Name: whole cell recordings from brain of adult drosophila
Uploaded: 2007-07-29T00:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Whole Cell Recordings from Brain of Adult Drosophila at JoVE.com

<p> Detta arbete stöddes av en NIH bidrag NS27501 till DKOD. Ytterligare stöd för detta arbete har tillhandahållits av en HHMI professor Program Bidrag till DKOD. </p>

<p class="jove_step"> I. dissektion av hjärnor från vuxna flyga </p><ol><li> Placera en liten droppe (~ 100 l) av dissekera lösning i centrum av en 35 mm petriskål. </li><li> Catch vuxen hona med aspirator. Enligt dissekera mikroskop, använder två kanyler att halshugga flugan. </li><li> Placera huvudet i en liten droppe dissekera saltlösning (med papain läggs till) i en petriskål. </li><li> Placera huvudet med med SNABEL vänd ner i skålen. </li><li> Håll nagelbanden täcker vänstra förening ögat med nål 1. Gör ett diagonalt sni...

<ol>
	<li>Gu, H., O Dowd, D. K., K, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cholinergic+synaptic+transmission+in+Adult+Drosophila+Kenyon+cells+in+situ.">Cholinergic synaptic transmission in Adult Drosophila Kenyon cells in situ.</a> <em style='font-style: italic'>Journal of Neuroscience</em>. <b>26</b>, 265-272 (2006).</li><li>Wilson, R. I., Turner, G. C., Laurent, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transformation+of+olfactory+representations+in+the+Drosophila+antennal+lobe.">Transformation of olfactory representations in the Drosophila antennal lobe.</a> <em style='font-style: italic'>Science</em>. <b>303</b>, 366-370 (2004).</li></ol>

<p> De isolerade hela hjärnan förberedelser illustrerar vi i den här videon gör bedömning av cellulära mekanismer som ligger bakom retbarhet och synaptisk överföring i identifierade nervceller, inklusive de i den lukt bearbetning vägar, i den vuxna Drosophila hjärnan (Gu och O Dowd, 2006). Denna metod är ett komplement till studier av neuronal aktivitet i hjärnan av intakt vuxna Drosophila (Wilson et alla 2004), ungefär på samma sätt inspelningar från nervceller i ett däggdjur hjärna skiva är ett komplement till inspelningar ...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>#5 Foceps</td>
<td>Tool</td>
<td>FST by DUMONT</td>
<td>No. 11251-10 </td>
<td>Be careful, never damage the fine tips of forceps</td>
</tr>
<tr>
<td>Papain</td>
<td>Reagent</td>
<td>Worthington</td>
<td>3126</td>
<td>20 U/ml activated by 1 mM L-cysteine</td>
</tr>
<tr>
<td>Dissecting microscope</td>
<td>SMZ-2B Model:C-PS</td>
<td>Nikon</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Equipped with gooseneck fiber optic lights positioned a low angle</td>
</tr>
<tr>
<td>Needle & Syringe </td>
<td>&nbsp;</td>
<td>PrecisionGlide&#174;?, Becton Dickinson & Co </td>
<td>305175 & 309602</td>
<td>Cheap and durable</td>
</tr>
<tr>
<td>Upright microscope</td>
<td>Axioskop2 FS plus</td>
<td>Zeiss</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Equipped with a fixed stage, 40X water immersion objective, Nomarski optics, and fluorescent lamp</td>
</tr>
<tr>
<td>Patch clamp amplifier</td>
<td>200 B</td>
<td>Molecular device</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Digidata  D-A converter </td>
<td>1322A</td>
<td>Molecular device</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>
			<div>
					</div>
		

whole cell recordings from brain of adult drosophila

<p class="jove_content">I denna video visar vi förfarandet för att isolera hela hjärnor från vuxna Drosophila för att förbereda inspelning från enstaka nervceller. Vi börjar med att beskriva dissekera lösningen och tillfångatagandet av den vuxna honor som används i våra studier. Förfarandet för att ta bort hela hjärnan intakt, inklusive både optiska loberna, illustreras. Dissekering av den överliggande luftstrupen visas också. De isolerade Hjärnan är inte bara liten, men behöver särskild vård i hanteringen i detta skede för att förhindra skador på nervceller, av vilka många ligger nära den yttre ytan av vävnaden. Vi visar hur en speciell hållare vi utvecklat används för att stabilisera hjärnan i inspelningen kammaren. En standard elektrofysiologi inrättat används för inspelning från enstaka nervceller eller par av nervceller. En fluorescerande bild, sedd genom inspelning mikroskop, från en GAL4 linje körning GFP uttryck (GH146) illustrerar hur projektion neuron (PNS) identifieras i den levande hjärnan. En hög effekt Nomarski bild visar en vy av en enda neuron som blir måltavla för hela cellen inspelning. När hjärnan är framgångsrikt bort utan att skada, de flesta av nervceller är spontant aktiva, bränning aktionspotentialer och / eller uppvisar spontan synaptisk input. Detta på plats beredning, i vilken helcells inspelning av identifierade nervceller i hela hjärnan kan kombineras med genetiska och farmakologiska manipulationer, är en användbar modell för att utforska cellulär fysiologi och plasticitet i den vuxna CNS.</p>

Watch this Scientific Journal Video about Whole Cell Recordings from Brain of Adult Drosophila at JoVE.com

Whole Cell Recordings from Brain of Adult Drosophila

<p class="jove_content">Denna video demonstrerar förfarandet för att isolera hela hjärnor från vuxna Drosophila för att förbereda inspelning från enskilda nervceller med hjälp av vanliga hela cellteknologi. Den innehåller bilder av GFP märkta celler och neuroner visade under inspelningen.</p>

Helcells Inspelningar från hjärnan hos vuxna Drosophila

In this video, we demonstrate the procedure for isolating whole brains from adult Drosophila in preparation for recording from single neurons. We begin by ...

Research

JoVE Journal

Biology

Dissection of Imaginal Discs from 3rd Instar Drosophila Larvae

Dissekering av Imaginal skivor från 3: e Instar Drosophila Larver

Transplantation of Whole Kidney Marrow in Adult Zebrafish

Transplantation av hela Njure Marrow i vuxen Zebrafish

Hematopoietic stem cells (HSC) are a rare population of pluripotent cells that maintain all the differentiated blood lineages throughout the life of an ...

Primary Neuronal Cultures from the Brains of Late Stage Drosophila Pupae

Primär Neuronal kulturer från hjärnan hos sent stadium Drosophila puppor

In this video, we demonstrate the preparation of primary neuronal cultures from the brains of late stage Drosophila pupae. The procedure begins with the ...

Preparation of Neuronal Cultures from Midgastrula Stage Drosophila Embryos

Beredning av Neuronal kulturer från Midgastrula Stage Drosophila embryon

This video illustrates the procedure for making primary neuronal cultures from midgastrula stage Drosophila embryos. The methods for collecting embryos ...

Whole-cell Recordings of Light Evoked Excitatory Synaptic Currents in the Retinal Slice

Helcells-Inspelningar av Ljus Evoked excitatoriska Synaptic strömmar i näthinnan Slice

We use the whole-cell patch clamp technique to study the synaptic circuitry that underlies visual information processing in the retina. In this video, we ...

Single-cell Suction Recordings from Mouse Cone Photoreceptors

Encelliga Sug Inspelningar från fotoreceptorer Mus Cone

Rod and cone photoreceptors in the retina are responsible for light detection. In darkness, cyclic nucleotide-gated (CNG) channels in the outer segment ...

Dissection of Organs from the Adult Zebrafish

Dissektion av organ från vuxna Zebrafish

Over the last 20 years, the zebrafish has become a powerful model organism for understanding vertebrate development and disease.  Although experimental ...

Primary Cell Cultures from <em>Drosophila</em> Gastrula Embryos

Primary Cell Cultures from Drosophila Gastrula Embryos

Primära cellkulturer från<em> Drosophila</em> Gastrula Embryon

Here we describe a method for preparing and culturing primary cells dissociated from Drosophila gastrula embryos.   In brief, a large amount of staged ...

Dissection of Oenocytes from Adult <em>Drosophila melanogaster</em>

Dissection of Oenocytes from Adult Drosophila melanogaster

Dissekering av Oenocytes från Vuxen<em> Drosophila melanogaster</em

In Drosophila melanogaster, as in other insects, a waxy layer on the outer surface of the cuticle, composed primarily of hydrocarbon compounds, provides ...

Isolation and Purification of Kinesin from <em>Drosophila</em> Embryos

Isolation and Purification of Kinesin from Drosophila Embryos

Isolering och rening av kinesin från<em> Drosophila</em> Embryon

Motor proteins move cargos along microtubules, and transport them to specific sub-cellular locations. Because altered transport is suggested to underlie a ...