Name: passive administration of monoclonal antibodies against h. capsulatum and others fungal pathogens
Uploaded: 2011-02-14T17:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Passive Administration of Monoclonal Antibodies Against H. capsulatum and Others Fungal Pathogens at JoVE.com

1. צמיחה של ח Capsulatum <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן את ארון biosafety לעבודה עם הפטרייה על ידי ניקוי הממשלה עם אקונומיקה 10% ואחריו קרינה UV 20 דקות. ח capsulatum בשלב שמרים biosafety דורש רמה (מנהלת הליגה) נוהלי השנייה, בעוד טופס עובש דו?...

<ol>
	<li>Casadevall, A., Mukherjee, J., Scharff, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monoclonal+antibody+based+ELISAs+for+cryptococcal+polysaccharide.">Monoclonal antibody based ELISAs for cryptococcal polysaccharide.</a> J. Immunol. Methods. 154, 27-35 (1992).</li><li>Guimaraes, A. J., Frases, S., Gomez, F. J., Zancope-Oliveira, R. M., Nosanchuk, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monoclonal+antibodies+to+heat+shock+protein+60+alter+the+pathogenesis+of+Histoplasma+capsulatum.+Infect+Immun+77.">Monoclonal antibodies to heat shock protein 60 alter the pathogenesis of Histoplasma capsulatum. Infect Immun 77.</a> , 1357-1367 (2009).</li><li>Guimaraes, A. J., Hamilton, A. J., de M Guedes, H. L., Nosanchuk, J. D., Zancope-Oliveira, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biological+function+and+molecular+mapping+of+M+antigen+in+yeast+phase+of+Histoplasma+capsulatum.">Biological function and molecular mapping of M antigen in yeast phase of Histoplasma capsulatum.</a> PLoS One. 3, e3449-e3449 (2008).</li><li>Nosanchuk, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protective+antibodies+and+endemic+dimorphic+fungi.">Protective antibodies and endemic dimorphic fungi.</a> Curr Mol Med. 5, 435-442 (2005).</li><li>Nosanchuk, J. D., Steenbergen, J. N., Shi, L., Jr, D. e. e. p. e., &amp;amp, G. S., Casadevall, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antibodies+to+a+cell+surface+histone-like+protein+protect+against+Histoplasma+capsulatum.">Antibodies to a cell surface histone-like protein protect against Histoplasma capsulatum.</a> J Clin Invest. 112, 1164-1175 (2003).</li><li>Nosanchuk, J. D., Steenbergen, J. N., Shi, L., Deepe, G. S., , ., Casadevall, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antibodies+to+a+cell+surface+histone-like+protein+protect+against+Histoplasma+capsulatum.">Antibodies to a cell surface histone-like protein protect against Histoplasma capsulatum.</a> J. Clin. Invest. 112, 1164-1175 (2003).</li><li>Smith, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Responses+of+laboratory+animals+to+some+injectable+anaesthetics.">Responses of laboratory animals to some injectable anaesthetics.</a> Lab Anim. 27, 30-39 (1993).</li></ol>

פרוטוקול המוצג כאן מוכיח כי MAB של אל ח capsulatum יכול לשנות את מהלך histoplasmosis Murine ניסיוני. מבז אל פני השטח אנטיגנים התא של פתוגנים יכול לשנות את הדינמיקה מורכבים המתרחשים במהלך משחק הגומלין בין המארחת לבין הפתוגן. מחקר זה קובע כי מבז לתווך הגנה במודל Murine של histoplasmosis קטלנ...

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><th> שם חומר </th><th> חברה </th></tr><tr><td> ארון בטיחות ביולוגית (BSL2) </td><td></td></tr><tr><td> 15 צינורות חרוטי מ&quot;ל </td><td> פלקון, BD </td></tr><tr><td> HAM-F-12 בינוני </td><td> Gibco </td></tr><tr><td> 37 ° C שייקר </td><td></td></tr><tr><td> מערבולת </td><td></td></tr><tr><td> 50 צינורות חרוטי מ&quot;ל </td><td> פלקון, BD </td></tr><tr><td> 26G1 / 2 מחט </td><td> BD </td></tr><tr><td> 10 מ&quot;ל מזרק </td><td> BD </td></tr><tr><td> 250 מ&quot;ל צלוחיות </td><td></td></tr><tr><td> FPLC (כרומטוגרפיה נוזלית חלבון מהיר) מערכת </td><td> GE Helthcare </td></tr><tr><td> ELISA הקורא </td><td> BioTek </td></tr><tr><td> הרדמה (קטמין ו Xylazine) </td><td></td></tr><tr><td> טור עומד </td><td></td></tr><tr><td> חוט ניילון </td><td></td></tr><tr><td> מחממים מנורה </td><td></td></tr><tr><td> תא strainers 70μm </td><td> פלקון, BD </td></tr><tr><td> BHI צלחות אגר </td><td> Gibco </td></tr></tbody></table>

passive administration of monoclonal antibodies against h. capsulatum and others fungal pathogens

מטרת השימוש של מתודולוגיה זו היא 1) כדי לקדם את היכולת שלנו להגן על אנשים עם נוגדנים או חיסון למניעת או לטיפול histoplasmosis נגרמת על ידי פטרייה capsulatum Histoplasma ו 2) לבחון את התפקיד של גורמים ארסיות כיעד לטיפול. כדי ליצור מבז, עכברים הם שחוסנו, תגובות החיסון מוערכים באמצעות בשלב מוצק ELISA המערכת שפותחה במעבדה שלנו, את העכברים הטובים ביותר המגיב נבחרים הבידוד של splenocytes היתוך עם תאים hybridoma. C57BL עכברים / 6 נעשה שימוש נרחב ללמוד H. בפתוגנזה capsulatum ולספק את המודל הטוב ביותר להשגת הנתונים הדרושים. על מנת להעריך את התפקיד של מבז זיהום, עכברים הם intraperitoneally מנוהל גם עם מב ח ל capsulatum או אלוטיפ בהתאמה מלאה מב ו נגוע אז או תוך ורידי (iv), intraperitoneal (IP), או intranasal (ב) מסלולים. בספרות המדעית, היעילות של מבז עבור זיהומים פטרייתיים בעכברים מסתמך על תמותה כנקודת סיום, בשיתוף עם formin יחידות המושבה (CFU) הערכות בנקודות זמן קודמות. (זמן מותו) מחקרים הישרדות נחוצים כמו שהם מייצגים בצורה הטובה ביותר מחלות אנושיות. לכן, יעילותה של התערבות שלנו לא מספקת תוקם ללא עקומות ההישרדות. הדבר נכון גם להקמת היעילות של חיסון או בדיקה של מוטנטים עבור ארסיות. עם histoplasmosis, העכברים לעתים קרובות ללכת מלהיות אנרגטית מת על כמה שעות. הקיבולת של התערבות כגון ניהול של MAB עשוי בתחילה להגן מפני מחלות בעלי חיים, אך המחלה יכולה להישנות אשר לא ימומש בקיצור ניסויים CFU. בנוסף הישרדות מבחני עומס פטרייתי, אנו בוחנים את תגובות דלקתיות לזיהום (היסטולוגיה, גיוס הסלולר, תגובות ציטוקינים). עבור ההישרדות / שעה כדי ניסויים מוות, עכברים נגועים ומנוטרים לפחות פעמיים ביום סימנים של תחלואה. על מנת להעריך את הנטל פטרייתי, histopathology, ותגובות ציטוקינים, בעכברים מורדמים בזמנים שונים לאחר ההדבקה. ניסויים בבעלי חיים מבוצעות על פי ההנחיות של המכון ללימודי החיות של אלברט איינשטיין לרפואה.

Watch this Scientific Journal Video about Passive Administration of Monoclonal Antibodies Against H. capsulatum and Others Fungal Pathogens at JoVE.com

Passive Administration of Monoclonal Antibodies Against H. capsulatum and Others Fungal Pathogens

C57BL עכברים / 6 שימשו ללמוד בפתוגנזה HC ולספק את המודל הטוב ביותר. אנחנו בוחנים את היתרונות הפוטנציאליים של חסינות הלחות נגד פטריות זה שנוצר מבז מספר [כדי H2B היסטון ואת הלם חום 60kDa חלבון] כי בדקנו את יעילות ההגנה שלהם לאחר מתן intraperitoneal.

מינהל פסיבי של נוגדנים חד שבטיים נגד ח capsulatum ואחרים פתוגנים פטרייתיים

The purpose of the use of this methodology is 1) to advance our capacity to protect individuals with antibody or vaccine for preventing or treating ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Passive Administration of Monoclonal Antibodies Against H. capsulatum and Others Fungal Pathogens

Quantitative Analyses of all Influenza Type A Viral Hemagglutinins and Neuraminidases using Universal Antibodies in Simple Slot Blot Assays

ניתוח כמותי של השפעת כל סוג Hemagglutinins ויראלי ו Neuraminidases באמצעות נוגדנים יוניברסל מבחני כתם פשוט חריץ

Hemagglutinin (HA) and neuraminidase (NA) are two surface proteins of influenza viruses which are known to play important roles in the viral life cycle ...

Infection of Zebrafish Embryos with Intracellular Bacterial Pathogens

זיהום של עוברים דג הזברה עם פתוגנים חיידקיים תאיים

Zebrafish (Danio rerio) embryos are increasingly used as a model for studying the function of the vertebrate innate immune system in host-pathogen ...

Assessing Anti-fungal Activity of Isolated Alveolar Macrophages by Confocal Microscopy

הערכת פעילות אנטי פטרייתי של מבודדים מכתשיים המקרופאגים ידי מיקרוסקופיה confocal

The lung is an interface where host cells are routinely exposed to microbes and microbial products. Alveolar macrophages are the first-line phagocytic ...

Biolistic Transformation of a Fluorescent Tagged Gene into the Opportunistic Fungal Pathogen Cryptococcus neoformans

Biolistic Transformation of a Fluorescent Tagged Gene into the Opportunistic Fungal Pathogen Cryptococcus neoformans

שינוי Biolistic של פלורסנט Tagged Gene לOpportunistic פטרייתיים פתוגן<em&gt; Neoformans קריפטוקוקוס</em

The basidiomycete Cryptococcus neoformans, an invasive opportunistic pathogen of the central nervous system, is the most frequent cause of fungal ...

Generation of Recombinant Human IgG Monoclonal Antibodies from Immortalized Sorted B Cells

דור של רקומביננטי אדם IgG נוגדנים חד שבטיים מתאים הממוינים B הונצחו

Finding new methods for generating human monoclonal antibodies is an active research field that is important for both basic and applied sciences, ...

Generation of Murine Monoclonal Antibodies by Hybridoma Technology

הדור של Murine חד-שבטיים נוגדנים על ידי Hybridoma טכנולוגיה

Monoclonal antibodies are universal binding molecules and are widely used in biomedicine and research. Nevertheless, the generation of these binding ...

A Robust Pneumonia Model in Immunocompetent Rodents to Evaluate Antibacterial Efficacy against S. pneumoniae, H. influenzae, K. pneumoniae, P. aeruginosa or A. baumannii

A Robust Pneumonia Model in Immunocompetent Rodents to Evaluate Antibacterial Efficacy against S. pneumoniae, H. influenzae, K. pneumoniae, P. aeruginosa or  A. baumannii

מודל דלקת ריאות חזק במכרסמי immunocompetent להערכת יעילות אנטיבקטריאלי נגד<i&gt; S. pneumoniae</i&gt;,<i&gt; H. אינפלואנזה</i&gt;,<i&gt; K. pneumoniae</i&gt;,<em&gt; P. aeruginosa</em&gt; או<em&gt; A. baumannii</em

Efficacy of candidate antibacterial treatments must be demonstrated in animal models of infection as part of the discovery and development process, ...

Generation of Escape Variants of Neutralizing Influenza Virus Monoclonal Antibodies

דור של בריחה וריאציות של נטרול נוגדנים חד-שבטיים של וירוס שפעת

Influenza viruses exhibit a remarkable ability to adapt and evade the host immune response. One way is through antigenic changes that occur on the surface ...

Generation of Discriminative Human Monoclonal Antibodies from Rare Antigen-specific B Cells Circulating in Blood

דור שמסווגת נוגדנים חד-שבטיים אנושי מתאי B אנטיגן ספציפי נדיר במחזור הדם

Monoclonal antibodies (mAbs) are powerful tools useful for both fundamental research and in biomedicine. Their high specificity is indispensable when the ...

Generation of Monoclonal Antibodies Against Natural Products

דור של נוגדנים חד-שבטיים כנגד מוצרים טבעיים

The analysis of the bioactive components present in foods and natural products has become a popular area of study in many fields, including traditional ...