Name: loading drosophila nerve terminals with calcium indicators
Uploaded: 2007-07-30T00:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Loading Drosophila Nerve Terminals with Calcium Indicators at JoVE.com

<ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בחר מנה לנתיחה נקי כי לא נחשף כל fixatives. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנתח נודד 3 rd instar הזחל תסיסנית בינוני של שניידר תסיסנית המכילה Ca 2 + ו-L-גלוטמין, (לא לחתוך שום עצבים או שרירים סיבי נזק מס &#39;7, 6, 13 או 12). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בחר ...

<ol>
	<li>Macleod, G. T., Hegstrom-Wojtowicz, M., Charlton, M. P., Atwood, H. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fast+calcium+signals+in+Drosophila+motor+neuron+terminals.">Fast calcium signals in Drosophila motor neuron terminals.</a> J. Neurophysiol. 88, 2659-2663 (2002).</li><li>Macleod, G. T., Suster, M. L., Charlton, M. P., Atwood, H. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single+neuron+activity+in+the+Drosophila+larval+CNS+detected+with+calcium+indicators.">Single neuron activity in the Drosophila larval CNS detected with calcium indicators.</a> J. Neurosci. Methods. 127, 167-178 (2003).</li><li>Macleod, G. T., Marin, L., Charlton, M. P., Atwood, H. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synaptic+vesicles:+test+for+a+role+in+presynaptic+calcium+regulation.">Synaptic vesicles: test for a role in presynaptic calcium regulation.</a> J. Neurosci. 24, 2496-2505 (2004).</li><li>Reiff, D. F., Thiel, P. R., Schuster, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+regulation+of+active+zone+density+during+long-term+strengthening+of+Drosophila+neuromuscular+junctions.">Differential regulation of active zone density during long-term strengthening of Drosophila neuromuscular junctions.</a> J. Neurosci. 22, 9399-9409 (2002).</li><li>Reiff, D. F., Ihring, A., Guerrero, G., Isacoff, E. Y., Joesch, M., Nakai, J., Borst, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+performance+of+genetically+encoded+indicators+of+neural+activity+in+flies.">In vivo performance of genetically encoded indicators of neural activity in flies.</a> J. Neurosci. 25, 4766-4778 (2005).</li></ol>

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Schneider&#x2019;s Insect Medium</td>
<td>Reagent</td>
<td>Sigma</td>
<td>S0146</td>
<td>must contain L-glutamine and calcium</td>
</tr>
<tr>
<td>L-glutamic acid monosodium salt hydrate</td>
<td>Reagent</td>
<td>Sigma</td>
<td>G1626</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>
			<div>
					</div>

loading drosophila nerve terminals with calcium indicators

סידן משחק תפקידים רבים במערכת העצבים אבל אף מרשים יותר כמו ההדק לשחרור נוירוטרנסמיטר, ואף אחד עמוק יותר כשליח חיוני הפלסטיות הסינפטית התומכת בלמידה ובזיכרון. כדי להמשיך להבהיר את הבסיס המולקולרי של Ca 2 + תלויי מנגנוני הסינפטי, מערכת מודל נדרש כי הוא גם נזיל גנטית נגיש מבחינה פיזיולוגית. תסיסנית melanogaster מספק מודל כזה. במערכת זו, מקודדים גנטית אינדיקטורים פלורסנט זמינים לזהות Ca 2 + שינויים מסופי העצב. עם זאת, אינדיקטורים אלה מוגבל רגישות Ca 2 + ולעתים קרובות להראות תגובה שאינו ליניארי. האינדיקטורים פלורסנט סינתטי מתאימים יותר למדידת Ca מהירה 2 + שינויים הקשורים לפעילות עצבית. כאן אנו להפגין טכניקה לטעינת dextran-מצומדות סינתטי Ca 2 + אינדיקטורים לתוך מסופי העצב לחיות הזחלים תסיסנית. דגש מיוחד מושם על אותם היבטים של פרוטוקול הקריטי ביותר להצלחה של טכניקה, כמו למשל איך להימנע הפרשות חשמל סטטי לאורך עצבים מבודדת, בשמירה על בריאות הכנת בתקופות טעינה ממושכת, והבטחת הישרדות האקסון ידי מתן Ca 2 + כדי לקדם את האיטום של קצות האקסון ניתק. זיקה נמוכה dextran-מצומדות Ca 2 +-אינדיקטורים, כגון fluo-4 ו rhod, זמינים אשר מראים יחס גבוה אות לרעש בזמן מינימלית לשבש presynaptic Ca 2 + דינמיקה. Dextran-נטיה מסייע במניעת Ca 2 + אינדיקטורים להיות מוחרם לתוך אברונים כגון מיטוכונדריה. הטכניקה הטעינה יכול להיות מיושם באופן שווה, הזחלים עוברים ומבוגרים.

Watch this Scientific Journal Video about Loading Drosophila Nerve Terminals with Calcium Indicators at JoVE.com

Loading Drosophila Nerve Terminals with Calcium Indicators

סידן הוא שליח בכל מקום במערכת העצבים, חיוני מפעילה שחרור הנוירוטרנסמיטר ושינויים חוזק סינפטי. כאן אנו להפגין טכניקה לטעינת Ca 2 +-אינדיקטורים לתוך מסופי תסיסנית עצב. אנחנו גם מדגימים המצאה של המנגנון הנדרש ולהדגיש נקודות קריטיות להצלחת הטכניקה.

טוען תסיסנית מסופי עצב עם אינדיקטורים סידן

Calcium plays many roles in the nervous system but none more impressive than as the trigger for neurotransmitter release, and none more profound than as ...

Research

JoVE Journal

Biology

Ex vivo Mechanical Loading of Tendon

Ex vivo טוען מכני של גיד

Injuries to the tendon (e.g., wrist tendonitis, epicondyltis) due to overuse are common in sports activities and the workplace.  Most are associated with ...

Visualizing the Live Drosophila Glial-neuromuscular Junction with Fluorescent Dyes

Visualizing the Live Drosophila Glial-neuromuscular Junction with Fluorescent Dyes

לדמיין את חיים תסיסנית גליה-neuromuscular צומת עם צבעי ניאון

Our project identified GFP labeled glial structures at the developing larval fly neuromuscular synapse. To look at development of live glial-nerve-muscle ...

Assembly, Loading, and Alignment of an Analytical Ultracentrifuge Sample Cell

העצרת, טוען, ואת המערך של תא ultracentrifuge אנליטית לדוגמא

The analytical ultracentrifuge (AUC) is a powerful biophysical tool that allows us to record macromolecular sedimentation profiles during high speed ...

Dopamine Release at Individual Presynaptic Terminals Visualized with FFNs

שחרור הדופמין ב מסופי Presynaptic הפרט דמיינו עם FFNs

The nervous system transmits signals between neurons via neurotransmitter release during synaptic vesicle fusion. To observe neurotransmitter uptake and ...

Cargo Loading onto Kinesin Powered Molecular Shuttles

המטען טוען על הסעות Kinesin מולקולרית מופעל

Cells have evolved sophisticated molecular machinery, such as kinesin motor proteins and microtubule filaments, to support active intracellular transport ...

Whole-Cell Recording of Calcium Release-Activated Calcium (CRAC) Currents in Human T Lymphocytes

Whole-Cell Recording of Calcium Release-Activated Calcium CRAC Currents in Human T Lymphocytes

Whole Cell-הקלטה של ​​סידן סידן שחרור פעילה (CRAC) זרמים האדם לימפוציטים-T

In T lymphocytes, depletion of Ca2+ from the intracellular Ca2+ store leads to activation of plasmalemmal Ca2+ channels, called Calcium Release-Activated ...

Measuring Fast Calcium Fluxes in Cardiomyocytes

מדידת Fluxes סידן מהיר ב cardiomyocytes

Cardiomyocytes have multiple Ca2+ fluxes of varying duration that work together to optimize function 1,2. Changes in Ca2+ activity in response to ...

Direct Imaging of ER Calcium with Targeted-Esterase Induced Dye Loading (TED)

Direct Imaging of ER Calcium with Targeted-Esterase Induced Dye Loading TED

הדמיה ישירה של סידן ER עם ממוקד esterase מושרה טעינת צבע (טד)

Visualization of calcium dynamics is important to understand the role of calcium in cell physiology. To examine calcium dynamics, synthetic fluorescent ...

Monitoring ER/SR Calcium Release with the Targeted Ca2+ Sensor CatchER+

Monitoring ER/SR Calcium Release with the Targeted Ca2+ Sensor CatchER+

ניטור ER / SR סידן שחרור עם CA ממוקד<sup&gt; 2+</sup&gt; חיישן Catcher<sup&gt; +</sup

Intracellular calcium (Ca2+) transients evoked by extracellular stimuli initiate a multitude of biological processes in living organisms. At the center of ...

Forward Genetic Screen Using Transgenic Calcium Reporter Aequorin to Identify Novel Targets in Calcium Signaling

המסך הגנטי הקדמי באמצעות כתבת סידן טרנסגניים Aequorin כדי לזהות יעדים הרומן איתות סידן

Forward genetic screens have been important tools in the unbiased identification of genetic components involved in several biological pathways. The basis ...