Name: whole cell recordings from brain of adult drosophila
Uploaded: 2007-07-29T00:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Whole Cell Recordings from Brain of Adult Drosophila at JoVE.com

<p> Dit werk werd ondersteund door een NIH subsidie ​​NS27501 naar DKOD. Extra ondersteuning voor dit werk werd geleverd door een HHMI professor Grant Program voor DKOD. </p>

<p class="jove_step"> I. dissectie van hersenen van volwassen vliegen </p><ol><li> Plaats een kleine druppel (~ 100 ul) van het ontleden van oplossing in het midden van een 35 mm petrischaal. </li><li> Catch volwassen vrouwelijke gebruik aspirator. Onder dissectiemicroscoop, gebruik maken van twee injectienaalden met de vlieg onthoofden. </li><li> Plaats het hoofd in een kleine daling van het ontleden van zout (met papaïne toegevoegd) in een petrischaal. </li><li> Positie van hoofd met de slurf naar bodem van de schaal. </li><li> Houd de cutic...

<ol>
	<li>Gu, H., O Dowd, D. K., K, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cholinergic+synaptic+transmission+in+Adult+Drosophila+Kenyon+cells+in+situ.">Cholinergic synaptic transmission in Adult Drosophila Kenyon cells in situ.</a> <em style='font-style: italic'>Journal of Neuroscience</em>. <b>26</b>, 265-272 (2006).</li><li>Wilson, R. I., Turner, G. C., Laurent, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transformation+of+olfactory+representations+in+the+Drosophila+antennal+lobe.">Transformation of olfactory representations in the Drosophila antennal lobe.</a> <em style='font-style: italic'>Science</em>. <b>303</b>, 366-370 (2004).</li></ol>

<p> De geïsoleerde hele brein voorbereiding illustreren we in deze video laat de beoordeling van cellulaire mechanismen die ten grondslag liggen prikkelbaarheid en synaptische transmissie in geïdentificeerde neuronen, inclusief die in de olfactorische verwerking paden, in de volwassen Drosophila hersenen (Gu en O Dowd, 2006). Deze aanpak is complementair aan van de neuronale activiteit studie in de hersenen van intacte volwassen Drosophila (Wilson et al 2004), in vrijwel dezelfde manier opnamen van neuronen in een plakje hersenen van zoogdier...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>#5 Foceps</td>
<td>Tool</td>
<td>FST by DUMONT</td>
<td>No. 11251-10 </td>
<td>Be careful, never damage the fine tips of forceps</td>
</tr>
<tr>
<td>Papain</td>
<td>Reagent</td>
<td>Worthington</td>
<td>3126</td>
<td>20 U/ml activated by 1 mM L-cysteine</td>
</tr>
<tr>
<td>Dissecting microscope</td>
<td>SMZ-2B Model:C-PS</td>
<td>Nikon</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Equipped with gooseneck fiber optic lights positioned a low angle</td>
</tr>
<tr>
<td>Needle & Syringe </td>
<td>&nbsp;</td>
<td>PrecisionGlide&#174;?, Becton Dickinson & Co </td>
<td>305175 & 309602</td>
<td>Cheap and durable</td>
</tr>
<tr>
<td>Upright microscope</td>
<td>Axioskop2 FS plus</td>
<td>Zeiss</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Equipped with a fixed stage, 40X water immersion objective, Nomarski optics, and fluorescent lamp</td>
</tr>
<tr>
<td>Patch clamp amplifier</td>
<td>200 B</td>
<td>Molecular device</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Digidata  D-A converter </td>
<td>1322A</td>
<td>Molecular device</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>
			<div>
					</div>
		

whole cell recordings from brain of adult drosophila

<p class="jove_content">In deze video, tonen we de procedure voor het isoleren van hele hersenen van volwassen Drosophila als voorbereiding voor het opnemen van enkele neuronen. We beginnen met het beschrijven van de oplossing ontleden en inname van de volwassen vrouwtjes in onze studies. De procedure voor het verwijderen van de hele hersenen intact, met inbegrip van zowel optische kwabben, wordt geïllustreerd. Dissectie van de bovenliggende trachea wordt ook getoond. De geïsoleerde brein is niet alleen klein, maar heeft speciale zorg in de behandeling in dit stadium om schade aan de neuronen te voorkomen, waarvan vele zich dicht bij de buitenkant van het weefsel. We laten zien hoe een speciale houder ontwikkeld wordt gebruikt om de hersenen in de opname kamer te stabiliseren. Een standaard elektrofysiologie opgezet wordt gebruikt voor het opnemen van enkele neuronen of paren van neuronen. Een TL-beeld, gezien door de opname microscoop, uit een GAL4 lijn rijden GFP-expressie (GH146) illustreert hoe projectie neuronen (PNS) worden geïdentificeerd in de live hersenen. Een hoog vermogen Nomarski beeld toont een weergave van een enkel neuron die wordt gericht op hele cel opnemen. Wanneer de hersenen met succes is verwijderd zonder schade, de meerderheid van de neuronen zijn spontaan actief, vuren actiepotentialen en / of de uitstalling van spontane synaptische input. Deze in situ voorbereiding, waarin whole cell-opname van de geïdentificeerde neuronen in de hele hersenen kunnen worden gecombineerd met genetische en farmacologische manipulaties, is een bruikbaar model voor het verkennen van cellulaire fysiologie en plasticiteit in het volwassen CZS.</p>

Watch this Scientific Journal Video about Whole Cell Recordings from Brain of Adult Drosophila at JoVE.com

Whole Cell Recordings from Brain of Adult Drosophila

<p class="jove_content">Deze video toont de procedure voor het isoleren van hele hersenen van volwassen Drosophila als voorbereiding voor het opnemen van enkele neuronen met behulp van standaard hele cel-technologie. Het bevat beelden van GFP gelabelde cellen en neuronen bekeken tijdens het opnemen.</p>

Hele Cell Opnamen van Brain van Adult Drosophila

In this video, we demonstrate the procedure for isolating whole brains from adult Drosophila in preparation for recording from single neurons. We begin by ...

Research

JoVE Journal

Biology

Dissection of Imaginal Discs from 3rd Instar Drosophila Larvae

Dissectie van de imaginaire Discs uit 3e Instar Drosophila Larven

Transplantation of Whole Kidney Marrow in Adult Zebrafish

Transplantatie van Whole nier Marrow in Adult zebravis

Hematopoietic stem cells (HSC) are a rare population of pluripotent cells that maintain all the differentiated blood lineages throughout the life of an ...

Primary Neuronal Cultures from the Brains of Late Stage Drosophila Pupae

Primaire neuronale culturen uit de hersenen van laat stadium Drosophila Poppen

In this video, we demonstrate the preparation of primary neuronal cultures from the brains of late stage Drosophila pupae. The procedure begins with the ...

Preparation of Neuronal Cultures from Midgastrula Stage Drosophila Embryos

De voorbereiding van Neuronale Culturen van Midgastrula Stage Drosophila embryo&#39;s

This video illustrates the procedure for making primary neuronal cultures from midgastrula stage Drosophila embryos. The methods for collecting embryos ...

Whole-cell Recordings of Light Evoked Excitatory Synaptic Currents in the Retinal Slice

Whole-cell Opnames van Licht prikkelende synaptische Stromingen opgeroepen in het netvlies Slice

We use the whole-cell patch clamp technique to study the synaptic circuitry that underlies visual information processing in the retina. In this video, we ...

Single-cell Suction Recordings from Mouse Cone Photoreceptors

Single-cell Suction Recordings van Mouse Cone fotoreceptoren

Rod and cone photoreceptors in the retina are responsible for light detection. In darkness, cyclic nucleotide-gated (CNG) channels in the outer segment ...

Dissection of Organs from the Adult Zebrafish

Dissectie van organen van de Adult zebravis

Over the last 20 years, the zebrafish has become a powerful model organism for understanding vertebrate development and disease.  Although experimental ...

Primary Cell Cultures from <em>Drosophila</em> Gastrula Embryos

Primary Cell Cultures from Drosophila Gastrula Embryos

Primaire celculturen van<em> Drosophila</em> Gastrula Embryo&#39;s

Here we describe a method for preparing and culturing primary cells dissociated from Drosophila gastrula embryos.   In brief, a large amount of staged ...

Dissection of Oenocytes from Adult <em>Drosophila melanogaster</em>

Dissection of Oenocytes from Adult Drosophila melanogaster

Dissectie van Oenocytes tegen Adult<em> Drosophila melanogaster</em

In Drosophila melanogaster, as in other insects, a waxy layer on the outer surface of the cuticle, composed primarily of hydrocarbon compounds, provides ...

Isolation and Purification of Kinesin from <em>Drosophila</em> Embryos

Isolation and Purification of Kinesin from Drosophila Embryos

Isolatie en zuivering van kinesine uit<em> Drosophila</em> Embryo&#39;s

Motor proteins move cargos along microtubules, and transport them to specific sub-cellular locations. Because altered transport is suggested to underlie a ...