 العازلة TE Xإلى 19 مل دي H 2 O. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تحضير محلول الكاشف PicoGreen بإضافة 50 ميكرولتر 200 الكاشف PicoGreen X ل9.95 مل 1 العازلة TE X. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعداد معايير (لامدا dsDNA) بجعل التخفيفات المتسلسلة لdsDNA الأسهم (100 ميكروغرام / مل). إعداد أول حل من 50 ميكروغرام / مل dsDNA بإضافة 25 ميكرولتر من dsDNA الأسهم (100 ميكروغرام / مل) و 25 ميكرولتر 1 العازلة TE س. ثم تعد الحلول القياسية من خلال إضافة وحدات التخزين من dsDNA وأشار العازلة كما هو موضح في الجدول أدناه : <table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> تركيز dsDNA </td><td> حجم dsDNA </td><td> حجم الاحتياطي </td></tr><tr><td> 1 ميكروغرام / مل </td><td> 20 ميكرولتر من 50 ميكروغرام / مل dsDNA </td><td> 980 ميكرولتر 1 X TE العازلة </td></tr><tr><td> 0،1 ميكروغرام / مل </td><td> 100 ميكرولتر من 1 ميكروغرام / مل dsDNA </td><td> 900 ميكرولتر 1 X TE العازلة </td></tr><tr><td> 0.01 ميكروغرام / مل </td><td> 100 ميكرولتر من 0،1 ميكروغرام / مل dsDNA </td><td> 900 ميكرولتر 1 X TE العازلة </td></tr><tr><td> 0،001 ميكروغرام / مل </td><td> 100 ميكرولتر من 0.01 ميكروغرام / مل dsDNA </td><td> 900 ميكرولتر 1 X TE العازلة </td></tr></tbody></table></li></ol> 3. قياس المعايير والإسفار نموذج <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ماصة 150 ميكرولتر من كل معيار في آبار A1 - E1 من 96 لوحة جيدا ، في الشكل 7 ، وفقا للجدول التالي : <table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> جيد </td><td> معيار </td></tr><tr><td> A1 </td><td> 1 ميكروغرام / مل </td></tr><tr><td> B1 </td><td> 0،1 ميكروغرام / مل </td></tr><tr><td> C1 </td><td> 0.01 ميكروغرام / مل </td></tr><tr><td> D1 </td><td> 0،001 ميكروغرام / مل </td></tr><tr><td> E1 </td><td> 1 X TE العازلة </td></tr></tbody></table></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ماصة 150 عينات غير معروفة في ميكرولتر F1 الآبار لH3 ، كما هو موضح في الشكل 7 </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> من أجل حل PicoGreen أعدت في الخطوة 1.2 في حوض مصمم للاستخدام ماصة متعدد القنوات. استخدام ماصة متعدد القنوات لتقديم حل PicoGreen 150 ميكرولتر من الآبار A1 - H3. حل المزيج بلطف مع المعايير وماصة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لوحة في مكان مظلم ومنطقة الانتظار 2-5 دقائق للرد على تطوير. </li></ol> 4. ممثل النتائج يتم تقييم منحنى المعايرة جيدة باستخدام معلمات مختلفة يقدمها البرنامج F - 7000 على قياس المعايير وحساب منحنى المعايرة بواسطة البرنامج. معامل تقرير يشير الى الخير من يصلح لمعايير قياس والمعايرة منحنى المحسوبة. وهذه القيمة هي أقرب إلى &quot;1&quot; ، وأفضل تناسب قيمة قياس والمعايرة منحنى. إذا كانت القيمة هي أبعد ما تكون عن &quot;1&quot; ، لا بد من اعادة قياس المعايير ، التي أعدت مرة أخرى ، أو تغيير اللياقة البدنية للمنحنى المعايرة. ويبين الشكل 11 مثال على منحنى المعايرة مع احتساب معامل عزم = 0.99993 ، وحصل على تقدير من dsDNA باستخدام PicoGreen صباغة. <img src="/files/ftp_upload/2465/2465fig11.jpg" alt="الرقم 11" /> الرقم 11. مثال على منحنى المعايرة dsDNA.

<ol>
	<li>Singer, V. L., Jones, L. J., Yue, S. T., Haugland, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+PicoGreen+reagent+and+development+of+a+fluorescence-based+solution+assay+for+double-stranded+DNA+quantitation.">Characterization of PicoGreen reagent and development of a fluorescence-based solution assay for double-stranded DNA quantitation.</a> Analytical Biochemistry. 249 (2), 228-238 (1997).</li></ol>

ويعمل لويس مورينو ألف ولام كوكس كندرا تكنولوجيز التي كتبها هيتاشي أمريكا السامية التي تنتج الأداة المستخدمة في هذه المقالة.

pipetting الحذر أثناء إعداد العينات ، وكذلك باستخدام معمل مستقرة وحساسة مضان ضروري للحصول على نتائج جيدة وقابلة للتكرار. في قضية معمل مضان يستخدم لهذا الاختبار ، يقترح استخدام 300 ميكرولتر حجم العينة النهائية في القارئ microplate. انخفاض حجم يقلل من الحساسية ، وزيادة حجمها قد يسبب التلوث المتبادل بين الآبار.

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Distilled H2O</td>
<td>Reagent</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Quant-iT Picogreen dsDNA Assay Kit from Invitrogen</td>
<td>Reagent</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>P7589</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Nalge Nunc Fluorescence Microplates p/n 237108</td>
<td>Supply</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>237108</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>12 Channel Eppendorf Micropipette</td>
<td>Supply</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>3516677</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>1000 &mu;L Eppendorf Pipette</td>
<td>Supply</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>200 &mu;L Eppendorf Pipette </td>
<td>Supply</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>10 mL serological pipet</td>
<td>Supply</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Aluminum foil</td>
<td>Supply</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Pipette tips</td>
<td>Supply</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Hitachi F-7000 Fluorescence Spectrophotometer with FL Solutions 2.1</td>
<td>Equipment</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>5J1-0003</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Microplate Reader Accessory for F-7000</td>
<td>Equipment</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>5J0-0139</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

quantification of dsdna using the hitachi f-7000 fluorescence spectrophotometer and picogreen dye

الكمي من الحمض النووي ، وخصوصا في تجمعات صغيرة ومهمة هامة مع مجموعة واسعة من التطبيقات بما في ذلك المعايير البيولوجية المقايسات البيولوجيا الجزيئية مثل تجميع وتنقية من الحمض النووي ، والتطبيقات التشخيصية مثل الكمي للمنتجات تضخيم الحمض النووي ، والكشف عن جزيئات الحمض النووي في قضايا المخدرات التحضيرات. خلال هذا الفيديو سوف نظهر قدرة الطيف هيتاشي F - 7000 الإسفار مجهزة التبعي بلايت القارئ الصغير لأداء dsDNA الكمي باستخدام المسابر الجزيئية كوانت ، أنه كاشف صبغ PicoGreen عدة. في الطيف F - 7000 الإسفار عروض حساسية عالية وقياسات سرعة عالية. وهو نظام مرن للغاية قادرة على قياس مضان ، التألق ، وتفسفر. طرق قياس عدة متاحة ، بما في ذلك فحص الطول الموجي والمسح الضوئي الوقت ، وقياس الضوء وقياس 3 - D الفحص. معمل لديه حساسية في مجموعة من 50 من picomoles فلوريسئين عند استخدام حجم العينة 300 ميكرولتر في microplate ، وقادر على قياس سرعة فحص 60000 نانومتر / دقيقة. كما أن لديها مجموعة واسعة ديناميكية تصل إلى 5 أوامر من حجمها والذي يسمح لاستخدام منحنيات المعايرة على طائفة واسعة من التركيزات. نظام بصري يستخدم كل البصريات الانعكاسية للطاقة القصوى والحساسية. النطاق الموجي هو معيار 200-750 نانومتر ، ويمكن أن تمتد إلى 900 نانومتر عند استخدام واحدة من photomultipliers اختياري الأشعة تحت الحمراء القريب. ويسمح نظام التحكم في درجة الحرارة اختياري للقارئ لوحة 5-60 درجة مئوية درجة الحرارة باستخدام اختياري للرقابة الخارجية دائري السائل. القارئ microplate يسمح للاستخدام من 96 microplates جيدا ، وقياس سرعة لمدة 96 بئرا أقل من 60 ثانية عند استخدام النمط حركية. ضوابط البرمجيات لF - 7000 ، وقارئ Microplate أيضا درجة عالية من المرونة. قد يتم تعيين العينات في عمود أو صف الأشكال سواء ، ويمكن اختيار أي مجموعة من الآبار للحصول على قياسات العينات. وهذا يسمح للاستخدام الأمثل للmicroplate. بالإضافة إلى ذلك ، يسمح برنامج استيراد التكوينات الدقيقة لوحة عينة التي تم إنشاؤها في Excel وحفظها في قيم مفصولة بفواصل ، أو &quot;CSV&quot; تنسيق. يمكن حفظ تكوينات Microplate قياس وأشار من قبل البرنامج للحصول على الراحة وزيادة الإنتاجية. يمكن أن يكون الناتج نتائج البيانات لتقرير القياسية ، إلى Excel ، أو إلى تقرير برنامج مولد اختيارية.

Watch this Scientific Journal Video about Quantification of dsDNA using the Hitachi F-7000 Fluorescence Spectrophotometer and PicoGreen Dye at JoVE.com

Quantification of dsDNA using the Hitachi F-7000 Fluorescence Spectrophotometer and PicoGreen Dye

مظاهرة الكمي للdsDNA باستخدام المسابر الجزيئية PicoGreen صبغ وهيتاشي الطيف الإسفار F - 7000 مجهزة التبعي microplate القارئ.

الكمي للdsDNA باستخدام F - 7000 هيتاشي الإسفار الطيف وصبغ PicoGreen

Quantification of DNA, especially in small concentrations, is an important task with a wide range of biological applications including standard molecular ...

Research

JoVE Journal

Biology

Microvolume Protein Concentration Determination using the NanoDrop 2000c Spectrophotometer

Microvolume تحديد تركيز البروتين باستخدام 2000c NanoDrop الطيف

Traditional spectrophotometry requires placing samples into cuvettes or capillaries. This is often impractical due to the limited sample volumes often ...

Time-lapse Imaging of Mitosis After siRNA Transfection

الوقت الفاصل بين التصوير من الانقسام الميتوزي بعد ترنسفكأيشن سيرنا

Changes in cellular organization and chromosome dynamics that occur during mitosis are tightly coordinated to ensure accurate inheritance of genomic and ...

Quantification of &gamma;H2AX Foci in Response to Ionising Radiation

Quantification of ÃƒÅ½Ã‚Â³H2AX Foci in Response to Ionising Radiation

الكمي بؤر γH2AX في الاستجابة للإشعاع المؤين

DNA double-strand breaks (DSBs), which are induced by either endogenous metabolic processes or by exogenous sources, are one of the most critical DNA ...

Concentration Determination of Nucleic Acids and Proteins Using the Micro-volume Bio-spec Nano Spectrophotometer

تعيين تركيز الأحماض النووية والبروتينات باستخدام الصغرى ، حجم الطيف نانو بيو المواصفات

Nucleic Acid quantitation procedures have advanced significantly in the last three decades.  More and more, molecular biologists require consistent ...

Absolute Quantum Yield Measurement of Powder Samples

مطلق قياس العائد الكم من عينات مسحوق

Measurement of fluorescence quantum yield has become an important tool in the search for new solutions in the development, evaluation, quality control and ...

Visualization of Caenorhabditis elegans Cuticular Structures Using the Lipophilic Vital Dye DiI

Visualization of Caenorhabditis elegans Cuticular Structures Using the Lipophilic Vital Dye DiI

تصور انواع معينة ايليجانس</emالهياكل البشرة> استخدام الصبغة الحيوية محبة للدهون ، صلاح الغيدان

The cuticle of C. elegans is a highly resistant structure that surrounds the exterior of the animal1-4. The cuticle not only protects the animal from the ...

Visualization and Analysis of mRNA Molecules Using Fluorescence In Situ Hybridization in Saccharomyces cerevisiae

Visualization and Analysis of mRNA Molecules Using Fluorescence In Situ Hybridization in Saccharomyces cerevisiae

التصور والتحليل من جزيئات الرنا المرسال عن طريق الإسفار<em&gt; في الموضع</em&gt; التهجين في<em&gt; خميرة الخباز</em

The Fluorescence in situ Hybridization (FISH) method allows one to detect nucleic acids in the native cellular environment. Here we provide a protocol for ...

Observation and Quantification of Telomere and Repetitive Sequences Using Fluorescence In Situ Hybridization (FISH) with PNA Probes in Caenorhabditis elegans

Observation and Quantification of Telomere and Repetitive Sequences Using Fluorescence In Situ Hybridization FISH with PNA Probes in Caenorhabditis elegans

المراقبة والكمي لالتيلومير وتسلسل المتكررة عن طريق الإسفار<em&gt; في الموقع</em&gt; التهجين (FISH) مع السلطة الوطنية الفلسطينية تحقيقات في<em&gt; انواع معينة ايليجانس</em

Telomere is a ribonucleoprotein structure that protects chromosomal ends from aberrant fusion and degradation. Telomere length is maintained by telomerase ...

Visualization and Quantification of Mesenchymal Cell Adipogenic Differentiation Potential with a Lineage Specific Marker

والتصور والتقدير الكمي للخلايا الوسيطة أديبوجينيك التمايز المحتملة مع علامة نسب المحددة

Several dyes are currently available for use in detecting differentiation of mesenchymal cells into adipocytes. Dyes, such as Oil Red O, are cheap, easy ...

Visualization and Quantification of Brown and Beige Adipose Tissues in Mice using [18F]FDG Micro-PET/MR Imaging

Visualization and Quantification of Brown and Beige Adipose Tissues in Mice using [18F]FDG Micro-PET/MR Imaging

التصور والقياس الكمي للأنسجة الدهنية البنية والبيج في الفئران باستخدام [18F] FDG Micro-PET / MR التصوير

Brown and beige adipocytes are now recognized as potential therapeutic targets for obesity and metabolic syndromes. Non-invasive molecular imaging methods ...