Name: loading drosophila nerve terminals with calcium indicators
Uploaded: 2007-07-30T00:00:00
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<ol><li> चुनें एक स्वच्छ विच्छेदन पकवान है कि किसी fixatives को उजागर नहीं किया गया. </li><li> एक भटक 3 श्नाइडर ड्रोसोफिला मध्यम 2 Ca युक्त में तीसरी instar ड्रोसोफिला लार्वा काटना + और ​​एल glutamine, (किसी भी नसों या क्षति मा?...

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	<li>Macleod, G. T., Hegstrom-Wojtowicz, M., Charlton, M. P., Atwood, H. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fast+calcium+signals+in+Drosophila+motor+neuron+terminals.">Fast calcium signals in Drosophila motor neuron terminals.</a> J. Neurophysiol. 88, 2659-2663 (2002).</li><li>Macleod, G. T., Suster, M. L., Charlton, M. P., Atwood, H. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single+neuron+activity+in+the+Drosophila+larval+CNS+detected+with+calcium+indicators.">Single neuron activity in the Drosophila larval CNS detected with calcium indicators.</a> J. Neurosci. Methods. 127, 167-178 (2003).</li><li>Macleod, G. T., Marin, L., Charlton, M. P., Atwood, H. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synaptic+vesicles:+test+for+a+role+in+presynaptic+calcium+regulation.">Synaptic vesicles: test for a role in presynaptic calcium regulation.</a> J. Neurosci. 24, 2496-2505 (2004).</li><li>Reiff, D. F., Thiel, P. R., Schuster, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+regulation+of+active+zone+density+during+long-term+strengthening+of+Drosophila+neuromuscular+junctions.">Differential regulation of active zone density during long-term strengthening of Drosophila neuromuscular junctions.</a> J. Neurosci. 22, 9399-9409 (2002).</li><li>Reiff, D. F., Ihring, A., Guerrero, G., Isacoff, E. Y., Joesch, M., Nakai, J., Borst, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+performance+of+genetically+encoded+indicators+of+neural+activity+in+flies.">In vivo performance of genetically encoded indicators of neural activity in flies.</a> J. Neurosci. 25, 4766-4778 (2005).</li></ol>

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		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Schneider&#x2019;s Insect Medium</td>
<td>Reagent</td>
<td>Sigma</td>
<td>S0146</td>
<td>must contain L-glutamine and calcium</td>
</tr>
<tr>
<td>L-glutamic acid monosodium salt hydrate</td>
<td>Reagent</td>
<td>Sigma</td>
<td>G1626</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>
			<div>
					</div>

loading drosophila nerve terminals with calcium indicators

कैल्शियम तंत्रिका तंत्र में कई भूमिका निभाता है लेकिन कोई भी neurotransmitter रिहाई के लिए ट्रिगर के रूप में की तुलना में अधिक प्रभावशाली है, और कोई भी synaptic plasticity है कि सीखने और स्मृति का समर्थन करता है के लिए आवश्यक दूत के रूप में की तुलना में अधिक गहरा है. आगे Ca 2 के आणविक आधार स्पष्ट + निर्भर synaptic तंत्र, एक मॉडल प्रणाली की आवश्यकता है कि दोनों आनुवंशिक निंदनीय और physiologically से सुलभ है. ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर इस तरह के एक मॉडल उपलब्ध कराता है. इस प्रणाली में, अनुवांशिक इनकोडिंग फ्लोरोसेंट संकेतक तंत्रिका टर्मिनलों में Ca 2 + परिवर्तन का पता लगाने के लिए उपलब्ध हैं. हालांकि, इन संकेतकों 2 Ca के लिए संवेदनशीलता सीमित है + और ​​अक्सर एक गैर रेखीय प्रतिक्रिया दिखा. सिंथेटिक फ्लोरोसेंट संकेतक बेहतर तेजी Ca 2 + तंत्रिका गतिविधि के साथ जुड़े परिवर्तन को मापने के लिए उपयुक्त हैं. यहाँ हम ड्रोसोफिला लार्वा में रहते तंत्रिका टर्मिनलों में dextran संयुग्मित सिंथेटिक Ca 2 + संकेतक लोड करने के लिए एक तकनीक का प्रदर्शन . सबसे पृथक नसों के साथ स्थैतिक बिजली निर्वहन कैसे से बचने के लिए, विस्तारित लोड हो रहा है अवधि के दौरान की तैयारी के स्वास्थ्य को बनाए रखने के जैसे है तकनीक की सफलता के लिए महत्वपूर्ण है, प्रोटोकॉल के उन पहलुओं पर विशेष जोर रखा है, और 2 Ca द्वारा प्रदान अक्षतंतु अस्तित्व को सुनिश्चित करने + कटे अक्षतंतु अंत की सील को बढ़ावा देने के लिए. निम्न आत्मीयता dextran संयुग्मित Ca 2 + fluo-4 और rhod जैसे संकेतक, उपलब्ध है जो एक उच्च संकेत से शोर अनुपात दिखाने जबकि न्यूनतम + गतिशीलता presynaptic 2 Ca में खलल न डालें . Dextran - संयुग्मन को रोकने Ca 2 + संकेतक mitochondria जैसे organelles में तनहा जा रहा में मदद करता है. लोड हो रहा तकनीक लार्वा भ्रूण, और वयस्कों के लिए समान रूप से लागू किया जा सकता है.

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Loading Drosophila Nerve Terminals with Calcium Indicators

कैल्शियम तंत्रिका तंत्र में एक सर्वव्यापी दूत, synaptic शक्ति में neurotransmitter रिहाई और परिवर्तन को ट्रिगर करने के लिए आवश्यक है. यहाँ हम ड्रोसोफिला तंत्रिका टर्मिनलों में + संकेतक 2 Ca लोड करने के लिए एक तकनीक का प्रदर्शन . हम भी आवश्यक तंत्र के निर्माण का प्रदर्शन और है तकनीक की सफलता के लिए महत्वपूर्ण बिंदुओं पर जोर.

कैल्शियम संकेतक के साथ लोड हो रहा है ड्रोसोफिला तंत्रिका टर्मिनल

Calcium plays many roles in the nervous system but none more impressive than as the trigger for neurotransmitter release, and none more profound than as ...

Research

JoVE Journal

Biology

Ex vivo Mechanical Loading of Tendon

कण्डरा के पूर्व vivo यांत्रिक लोड हो रहा है है

Injuries to the tendon (e.g., wrist tendonitis, epicondyltis) due to overuse are common in sports activities and the workplace.  Most are associated with ...

Visualizing the Live Drosophila Glial-neuromuscular Junction with Fluorescent Dyes

Visualizing the Live Drosophila Glial-neuromuscular Junction with Fluorescent Dyes

लाइव Visualizing ड्रोसोफिला फ्लोरोसेंट रंजक के साथ जंक्शन Glial neuromuscular

Our project identified GFP labeled glial structures at the developing larval fly neuromuscular synapse. To look at development of live glial-nerve-muscle ...

Assembly, Loading, and Alignment of an Analytical Ultracentrifuge Sample Cell

विधानसभा, लोड हो रहा है, और एक विश्लेषणात्मक ultracentrifuge नमूना सेल के संरेखण

The analytical ultracentrifuge (AUC) is a powerful biophysical tool that allows us to record macromolecular sedimentation profiles during high speed ...

Dopamine Release at Individual Presynaptic Terminals Visualized with FFNs

व्यक्तिगत presynaptic टर्मिनल पर dopamine रिलीज FFNs के साथ visualized

The nervous system transmits signals between neurons via neurotransmitter release during synaptic vesicle fusion. To observe neurotransmitter uptake and ...

Cargo Loading onto Kinesin Powered Molecular Shuttles

Kinesin संचालित आण्विक शटल पर कार्गो लोड हो रहा है

Cells have evolved sophisticated molecular machinery, such as kinesin motor proteins and microtubule filaments, to support active intracellular transport ...

Whole-Cell Recording of Calcium Release-Activated Calcium (CRAC) Currents in Human T Lymphocytes

Whole-Cell Recording of Calcium Release-Activated Calcium CRAC Currents in Human T Lymphocytes

मानव टी लिम्फोसाइटों में कैल्शियम कैल्शियम विज्ञप्ति सक्रिय के पूरे सेल रिकॉर्डिंग (CRAC) धाराओं

In T lymphocytes, depletion of Ca2+ from the intracellular Ca2+ store leads to activation of plasmalemmal Ca2+ channels, called Calcium Release-Activated ...

Measuring Fast Calcium Fluxes in Cardiomyocytes

Cardiomyocytes में फास्ट कैल्शियम अपशिष्टों को मापने

Cardiomyocytes have multiple Ca2+ fluxes of varying duration that work together to optimize function 1,2. Changes in Ca2+ activity in response to ...

Direct Imaging of ER Calcium with Targeted-Esterase Induced Dye Loading (TED)

Direct Imaging of ER Calcium with Targeted-Esterase Induced Dye Loading TED

लक्षित-esterase साथ ईआर कैल्शियम की प्रत्यक्ष इमेजिंग प्रेरित डाई लोड हो रहा है (टेड)

Visualization of calcium dynamics is important to understand the role of calcium in cell physiology. To examine calcium dynamics, synthetic fluorescent ...

Monitoring ER/SR Calcium Release with the Targeted Ca2+ Sensor CatchER+

Monitoring ER/SR Calcium Release with the Targeted Ca2+ Sensor CatchER+

लक्षित सीए के साथ ईआर / एसआर कैल्शियम रिलीज की निगरानी<sup&gt; 2 +</sup&gt; सेंसर कैचर<sup&gt; +</sup

Intracellular calcium (Ca2+) transients evoked by extracellular stimuli initiate a multitude of biological processes in living organisms. At the center of ...

Forward Genetic Screen Using Transgenic Calcium Reporter Aequorin to Identify Novel Targets in Calcium Signaling

फॉरवर्ड जेनेटिक स्क्रीन ट्रांसजेनिक कैल्शियम रिपोर्टर Aequorin का उपयोग करने के लिए कैल्शियम सिग्नलिंग में उपन्यास लक्ष्य की पहचान

Forward genetic screens have been important tools in the unbiased identification of genetic components involved in several biological pathways. The basis ...