Name: passive administration of monoclonal antibodies against h. capsulatum and others fungal pathogens
Uploaded: 2011-02-14T17:00:00
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1. H.의 성장 Capsulatum <ol><li> 20 분 자외선 조사에 의해 다음 10 % 표백제와 캐비닛을 청소하여 곰팡이와 함께 일을 biosafety 캐비닛을 준비합니다. H.이 금형 양식 BSLIII을 필요로하는 동안 효모 단계에 capsulatum은 Biosafety 레벨 (BSL) II 관행이 필요합니다. 다음 단계에서 효모 양식을 사용하십시오. </li><li> 다음 PBS 5 ML과 15 ML 원뿔 튜브를 준비합니다. H.의 식?...

<ol>
	<li>Casadevall, A., Mukherjee, J., Scharff, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monoclonal+antibody+based+ELISAs+for+cryptococcal+polysaccharide.">Monoclonal antibody based ELISAs for cryptococcal polysaccharide.</a> J. Immunol. Methods. 154, 27-35 (1992).</li><li>Guimaraes, A. J., Frases, S., Gomez, F. J., Zancope-Oliveira, R. M., Nosanchuk, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monoclonal+antibodies+to+heat+shock+protein+60+alter+the+pathogenesis+of+Histoplasma+capsulatum.+Infect+Immun+77.">Monoclonal antibodies to heat shock protein 60 alter the pathogenesis of Histoplasma capsulatum. Infect Immun 77.</a> , 1357-1367 (2009).</li><li>Guimaraes, A. J., Hamilton, A. J., de M Guedes, H. L., Nosanchuk, J. D., Zancope-Oliveira, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biological+function+and+molecular+mapping+of+M+antigen+in+yeast+phase+of+Histoplasma+capsulatum.">Biological function and molecular mapping of M antigen in yeast phase of Histoplasma capsulatum.</a> PLoS One. 3, e3449-e3449 (2008).</li><li>Nosanchuk, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protective+antibodies+and+endemic+dimorphic+fungi.">Protective antibodies and endemic dimorphic fungi.</a> Curr Mol Med. 5, 435-442 (2005).</li><li>Nosanchuk, J. D., Steenbergen, J. N., Shi, L., Jr, D. e. e. p. e., &amp;amp, G. S., Casadevall, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antibodies+to+a+cell+surface+histone-like+protein+protect+against+Histoplasma+capsulatum.">Antibodies to a cell surface histone-like protein protect against Histoplasma capsulatum.</a> J Clin Invest. 112, 1164-1175 (2003).</li><li>Nosanchuk, J. D., Steenbergen, J. N., Shi, L., Deepe, G. S., , ., Casadevall, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antibodies+to+a+cell+surface+histone-like+protein+protect+against+Histoplasma+capsulatum.">Antibodies to a cell surface histone-like protein protect against Histoplasma capsulatum.</a> J. Clin. Invest. 112, 1164-1175 (2003).</li><li>Smith, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Responses+of+laboratory+animals+to+some+injectable+anaesthetics.">Responses of laboratory animals to some injectable anaesthetics.</a> Lab Anim. 27, 30-39 (1993).</li></ol>

여기에 제시 프로토콜 mAb는 H.하는 걸 보여줍니다 capsulatum는 실험 murine 히스토플라스마증의 과정을 수정할 수 있습니다. 병원균의 세포 표면 항원에 MAbs는 호스트와 병원체 사이 상호 작용하는 동안 발생하는 복잡한 역학을 수정할 수 있습니다. 이 연구 intraperitoneally을 주입했을 때 mAbs는 치명적인 히스토플라스마증의 murine 모델의 보호를 중재 것을 수립하고는 H2B, M의 항원 (카탈 라 ...

<table border="1"><tbody><tr><th> 재료의 이름 </th><th> 회사 </th></tr><tr><td> 생물 안전 캐비닛 (BSL2) </td><td></td></tr><tr><td> 15 ML 원뿔 튜브 </td><td> 팔콘, BD </td></tr><tr><td> 햄 F - 12 중간 </td><td> Gibco </td></tr><tr><td> 37 ° C 흔드는 </td><td></td></tr><tr><td> 와동 </td><td></td></tr><tr><td> 50 ML 원뿔 튜브 </td><td> 팔콘, BD </td></tr><tr><td> 26G1 / 2 바늘 </td><td> BD </td></tr><tr><td> 10 ML 주사기 </td><td> BD </td></tr><tr><td> 250 ML의 flasks </td><td></td></tr><tr><td> FPLC (고속 단백질 액체 크로마 토그래피) 시스템 </td><td> GE Helthcare </td></tr><tr><td> 엘리사 리더 </td><td> BioTek </td></tr><tr><td> 마취 (마취제와 Xylazine) </td><td></td></tr><tr><td> 열 스탠드 </td><td></td></tr><tr><td> 나일론 문자열 </td><td></td></tr><tr><td> 가열 램프 </td><td></td></tr><tr><td> 70μm 세포 strainers </td><td> 팔콘, BD </td></tr><tr><td> BHI 한천 플레이트 </td><td> Gibco </td></tr></tbody></table>

passive administration of monoclonal antibodies against h. capsulatum and others fungal pathogens

이 방법론의 사용 목적은 항체 또는 균류 Histoplasma capsulatum 2) 치료 대상으로 독성 요소의 역할을 검토로 인한 히스토플라스마증을 예방하거나 치료를위한 백신과 개인을 보호하기 위해 우리의 역량을 발전) 1입니다. mAbs를 생성하려면, 마우스가 예방 접종되고 면역 반응은 우리의 연구실에서 개발한 고체 위상 엘리사 시스템을 사용 평가하고 있으며, 최고의 응답의 마우스는 하이 브리 도마 세포와 융합을위한 splenocytes의 격리를 위해 선택됩니다. C57BL / 6 생쥐는 광범위 H. 연구하는 데 사용되었습니다 capsulatum pathogenesis하고 필요한 데이터를 얻기위한 최상의 모델을 제공합니다. 감염에 mAbs의 역할을 평가하기 위해서는, 마우스는 H.에 mAb 중과 관리 intraperitoneally 아르 capsulatum 또는 isotype도 정맥 주사 (IV), intraperitoneal (IP) 또는 비강 (인) 노선에 의해 제어 mAb와 일치하고 감염. 과학 문학, 마우스에 곰팡이 감염 mAbs의 효능은 이전 시간 지점에서 콜로니 formin 단위 (CFU) 평가와 함께, 끝점으로 사망률에 의존합니다. 그들은 최고의 인간의 질병을 대표로 생존 (사망 시간) 연구가 필요합니다. 따라서, 우리의 개입의 효능은 충분히 생존 곡선없이 설정할 수 없습니다 것입니다. 이것은 백신이나 독성에 대한 돌연변이 검사의 효능을 수립에도 적용됩니다. 히스토플라스마증와 생쥐는 종종 몇 시간 동안 죽은 활기찬되는 이동합니다. 이러한 mAb의 행정으로 개입의 용량은 처음에는 질병으로부터 동물을 보호 수 있지만, 질병은 짧은 CFU 실험의 재발을 실현 않을 수있는. 생존과 곰팡이 부담 assays 이외에, 우리는 감염 (조직학, 세포 채용, 시토킨 응답)로 염증 반응을 검사합니다. 생존 / 사망 실험 시간은 생쥐는 병적 상태의 흔적에 대해 최소한 회 감염 감시하고 있습니다. 곰팡이 부담, 조직 병리학, 그리고 시토킨 반응을 평가하기 위해, 생쥐는 감염 후 여러 시간에 euthanized 있습니다. 동물 실험은 의학의 알버트 아인슈타인 대학 동물 연구소의 지침에 따라 수행됩니다.

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Passive Administration of Monoclonal Antibodies Against H. capsulatum and Others Fungal Pathogens

C57BL / 6 마​​우스는 HC의 pathogenesis을 연구하고 최상의 모델을 제공하는 데 사용되었습니다. 우리는이 곰팡이에 대한 체액성 면역의 가능성 혜택을 탐구하고 [히스톤 H2B와 열 충격 단백질 60kDa로] 여러 mAbs를 생성 우리가 intraperitoneal 행정부 이후에 그들의 보호 효능에 대한 테스트 것을.

반대 단클론 항체의 수동적 관리 H. capsulatum 및 기타 곰팡이 병원균을

The purpose of the use of this methodology is 1) to advance our capacity to protect individuals with antibody or vaccine for preventing or treating ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Passive Administration of Monoclonal Antibodies Against H. capsulatum and Others Fungal Pathogens

Quantitative Analyses of all Influenza Type A Viral Hemagglutinins and Neuraminidases using Universal Antibodies in Simple Slot Blot Assays

모든 독감의 양적 분석 간단한 슬롯 얼룩 Assays에서 유니버설 항체를 사용하는 바이러스성 Hemagglutinins 및 Neuraminidases를 입력하십시오

Hemagglutinin (HA) and neuraminidase (NA) are two surface proteins of influenza viruses which are known to play important roles in the viral life cycle ...

연구

면역학 및 감염병학

Infection of Zebrafish Embryos with Intracellular Bacterial Pathogens

세포내 세균성 병원균과 Zebrafish 태아의 감염

Zebrafish (Danio rerio) embryos are increasingly used as a model for studying the function of the vertebrate innate immune system in host-pathogen ...

Assessing Anti-fungal Activity of Isolated Alveolar Macrophages by Confocal Microscopy

공 초점 현미경으로 고립 된 폐포 대 식세포의 반대로 곰팡이 활동을 평가

The lung is an interface where host cells are routinely exposed to microbes and microbial products. Alveolar macrophages are the first-line phagocytic ...

Biolistic Transformation of a Fluorescent Tagged Gene into the Opportunistic Fungal Pathogen Cryptococcus neoformans

Biolistic Transformation of a Fluorescent Tagged Gene into the Opportunistic Fungal Pathogen Cryptococcus neoformans

편의적 곰팡이 병원균에 형광 태그 유전자의과 유전자 변형<em&gt; 크립토 콕 쿠스 네오 포르</em

The basidiomycete Cryptococcus neoformans, an invasive opportunistic pathogen of the central nervous system, is the most frequent cause of fungal ...

Generation of Recombinant Human IgG Monoclonal Antibodies from Immortalized Sorted B Cells

정렬 된 불멸화 된 B 세포로부터 재조합 인간 IgG 단일 클론 항체의 생성

Finding new methods for generating human monoclonal antibodies is an active research field that is important for both basic and applied sciences, ...

Generation of Murine Monoclonal Antibodies by Hybridoma Technology

하이 브리 도마 기술에 의해 쥐 단일 클론 항체의 생성

Monoclonal antibodies are universal binding molecules and are widely used in biomedicine and research. Nevertheless, the generation of these binding ...

A Robust Pneumonia Model in Immunocompetent Rodents to Evaluate Antibacterial Efficacy against S. pneumoniae, H. influenzae, K. pneumoniae, P. aeruginosa or A. baumannii

A Robust Pneumonia Model in Immunocompetent Rodents to Evaluate Antibacterial Efficacy against S. pneumoniae, H. influenzae, K. pneumoniae, P. aeruginosa or  A. baumannii

면역 적격 설치류에서 강력한 폐렴 모델에 대해 항균 효능을 평가하기<i&gt; S. 폐렴</i&gt;<i&gt; H. 인플루엔자</i&gt;<i&gt; K. 폐렴</i&gt;<em&gt; P. 녹농균</em&gt; 또는<em&gt;를했다. baumannii가</em

Efficacy of candidate antibacterial treatments must be demonstrated in animal models of infection as part of the discovery and development process, ...

Generation of Escape Variants of Neutralizing Influenza Virus Monoclonal Antibodies

인플루엔자 바이러스 단일 클론 항 체를 중화의 탈출 변종의 생성

Influenza viruses exhibit a remarkable ability to adapt and evade the host immune response. One way is through antigenic changes that occur on the surface ...

Generation of Discriminative Human Monoclonal Antibodies from Rare Antigen-specific B Cells Circulating in Blood

희귀 한 항 원 특정 B 세포 혈액 순환에서 구별 인간 단일 클론 항 체의 생성

Monoclonal antibodies (mAbs) are powerful tools useful for both fundamental research and in biomedicine. Their high specificity is indispensable when the ...

Generation of Monoclonal Antibodies Against Natural Products

천연 제품에 대 한 단일 클론 항 체의 생성

The analysis of the bioactive components present in foods and natural products has become a popular area of study in many fields, including traditional ...