Name: whole cell recordings from brain of adult drosophila
Uploaded: 2007-07-29T00:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Whole Cell Recordings from Brain of Adult Drosophila at JoVE.com

<p> Questo lavoro è stato finanziato da una sovvenzione al NIH NS27501 DKOD. Supporto aggiuntivo per questo lavoro è stato fornito da una sovvenzione HHMI Programma Professore a DKOD. </p>

<p class="jove_step"> I. La dissezione del cervello da mosca adulta </p><ol><li> Mettere una piccola goccia (~ 100 l) di dissezione soluzione in centro di un piatto 35 millimetri Petri. </li><li> Cattura femmina adulta con aspiratore. Sotto dissezione microscopio, utilizzare due aghi da siringa di decapitare la mosca. </li><li> Mettere la testa in una piccola goccia di soluzione salina dissezione (con papaina aggiunto) in una capsula di Petri. </li><li> Testa di posizione con con proboscide rivolta fondo del piatto. </li><li> Tenere la cuticola...

<ol>
	<li>Gu, H., O Dowd, D. K., K, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cholinergic+synaptic+transmission+in+Adult+Drosophila+Kenyon+cells+in+situ.">Cholinergic synaptic transmission in Adult Drosophila Kenyon cells in situ.</a> <em style='font-style: italic'>Journal of Neuroscience</em>. <b>26</b>, 265-272 (2006).</li><li>Wilson, R. I., Turner, G. C., Laurent, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transformation+of+olfactory+representations+in+the+Drosophila+antennal+lobe.">Transformation of olfactory representations in the Drosophila antennal lobe.</a> <em style='font-style: italic'>Science</em>. <b>303</b>, 366-370 (2004).</li></ol>

<p> La preparazione isolato intero cervello illustriamo in questo video permette la valutazione dei meccanismi cellulari alla base eccitabilità e la trasmissione sinaptica nei neuroni identificati, compresi quelli nelle vie di elaborazione olfattiva, nel cervello adulto Drosophila (Gu e O Dowd, 2006). Questo approccio è complementare allo studio dell&#39;attività neuronale nel cervello degli adulti Drosophila intatto (Wilson et all 2004), più o meno allo stesso modo le registrazioni da parte dei neuroni in una fetta cervello dei mammiferi s...

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		<div>
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		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>#5 Foceps</td>
<td>Tool</td>
<td>FST by DUMONT</td>
<td>No. 11251-10 </td>
<td>Be careful, never damage the fine tips of forceps</td>
</tr>
<tr>
<td>Papain</td>
<td>Reagent</td>
<td>Worthington</td>
<td>3126</td>
<td>20 U/ml activated by 1 mM L-cysteine</td>
</tr>
<tr>
<td>Dissecting microscope</td>
<td>SMZ-2B Model:C-PS</td>
<td>Nikon</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Equipped with gooseneck fiber optic lights positioned a low angle</td>
</tr>
<tr>
<td>Needle & Syringe </td>
<td>&nbsp;</td>
<td>PrecisionGlide&#174;?, Becton Dickinson & Co </td>
<td>305175 & 309602</td>
<td>Cheap and durable</td>
</tr>
<tr>
<td>Upright microscope</td>
<td>Axioskop2 FS plus</td>
<td>Zeiss</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Equipped with a fixed stage, 40X water immersion objective, Nomarski optics, and fluorescent lamp</td>
</tr>
<tr>
<td>Patch clamp amplifier</td>
<td>200 B</td>
<td>Molecular device</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Digidata  D-A converter </td>
<td>1322A</td>
<td>Molecular device</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>
			<div>
					</div>
		

whole cell recordings from brain of adult drosophila

<p class="jove_content">In questo video, dimostriamo la procedura per isolare il cervello tutto da adulto Drosophila, in preparazione per la registrazione da singoli neuroni. Cominciamo con la descrizione della soluzione di dissezione e la cattura delle femmine adulte utilizzate nei nostri studi. La procedura per la rimozione del cervello intatto, tra cui entrambi i lobi ottici, è illustrata. Dissezione della trachea sovrastante è anche mostrato. Il cervello isolato non è solo piccola ma necessita di particolare attenzione nella gestione in questa fase, per evitare di danneggiare i neuroni, molti dei quali sono vicini alla superficie esterna del tessuto. Si mostra come un supporto speciale che abbiamo sviluppato è usato per stabilizzare il cervello nella camera di registrazione. Un elettrofisiologia norme stabilite viene utilizzato per la registrazione di singoli neuroni o coppie di neuroni. Una immagine fluorescente, vista attraverso il microscopio di registrazione, da una linea guida GAL4 espressione GFP (GH146) illustra come i neuroni di proiezione (PN) sono identificate nel cervello vivo. Una immagine ad alta potenza Nomarski mostra una vista di un singolo neurone che è nel mirino per la registrazione a cellula intera. Quando il cervello è rimosso con successo senza danni, la maggior parte dei neuroni sono attivi spontaneamente, sparando potenziali d&#39;azione e / o esporre spontaneo di input sinaptici. Questo in preparazione in situ, in cui la registrazione a cellule intere di neuroni identificati in tutto il cervello può essere combinato con manipolazioni genetiche e farmacologiche, è un modello utile per esplorare la fisiologia cellulare e la plasticità del sistema nervoso centrale adulto.</p>

Watch this Scientific Journal Video about Whole Cell Recordings from Brain of Adult Drosophila at JoVE.com

Whole Cell Recordings from Brain of Adult Drosophila

<p class="jove_content">Questo video mostra la procedura per isolare il cervello tutto da adulto Drosophila, in preparazione per la registrazione di singoli neuroni utilizzando tecnologia standard a cellula intera. Esso comprende le immagini di cellule GFP etichettati e neuroni visualizzati durante la registrazione.</p>

Registrazioni cella intero cervello di adulti Drosophila

In this video, we demonstrate the procedure for isolating whole brains from adult Drosophila in preparation for recording from single neurons. We begin by ...

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