Name: pressure controlled ventilation to induce acute lung injury in mice
Uploaded: 2011-05-05T12:00:00
Duration: 7 min 55 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Pressure Controlled Ventilation to Induce Acute Lung Injury in Mice at JoVE.com

<p class="jove_content"&gt; Mevcut çalışmalar, Ulusal Kalp, Akciğer ve Kan Enstitüsü Hibe R01-HL0921, HK Eltzschig R01-DK083385 ve R01HL098294, T. Eckle 1K08HL102267-01, ve Anestezi Eğitim ve Araştırma T. Eckle Hibeler Vakfı tarafından desteklenen HK Eltzschig ve Amerikan Kalp Derneği, T. Eckle ve HK Eltzschig ve M. Koeppen Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) araştırma bursu Grant.</p

Genel notlar: Tüm işlemler, dik bir diseksiyon mikroskobu (Olympus, STU2 Standı Boom Stand ile Z-Eksen Crank Post SZX10) altında bir cerrahi koagülatör (11) kullanılarak yapılmalıdır. Deneysel gruplar sonuçlarının karşılaştırılabilirliği sağlamak için en iyi yaş ve ağırlığı mümkün olduğunca uyumlu olmalıdır. Sıcaklık, kan basıncı, anestezi ve sıvı yönetimi boyunca sabit olmalıdır. 1. Anestezi ve trakea hazırlık <ol><li> Kullanın ve en az 10 hafta eski C57BL / 6 fareler 22-25 g. bir vücuda sahip. Anestezi neden doz 70 mg / kg vücut ağırlığı ip (6) pentobarbital sodyum kullanarak. Yaklaşık pentobarbital 10 mg / kg / saat sodyum ile anestezi koruyun. Bu kan basıncını önemli ölçüde azaltabilirsiniz doz aşımı ile dikkatli olun. Pentobarbital yeniden dozlama sonra bile plazma düzeylerinde ciddi artışlara yol saat-. </li><li> Sonra anestezi indüksiyonu, bir teyp ve ayak bileklerine kadar bağlanmış bir dikiş kullanarak tabloya bağlı üst ve alt ekstremite ile yatar pozisyonda güvenli fareler. Dişler kullanarak kafa için de aynı işlemi yapın. Yeterli frenleyici başarılı bir entübasyon ve iyi kontrollü bir cerrahi için önemlidir. Ameliyat öncesinde, fare saç alerji riskini azaltmak için, mineral yağ ile fare kaplayın. Vücut ısısı, piyasada bulunan gıda ambalajlarında farelerin kapağı sabit kalmasını sağlamak için. </li><li> 37 vücut ısısını korumak için termal geribildirim denetleyicisine bağlı bir rektal termometre probu ile sıcaklık kontrollü ısıtmalı masa (RT, Effenberg, Münih, Almanya) ° C Yeri fareler </li><li> Trakeanın cerrahi Açığa. Bağ dokusu yer ve iki 3.0 ipek cerrahi sütür (Harvard cihazları, ABD) her 10 cm altında uzun trakea trakea lateral ve dorsal taraf parçalara ayır. Sütür dışında yaklaşık 1 cm olmalıdır. </li><li> McPherson-Vannas Makas (Dünya Hassas Aletler, ABD 8 cm, düz bıçak) kullanarak iki dairesel kıkırdaklar arasındaki gırtlak altında 4 mm - dikkatlice trakea 3 insizyon. Kanamaya neden bu sonuç parametreleri etkileyebilecek, emin olun. </li><li> Trakeal entübasyon künt polietilen kanül (Insyte 22g, Beckton Dickinson, ABD) kullanarak gerçekleştirin. Polietilen kanül ucu trakea içine 85 derecelik bir açıyla yerleştirin. Trakeal lümen böylece Sonra kanüller yatırın. Kanül ucu toraks diyafram kayboldu kadar tüp trakea aşağı yavaşça ilerler. Trakea (bkz. 1.4) dorsal yerleştirilen iki cerrahi ipek sütür ile bu pozisyonda tüp sabitleşmek. </li></ol> 2. Ventilatöre bağlı akciğer hasarı Tekniği <ol><li> Tüpün bir vantilatör bağlayın. Akciğer hasarına neden için Servo 900 C, Siemens (PRM Veteriner, ABD) kullanılarak bir basınç kontrollü ventilasyon tekniği kullanır . Hayvanlar FiO 2 = 1.0 ile 80 nefes / dk 45 mbar, frekans pik inspiratuar basınç ve 0-3 mbar bir pozitif ekspirasyon sonu basınç ile havalandırılmalıdır. Ilham sona erme oranı 1:1 olmalıdır. Servo 900 C, insanlar için vantilatör olarak inşa olduğu gerçeğine rağmen, bir basınç kontrollü ventilatör ortamda kullanılması farelerin havalandırma için mükemmel çalışır. </li><li> Monitör EKG (örneğin, Hewlett Packard, B blingen, Almanya) ile kalp atım hızı. Kalp hızı 400 altına düştüğü olmadığından emin olun. Bir mekanik ventilasyon intratorasik basınç artışı takiben artan pulmoner arter basınçları bir işareti olarak tesis sağ kalp eksen kayması, göreceksiniz. Fare bradikardi oluşursa, sıcaklık ve anestezi dozu / konsantrasyon kontrol edin. Xylacin / Ketamin anestezisi 250 / dk bir kalp neden olur ve bu nedenle tavsiye edilmez. </li><li> Uygun bir sıvı replasmanı uygulayın. Olan bir infüzyon serum fizyolojik 0.1 ml / saat arteriyel ya da venöz kateter yoluyla yeterli venöz dosyalama sağlamak için havalandırma önce yapılmalıdır. Ortalama arter basıncında önemli bir düşüşe yol açabilecek yüksek havalandırma basınçları, kalbe venöz dönüş bozulur nedeniyle. Ayrıca, 500 ul tuzlu bolus cerrahi öncesi ip verilebilir. </li><li> Karotis arter kan basıncı (27) sürekli kayıt için bir kateter yerleştirin. Arter diseksiyon başlamadan önce vücut kol takın. Karotis arter paratrakeal kasların künt diseksiyon ile maruz kalmaktadır. Daha fazla maruz kalma ve herhangi bir doku travması (özellikle vagal sinir) dikkatli kaçınma ardından, iki sütür ve küçük bir kelepçe (37) ile damar içine bir kateter yerleştirilir. Bu arter uzun bir segment gösterecektir. Karotis arter en sonunda bir ligatür yerleştirin. Gerginlik veya sabitleşmek inci elde etmek için dikiş sonuna kadar büyük bir kelepçe takınbant kullanarak tablo e dikin. Arter çevresinde başka bir dikiş yerleştirin ve çok distal ucu arter disseke. Burada, küçük bir kelepçe yerleştirin. Arter içine bir küçük çapraz açılış kesmek için mikro makas kullanın. Ince bir forseps (Dumont, TEFE) ile açılış tutun ve ellerinizi / forseps ile uygun büyüklükte kateter önceden. Ikinci sütür ile düğüm yapın ve arter güvenli. Kelepçe gevşetin ve kateter daha önceden. Kateter birkaç knot ve bant ile sabitleyin. Alternatif olarak, karotis arter kateter arter kan gazı analizi için kan örnekleri toplamak için deney sonunda yer olabilir. </li></ol> 3. Kurtarma doku örneklerinin 3 saat sonra mekanik ventilasyon, örnekler, akciğer hasarı ölçüde değerlendirmek için toplanır. Brochnoalveolar lavaj sıvısı (BAL), arteryel kan ve akciğer dokusunda toplayarak öneririz. <ol><li> Deneyin sonunda BAL sıvı alın. Anestezi derinleşen sonra, 1 ml fosfat ile trakeal tüp yıkayın tuzlu su (PBS) tamponlu. Bağlı enjektör ile kurtarma önce sıvı üç saniye için trakea / akciğer kalmalıdır. BAL, sıvı nitrojen içinde snap-dondurulmuş ve -80 ° C&#39;de daha fazla analiz için saklanır. Kurtarılan hacmi 1 ml önemli ölçüde daha az olabileceğini farkında olun. </li><li> Deney sonunda kan gazı analizi yapın. Bunu yapmak için, bir kesi sağ sternum altında yapılmalıdır. Forseps ve göğüs kafesi boyunca kesi ölçüde ile sternum tutun. Daha sonra, diyaframın kenarlarında kazıma ve kaburga dışarı kesilir. Şimdi alt toraks boşluğuna açık bir görüş vardır. Forseps ile sternum yukarı kaldırın ve tam anterior toraks duvar-koğuşta kadar açık olduğunu, sağ ve sol tarafında uzun kesintiler (mümkün olduğunca lateral) göğüs kafesi açmak. Deneysel hayvan hala mekanik ventilasyon ise bu yapılmalıdır. Sol ventrikül, 27 delinirse ½ G iğne ve arteryel kan analizi i-STAT Sistemi (Abbott, USA) kullanılarak yapılır. Bu sonuç önemli bir karıştırıcı olacağından, arteryel kan gazı analizi yapılmalıdır BAL, elde edilebilir değildir. </li><li> Alternatif Yukarıdaki yöntem, arteryel kan örnekleri karotis arter kateter yoluyla toplanabilir. Ancak BAL elde önce yapılmalıdır. </li><li> Kalp yukarı çekerek ve trakea kesmek Vergi akciğerlerin en blok. Kan emmek için hazır bir doku parçası vardır, cerrahi sitesi görünür. Karın yönünde kalp çekin ve tüm torasik organlar dikkatli bir şekilde harekete geçirmek için, omurga boyunca kesilir. Aort Kes, torasik organlar kaldırmak ve temiz bir cerrahi masanın üzerine koyun. </li><li> Kalp ve büyük damar doku örneği kesip. Hiçbir timus dokusu hala akciğere bağlı olduğundan emin olun. Bireysel boru ve ek dondurucu bir makas ve yer ile akciğerlere ayırın. Daha fazla analiz için -80 ° C&#39;de saklayın. </li></ol> 4. Akciğer hasarı ölçümü Biz akciğer hasarı ölçüde değerlendirmek için aşağıdaki sonuç parametreleri kullanmanızı tavsiye ederim: albümin ELISA (Bethyl Laboratories, USA) ve bariyer disfonksiyonu ölçüde ve inflamatuar miktarını değerlendirmek için bir miyeloperoksidaz (MPO) ELISA (Hycult Biyoteknoloji, ABD) yapın BAL sıvısı hücre. Da akciğer dokusunda MPO ELISA gerçekleştirin oluşturur. Islak-kuru oranı ölçülecek ise BAL sıvısı elde yoktur ve pulmoner dolaşım (3.3) kızarmış değildir. Eksizyon sonrası akciğer ağırlığı ölçün. Sonra akciğerler 48 saat ve akciğer dokusunun yeniden ölçülür için liyofilize. Sonra ıslak-kuru oranı kuru doku mg başına düşen su mg (5) olarak ölçülür. <img src="/files/ftp_upload/2525/2525fig1.jpg" alt="Şekil 1" /> Şekil 1. Protein içeriği VILI. Fareler yanıt BAL pentobarbital ile anestezi, mekanik ventilasyon tesis edildi ve fareler, basınç kontrollü ayarları (45 mbar inspiratuar basınç, son exspiratory pozitif basınç 3 mbar, ilham% 100 kullanarak havalandırılan oksijen konsantrasyonu). 0 1, 2 ve 3 saat sonra, havalandırma BAL, hasat ve protein içeriği bicinchoninic asit tayini (BCA tahlil) kullanarak sayısal oldu. Protein içeriği göreceli değişim havalandırma 0 saat normalize gösterilir (n = 4 grup başına, * p &lt;0.05, kontrole göre gösterir, ortalama ± SEM )

<ol>
	<li>Eckle, T., Faigle, M., Grenz, A., Laucher, S., Thompson, L. F., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A2B+adenosine+receptor+dampens+hypoxia-induced+vascular+leak.">A2B adenosine receptor dampens hypoxia-induced vascular leak.</a> Blood. 111, 2024-2035 (2008).</li><li>Eckle, T., Fullbier, L. G. r. e. n. z., A, ., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Usefulness+of+pressure-controlled+ventilation+at+high+inspiratory+pressures+to+induce+acute+lung+injury+in+mice.">Usefulness of pressure-controlled ventilation at high inspiratory pressures to induce acute lung injury in mice.</a> Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 295, 718-724 (2008).</li><li>Eckle, T., Fullbier, L., Wehrmann, M., Khoury, J., Mittelbronn, M., Ibla, J., Rosenberger, P., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+ectonucleotidases+CD39+and+CD73+in+innate+protection+during+acute+lung+injury.">Identification of ectonucleotidases CD39 and CD73 in innate protection during acute lung injury.</a> J Immunol. 178, 8127-8137 (2007).</li><li>Eckle, T., Grenz, A., Kohler, D., Redel, A., Falk, M., Rolauffs, B., Osswald, H., Kehl, F., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Systematic+evaluation+of+a+novel+model+for+cardiac+ischemic+preconditioning+in+mice.">Systematic evaluation of a novel model for cardiac ischemic preconditioning in mice.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 291, 2533-2540 (2006).</li><li>Eckle, T., Grenz, A., Laucher, S., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A2B+adenosine+receptor+signaling+attenuates+acute+lung+injury+by+enhancing+alveolar+fluid+clearance+in+mice.">A2B adenosine receptor signaling attenuates acute lung injury by enhancing alveolar fluid clearance in mice.</a> J Clin Invest. 118, 3301-3315 (2008).</li><li>Eckle, T., Krahn, T., Grenz, A., Kohler, D., Mittelbronn, M., Ledent, C., Jacobson, M. A., Osswald, H., Thompson, L. F., Unertl, K., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardioprotection+by+ecto-5'-nucleotidase+(CD73)+and+A2B+adenosine+receptors.">Cardioprotection by ecto-5'-nucleotidase (CD73) and A2B adenosine receptors.</a> Circulation. 115, 1581-1590 (2007).</li><li>Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adenosine:+an+old+drug+newly+discovered.">Adenosine: an old drug newly discovered.</a> Anesthesiology. 111, 904-915 (2009).</li><li>Eltzschig, H. K., Eckle, T., Mager, A., Kuper, N., Karcher, C., Weissmuller, T., Boengler, K., Schulz, R., Robson, S. C., Colgan, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ATP+release+from+activated+neutrophils+occurs+via+connexin+43+and+modulates+adenosine-dependent+endothelial+cell+function.">ATP release from activated neutrophils occurs via connexin 43 and modulates adenosine-dependent endothelial cell function.</a> Circ Res. 99, 1100-1108 (2006).</li><li>Eltzschig, H. K., Ibla, J. C., Furuta, G. T., Leonard, M. O., Jacobson, K. A., Enjyoji, K., Robson, S. C., Colgan, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coordinated+adenine+nucleotide+phosphohydrolysis+and+nucleoside+signaling+in+posthypoxic+endothelium:+role+of+ectonucleotidases+and+adenosine+A2B+receptors.">Coordinated adenine nucleotide phosphohydrolysis and nucleoside signaling in posthypoxic endothelium: role of ectonucleotidases and adenosine A2B receptors.</a> J Exp Med. 198, 783-796 (2003).</li><li>Eltzschig, H. K., Kohler, D., Eckle, T., Kong, T., Robson, S. C., Colgan, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Central+role+of+Sp1-regulated+CD39+in+hypoxia/ischemia+protection.">Central role of Sp1-regulated CD39 in hypoxia/ischemia protection.</a> Blood. 113, 224-232 (2009).</li><li>Frick, J. S., MacManus, C. F., Scully, M., Glover, L. E., Eltzschig, H. K., Colgan, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contribution+of+adenosine+A2B+receptors+to+inflammatory+parameters+of+experimental+colitis.">Contribution of adenosine A2B receptors to inflammatory parameters of experimental colitis.</a> J Immunol. 182, 4957-4964 (2009).</li><li>Grenz, A., Eckle, T., Zhang, H., Huang, D. Y., Wehrmann, M., Kohle, C., Unertl, K., Osswald, H., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+a+hanging-weight+system+for+isolated+renal+artery+occlusion+during+ischemic+preconditioning+in+mice.">Use of a hanging-weight system for isolated renal artery occlusion during ischemic preconditioning in mice.</a> Am J Physiol Renal Physiol. 292, 475-485 (2007).</li><li>Grenz, A., Osswald, H., Eckle, T., Yang, D., Zhang, H., Tran, Z. V., Klingel, K., Ravid, K., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Reno-Vascular+A2B+Adenosine+Receptor+Protects+the+Kidney+from+Ischemia.">The Reno-Vascular A2B Adenosine Receptor Protects the Kidney from Ischemia.</a> PLoS Medicine. 5, e137-e137 (2008).</li><li>Grenz, A., Zhang, H., Eckle, T., Mittelbronn, M., Wehrmann, M., Kohle, C., Kloor, D., Thompson, L. F., Osswald, H., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protective+role+of+ecto-5'-nucleotidase+(CD73)+in+renal+ischemia.">Protective role of ecto-5'-nucleotidase (CD73) in renal ischemia.</a> J Am Soc Nephrol. 18, 833-845 (2007).</li><li>Grenz, A., Zhang, H., Hermes, M., Eckle, T., Klingel, K., Huang, D. Y., Muller, C. E., Robson, S. C., Osswald, H., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contribution+of+E-NTPDase1+(CD39)+to+renal+protection+from+ischemia-reperfusion+injury.">Contribution of E-NTPDase1 (CD39) to renal protection from ischemia-reperfusion injury.</a> FASEB J. 21, 2863-2873 (2007).</li><li>Grenz, A., Zhang, H., Weingart, J., von Wietersheim, S., Eckle, T., Schnermann, J. B., Kohle, C., Kloor, D., Gleiter, C. H., Vallon, V., Eltzschig, H. K., Osswald, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lack+of+effect+of+extracellular+adenosine+generation+and+signalling+on+renal+erythropoietin+secretion+during+hypoxia.">Lack of effect of extracellular adenosine generation and signalling on renal erythropoietin secretion during hypoxia.</a> Am J Physiol Renal Physiol. , (2007).</li><li>Haeberle, H. A., Durrstein, C., Rosenberger, P., Hosakote, Y. M., Kuhlicke, J., Kempf, V. A., Garofalo, R. P., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oxygen-independent+stabilization+of+hypoxia+inducible+factor+(HIF)-1+during+RSV+infection.">Oxygen-independent stabilization of hypoxia inducible factor (HIF)-1 during RSV infection.</a> PLoS ONE. 3, e3352-e3352 (2008).</li><li>Hart, M. L., Gorzolla, I. C., Schittenhelm, J., Robson, S. C., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=SP1-dependent+induction+of+CD39+facilitates+hepatic+ischemic+preconditioning.">SP1-dependent induction of CD39 facilitates hepatic ischemic preconditioning.</a> J Immunol. 184, 4017-4024 (2010).</li><li>Hart, M. L., Henn, M., Kohler, D., Kloor, D., Mittelbronn, M., Gorzolla, I. C., Stahl, G. L., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+extracellular+nucleotide+phosphohydrolysis+in+intestinal+ischemia-reperfusion+injury.">Role of extracellular nucleotide phosphohydrolysis in intestinal ischemia-reperfusion injury.</a> FASEB J. 22, 2784-2797 (2008).</li><li>Hart, M. L., Jacobi, B., Schittenhelm, J., Henn, M., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cutting+Edge:+A2B+Adenosine+receptor+signaling+provides+potent+protection+during+intestinal+ischemia/reperfusion+injury.">Cutting Edge: A2B Adenosine receptor signaling provides potent protection during intestinal ischemia/reperfusion injury.</a> J Immunol. 182, 3965-3968 (2009).</li><li>Hart, M. L., Kohler, D., Eckle, T., Kloor, D., Stahl, G. L., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+treatment+of+mouse+or+human+blood+with+soluble+5'-nucleotidase+inhibits+platelet+aggregation.">Direct treatment of mouse or human blood with soluble 5'-nucleotidase inhibits platelet aggregation.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 28, 1477-1483 (2008).</li><li>Hart, M. L., Much, C., Gorzolla, I. C., Schittenhelm, J., Kloor, D., Stahl, G. L., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extracellular+adenosine+production+by+ecto-5'-nucleotidase+protects+during+murine+hepatic+ischemic+preconditioning.">Extracellular adenosine production by ecto-5'-nucleotidase protects during murine hepatic ischemic preconditioning.</a> Gastroenterology. 135, 1739-1750 (2008).</li><li>Hart, M. L., Much, C., Kohler, D., Schittenhelm, J., Gorzolla, I. C., Stahl, G. L., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+a+hanging-weight+system+for+liver+ischemic+preconditioning+in+mice.">Use of a hanging-weight system for liver ischemic preconditioning in mice.</a> Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 294, 1431-1440 (2008).</li><li>Hartmann, H., Eltzschig, H. K., Wurz, H., Hantke, K., Rakin, A., Yazdi, A. S., Matteoli, G., Bohn, E., Autenrieth, I. B., Karhausen, J., Neumann, D., Colgan, S. P., Kempf, V. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypoxia-independent+activation+of+HIF-1+by+enterobacteriaceae+and+their+siderophores.">Hypoxia-independent activation of HIF-1 by enterobacteriaceae and their siderophores.</a> Gastroenterology. 134, 756-767 (2008).</li><li>Heinzelmann, F., Jendrossek, V., Lauber, K., Nowak, K., Eldh, T., Boras, R., Handrick, R., Henkel, M., Martin, C., Uhlig, S., Kohler, D., Eltzschig, H. K., Wehrmann, M., Budach, W., Belka, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Irradiation-induced+pneumonitis+mediated+by+the+CD95/CD95-ligand+system.">Irradiation-induced pneumonitis mediated by the CD95/CD95-ligand system.</a> J Natl Cancer Inst. 98, 1248-1251 (2006).</li><li>Koeppen, M., Eckle, T., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Selective+deletion+of+the+A1+adenosine+receptor+abolishes+heart-rate+slowing+effects+of+intravascular+adenosine+in+vivo.">Selective deletion of the A1 adenosine receptor abolishes heart-rate slowing effects of intravascular adenosine in vivo.</a> PLoS One. 4, e6784-e6784 (2009).</li><li>Kohler, D., Eckle, T., Faigle, M., Grenz, A., Mittelbronn, M., Laucher, S., Hart, M. L., Robson, S. C., Muller, C. E., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CD39/ectonucleoside+triphosphate+diphosphohydrolase+1+provides+myocardial+protection+during+cardiac+ischemia/reperfusion+injury.">CD39/ectonucleoside triphosphate diphosphohydrolase 1 provides myocardial protection during cardiac ischemia/reperfusion injury.</a> Circulation. 116, 1784-1794 (2007).</li><li>Kuhlicke, J., Frick, J. S., Morote-Garcia, J. C., Rosenberger, P., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypoxia+Inducible+Factor+(HIF)-1+Coordinates+Induction+of+Toll-Like+Receptors+TLR2+and+TLR6+during+Hypoxia.">Hypoxia Inducible Factor (HIF)-1 Coordinates Induction of Toll-Like Receptors TLR2 and TLR6 during Hypoxia.</a> PLoS ONE. 2, e1364-e1364 (2007).</li><li>Morote-Garcia, J. C., Rosenberger, P., Kuhlicke, J., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=HIF-1-dependent+repression+of+adenosine+kinase+attenuates+hypoxia-induced+vascular+leak.">HIF-1-dependent repression of adenosine kinase attenuates hypoxia-induced vascular leak.</a> Blood. 111, 5571-5580 (2008).</li><li>Morote-Garcia, J. C., Rosenberger, P., Nivillac, N. M., Coe, I. R., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypoxia-inducible+factor-dependent+repression+of+equilibrative+nucleoside+transporter+2+attenuates+mucosal+inflammation+during+intestinal+hypoxia.">Hypoxia-inducible factor-dependent repression of equilibrative nucleoside transporter 2 attenuates mucosal inflammation during intestinal hypoxia.</a> Gastroenterology. 136, 607-618 (2009).</li><li>Reutershan, J., Vollmer, I., Stark, S., Wagner, R., Ngamsri, K. C., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adenosine+and+inflammation:+CD39+and+CD73+are+critical+mediators+in+LPS-induced+PMN+trafficking+into+the+lungs.">Adenosine and inflammation: CD39 and CD73 are critical mediators in LPS-induced PMN trafficking into the lungs.</a> FASEB J. 23, 473-482 (2009).</li><li>Schingnitz, U., Hartmann, K., Macmanus, C. F., Eckle, T., Zug, S., Colgan, S. P., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Signaling+through+the+A2B+adenosine+receptor+dampens+endotoxin-induced+acute+lung+injury.">Signaling through the A2B adenosine receptor dampens endotoxin-induced acute lung injury.</a> J Immunol. 184, 5271-5279 (2010).</li><li>Thompson, L. F., Eltzschig, H. K., Ibla, J. C., Van De Wiele, C. J., Resta, R., Morote-Garcia, J. C., Colgan, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Crucial+role+for+ecto-5'-nucleotidase+(CD73)+in+vascular+leakage+during+hypoxia.">Crucial role for ecto-5'-nucleotidase (CD73) in vascular leakage during hypoxia.</a> J. Exp. Med. 200, 1395-1405 (2004).</li><li>Aherne, C. M., Kewley, E. M., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+resurgence+of+A2B+adenosine+receptor+signaling.">The resurgence of A2B adenosine receptor signaling.</a> Biochim Biophys Acta. , (2010).</li><li>Eckle, T., Koeppen, M., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+extracellular+adenosine+in+acute+lung+injury.">Role of extracellular adenosine in acute lung injury.</a> Physiology (Bethesda). 24, 298-306 (2009).</li><li>Koeppen, M., Feil, R., Siegl, D., Feil, S., Hofmann, F., Pohl, U., de Wit, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=cGMP-dependent+protein+kinase+mediates+NO-+but+not+acetylcholine-induced+dilations+in+resistance+vessels+in+vivo.">cGMP-dependent protein kinase mediates NO- but not acetylcholine-induced dilations in resistance vessels in vivo.</a> Hypertension. 44, 952-955 (2004).</li></ol>

Bu çalışmada farelerde ventilatöre bağlı akciğer hasarı yapan bir teknik açıklar. Bu model, yüksek basınçlı havalandırma nedeniyle yüksek tekrarlanabilir yaralanma göstermektedir. Farelerde akut akciğer hasarı okullar Müfettişler bu model yararlanabilir.

<table border="1"><tbody><tr><th> Reaktifin Adı </th><th> Şirket </th><th> Katalog numarası </th><th> Yorumlar (isteğe bağlı) </th></tr><tr><td> Pentobarbital Sodyum (Fatal Plus,) </td><td> Vortech İlaç Ls, Ltd. </td><td> VPL 9372 </td><td> Içinde 4mg/mL serum fizyolojik </td></tr><tr><td> Insyte 22 G </td><td> Beckton Dickinson </td><td> n / a </td><td></td></tr><tr><td> Dikiş, ipek 4.0 </td><td> Harvard Apparatus </td><td> 517698 </td><td></td></tr><tr><td> Dikiş, Prolen 8.0 </td><td> Ethicon, ABD </td><td> M8739 </td><td> yeniden kullanılabilir </td></tr><tr><td> Siemens, 900 ° C </td><td> PRM Veteriner, ABD </td><td> # 336 </td><td> yenilenmiş </td></tr><tr><td> diseksiyon mikroskobu (SZX10) </td><td> Olympus </td><td> n / a </td><td> geniş çalışma mesafesi düşünün </td></tr><tr><td> Isıtma Tablo </td><td> Rt, Effenberger, Almanya </td><td> n / a </td><td> sadece ve tek bir sağlayıcı </td></tr><tr><td> Kan basıncı cihazı </td><td> Cyber ​​Sense, Inc. </td><td> BPM02 </td><td></td></tr><tr><td> Ben STAT </td><td> Abbott </td><td> n / a </td><td></td></tr></tbody></table>

pressure controlled ventilation to induce acute lung injury in mice

Sıçan modellerinde farklı organların sistemleri (1-34) akut yaralanmalar kapsamlı araştırmak için kullanılır. Uzamış mekanik ventilasyon ile ortaya çıkan akut akciğer hasarı (ALI), kritik hastalık morbidite ve mortalite katkıda bulunur ve yeni genetik veya farmakolojik hedefler üzerinde çalışmalar yoğun bir soruşturma alanlarda (1-3, 5, 8, 26, 30, 33 -36). ALİ non-kardiyak pulmoner ödem ve pulmoner gaz değişimi (36) sonraki bozukluğu neden olan hastalık, akut başlangıçlı tarafından tanımlanır. Biz ventilatöre bağlı akciğer hasarı (2) ikna etmek için bir basınç kontrollü ventilasyon ile ALI bir fare modeli geliştirdiler. Bu amaçla, C57BL / 6 fareler anestezi ve mekanik ventilasyon ile ALI indüksiyon bir trakeotomi takip yapılır. 3 saat - Fareler üzerinde 45 mbar 1 inspiratuar tepe basıncı ile basınç kontrollü bir ortamda havalandırılan. Sonuç parametreleri, pulmoner ödem (ıslak-kuru oranı), bronkoalveoler sıvı albümin içerik, bronkoalveoler sıvı ve akciğer dokusunda miyeloperoksidaz içeriği ve pulmoner gaz değişimi (2) değerlendirilir. Bu tekniği kullanarak Yeteri kadar akut akciğer iltihabı neden olur ve farklı tedavi grupları ya da genotipler (1-3, 5) ayırt edebilirsiniz gösterebilirim. Bu nedenle bu tekniğin ALİ gen hedefli bir silme ile farelerde genetik bir yaklaşım kullanarak ilgili moleküler mekanizmaları takip araştırmacılar için yararlı olabilir.

Watch this Scientific Journal Video about Pressure Controlled Ventilation to Induce Acute Lung Injury in Mice at JoVE.com

Pressure Controlled Ventilation to Induce Acute Lung Injury in Mice

Ventilatöre bağlı akciğer hasarı için bir fare modeli akut akciğer hasarı incelemek için önemli bir araçtır<em&gt; In vivo</em&gt;. Burada, kolay uygulanabilir rapor<em&gt; In situ</em&gt; Yüksek basınçlı mekanik ventilasyon akut akciğer yetmezliğine yol kullanarak akut akciğer hasarı modeli.

Farelerde Akut Akciğer Hasarı tetikleyebilecek Basınç Kontrollü Havalandırma

Murine models are extensively used to investigate acute injuries of different organs systems (1-34). Acute lung injury (ALI), which occurs with prolonged ...

Research

JoVE Journal

Medicine

The CYP2D6 Animal Model: How to Induce Autoimmune Hepatitis in Mice

CYP2D6 Hayvan Modeli:, Fare Otoimmün Hepatit indükleyin nasıl

Autoimmune hepatitis is a rare but life threatening autoimmune disease of the liver of unknown etiology1,2. In the past many attempts have been made to ...

Controlled Cervical Laceration Injury in Mice

Farelerde Kontrollü Servikal yırtığı Sakatlık

Use of genetically modified mice enhances our  understanding of molecular mechanisms underlying several neurological disorders  such as a spinal cord ...

Ischemia-reperfusion Model of Acute Kidney Injury and Post Injury Fibrosis in Mice

Farelerde Akut Böbrek Hasarı ve Post Yaralanma Fibrozis iskemi-reperfüzyon Model

Ischemia-reperfusion induced acute kidney injury (IR-AKI) is widely used as a model of AKI in mice, but results are often quite variable with high, often ...

Controlled Cortical Impact Model for Traumatic Brain Injury

Travmatik Beyin Hasarı için Kontrollü Kortikal Etki Modeli

Every year over a million Americans suffer a traumatic brain injury (TBI).  Combined with the incidence of TBIs worldwide, the physical, emotional, ...

Sublingual Immunotherapy as an Alternative to Induce Protection Against Acute Respiratory Infections

Alternatifi olarak dilaltı immünoterapi Akut Solunum Enfeksiyonları Karşı Koruma tetikleyebilecek

Sublingual route has been widely used to deliver small molecules into the bloodstream and to modulate the immune response at different sites. It has been ...

Cardiac Catheterization in Mice to Measure the Pressure Volume Relationship: Investigating the Bowditch Effect

Bowditch Efekt incelenmesi: Basınç Hacim İlişkisi Tedbir Fare Kardiyak Kateterizasyon

Animal models that mimic human cardiac disorders have been created to test potential therapeutic strategies. A key component to evaluating these ...

Open Tracheostomy Gastric Acid Aspiration Murine Model of Acute Lung Injury Results in Maximal Acute Nonlethal Lung Injury

Akut Akciğer Hasarı Açık Trakeostomi Gastrik Asit Aspirasyon Fare Modeli Maksimal Akut Ölümcül olmayan Akciğer Hasarı Sonuçlar

Acid pneumonitis is a major cause of sterile acute lung injury (ALI) in humans. Acid pneumonitis spans the clinical spectrum from asymptomatic to acute ...

Balloon-based Injury to Induce Myointimal Hyperplasia in the Mouse Abdominal Aorta

Fare Abdominal aort Myointimal Hiperplazi ikna etmek için balon tabanlı yaralanma

The use of animal models is essential for a better understanding of MH, one major cause for arterial stenosis.In this article, we demonstrate a murine ...

A Closed-chest Model to Induce Transverse Aortic Constriction in Mice

Transvers aort daralma farelerde ikna etmek için kapalı-göğüs manken

Research on cardiac hypertrophy and heart failure is frequently based on pressure overload mouse models induced by TAC. The standard procedure is to ...

Real-time Pressure-volume Analysis of Acute Myocardial Infarction in Mice

Akut miyokard infarktüsünde farelerde gerçek zamanlı basınç-hacim Analizi

Acute myocardial infarction can lead to acute heart failure and cardiogenic shock. The evaluation of hemodynamics is critical for the evaluation of any ...