Name: pressure controlled ventilation to induce acute lung injury in mice
Uploaded: 2011-05-05T12:00:00
Duration: 7 min 55 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Pressure Controlled Ventilation to Induce Acute Lung Injury in Mice at JoVE.com

<p class="jove_content"&gt; הלימודים הנוכחית נתמכים על ידי הלאומי ללב, ריאות, ודם המכון גרנט R01-HL0921, R01-DK083385 ו R01HL098294 כדי HK Eltzschig, 1K08HL102267-01 ל ט Eckle, ואת הקרן לחינוך הרדמה מענקי מחקר ל ט Eckle ו HK Eltzschig, ו American Heart Association גרנט ט Eckle ו HK Eltzschig ודויטשה Forschungsgemeinschaft (DFG) מלגת מחקר מ Koeppen.</p

הערות כלליות: כל הפעולות צריכות להתבצע תחת מיקרוסקופ לנתח זקוף (אולימפוס, SZX10 הודעה עם Z-Axis Crank עם סטנד בום סטנד STU2) וכן באמצעות coagulator כירורגית (11). קבוצות הניסוי צריך להיות תואם ככל האפשר גיל ומשקל כדי להבטיח את ההשוואה של התוצאות. הממשל, טמפרטורה לחץ דם, נוזל ההרדמה צריך להיות יציב לאורך כל הדרך. 1. הרדמה והכנת קנה הנשימה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש C57BL / 6 עכברים, כי הם לפחות 10 שבועות ויש לך גוף של 22-25 גרם להשרות הרדמה באמצעות נתרן pentobarbital ב 70 מנה ip מ&quot;ג / ק&quot;ג משקל גוף (6). שמור הרדמה עם כ 10 מ&quot;ג / ק&quot;ג / שעה נתרן pentobarbital. היה זהיר עם מינון יתר שכן הדבר עלול להפחית באופן משמעותי את לחץ הדם. Re-המינון של pentobarbital - גם לאחר שעות, יכולה להוביל לעלייה ברמות קשות פלזמה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר אינדוקציה הרדמה, עכברים מאובטח במצב שכיבה עם הגפיים העליונות והתחתונות המצורפת השולחן באמצעות סרט דביק, תפר מהודק עד הקרסוליים. לעשות את אותו הדבר עבור הראש באמצעות השיניים. הרחקה מספיק חשוב אינטובציה מוצלחת ניתוח מבוקר היטב. לפני הניתוח, לכסות את העכבר עם שמן מינרלי כדי להפחית את הסיכון לאלרגיה שיער העכבר. על מנת להבטיח כי טמפרטורת הגוף נשאר יציב לכסות את העכברים עם לעטוף מזון זמינים מסחרית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> המקום עכברים על השולחן בקרת טמפרטורה מחומם (RT, Effenberg, מינכן, גרמניה) עם בדיקה מדחום רקטלי המצורפת בקר משוב תרמי לשמירה על חום גופם על 37 ° C. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחשוף את קנה הנשימה בניתוח. לנתח הצדדים לרוחב הגב של קנה הנשימה של הרקמה החיבורית מקום שני 3.0 תפר משי כירורגית (הרווארד המנגנון, ארה&quot;ב) כל 10 ס&quot;מ מתחת לקנה הנשימה. התפרים צריך להיות כ 1 ס&quot;מ זו מזו. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בזהירות לחתוך את הקנה 3-4 מ&quot;מ מתחת הגרון בין שני הסחוסים מעגלית באמצעות מקפרסון-Vannas מספריים (8 ס&quot;מ, להב ישר; Precision Instruments העולם, ארה&quot;ב). הקפד לא לגרום לדימום, שכן הדבר עלול לבלבל את הפרמטרים התוצאה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בצע אינטובציה לקנה הנשימה באמצעות פוליאתילן cannulae בוטה (Insyte 22g, Beckton דיקינסון, ארה&quot;ב). הכנס את קצה cannulae פוליאתילן בזווית של 85 מעלות לתוך קנה הנשימה. ואז להטות את cannulae כך עולה בקנה אחד עם לומן קנה הנשימה. לאט לאט לקדם את הצינור בהמשך קנה הנשימה עד קצה cannulae נעלם בתוך הפתח החזה. לקבע את הצינורית בתנוחה זו עם תפר שתי משי כירורגית להציב הגבי של קנה הנשימה (ראה 1.4). </li></ol> 2. טכניקה של פגיעה ההנשמה-Induced ריאות <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חבר את צינור ההנשמה. כדי לגרום פגיעה ריאות אנו משתמשים בטכניקה נשלטת לחץ אוורור באמצעות C סרוו 900 מסימנס (DRE וטרינרית, ארה&quot;ב). בעלי חיים יהיה מאוורר באמצעות לחץ inspiratory שיא של 45 תדר, mbar של 80 נשימות / דקה לבין לחץ חיובי בסוף הנשיפה של 0-3 mbar עם FiO 2 = 1.0. ההשראה יחס תפוגה צריכים להיות 01:01. למרות העובדה כי ה-C סרוו 900 בנוי כמו מאוורר לבני אדם, השימוש בו הגדרה ההנשמה נשלט הלחץ עובד מצוין אוורור של עכברים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מוניטור קצב הלב עם א.ק.ג. (למשל Hewlett Packard, B blingen, גרמניה). ודא כי קצב הלב לא לרדת מתחת 400. אחד צריך לראות שינוי של ציר הלב בצד ימין, כאשר אוורור מכני הוא הנהיג כסימן גדל הלחצים בעורק הריאה בעקבות עלייה בלחץ intrathoracic. אם העכבר מפתח ברדיקרדיה, לבדוק את הטמפרטורה ואת המינון הרדמה / ריכוז. Xylacin / Ketamin הרדמה מעוררת בלב ליבו של 250 / דקה ולכן אינו מומלץ. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החלת החלפת נוזלים תקין. עירוי תמיסת מלח רגיל עם 0.1 מ&quot;ל / שעה באמצעות קטטר עורקי או ורידי יש לבצע לפני אוורור כדי להבטיח הגשת ורידי מספיק. בשל הלחצים אוורור גבוהה החזרה ורידית ללב נפגעת, דבר שעשוי להוביל לירידה קריטית של לחץ עורקי ממוצע. כמו כן, בולוס מלוחים של μl 500 יכול להינתן ip לפני הניתוח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> המקום קטטר בעורק הראש עבור הקלטה רציפה של לחץ דם (27). צרף את הזרוע לגוף לפני שאתה מתחיל לנתח את העורק. עורק הצוואר חשוף דרך לנתיחה בוטה של ​​שרירי paratracheal. בעקבות חשיפת נוסף והימנעות קפדנית של טראומה כל רקמות (במיוחד של העצב מחנק), קטטר מוכנס לתוך הכלי באמצעות שני התפרים ואת מלחציים קטן (37). זה יחשוף עוד קטע של העורק. מניחים ליגטורה בסוף מאוד של עורק הצוואר. צרף מהדק גדול לסוף תפר כדי להשיג ה מתח או לקבעדואר תפר לשולחן באמצעות קלטת. מקום אחר תפר סביב העורק לנתח את העורק עד הסוף דיסטלי מאוד. כאן, במקום מהדק קטן. השתמש במספריים מיקרו לחתוך פתח אלכסוני קטן לתוך העורק. החזק את הפתיחה עם מלקחיים קנס (דומון, WPI) ולקדם את הקטטר בגודל תקין עם הידיים / מלקחיים. צור קשר עם תפר השני שלך ולהבטיח את העורק. שחרר את מהדק ולקדם את הקטטר יותר. Secure את הקטטר קשרים עם כמה קלטות. לחילופין את הקטטר העורק הראשי יכול להיות מקום בסוף הניסוי כדי לאסוף דגימות דם עורקי לניתוח גז דם. </li></ol> 3. שחזור של דגימות רקמה אחרי 3 שעות של אוורור מכני, נאספות דגימות כדי להעריך את מידת הפגיעה ריאות. אנו ממליצים על איסוף נוזל שטיפה brochnoalveolar (BAL), הדם בעורקים רקמת הריאה. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השג נוזל BAL בסוף הניסוי. לאחר העמקה של הרדמה, שטוף את צינור לקנה הנשימה עם פוספט 1 מ&quot;ל בופר סליין (PBS). הנוזל צריך להישאר קנה הנשימה / הריאות למשך שלוש שניות לפני זה הוא התאוששות באמצעות מזרק המחובר. BAL היא Snap-קפואים בחנקן נוזלי המאוחסן ב -80 ° C לניתוח נוסף. שים לב כי נפח התאושש יכול להיות משמעותית פחות מ&quot;ל 1. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בצע גז בדיקות דם בסוף הניסוי. כדי לעשות זאת, חתך צריכה להיעשות ממש מתחת לעצם החזה. החזק את החזה עם מלקחיים במידה חתך לאורך כלוב הצלעות. בשלב הבא, הסרעפת היא חרות בקצוות והוא לגזור מן הצלעות. עכשיו יש נוף פתוח לתוך הפתח התחתון של החזה. הרם את החזה עם מלקחיים ולפתוח את בית החזה על ידי חתכים ארוכים בצד ימין ושמאל (לרוחב ככל האפשר) כדי להשלים את קיר בית החזה הקדמי מופנה מעלה במחלקות. זה צריך להיעשות, בעוד בעלי החיים עדיין ניסיוני מאוורר מכאני. החדר השמאלי הוא ניקב באמצעות מחט 27 ½ G וניתוח דם עורקי מתבצע באמצעות מערכת i-STAT (אבוט, ארה&quot;ב). אם ניתוח עורקי גז דם יש לבצע, BAL לא ניתן להשיג, שכן זו תהיה confounder משמעותית את התוצאות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחילופין שיטה לעיל, דגימות דם עורקי ניתן לאסוף באמצעות קטטר העורק הראשי. אולם זה צריך להיעשות לפני BAL מתקבל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> והבלו הריאות en-הגוש ידי משיכת את לב לחתוך את קנה הנשימה. האם פיסת רקמה מוכנה לספוג דם, כך באתר כירורגית גלוי. משוך את הלב לכיוון הבטן לחתוך בזהירות לאורך עמוד השדרה לגייס את כל איברי החזה. חותכים את אבי העורקים, להסיר את איברי החזה ומניחים אותם על שולחן הניתוח נקיים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחתוך את הלב ואת כלי מרכזי של המדגם רקמות. ודא כי אין כל רקמת בלוטת התימוס מחוברת עדיין הריאה. הפרד את הריאות עם מספריים ומניחים צינורות בודדים Snap-להקפיא. חנות ב -80 ° C לניתוח נוסף. </li></ol> 4. מדידה של פגיעה ריאות אנו ממליצים להשתמש בפרמטרים התוצאה הבאה כדי להעריך את מידת הפגיעה ריאות: ביצוע ELISA אלבומין (Bethyl מעבדות, ארה&quot;ב) ו myeloperoxidase (MPO) ELISA (Hycult ביוטכנולוגיה, ארה&quot;ב) כדי להעריך את מידת תפקוד מחסום וכמות דלקתיות תאים בנוזל BAL. בצע ELISA MPO גם בצורת רקמת הריאה. אם רטוב עד יבש יחס נמדדת איננו להשיג נוזל BAL ואת מחזור הדם הריאתי אינו סמוק (ראה 3.3). מדדו את המשקל של הריאות לאחר כריתה. ואז הריאות הם lyophilized עבור 48 שעות ו רקמת הריאות שוב נמדד. אז היחס רטוב אל היבשה, כפי שהיא נמדדת מ&quot;ג של מים לכל מיליגרם של רקמה יבשה (5). <img src="/files/ftp_upload/2525/2525fig1.jpg" alt="איור 1" /> באיור 1. התוכן חלבון BAL בתגובה וילי. עכברים היו מורדמים עם pentobarbital, אוורור מכני הונהג ועכברים היו מאוורר באמצעות לחץ שבשליטת הגדרות (לחץ inspiratory של 45 mbar, חיובי בסוף exspiratory לחץ mbar 3, 100% השראה ריכוז החמצן). לאחר 0, 1, 2 ו - 3 שעות של אוורור BAL היה לקצור את תכולת החלבון היה לכמת באמצעות assay חומצה bicinchoninic (assay BCA). השינוי היחסי של התוכן חלבון מוצג מנורמל ל -0 שעות של אוורור (n = 4 לכל קבוצה, * מציין p &lt;0.05 לעומת שליטה, ממוצע ± SEM)

<ol>
	<li>Eckle, T., Faigle, M., Grenz, A., Laucher, S., Thompson, L. F., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A2B+adenosine+receptor+dampens+hypoxia-induced+vascular+leak.">A2B adenosine receptor dampens hypoxia-induced vascular leak.</a> Blood. 111, 2024-2035 (2008).</li><li>Eckle, T., Fullbier, L. G. r. e. n. z., A, ., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Usefulness+of+pressure-controlled+ventilation+at+high+inspiratory+pressures+to+induce+acute+lung+injury+in+mice.">Usefulness of pressure-controlled ventilation at high inspiratory pressures to induce acute lung injury in mice.</a> Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 295, 718-724 (2008).</li><li>Eckle, T., Fullbier, L., Wehrmann, M., Khoury, J., Mittelbronn, M., Ibla, J., Rosenberger, P., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+ectonucleotidases+CD39+and+CD73+in+innate+protection+during+acute+lung+injury.">Identification of ectonucleotidases CD39 and CD73 in innate protection during acute lung injury.</a> J Immunol. 178, 8127-8137 (2007).</li><li>Eckle, T., Grenz, A., Kohler, D., Redel, A., Falk, M., Rolauffs, B., Osswald, H., Kehl, F., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Systematic+evaluation+of+a+novel+model+for+cardiac+ischemic+preconditioning+in+mice.">Systematic evaluation of a novel model for cardiac ischemic preconditioning in mice.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 291, 2533-2540 (2006).</li><li>Eckle, T., Grenz, A., Laucher, S., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A2B+adenosine+receptor+signaling+attenuates+acute+lung+injury+by+enhancing+alveolar+fluid+clearance+in+mice.">A2B adenosine receptor signaling attenuates acute lung injury by enhancing alveolar fluid clearance in mice.</a> J Clin Invest. 118, 3301-3315 (2008).</li><li>Eckle, T., Krahn, T., Grenz, A., Kohler, D., Mittelbronn, M., Ledent, C., Jacobson, M. A., Osswald, H., Thompson, L. F., Unertl, K., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardioprotection+by+ecto-5'-nucleotidase+(CD73)+and+A2B+adenosine+receptors.">Cardioprotection by ecto-5'-nucleotidase (CD73) and A2B adenosine receptors.</a> Circulation. 115, 1581-1590 (2007).</li><li>Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adenosine:+an+old+drug+newly+discovered.">Adenosine: an old drug newly discovered.</a> Anesthesiology. 111, 904-915 (2009).</li><li>Eltzschig, H. K., Eckle, T., Mager, A., Kuper, N., Karcher, C., Weissmuller, T., Boengler, K., Schulz, R., Robson, S. C., Colgan, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ATP+release+from+activated+neutrophils+occurs+via+connexin+43+and+modulates+adenosine-dependent+endothelial+cell+function.">ATP release from activated neutrophils occurs via connexin 43 and modulates adenosine-dependent endothelial cell function.</a> Circ Res. 99, 1100-1108 (2006).</li><li>Eltzschig, H. K., Ibla, J. C., Furuta, G. T., Leonard, M. O., Jacobson, K. A., Enjyoji, K., Robson, S. C., Colgan, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coordinated+adenine+nucleotide+phosphohydrolysis+and+nucleoside+signaling+in+posthypoxic+endothelium:+role+of+ectonucleotidases+and+adenosine+A2B+receptors.">Coordinated adenine nucleotide phosphohydrolysis and nucleoside signaling in posthypoxic endothelium: role of ectonucleotidases and adenosine A2B receptors.</a> J Exp Med. 198, 783-796 (2003).</li><li>Eltzschig, H. K., Kohler, D., Eckle, T., Kong, T., Robson, S. C., Colgan, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Central+role+of+Sp1-regulated+CD39+in+hypoxia/ischemia+protection.">Central role of Sp1-regulated CD39 in hypoxia/ischemia protection.</a> Blood. 113, 224-232 (2009).</li><li>Frick, J. S., MacManus, C. F., Scully, M., Glover, L. E., Eltzschig, H. K., Colgan, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contribution+of+adenosine+A2B+receptors+to+inflammatory+parameters+of+experimental+colitis.">Contribution of adenosine A2B receptors to inflammatory parameters of experimental colitis.</a> J Immunol. 182, 4957-4964 (2009).</li><li>Grenz, A., Eckle, T., Zhang, H., Huang, D. Y., Wehrmann, M., Kohle, C., Unertl, K., Osswald, H., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+a+hanging-weight+system+for+isolated+renal+artery+occlusion+during+ischemic+preconditioning+in+mice.">Use of a hanging-weight system for isolated renal artery occlusion during ischemic preconditioning in mice.</a> Am J Physiol Renal Physiol. 292, 475-485 (2007).</li><li>Grenz, A., Osswald, H., Eckle, T., Yang, D., Zhang, H., Tran, Z. V., Klingel, K., Ravid, K., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Reno-Vascular+A2B+Adenosine+Receptor+Protects+the+Kidney+from+Ischemia.">The Reno-Vascular A2B Adenosine Receptor Protects the Kidney from Ischemia.</a> PLoS Medicine. 5, e137-e137 (2008).</li><li>Grenz, A., Zhang, H., Eckle, T., Mittelbronn, M., Wehrmann, M., Kohle, C., Kloor, D., Thompson, L. F., Osswald, H., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protective+role+of+ecto-5'-nucleotidase+(CD73)+in+renal+ischemia.">Protective role of ecto-5'-nucleotidase (CD73) in renal ischemia.</a> J Am Soc Nephrol. 18, 833-845 (2007).</li><li>Grenz, A., Zhang, H., Hermes, M., Eckle, T., Klingel, K., Huang, D. Y., Muller, C. E., Robson, S. C., Osswald, H., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contribution+of+E-NTPDase1+(CD39)+to+renal+protection+from+ischemia-reperfusion+injury.">Contribution of E-NTPDase1 (CD39) to renal protection from ischemia-reperfusion injury.</a> FASEB J. 21, 2863-2873 (2007).</li><li>Grenz, A., Zhang, H., Weingart, J., von Wietersheim, S., Eckle, T., Schnermann, J. B., Kohle, C., Kloor, D., Gleiter, C. H., Vallon, V., Eltzschig, H. K., Osswald, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lack+of+effect+of+extracellular+adenosine+generation+and+signalling+on+renal+erythropoietin+secretion+during+hypoxia.">Lack of effect of extracellular adenosine generation and signalling on renal erythropoietin secretion during hypoxia.</a> Am J Physiol Renal Physiol. , (2007).</li><li>Haeberle, H. A., Durrstein, C., Rosenberger, P., Hosakote, Y. M., Kuhlicke, J., Kempf, V. A., Garofalo, R. P., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oxygen-independent+stabilization+of+hypoxia+inducible+factor+(HIF)-1+during+RSV+infection.">Oxygen-independent stabilization of hypoxia inducible factor (HIF)-1 during RSV infection.</a> PLoS ONE. 3, e3352-e3352 (2008).</li><li>Hart, M. L., Gorzolla, I. C., Schittenhelm, J., Robson, S. C., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=SP1-dependent+induction+of+CD39+facilitates+hepatic+ischemic+preconditioning.">SP1-dependent induction of CD39 facilitates hepatic ischemic preconditioning.</a> J Immunol. 184, 4017-4024 (2010).</li><li>Hart, M. L., Henn, M., Kohler, D., Kloor, D., Mittelbronn, M., Gorzolla, I. C., Stahl, G. L., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+extracellular+nucleotide+phosphohydrolysis+in+intestinal+ischemia-reperfusion+injury.">Role of extracellular nucleotide phosphohydrolysis in intestinal ischemia-reperfusion injury.</a> FASEB J. 22, 2784-2797 (2008).</li><li>Hart, M. L., Jacobi, B., Schittenhelm, J., Henn, M., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cutting+Edge:+A2B+Adenosine+receptor+signaling+provides+potent+protection+during+intestinal+ischemia/reperfusion+injury.">Cutting Edge: A2B Adenosine receptor signaling provides potent protection during intestinal ischemia/reperfusion injury.</a> J Immunol. 182, 3965-3968 (2009).</li><li>Hart, M. L., Kohler, D., Eckle, T., Kloor, D., Stahl, G. L., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+treatment+of+mouse+or+human+blood+with+soluble+5'-nucleotidase+inhibits+platelet+aggregation.">Direct treatment of mouse or human blood with soluble 5'-nucleotidase inhibits platelet aggregation.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 28, 1477-1483 (2008).</li><li>Hart, M. L., Much, C., Gorzolla, I. C., Schittenhelm, J., Kloor, D., Stahl, G. L., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extracellular+adenosine+production+by+ecto-5'-nucleotidase+protects+during+murine+hepatic+ischemic+preconditioning.">Extracellular adenosine production by ecto-5'-nucleotidase protects during murine hepatic ischemic preconditioning.</a> Gastroenterology. 135, 1739-1750 (2008).</li><li>Hart, M. L., Much, C., Kohler, D., Schittenhelm, J., Gorzolla, I. C., Stahl, G. L., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+a+hanging-weight+system+for+liver+ischemic+preconditioning+in+mice.">Use of a hanging-weight system for liver ischemic preconditioning in mice.</a> Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 294, 1431-1440 (2008).</li><li>Hartmann, H., Eltzschig, H. K., Wurz, H., Hantke, K., Rakin, A., Yazdi, A. S., Matteoli, G., Bohn, E., Autenrieth, I. B., Karhausen, J., Neumann, D., Colgan, S. P., Kempf, V. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypoxia-independent+activation+of+HIF-1+by+enterobacteriaceae+and+their+siderophores.">Hypoxia-independent activation of HIF-1 by enterobacteriaceae and their siderophores.</a> Gastroenterology. 134, 756-767 (2008).</li><li>Heinzelmann, F., Jendrossek, V., Lauber, K., Nowak, K., Eldh, T., Boras, R., Handrick, R., Henkel, M., Martin, C., Uhlig, S., Kohler, D., Eltzschig, H. K., Wehrmann, M., Budach, W., Belka, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Irradiation-induced+pneumonitis+mediated+by+the+CD95/CD95-ligand+system.">Irradiation-induced pneumonitis mediated by the CD95/CD95-ligand system.</a> J Natl Cancer Inst. 98, 1248-1251 (2006).</li><li>Koeppen, M., Eckle, T., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Selective+deletion+of+the+A1+adenosine+receptor+abolishes+heart-rate+slowing+effects+of+intravascular+adenosine+in+vivo.">Selective deletion of the A1 adenosine receptor abolishes heart-rate slowing effects of intravascular adenosine in vivo.</a> PLoS One. 4, e6784-e6784 (2009).</li><li>Kohler, D., Eckle, T., Faigle, M., Grenz, A., Mittelbronn, M., Laucher, S., Hart, M. L., Robson, S. C., Muller, C. E., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CD39/ectonucleoside+triphosphate+diphosphohydrolase+1+provides+myocardial+protection+during+cardiac+ischemia/reperfusion+injury.">CD39/ectonucleoside triphosphate diphosphohydrolase 1 provides myocardial protection during cardiac ischemia/reperfusion injury.</a> Circulation. 116, 1784-1794 (2007).</li><li>Kuhlicke, J., Frick, J. S., Morote-Garcia, J. C., Rosenberger, P., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypoxia+Inducible+Factor+(HIF)-1+Coordinates+Induction+of+Toll-Like+Receptors+TLR2+and+TLR6+during+Hypoxia.">Hypoxia Inducible Factor (HIF)-1 Coordinates Induction of Toll-Like Receptors TLR2 and TLR6 during Hypoxia.</a> PLoS ONE. 2, e1364-e1364 (2007).</li><li>Morote-Garcia, J. C., Rosenberger, P., Kuhlicke, J., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=HIF-1-dependent+repression+of+adenosine+kinase+attenuates+hypoxia-induced+vascular+leak.">HIF-1-dependent repression of adenosine kinase attenuates hypoxia-induced vascular leak.</a> Blood. 111, 5571-5580 (2008).</li><li>Morote-Garcia, J. C., Rosenberger, P., Nivillac, N. M., Coe, I. R., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypoxia-inducible+factor-dependent+repression+of+equilibrative+nucleoside+transporter+2+attenuates+mucosal+inflammation+during+intestinal+hypoxia.">Hypoxia-inducible factor-dependent repression of equilibrative nucleoside transporter 2 attenuates mucosal inflammation during intestinal hypoxia.</a> Gastroenterology. 136, 607-618 (2009).</li><li>Reutershan, J., Vollmer, I., Stark, S., Wagner, R., Ngamsri, K. C., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adenosine+and+inflammation:+CD39+and+CD73+are+critical+mediators+in+LPS-induced+PMN+trafficking+into+the+lungs.">Adenosine and inflammation: CD39 and CD73 are critical mediators in LPS-induced PMN trafficking into the lungs.</a> FASEB J. 23, 473-482 (2009).</li><li>Schingnitz, U., Hartmann, K., Macmanus, C. F., Eckle, T., Zug, S., Colgan, S. P., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Signaling+through+the+A2B+adenosine+receptor+dampens+endotoxin-induced+acute+lung+injury.">Signaling through the A2B adenosine receptor dampens endotoxin-induced acute lung injury.</a> J Immunol. 184, 5271-5279 (2010).</li><li>Thompson, L. F., Eltzschig, H. K., Ibla, J. C., Van De Wiele, C. J., Resta, R., Morote-Garcia, J. C., Colgan, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Crucial+role+for+ecto-5'-nucleotidase+(CD73)+in+vascular+leakage+during+hypoxia.">Crucial role for ecto-5'-nucleotidase (CD73) in vascular leakage during hypoxia.</a> J. Exp. Med. 200, 1395-1405 (2004).</li><li>Aherne, C. M., Kewley, E. M., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+resurgence+of+A2B+adenosine+receptor+signaling.">The resurgence of A2B adenosine receptor signaling.</a> Biochim Biophys Acta. , (2010).</li><li>Eckle, T., Koeppen, M., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+extracellular+adenosine+in+acute+lung+injury.">Role of extracellular adenosine in acute lung injury.</a> Physiology (Bethesda). 24, 298-306 (2009).</li><li>Koeppen, M., Feil, R., Siegl, D., Feil, S., Hofmann, F., Pohl, U., de Wit, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=cGMP-dependent+protein+kinase+mediates+NO-+but+not+acetylcholine-induced+dilations+in+resistance+vessels+in+vivo.">cGMP-dependent protein kinase mediates NO- but not acetylcholine-induced dilations in resistance vessels in vivo.</a> Hypertension. 44, 952-955 (2004).</li></ol>

המחקר הנוכחי מתאר טכניקה של ביצוע ההנשמה-Induced פגיעה ריאות בעכברים. מודל זה מדגים פגיעה לשעתקו מאוד בשל אוורור בלחץ גבוה. חוקרים הרואים בלימוד פציעה ריאות חריפה, בעכברים עשויים להפיק תועלת ממודל זה.

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><th> שם מגיב </th><th> חברה </th><th> מספר קטלוגי </th><th> הערות (אופציונלי) </th></tr><tr><td> נתרן Pentobarbital (פלוס קטלניות) </td><td> Vortech Ls פרמצבטיות בע&quot;מ, </td><td> VPL 9372 </td><td> 4mg/mL ב מלוחים </td></tr><tr><td> Insyte 22 G </td><td> Beckton דיקינסון </td><td> n / a </td><td></td></tr><tr><td> תפר, משי 4.0 </td><td> הרווארד Apparatus </td><td> 517698 </td><td></td></tr><tr><td> תפר, Prolene 8.0 </td><td> Ethicon, ארה&quot;ב </td><td> M8739 </td><td> לשימוש חוזר </td></tr><tr><td> סימנס 900 ° C </td><td> DRE וטרינרית, ארה&quot;ב </td><td> # 336 </td><td> שיפוץ </td></tr><tr><td> מיקרוסקופ לנתח (SZX10) </td><td> אולימפוס </td><td> n / a </td><td> לשקול ומרחק עבודה נדיבה </td></tr><tr><td> חימום טבלה </td><td> RT, Effenberger, גרמניה </td><td> n / a </td><td> רק ספק אחד </td></tr><tr><td> לחץ דם במכשיר </td><td> Sense Cyber, Inc </td><td> BPM02 </td><td></td></tr><tr><td> אני STAT </td><td> אבוט </td><td> n / a </td><td></td></tr></tbody></table>

pressure controlled ventilation to induce acute lung injury in mice

מודלים Murine נמצאים בשימוש נרחב לחקור פציעות חריפה של מערכות ואיברים שונים (1-34). פציעה ריאות חריפה (עלי), אשר מתרחשת עם להנשמה מלאכותית ממושכת, תורמת התחלואה והתמותה של מחלה קריטית, מחקרים על מטרות גנטי או תרופתי הרומן הם אזורים של חקירה אינטנסיבית (1-3, 5, 8, 26, 30, 33 -36). ALI מוגדרת על ידי התפרצות חריפה של המחלה, אשר מוביל בצקת שאינם לב ריאתי ליקוי הבאות של ריאתי גז החליפין (36). פיתחנו מודל Murine של עלי באמצעות אוורור לחץ שבשליטת לגרום ההנשמה-Induced פגיעה ריאה (2). למטרה זו, עכברים C57BL / 6 מורדמים ו ההנשמה מתבצעת ואחריו אינדוקציה של עלי באמצעות אוורור מכני. עכברים הם מאוורר בקביעת הלחץ שבשליטת עם הלחץ inspiratory שיא של 45 mbar מעל 1 - 3 שעות. כפי פרמטרים התוצאה, בצקת ריאות (רטוב על יבש יחס), תוכן נוזל ברונכואלוואולרית אלבומין, נוזל ברונכואלוואולרית ותוכן ריאתי myeloperoxidase רקמות חילוף הגזים ריאתי מוערכים (2). באמצעות טכניקה זו נוכל להראות שזה מספיק גורם לדלקת ריאות חריפה יכולה להבחין בין קבוצות הטיפול השונות או גנוטיפים (1-3, 5). לכן טכניקה זו עשויה לסייע לחוקרים מי לרדוף המנגנונים המולקולריים המעורבים עלי באמצעות גישה גנטיות בעכברים עם מחיקת הגן במיקוד.

Watch this Scientific Journal Video about Pressure Controlled Ventilation to Induce Acute Lung Injury in Mice at JoVE.com

Pressure Controlled Ventilation to Induce Acute Lung Injury in Mice

מודל Murine לפגיעה ריאות הנגרמת ההנשמה הוא כלי חשוב ללמוד פציעה ריאות חריפה<em&gt; In vivo</em&gt;. כאן אנו מדווחים החלים קל<em&gt; באתרו</em&gt; מודל פציעה ריאות חריפה שימוש בלחץ גבוה להנשמה מלאכותית כדי לגרום לכישלון חריף של הריאה.

לחץ אוורור מבוקר כדי לגרום פגיעה ריאות חריפה על עכברים

Murine models are extensively used to investigate acute injuries of different organs systems (1-34). Acute lung injury (ALI), which occurs with prolonged ...

Research

JoVE Journal

Medicine

The CYP2D6 Animal Model: How to Induce Autoimmune Hepatitis in Mice

CYP2D6 מודל החיה: כיצד לגרום דלקת כבד אוטואימונית עכברים

Autoimmune hepatitis is a rare but life threatening autoimmune disease of the liver of unknown etiology1,2. In the past many attempts have been made to ...

Controlled Cervical Laceration Injury in Mice

פגיעה קריעת צוואר הרחם מבוקרת בעכברים

Use of genetically modified mice enhances our  understanding of molecular mechanisms underlying several neurological disorders  such as a spinal cord ...

Ischemia-reperfusion Model of Acute Kidney Injury and Post Injury Fibrosis in Mice

דגם איסכמיה reperfusion של פגיעה חריפה בכליות ופגיעים ההודעה פיברוזיס בעכברים

Ischemia-reperfusion induced acute kidney injury (IR-AKI) is widely used as a model of AKI in mice, but results are often quite variable with high, often ...

Controlled Cortical Impact Model for Traumatic Brain Injury

השפעת דגם קליפת המוח מבוקר לפגיעה מוחית טראומטית

Every year over a million Americans suffer a traumatic brain injury (TBI).  Combined with the incidence of TBIs worldwide, the physical, emotional, ...

Sublingual Immunotherapy as an Alternative to Induce Protection Against Acute Respiratory Infections

אימונותרפיה תת לשונית כחלופה ללהשרות הגנה מפני זיהומים בדרכי הנשימה חריפים

Sublingual route has been widely used to deliver small molecules into the bloodstream and to modulate the immune response at different sites. It has been ...

Cardiac Catheterization in Mice to Measure the Pressure Volume Relationship: Investigating the Bowditch Effect

צנתור לב בעכברים כדי למדוד את יחסי נפח לחץ: חקירת אפקט Bowditch

Animal models that mimic human cardiac disorders have been created to test potential therapeutic strategies. A key component to evaluating these ...

Open Tracheostomy Gastric Acid Aspiration Murine Model of Acute Lung Injury Results in Maximal Acute Nonlethal Lung Injury

להרחיב הנשמת קיבת חומצה שאיפת Murine הדגם של פגיעה החריפה ריאות תוצאות ב מקסימלי חריפה קטלנית פגיעת ריאות

Acid pneumonitis is a major cause of sterile acute lung injury (ALI) in humans. Acid pneumonitis spans the clinical spectrum from asymptomatic to acute ...

Balloon-based Injury to Induce Myointimal Hyperplasia in the Mouse Abdominal Aorta

מבוסס על בלון פציעה לזירוז היפרפלזיה Myointimal באבי העורקים בטן העכבר

The use of animal models is essential for a better understanding of MH, one major cause for arterial stenosis.In this article, we demonstrate a murine ...

A Closed-chest Model to Induce Transverse Aortic Constriction in Mice

דגם סגור-החזה לזירוז רוחבי. התרחבות אבי העורקים בעכברים

Research on cardiac hypertrophy and heart failure is frequently based on pressure overload mouse models induced by TAC. The standard procedure is to ...

Real-time Pressure-volume Analysis of Acute Myocardial Infarction in Mice

ניתוח בזמן אמת לחץ-נפח של אוטם אקוטי בעכברים

Acute myocardial infarction can lead to acute heart failure and cardiogenic shock. The evaluation of hemodynamics is critical for the evaluation of any ...