Name: pressure controlled ventilation to induce acute lung injury in mice
Uploaded: 2011-05-05T12:00:00
Duration: 7 min 55 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Pressure Controlled Ventilation to Induce Acute Lung Injury in Mice at JoVE.com

<p class="jove_content"&gt; Den nuvarande studier stöds av National Heart, Lung, and Blood Institute Grant R01-HL0921, R01-DK083385 och R01HL098294 till HK Eltzschig, den 1K08HL102267-01 till T. Eckle och Stiftelsen för anestesi utbildning och forskningsbidrag till T. Eckle och HK Eltzschig, och American Heart Association Bidrag till T. Eckle och HK Eltzschig och Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) forskning stipendium till M. Koeppen.</p

Allmänna anmärkningar: All verksamhet ska ske under en upprätt dissekera mikroskop (Olympus, SZX10 med Z-Axis Crank-post STU2 Stand Boom Stand) och genom att använda en kirurgisk coagulator (11). Den experimentella grupper bör matchas så bra som möjligt i ålder och vikt för att garantera jämförbarhet av resultaten. Temperatur, blodtryck, anestesi-och vätsketillförsel bör vara stabila under. 1. Anestesi och luftstrupen förberedelse <ol><li> Använd C57BL / 6 möss som är minst 10 veckor gammal och har en kropp av 22-25 g. Inducera anestesi med natrium pentobarbital vid en dos 70 mg / kg kroppsvikt ip (6). Upprätthålla anestesi ungefär med 10 mg / kg / timme natrium pentobarbital. Var försiktig med att överdosera eftersom detta påtagligt kan sänka blodtrycket. Re-dosering av pentobarbital - även efter timmar-kan leda till allvarliga ökningar i plasmanivåerna. </li><li> Efter anestesi induktion, säker möss i ryggläge med övre och nedre extremiteterna fäst vid bordet med hjälp av en tejp och en sutur fäst till anklarna. Gör samma sak för huvudet med hjälp av tänderna. Tillräckligt besöksförbud är viktigt för en lyckad intubering och en väl kontrollerad kirurgi. Före operation, täck musen med mineralolja för att minska risken för musen hår allergi. För att säkerställa att kroppstemperaturen förblir stabil täcka möss med kommersiellt tillgängliga mat wrap. </li><li> Placera möss på en temperatur-kontrollerad uppvärmd tabellen (RT, Effenberg, München, Tyskland) med en rektal termometer sond fäst termisk återföring controller för att upprätthålla kroppstemperaturen vid 37 ° C. </li><li> Exponera luftstrupen kirurgiskt. Dissekera laterala och dorsala sidan av luftstrupen av bindväv och placera två 3,0 siden kirurgiska suturer (Harvard apparater, USA) var 10 cm lång under luftstrupen. Stygnen ska vara ca 1 cm mellanrum. </li><li> Försiktigt incise luftstrupen 3 - 4 mm nedanför struphuvudet mellan två cirkulära brosk med hjälp av en McPherson-Vannas Scissors (8 cm, rakt blad, World precisionsinstrument, USA). Se till att inte orsaka en blödning, eftersom det kan förbrylla resultatet parametrar. </li><li> Utför en intubation med ett trubbigt polyeten kanyler (Insyte 22g, Beckton Dickinson, USA). Sätt spetsen av polyeten kanyler i en 85 graders vinkel ner i luftstrupen. Sedan luta kanyler så det är i linje med trakeal lumen. Sakta förväg röret längre ner i luftstrupen tills spetsen kanyler har försvunnit i bröstkorgen bländare. Fixera röret i detta läge med två kirurgiska siden sutur placeras rygg av luftstrupe (se 1,4). </li></ol> 2. Teknik för ventilator-inducerad lungskada <ol><li> Anslut röret till en respirator. Att inducera lungskada vi använder en tryckstyrd ventilation teknik med hjälp av en Servo 900 C från Siemens (DRE veterinär, USA). Djur kommer att ventileras med hjälp av topp inspiratoriska tryck på 45 mbar, frekvens av 80 andetag / min och ett positivt slut expiratoriskt tryck på 0-3 mbar med en FiO 2 = 1,0. Inspirationen till utgångsdatum förhållandet skall vara 1:1. Trots det faktum att Servo 900 C är byggd som fläkt för människor, arbetar dess användning i en tryckstyrd respirator inställning utmärkt för ventilation av möss. </li><li> Pulsmätare med ett EKG (t.ex. Hewlett Packard, B blingen, Tyskland). Se till att pulsen inte sjunker under 400. Man bör se en förskjutning av hjärtat axeln till höger, när mekanisk ventilation inleds som ett tecken på ökad lungartären tryck efter en ökning intratorakalt tryck. Om musen utvecklar bradykardi, kontrollera temperatur och narkos dos / koncentration. Xylacin / Ketamin anestesi framkallar ett hjärta mitt i 250 / min och rekommenderas därför inte. </li><li> Applicera en lämplig vätskeersättning. En infusion med fysiologisk koksaltlösning 0,1 ml / timme via en arteriell eller venkateter bör utföras före ventilation för att säkerställa tillräcklig venös arkivering. På grund av den höga ventilationen tryck på venöst återflöde till hjärtat är nedsatt, vilket kan leda till en kritisk droppe av genomsnittligt blodtryck. Dessutom kan en saltlösning bolusdos på 500 l ges ip före operation. </li><li> Placera en kateter i halspulsådern för kontinuerlig registrering av blodtryck (27). Fäst armen mot kroppen innan du börjar dissekera artären. Halspulsådern exponeras via dissektion av paratracheal muskler. Efter ytterligare exponering och noggrann undvikande av vävnad trauma (särskilt vagusnerven) är en kateter sätts in i fartyget med hjälp av två suturer och en liten klämma (37). Detta kommer att utsätta en längre segment av artären. Placera en ligatur i slutet av halspulsådern. Bifoga en större klämma till slutet av sutur för att få spänning eller fixera the sutur till bordet med tejp. Ställ ytterligare ett sutur runt artär och dissekera artären till den mycket distala änden. Här, placera en liten klämma. Använd mikro sax för att klippa en liten diagonal öppning in i artären. Håll öppningen med en fin pincett (Dumont, WPI) och avancera rätt storlek katetern med händerna / pincett. Gör en knut med din andra sutur och säkra artären. Lossa klämman och avancera katetern ytterligare. Säkra katetern med flera knutar och tejp. Alternativt halspulsådern katetern kan i slutet av försöket att samla arteriella blodprov för blodgas analys. </li></ol> 3. Återvinning av vävnadsprover Efter 3 timmar av mekanisk ventilation, tas blodprov för att bedöma omfattningen av lungskada. Vi rekommenderar att samla brochnoalveolar lavage (BAL), arteriellt blod och lungvävnad. <ol><li> Skaffa BAL vätska i slutet av experimentet. Efter fördjupningen av anestesi, spola trakealtub med 1 ml fosfatbuffrad saltlösning (PBS). Vätskan bör förbli i luftstrupen / lungorna under tre sekunder innan den återhämtning via den anslutna sprutan. BAL är snap-frysta i flytande kväve och förvaras vid -80 ° C för vidare analys. Var medveten om att den återvunna volymen kan vara betydligt mindre än 1 ml. </li><li> Utför analys blodgas vid slutet av experimentet. För att göra det, bör ett snitt göras precis under bröstbenet. Håll bröstbenet med pincett och omfattning snittet längs bröstkorgen. Därefter är membranet inristade i kanterna och skärs ut från revbenen. Nu finns det en öppen utsikt i nedre öppning av bröstkorgen. Lyft bröstbenet upp med pincett och öppna bröstkorgen av långa snitt på höger och vänster sida (så sidled som möjligt) så att hela främre bröstkorgen väggen slås uppåt. Detta bör göras samtidigt som försöksdjur fortfarande är mekaniskt ventilerad. Vänster kammare punkteras med hjälp av en 27 ½ G-nål och arteriella blod analyser utförs med hjälp av i-STAT System (Abbott, USA). Om arteriella blodgas analys bör göras, kan en BAL inte kan erhållas, eftersom detta kommer att bli en betydande confounder till resultaten. </li><li> Som alternativ till metoden ovan kan arteriella blodprover tas via halspulsådern kateter. Men detta bör göras innan BAL erhålls. </li><li> Excise lungorna sv-bloc genom att dra upp hjärtat och skär i luftstrupen. Har en bit vävnad redo att absorbera blod, så operationsområdet är synlig. Dra hjärtat i riktning mot buken och fräs försiktigt längs med ryggraden att mobilisera alla bröstkorg organ. Klipp aorta, ta bort bröstkorg organ och placera dem på en ren kirurgisk bord. </li><li> Klipp bort hjärtat och de stora fartyget av vävnadsprov. Se till att det inte finns någon bräss vävnad fortfarande sitter i lungorna. Separera lungorna med en sax och placera i enskilda rör och snap-frysa. Förvaras vid -80 ° C för vidare analys. </li></ol> 4. Mätning av lungskada Vi rekommenderar att du använder följande resultat parametrar för att bedöma omfattningen av lungskada: Genomför en albumin ELISA (Bethyl Laboratories, USA) och en myeloperoxidas (MPO) ELISA (Hycult Bioteknik, USA) för att bedöma omfattningen av hinder dysfunktion och mängden av inflammatoriska celler i BAL vätska. Gör en MPO ELISA också ligger till lungvävnad. Om våta till torra förhållande skall mätas får vi inte BAL vätska och lungkretsloppet inte spolas (se 3.3). Mät vikt lungorna efter excision. Sedan lungor frystorkat för 48 h och lungvävnad igen mäts. Sedan den våta till torra förhållande mäts i mg vatten per mg torr trasa (5). <img src="/files/ftp_upload/2525/2525fig1.jpg" alt="Figur 1" /> Figur 1. Proteininnehållet i BAL som svar på Vili. Möss var bedövas med pentobarbital var mekanisk ventilation inrättades och möss ventileras med hjälp av tryck-inställningar (inspiratoriska tryck på 45 mbar, positiv slutet exspiratory tryck 3 mbar, 100% inspirerad syrehalt). Efter 0, var 1, 2 och 3 timmar av ventilation BAL skördas och proteinhalten var kvantifieras med hjälp av en bicinchoninic syra analys (BCA test). Den relativa förändringen av proteinhalten visas normaliserad till 0 timmar ventilation (n = 4 per grupp, tyder * p &lt;0,05 jämfört med kontroll, genomsnitt ± SEM)

<ol>
	<li>Eckle, T., Faigle, M., Grenz, A., Laucher, S., Thompson, L. F., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A2B+adenosine+receptor+dampens+hypoxia-induced+vascular+leak.">A2B adenosine receptor dampens hypoxia-induced vascular leak.</a> Blood. 111, 2024-2035 (2008).</li><li>Eckle, T., Fullbier, L. G. r. e. n. z., A, ., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Usefulness+of+pressure-controlled+ventilation+at+high+inspiratory+pressures+to+induce+acute+lung+injury+in+mice.">Usefulness of pressure-controlled ventilation at high inspiratory pressures to induce acute lung injury in mice.</a> Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 295, 718-724 (2008).</li><li>Eckle, T., Fullbier, L., Wehrmann, M., Khoury, J., Mittelbronn, M., Ibla, J., Rosenberger, P., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+ectonucleotidases+CD39+and+CD73+in+innate+protection+during+acute+lung+injury.">Identification of ectonucleotidases CD39 and CD73 in innate protection during acute lung injury.</a> J Immunol. 178, 8127-8137 (2007).</li><li>Eckle, T., Grenz, A., Kohler, D., Redel, A., Falk, M., Rolauffs, B., Osswald, H., Kehl, F., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Systematic+evaluation+of+a+novel+model+for+cardiac+ischemic+preconditioning+in+mice.">Systematic evaluation of a novel model for cardiac ischemic preconditioning in mice.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 291, 2533-2540 (2006).</li><li>Eckle, T., Grenz, A., Laucher, S., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A2B+adenosine+receptor+signaling+attenuates+acute+lung+injury+by+enhancing+alveolar+fluid+clearance+in+mice.">A2B adenosine receptor signaling attenuates acute lung injury by enhancing alveolar fluid clearance in mice.</a> J Clin Invest. 118, 3301-3315 (2008).</li><li>Eckle, T., Krahn, T., Grenz, A., Kohler, D., Mittelbronn, M., Ledent, C., Jacobson, M. A., Osswald, H., Thompson, L. F., Unertl, K., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardioprotection+by+ecto-5'-nucleotidase+(CD73)+and+A2B+adenosine+receptors.">Cardioprotection by ecto-5'-nucleotidase (CD73) and A2B adenosine receptors.</a> Circulation. 115, 1581-1590 (2007).</li><li>Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adenosine:+an+old+drug+newly+discovered.">Adenosine: an old drug newly discovered.</a> Anesthesiology. 111, 904-915 (2009).</li><li>Eltzschig, H. K., Eckle, T., Mager, A., Kuper, N., Karcher, C., Weissmuller, T., Boengler, K., Schulz, R., Robson, S. C., Colgan, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ATP+release+from+activated+neutrophils+occurs+via+connexin+43+and+modulates+adenosine-dependent+endothelial+cell+function.">ATP release from activated neutrophils occurs via connexin 43 and modulates adenosine-dependent endothelial cell function.</a> Circ Res. 99, 1100-1108 (2006).</li><li>Eltzschig, H. K., Ibla, J. C., Furuta, G. T., Leonard, M. O., Jacobson, K. A., Enjyoji, K., Robson, S. C., Colgan, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coordinated+adenine+nucleotide+phosphohydrolysis+and+nucleoside+signaling+in+posthypoxic+endothelium:+role+of+ectonucleotidases+and+adenosine+A2B+receptors.">Coordinated adenine nucleotide phosphohydrolysis and nucleoside signaling in posthypoxic endothelium: role of ectonucleotidases and adenosine A2B receptors.</a> J Exp Med. 198, 783-796 (2003).</li><li>Eltzschig, H. K., Kohler, D., Eckle, T., Kong, T., Robson, S. C., Colgan, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Central+role+of+Sp1-regulated+CD39+in+hypoxia/ischemia+protection.">Central role of Sp1-regulated CD39 in hypoxia/ischemia protection.</a> Blood. 113, 224-232 (2009).</li><li>Frick, J. S., MacManus, C. F., Scully, M., Glover, L. E., Eltzschig, H. K., Colgan, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contribution+of+adenosine+A2B+receptors+to+inflammatory+parameters+of+experimental+colitis.">Contribution of adenosine A2B receptors to inflammatory parameters of experimental colitis.</a> J Immunol. 182, 4957-4964 (2009).</li><li>Grenz, A., Eckle, T., Zhang, H., Huang, D. Y., Wehrmann, M., Kohle, C., Unertl, K., Osswald, H., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+a+hanging-weight+system+for+isolated+renal+artery+occlusion+during+ischemic+preconditioning+in+mice.">Use of a hanging-weight system for isolated renal artery occlusion during ischemic preconditioning in mice.</a> Am J Physiol Renal Physiol. 292, 475-485 (2007).</li><li>Grenz, A., Osswald, H., Eckle, T., Yang, D., Zhang, H., Tran, Z. V., Klingel, K., Ravid, K., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Reno-Vascular+A2B+Adenosine+Receptor+Protects+the+Kidney+from+Ischemia.">The Reno-Vascular A2B Adenosine Receptor Protects the Kidney from Ischemia.</a> PLoS Medicine. 5, e137-e137 (2008).</li><li>Grenz, A., Zhang, H., Eckle, T., Mittelbronn, M., Wehrmann, M., Kohle, C., Kloor, D., Thompson, L. F., Osswald, H., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protective+role+of+ecto-5'-nucleotidase+(CD73)+in+renal+ischemia.">Protective role of ecto-5'-nucleotidase (CD73) in renal ischemia.</a> J Am Soc Nephrol. 18, 833-845 (2007).</li><li>Grenz, A., Zhang, H., Hermes, M., Eckle, T., Klingel, K., Huang, D. Y., Muller, C. E., Robson, S. C., Osswald, H., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contribution+of+E-NTPDase1+(CD39)+to+renal+protection+from+ischemia-reperfusion+injury.">Contribution of E-NTPDase1 (CD39) to renal protection from ischemia-reperfusion injury.</a> FASEB J. 21, 2863-2873 (2007).</li><li>Grenz, A., Zhang, H., Weingart, J., von Wietersheim, S., Eckle, T., Schnermann, J. B., Kohle, C., Kloor, D., Gleiter, C. H., Vallon, V., Eltzschig, H. K., Osswald, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lack+of+effect+of+extracellular+adenosine+generation+and+signalling+on+renal+erythropoietin+secretion+during+hypoxia.">Lack of effect of extracellular adenosine generation and signalling on renal erythropoietin secretion during hypoxia.</a> Am J Physiol Renal Physiol. , (2007).</li><li>Haeberle, H. A., Durrstein, C., Rosenberger, P., Hosakote, Y. M., Kuhlicke, J., Kempf, V. A., Garofalo, R. P., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oxygen-independent+stabilization+of+hypoxia+inducible+factor+(HIF)-1+during+RSV+infection.">Oxygen-independent stabilization of hypoxia inducible factor (HIF)-1 during RSV infection.</a> PLoS ONE. 3, e3352-e3352 (2008).</li><li>Hart, M. L., Gorzolla, I. C., Schittenhelm, J., Robson, S. C., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=SP1-dependent+induction+of+CD39+facilitates+hepatic+ischemic+preconditioning.">SP1-dependent induction of CD39 facilitates hepatic ischemic preconditioning.</a> J Immunol. 184, 4017-4024 (2010).</li><li>Hart, M. L., Henn, M., Kohler, D., Kloor, D., Mittelbronn, M., Gorzolla, I. C., Stahl, G. L., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+extracellular+nucleotide+phosphohydrolysis+in+intestinal+ischemia-reperfusion+injury.">Role of extracellular nucleotide phosphohydrolysis in intestinal ischemia-reperfusion injury.</a> FASEB J. 22, 2784-2797 (2008).</li><li>Hart, M. L., Jacobi, B., Schittenhelm, J., Henn, M., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cutting+Edge:+A2B+Adenosine+receptor+signaling+provides+potent+protection+during+intestinal+ischemia/reperfusion+injury.">Cutting Edge: A2B Adenosine receptor signaling provides potent protection during intestinal ischemia/reperfusion injury.</a> J Immunol. 182, 3965-3968 (2009).</li><li>Hart, M. L., Kohler, D., Eckle, T., Kloor, D., Stahl, G. L., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+treatment+of+mouse+or+human+blood+with+soluble+5'-nucleotidase+inhibits+platelet+aggregation.">Direct treatment of mouse or human blood with soluble 5'-nucleotidase inhibits platelet aggregation.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 28, 1477-1483 (2008).</li><li>Hart, M. L., Much, C., Gorzolla, I. C., Schittenhelm, J., Kloor, D., Stahl, G. L., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extracellular+adenosine+production+by+ecto-5'-nucleotidase+protects+during+murine+hepatic+ischemic+preconditioning.">Extracellular adenosine production by ecto-5'-nucleotidase protects during murine hepatic ischemic preconditioning.</a> Gastroenterology. 135, 1739-1750 (2008).</li><li>Hart, M. L., Much, C., Kohler, D., Schittenhelm, J., Gorzolla, I. C., Stahl, G. L., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+a+hanging-weight+system+for+liver+ischemic+preconditioning+in+mice.">Use of a hanging-weight system for liver ischemic preconditioning in mice.</a> Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 294, 1431-1440 (2008).</li><li>Hartmann, H., Eltzschig, H. K., Wurz, H., Hantke, K., Rakin, A., Yazdi, A. S., Matteoli, G., Bohn, E., Autenrieth, I. B., Karhausen, J., Neumann, D., Colgan, S. P., Kempf, V. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypoxia-independent+activation+of+HIF-1+by+enterobacteriaceae+and+their+siderophores.">Hypoxia-independent activation of HIF-1 by enterobacteriaceae and their siderophores.</a> Gastroenterology. 134, 756-767 (2008).</li><li>Heinzelmann, F., Jendrossek, V., Lauber, K., Nowak, K., Eldh, T., Boras, R., Handrick, R., Henkel, M., Martin, C., Uhlig, S., Kohler, D., Eltzschig, H. K., Wehrmann, M., Budach, W., Belka, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Irradiation-induced+pneumonitis+mediated+by+the+CD95/CD95-ligand+system.">Irradiation-induced pneumonitis mediated by the CD95/CD95-ligand system.</a> J Natl Cancer Inst. 98, 1248-1251 (2006).</li><li>Koeppen, M., Eckle, T., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Selective+deletion+of+the+A1+adenosine+receptor+abolishes+heart-rate+slowing+effects+of+intravascular+adenosine+in+vivo.">Selective deletion of the A1 adenosine receptor abolishes heart-rate slowing effects of intravascular adenosine in vivo.</a> PLoS One. 4, e6784-e6784 (2009).</li><li>Kohler, D., Eckle, T., Faigle, M., Grenz, A., Mittelbronn, M., Laucher, S., Hart, M. L., Robson, S. C., Muller, C. E., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CD39/ectonucleoside+triphosphate+diphosphohydrolase+1+provides+myocardial+protection+during+cardiac+ischemia/reperfusion+injury.">CD39/ectonucleoside triphosphate diphosphohydrolase 1 provides myocardial protection during cardiac ischemia/reperfusion injury.</a> Circulation. 116, 1784-1794 (2007).</li><li>Kuhlicke, J., Frick, J. S., Morote-Garcia, J. C., Rosenberger, P., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypoxia+Inducible+Factor+(HIF)-1+Coordinates+Induction+of+Toll-Like+Receptors+TLR2+and+TLR6+during+Hypoxia.">Hypoxia Inducible Factor (HIF)-1 Coordinates Induction of Toll-Like Receptors TLR2 and TLR6 during Hypoxia.</a> PLoS ONE. 2, e1364-e1364 (2007).</li><li>Morote-Garcia, J. C., Rosenberger, P., Kuhlicke, J., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=HIF-1-dependent+repression+of+adenosine+kinase+attenuates+hypoxia-induced+vascular+leak.">HIF-1-dependent repression of adenosine kinase attenuates hypoxia-induced vascular leak.</a> Blood. 111, 5571-5580 (2008).</li><li>Morote-Garcia, J. C., Rosenberger, P., Nivillac, N. M., Coe, I. R., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypoxia-inducible+factor-dependent+repression+of+equilibrative+nucleoside+transporter+2+attenuates+mucosal+inflammation+during+intestinal+hypoxia.">Hypoxia-inducible factor-dependent repression of equilibrative nucleoside transporter 2 attenuates mucosal inflammation during intestinal hypoxia.</a> Gastroenterology. 136, 607-618 (2009).</li><li>Reutershan, J., Vollmer, I., Stark, S., Wagner, R., Ngamsri, K. C., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adenosine+and+inflammation:+CD39+and+CD73+are+critical+mediators+in+LPS-induced+PMN+trafficking+into+the+lungs.">Adenosine and inflammation: CD39 and CD73 are critical mediators in LPS-induced PMN trafficking into the lungs.</a> FASEB J. 23, 473-482 (2009).</li><li>Schingnitz, U., Hartmann, K., Macmanus, C. F., Eckle, T., Zug, S., Colgan, S. P., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Signaling+through+the+A2B+adenosine+receptor+dampens+endotoxin-induced+acute+lung+injury.">Signaling through the A2B adenosine receptor dampens endotoxin-induced acute lung injury.</a> J Immunol. 184, 5271-5279 (2010).</li><li>Thompson, L. F., Eltzschig, H. K., Ibla, J. C., Van De Wiele, C. J., Resta, R., Morote-Garcia, J. C., Colgan, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Crucial+role+for+ecto-5'-nucleotidase+(CD73)+in+vascular+leakage+during+hypoxia.">Crucial role for ecto-5'-nucleotidase (CD73) in vascular leakage during hypoxia.</a> J. Exp. Med. 200, 1395-1405 (2004).</li><li>Aherne, C. M., Kewley, E. M., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+resurgence+of+A2B+adenosine+receptor+signaling.">The resurgence of A2B adenosine receptor signaling.</a> Biochim Biophys Acta. , (2010).</li><li>Eckle, T., Koeppen, M., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+extracellular+adenosine+in+acute+lung+injury.">Role of extracellular adenosine in acute lung injury.</a> Physiology (Bethesda). 24, 298-306 (2009).</li><li>Koeppen, M., Feil, R., Siegl, D., Feil, S., Hofmann, F., Pohl, U., de Wit, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=cGMP-dependent+protein+kinase+mediates+NO-+but+not+acetylcholine-induced+dilations+in+resistance+vessels+in+vivo.">cGMP-dependent protein kinase mediates NO- but not acetylcholine-induced dilations in resistance vessels in vivo.</a> Hypertension. 44, 952-955 (2004).</li></ol>

Den aktuella studien beskriver en teknik att utföra ventilator-inducerad lungskada hos möss. Denna modell visar mycket reproducerbar skada på grund av högt tryck ventilation. Utredarna som anser att studera akut-lungskada hos möss kan ha nytta av denna modell.

<table border="1"><tbody><tr><th> Reagensets namn </th><th> Företag </th><th> Katalognummer </th><th> Kommentarer (frivilligt) </th></tr><tr><td> Natrium Pentobarbital (Fatal Plus) </td><td> Vortech Pharmaceutical Ls, Ltd, </td><td> VPL 9372 </td><td> 4mg/mL i saltlösning </td></tr><tr><td> Insyte 22 G </td><td> Beckton Dickinson </td><td> n / a </td><td></td></tr><tr><td> Sutur, silke 4,0 </td><td> Harvard Apparatus </td><td> 517.698 </td><td></td></tr><tr><td> Sutur, Prolene 8,0 </td><td> Ethicon, USA </td><td> M8739 </td><td> återanvändbara </td></tr><tr><td> Siemens 900 ° C </td><td> DRE veterinär, USA </td><td> # 336 </td><td> renoverade </td></tr><tr><td> dissekera mikroskop (SZX10) </td><td> Olympus </td><td> n / a </td><td> överväga generös arbetsavstånd </td></tr><tr><td> Värme Tabell </td><td> Rt, Effenberger, Tyskland </td><td> n / a </td><td> bara och enda leverantör </td></tr><tr><td> Blodtryck enhet </td><td> Cyber ​​Sense, Inc </td><td> BPM02 </td><td></td></tr><tr><td> Jag STAT </td><td> Abbott </td><td> n / a </td><td></td></tr></tbody></table>

pressure controlled ventilation to induce acute lung injury in mice

Musmodeller används flitigt för att undersöka akuta skador av olika organ system (1-34). Akut lungskada (ALI), vilket sker med långvarig mekanisk ventilation, bidrar till sjuklighet och dödlighet av allvarlig sjukdom, och studier om nya genetiska eller farmakologiska mål är områden med intensiv utredning 1-3 (, 5, 8, 26, 30, 33 -36). ALI definieras av akut sjukdom, vilket leder till icke-kardiell lungödem och efterföljande nedskrivning av pulmonell gasutbyte (36). Vi har utvecklat en mus modell av ALI med hjälp av en tryck-kontrollerad ventilation för att förmå ventilator-inducerad lungskada (2). För detta ändamål C57BL / 6 möss är bedövad och en trakeotomi utförs följt av induktion av ALI via mekanisk ventilation. Möss är ventilerade i en tryck-kontrollerad miljö med en inspiratorisk topp tryck på 45 mbar över 1 - 3 timmar. Som resultatet parametrar, lungödem (vått till torrt ratio), bronkoalveolär vätska albumin innehåll bronkoalveolär vätska och lungvävnad myeloperoxidas innehåll och pulmonell gasutbyte bedöms (2). Med denna teknik kunde vi visa att det är tillräckligt inducerar akut lunginflammation och kan skilja mellan olika behandlingsgrupperna eller genotyper (1-3, 5). Därför denna teknik kan vara till hjälp för forskare som bedriver molekylära mekanismer som är inblandade i ALI med en genetisk strategi i möss med genen riktade radering.

Watch this Scientific Journal Video about Pressure Controlled Ventilation to Induce Acute Lung Injury in Mice at JoVE.com

Pressure Controlled Ventilation to Induce Acute Lung Injury in Mice

En mus-modell för respirator inducerad lungskada är ett viktigt verktyg för att studera en akut lungskada<em&gt; In vivo</em&gt;. Här rapporterar vi ett lätt fall<em&gt; På plats</em&gt; Modell för akut lungskada med högt tryck mekanisk ventilation för att framkalla akuta fel på lungan.

Tryckstyrd ventilation för att framkalla akut lungskada hos möss

Murine models are extensively used to investigate acute injuries of different organs systems (1-34). Acute lung injury (ALI), which occurs with prolonged ...

Research

JoVE Journal

Medicine

The CYP2D6 Animal Model: How to Induce Autoimmune Hepatitis in Mice

CYP2D6 Animal Model: Hur Framkalla Autoimmun hepatit hos möss

Autoimmune hepatitis is a rare but life threatening autoimmune disease of the liver of unknown etiology1,2. In the past many attempts have been made to ...

Controlled Cervical Laceration Injury in Mice

Kontrollerad Cervikal Laceration Skada hos möss

Use of genetically modified mice enhances our  understanding of molecular mechanisms underlying several neurological disorders  such as a spinal cord ...

Ischemia-reperfusion Model of Acute Kidney Injury and Post Injury Fibrosis in Mice

Ischemi-reperfusion modell av akut Kidneyskadan och efter skada Fibros i möss

Ischemia-reperfusion induced acute kidney injury (IR-AKI) is widely used as a model of AKI in mice, but results are often quite variable with high, often ...

Controlled Cortical Impact Model for Traumatic Brain Injury

Kontrollerad Kortikal Impact modell för traumatisk hjärnskada

Every year over a million Americans suffer a traumatic brain injury (TBI).  Combined with the incidence of TBIs worldwide, the physical, emotional, ...

Sublingual Immunotherapy as an Alternative to Induce Protection Against Acute Respiratory Infections

Sublingual immunterapi som ett alternativ att inducera skydd mot akuta luftvägsinfektioner

Sublingual route has been widely used to deliver small molecules into the bloodstream and to modulate the immune response at different sites. It has been ...

Cardiac Catheterization in Mice to Measure the Pressure Volume Relationship: Investigating the Bowditch Effect

Hjärtkateterisering i möss för att mäta trycket Volym Förhållande: Undersöka Bowditch Effect

Animal models that mimic human cardiac disorders have been created to test potential therapeutic strategies. A key component to evaluating these ...

Open Tracheostomy Gastric Acid Aspiration Murine Model of Acute Lung Injury Results in Maximal Acute Nonlethal Lung Injury

Öppna Trakeostomituber Gastric Acid aspiration Murina Modell av akut lungskada Resultat i Maximal Akut nonlethal Lung Injury

Acid pneumonitis is a major cause of sterile acute lung injury (ALI) in humans. Acid pneumonitis spans the clinical spectrum from asymptomatic to acute ...

Balloon-based Injury to Induce Myointimal Hyperplasia in the Mouse Abdominal Aorta

Ballong-baserade skada att inducera Myointimal hyperplasi i mus bukaorta

The use of animal models is essential for a better understanding of MH, one major cause for arterial stenosis.In this article, we demonstrate a murine ...

A Closed-chest Model to Induce Transverse Aortic Constriction in Mice

En stängd-bröst modell att inducera tvärgående aorta förträngning i möss

Research on cardiac hypertrophy and heart failure is frequently based on pressure overload mouse models induced by TAC. The standard procedure is to ...

Real-time Pressure-volume Analysis of Acute Myocardial Infarction in Mice

Realtid tryck-volym analys av akut hjärtinfarkt hos möss

Acute myocardial infarction can lead to acute heart failure and cardiogenic shock. The evaluation of hemodynamics is critical for the evaluation of any ...