Name: loading drosophila nerve terminals with calcium indicators
Uploaded: 2007-07-30T00:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Loading Drosophila Nerve Terminals with Calcium Indicators at JoVE.com

<ol><li> Herhangi bir fiksatif maruz olmamıştır temiz bir diseksiyon çanak seçin. </li><li> Schneider Drosophila Orta Ca 2 içeren bir gezgin 3. instar Drosophila larva teşrih + ve L-glutamin, (herhangi bir sinir ya da hasar kas lifleri No 7, 6, 13 veya 12 kesmeyin). </li><li> 12 mikron ucu (iç çapı) ile bir bardak doldurma pipet seçin. </li><li> (Pipet negatif basınç uygulamak için) bir şırınga ve tüp kullanarak pipet ucu tıkalı olmadığından emin olun. <...

<ol>
	<li>Macleod, G. T., Hegstrom-Wojtowicz, M., Charlton, M. P., Atwood, H. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fast+calcium+signals+in+Drosophila+motor+neuron+terminals.">Fast calcium signals in Drosophila motor neuron terminals.</a> J. Neurophysiol. 88, 2659-2663 (2002).</li><li>Macleod, G. T., Suster, M. L., Charlton, M. P., Atwood, H. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single+neuron+activity+in+the+Drosophila+larval+CNS+detected+with+calcium+indicators.">Single neuron activity in the Drosophila larval CNS detected with calcium indicators.</a> J. Neurosci. Methods. 127, 167-178 (2003).</li><li>Macleod, G. T., Marin, L., Charlton, M. P., Atwood, H. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synaptic+vesicles:+test+for+a+role+in+presynaptic+calcium+regulation.">Synaptic vesicles: test for a role in presynaptic calcium regulation.</a> J. Neurosci. 24, 2496-2505 (2004).</li><li>Reiff, D. F., Thiel, P. R., Schuster, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+regulation+of+active+zone+density+during+long-term+strengthening+of+Drosophila+neuromuscular+junctions.">Differential regulation of active zone density during long-term strengthening of Drosophila neuromuscular junctions.</a> J. Neurosci. 22, 9399-9409 (2002).</li><li>Reiff, D. F., Ihring, A., Guerrero, G., Isacoff, E. Y., Joesch, M., Nakai, J., Borst, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+performance+of+genetically+encoded+indicators+of+neural+activity+in+flies.">In vivo performance of genetically encoded indicators of neural activity in flies.</a> J. Neurosci. 25, 4766-4778 (2005).</li></ol>

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Schneider&#x2019;s Insect Medium</td>
<td>Reagent</td>
<td>Sigma</td>
<td>S0146</td>
<td>must contain L-glutamine and calcium</td>
</tr>
<tr>
<td>L-glutamic acid monosodium salt hydrate</td>
<td>Reagent</td>
<td>Sigma</td>
<td>G1626</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>
			<div>
					</div>

loading drosophila nerve terminals with calcium indicators

Kalsiyum sinir sistemi birçok roller oynar ama hiçbiri nörotransmitter serbest bırakılması için tetikleyici olarak daha etkileyici ve sinaptik plastisite, öğrenme ve hafıza destekler için gerekli elçi olarak daha hiçbiri daha derin. Ca 2 moleküler temellerinin daha da aydınlatmak için +-bağımlı sinaptik mekanizmalar, genetik uysal ve fizyolojik olarak erişilebilir bir model sistem olması gereklidir . Drosophila melanogaster böyle bir model sağlar. Bu sistemde, sinir uçlarında Ca 2 + değişiklikleri tespit etmek için genetik olarak kodlanmış floresan göstergeler mevcuttur. Ancak, bu göstergeler Ca 2 duyarlılık sınırlı + ve genellikle doğrusal olmayan bir tepki göstermek. Sentetik floresan göstergeler daha iyi, hızlı bir şekilde Ca 2 + sinir aktivitesi ile ilişkili değişiklikler ölçmek için uygundur. Burada Drosophila larvaları canlı sinir terminallerine dekstran-konjuge sentetik Ca 2 + göstergeleri yükleme için kullanılan bir tekniktir göstermektedir. Özellikle vurgu hazırlık sağlığı devamlılığının uzun yükleme dönemleri sırasında sağlanması bakımından, izole sinirler boyunca statik elektrik deşarjları önlemek için ne gibi, tekniği Kullanıcı başarısı için en kritik protokolün bu yönleri üzerine yerleştirilir, ve Ca 2 sağlayan akson hayatta kalma sağlanması . + kopmuş akson uçlarının sızdırmazlık teşvik. Düşük afiniteli dekstran-konjuge fluo-4 ve rhod + göstergeleri, Ca 2 + dinamikleri presinaptik Ca 2 kesintiye minimal yüksek sinyal-gürültü oranı gösteren mevcuttur. Dekstran-konjugasyon Ca 2 + göstergeleri gibi mitokondri gibi organellerin içinde sekestre önlemeye yardımcı olur. Larvaları, embriyoları ve yetişkinler için eşit yükleme tekniği uygulanabilir.

Watch this Scientific Journal Video about Loading Drosophila Nerve Terminals with Calcium Indicators at JoVE.com

Loading Drosophila Nerve Terminals with Calcium Indicators

Kalsiyum sinir sistemi her yerde bulunan bir haberci, sinaptik gücü nörotransmitter salınımı ve değişiklikleri tetiklenmesi için gerekli. Burada Ca 2 +-göstergeler Drosophila sinir uçları içine yüklemek için bir teknik göstermektedir. Biz de gerekli aparat imalatı göstermek ve tekniğinin başarısı için kritik noktaları vurgulamak.

Kalsiyum Göstergeleri ile yükleme Drosophila Sinir Terminalleri

Calcium plays many roles in the nervous system but none more impressive than as the trigger for neurotransmitter release, and none more profound than as ...

Research

JoVE Journal

Biology

Ex vivo Mechanical Loading of Tendon

Tendon ex vivo Mekanik Yükleniyor

Injuries to the tendon (e.g., wrist tendonitis, epicondyltis) due to overuse are common in sports activities and the workplace.  Most are associated with ...

Visualizing the Live Drosophila Glial-neuromuscular Junction with Fluorescent Dyes

Visualizing the Live Drosophila Glial-neuromuscular Junction with Fluorescent Dyes

Canlı görselleştirme Drosophila</emFloresan Boyalar> Glial nöromüsküler Kavşağı

Our project identified GFP labeled glial structures at the developing larval fly neuromuscular synapse. To look at development of live glial-nerve-muscle ...

Assembly, Loading, and Alignment of an Analytical Ultracentrifuge Sample Cell

Kurul, Yükleme ve Analitik ultrasantrifüjdeki Örnek Hücre Hizalama

The analytical ultracentrifuge (AUC) is a powerful biophysical tool that allows us to record macromolecular sedimentation profiles during high speed ...

Dopamine Release at Individual Presynaptic Terminals Visualized with FFNs

Bireysel Presinaptik Terminalleri Dopamin Yayın FFNs ile görüntülendi

The nervous system transmits signals between neurons via neurotransmitter release during synaptic vesicle fusion. To observe neurotransmitter uptake and ...

Cargo Loading onto Kinesin Powered Molecular Shuttles

Kinesin Powered Moleküler minibüsleri üzerine Kargo Yükleniyor

Cells have evolved sophisticated molecular machinery, such as kinesin motor proteins and microtubule filaments, to support active intracellular transport ...

Whole-Cell Recording of Calcium Release-Activated Calcium (CRAC) Currents in Human T Lymphocytes

Whole-Cell Recording of Calcium Release-Activated Calcium CRAC Currents in Human T Lymphocytes

İnsan T lenfositleri, Kalsiyum-Film Aktive Kalsiyum Tüm Hücre Kayıt (Kerek) Akımlar

In T lymphocytes, depletion of Ca2+ from the intracellular Ca2+ store leads to activation of plasmalemmal Ca2+ channels, called Calcium Release-Activated ...

Measuring Fast Calcium Fluxes in Cardiomyocytes

Hızlı Kalsiyum Dekapanları kardiyomiyositlerde Ölçme

Cardiomyocytes have multiple Ca2+ fluxes of varying duration that work together to optimize function 1,2. Changes in Ca2+ activity in response to ...

Direct Imaging of ER Calcium with Targeted-Esterase Induced Dye Loading (TED)

Direct Imaging of ER Calcium with Targeted-Esterase Induced Dye Loading TED

Hedefli-esteraz ile ER Kalsiyum Doğrudan Görüntüleme Kaynaklı Boya Yükleme (TED)

Visualization of calcium dynamics is important to understand the role of calcium in cell physiology. To examine calcium dynamics, synthetic fluorescent ...

Monitoring ER/SR Calcium Release with the Targeted Ca2+ Sensor CatchER+

Monitoring ER/SR Calcium Release with the Targeted Ca2+ Sensor CatchER+

Hedeflenen Ca ile ER / SR Kalsiyum Salınımının İzlenmesi<sup&gt; 2+</sup&gt; Sensör Catcher<sup&gt; +</sup

Intracellular calcium (Ca2+) transients evoked by extracellular stimuli initiate a multitude of biological processes in living organisms. At the center of ...

Forward Genetic Screen Using Transgenic Calcium Reporter Aequorin to Identify Novel Targets in Calcium Signaling

İleri Genetik Ekran Kullanarak Transgenik Kalsiyum Reporter Aequorin Kalsiyum Sinyalyeni Hedefleri Belirlemek için

Forward genetic screens have been important tools in the unbiased identification of genetic components involved in several biological pathways. The basis ...