Name: whole cell recordings from brain of adult drosophila
Uploaded: 2007-07-29T00:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Whole Cell Recordings from Brain of Adult Drosophila at JoVE.com

<p> Este trabalho foi financiado por uma bolsa NIH NS27501 para DKOD. Suporte adicional para este trabalho foi fornecida por um Grant Programa HHMI Professor para DKOD. </p>

<p class="jove_step"> I. Dissecção de cérebros da mosca adulta </p><ol><li> Coloque uma pequena gota (~ mL 100) de dissecar solução no centro de uma placa de Petri 35 mm. </li><li> Pegar fêmea adulta utilizando aspirador. Sob microscópio de dissecação, use duas agulhas de seringa para decapitar a voar. </li><li> Cabeça no lugar uma pequena gota de solução salina de dissecação (com papaína adicionados) numa placa de Petri. </li><li> Posição com cabeça com tromba de frente para fundo do prato. </li><li> Segure a cutícula que co...

<ol>
	<li>Gu, H., O Dowd, D. K., K, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cholinergic+synaptic+transmission+in+Adult+Drosophila+Kenyon+cells+in+situ.">Cholinergic synaptic transmission in Adult Drosophila Kenyon cells in situ.</a> <em style='font-style: italic'>Journal of Neuroscience</em>. <b>26</b>, 265-272 (2006).</li><li>Wilson, R. I., Turner, G. C., Laurent, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transformation+of+olfactory+representations+in+the+Drosophila+antennal+lobe.">Transformation of olfactory representations in the Drosophila antennal lobe.</a> <em style='font-style: italic'>Science</em>. <b>303</b>, 366-370 (2004).</li></ol>

<p> A preparação do cérebro isolado todo ilustramos neste vídeo permite a avaliação dos mecanismos celulares subjacentes a excitabilidade ea transmissão sináptica em neurônios identificados, incluindo aqueles em vias de processamento olfativo, no adulto Drosophila cérebro (Gu e O Dowd, 2006). Esta abordagem é complementar ao estudo da atividade neuronal no cérebro de adultos intactos Drosophila (Wilson et all, 2004), em grande parte as gravações mesma forma dos neurônios em uma fatia do cérebro de mamíferos são complementares ...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>#5 Foceps</td>
<td>Tool</td>
<td>FST by DUMONT</td>
<td>No. 11251-10 </td>
<td>Be careful, never damage the fine tips of forceps</td>
</tr>
<tr>
<td>Papain</td>
<td>Reagent</td>
<td>Worthington</td>
<td>3126</td>
<td>20 U/ml activated by 1 mM L-cysteine</td>
</tr>
<tr>
<td>Dissecting microscope</td>
<td>SMZ-2B Model:C-PS</td>
<td>Nikon</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Equipped with gooseneck fiber optic lights positioned a low angle</td>
</tr>
<tr>
<td>Needle & Syringe </td>
<td>&nbsp;</td>
<td>PrecisionGlide&#174;?, Becton Dickinson & Co </td>
<td>305175 & 309602</td>
<td>Cheap and durable</td>
</tr>
<tr>
<td>Upright microscope</td>
<td>Axioskop2 FS plus</td>
<td>Zeiss</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Equipped with a fixed stage, 40X water immersion objective, Nomarski optics, and fluorescent lamp</td>
</tr>
<tr>
<td>Patch clamp amplifier</td>
<td>200 B</td>
<td>Molecular device</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Digidata  D-A converter </td>
<td>1322A</td>
<td>Molecular device</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>
			<div>
					</div>
		

whole cell recordings from brain of adult drosophila

<p class="jove_content">Neste vídeo, demonstramos o procedimento para isolar toda cérebros de adultos Drosophila em preparação para gravar a partir de neurônios individuais. Começamos por descrever a solução de dissecação e captura das fêmeas adultas usadas em nossos estudos. O procedimento para a remoção de todo o cérebro intacto, incluindo ambos os lobos óptica, é ilustrado. Dissecção da traquéia sobrejacente também é mostrada. O cérebro isolado não é apenas pequena, mas necessita de cuidados especiais no manuseio, nesta fase, para evitar danos aos neurônios, muitos dos quais estão perto da superfície externa do tecido. Mostramos como um suporte especial que desenvolvemos é usado para estabilizar o cérebro na câmara de gravação. A eletrofisiologia padrão criado é usado para gravar a partir de neurônios individuais ou pares de neurônios. Uma imagem fluorescente, vistos através do microscópio de gravação, de uma linha de condução GAL4 expressão GFP (GH146) ilustra como os neurônios de projeção (PNs) são identificados no cérebro vivo. A imagem de alta potência Nomarski mostra uma visão de um único neurônio que está sendo alvo para gravação de células inteiras. Quando o cérebro é removido com sucesso sem danos, a maioria dos neurônios são espontaneamente ativos, disparando potenciais de ação e / ou exibindo entrada sináptica espontânea. Esta em preparação local, em que a gravação de células inteiras de neurônios identificados em todo o cérebro pode ser combinado com manipulações genéticas e farmacológicas, é um modelo útil para explorar fisiologia celular e plasticidade no SNC adulto.</p>

Watch this Scientific Journal Video about Whole Cell Recordings from Brain of Adult Drosophila at JoVE.com

Whole Cell Recordings from Brain of Adult Drosophila

<p class="jove_content">Este vídeo demonstra o procedimento para isolar toda cérebros de adultos Drosophila em preparação para gravar a partir de neurônios individuais usando a tecnologia de célula padrão todo. Inclui imagens de células GFP rotulados e neurônios visto durante a gravação.</p>

Todo Recordings celular do cérebro de adultos Drosophila

In this video, we demonstrate the procedure for isolating whole brains from adult Drosophila in preparation for recording from single neurons. We begin by ...

Research

JoVE Journal

Biology

Dissection of Imaginal Discs from 3rd Instar Drosophila Larvae

Dissecação de discos imaginais de 3 larvas Drosophila Instar

Biologia

Transplantation of Whole Kidney Marrow in Adult Zebrafish

Transplante de Medula Renal inteiro em Zebrafish Adulto

Hematopoietic stem cells (HSC) are a rare population of pluripotent cells that maintain all the differentiated blood lineages throughout the life of an ...

Primary Neuronal Cultures from the Brains of Late Stage Drosophila Pupae

Culturas primárias neuronais do cérebro de Tarde Stage Drosophila pupas

In this video, we demonstrate the preparation of primary neuronal cultures from the brains of late stage Drosophila pupae. The procedure begins with the ...

Preparation of Neuronal Cultures from Midgastrula Stage Drosophila Embryos

Preparação de culturas de neurônios a partir de embriões Midgastrula Stage Drosophila

This video illustrates the procedure for making primary neuronal cultures from midgastrula stage Drosophila embryos. The methods for collecting embryos ...

Whole-cell Recordings of Light Evoked Excitatory Synaptic Currents in the Retinal Slice

De célula inteira Recordings of Light Evocados Excitatórios Correntes Synaptic na Slice Retinal

We use the whole-cell patch clamp technique to study the synaptic circuitry that underlies visual information processing in the retina. In this video, we ...

Single-cell Suction Recordings from Mouse Cone Photoreceptors

Gravações de uma única célula de sucção de cones fotorreceptores rato

Rod and cone photoreceptors in the retina are responsible for light detection. In darkness, cyclic nucleotide-gated (CNG) channels in the outer segment ...

Dissection of Organs from the Adult Zebrafish

Dissecção de Órgãos do Zebrafish Adulto

Over the last 20 years, the zebrafish has become a powerful model organism for understanding vertebrate development and disease.  Although experimental ...

Primary Cell Cultures from <em>Drosophila</em> Gastrula Embryos

Primary Cell Cultures from Drosophila Gastrula Embryos

Culturas de células primárias de<em> Drosophila</em> Os embriões Gástrula

Here we describe a method for preparing and culturing primary cells dissociated from Drosophila gastrula embryos.   In brief, a large amount of staged ...

Dissection of Oenocytes from Adult <em>Drosophila melanogaster</em>

Dissection of Oenocytes from Adult Drosophila melanogaster

Dissecção da Oenocytes de Adultos<em> Drosophila melanogaster</em

In Drosophila melanogaster, as in other insects, a waxy layer on the outer surface of the cuticle, composed primarily of hydrocarbon compounds, provides ...

Isolation and Purification of Kinesin from <em>Drosophila</em> Embryos

Isolation and Purification of Kinesin from Drosophila Embryos

Isolamento e Purificação de cinesina partir<em> Drosophila</em> Os embriões

Motor proteins move cargos along microtubules, and transport them to specific sub-cellular locations. Because altered transport is suggested to underlie a ...