Name: passive administration of monoclonal antibodies against h. capsulatum and others fungal pathogens
Uploaded: 2011-02-14T17:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Passive Administration of Monoclonal Antibodies Against H. capsulatum and Others Fungal Pathogens at JoVE.com

1. Рост H. Capsulatum <ol><li> Подготовка кабинета биологической безопасности для работы с грибом путем очистки шкафа с 10% гипохлоритом затем 20 облучении УФ мин. H. capsulatum в дрожжевой фазе требует уровня биобезопасности (BSL) II практики, в то время как плесень форма требует BSLIII. Исп...

<ol>
	<li>Casadevall, A., Mukherjee, J., Scharff, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monoclonal+antibody+based+ELISAs+for+cryptococcal+polysaccharide.">Monoclonal antibody based ELISAs for cryptococcal polysaccharide.</a> J. Immunol. Methods. 154, 27-35 (1992).</li><li>Guimaraes, A. J., Frases, S., Gomez, F. J., Zancope-Oliveira, R. M., Nosanchuk, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monoclonal+antibodies+to+heat+shock+protein+60+alter+the+pathogenesis+of+Histoplasma+capsulatum.+Infect+Immun+77.">Monoclonal antibodies to heat shock protein 60 alter the pathogenesis of Histoplasma capsulatum. Infect Immun 77.</a> , 1357-1367 (2009).</li><li>Guimaraes, A. J., Hamilton, A. J., de M Guedes, H. L., Nosanchuk, J. D., Zancope-Oliveira, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biological+function+and+molecular+mapping+of+M+antigen+in+yeast+phase+of+Histoplasma+capsulatum.">Biological function and molecular mapping of M antigen in yeast phase of Histoplasma capsulatum.</a> PLoS One. 3, e3449-e3449 (2008).</li><li>Nosanchuk, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protective+antibodies+and+endemic+dimorphic+fungi.">Protective antibodies and endemic dimorphic fungi.</a> Curr Mol Med. 5, 435-442 (2005).</li><li>Nosanchuk, J. D., Steenbergen, J. N., Shi, L., Jr, D. e. e. p. e., &amp;amp, G. S., Casadevall, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antibodies+to+a+cell+surface+histone-like+protein+protect+against+Histoplasma+capsulatum.">Antibodies to a cell surface histone-like protein protect against Histoplasma capsulatum.</a> J Clin Invest. 112, 1164-1175 (2003).</li><li>Nosanchuk, J. D., Steenbergen, J. N., Shi, L., Deepe, G. S., , ., Casadevall, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antibodies+to+a+cell+surface+histone-like+protein+protect+against+Histoplasma+capsulatum.">Antibodies to a cell surface histone-like protein protect against Histoplasma capsulatum.</a> J. Clin. Invest. 112, 1164-1175 (2003).</li><li>Smith, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Responses+of+laboratory+animals+to+some+injectable+anaesthetics.">Responses of laboratory animals to some injectable anaesthetics.</a> Lab Anim. 27, 30-39 (1993).</li></ol>

Протокол, представленные здесь, показывает, что МКА к H. capsulatum может изменить ход экспериментальной мышиной гистоплазмоз. МАТ к поверхности клеток антигенов возбудителей может изменить сложную динамику, которые происходят во взаимодействии между хозяином и патогеном. Это исследо...

<table border="1"><tbody><tr><th> Название материала </th><th> Компания </th></tr><tr><td> Биологические кабинета безопасности (BSL2) </td><td></td></tr><tr><td> 15 мл конические пробирки </td><td> Сокол, Б. Д. </td></tr><tr><td> HAM F-12 средний </td><td> Гибко </td></tr><tr><td> 37 ° C шейкер </td><td></td></tr><tr><td> Вихревой </td><td></td></tr><tr><td> 50 мл конические пробирки </td><td> Сокол, Б. Д. </td></tr><tr><td> 26G1 / 2 иглы </td><td> BD </td></tr><tr><td> 10 мл шприца </td><td> BD </td></tr><tr><td> 250 мл колб </td><td></td></tr><tr><td> FPLC (Fast жидкостной хроматографии белков) системы </td><td> GE Helthcare </td></tr><tr><td> ИФА </td><td> Биотек </td></tr><tr><td> Анестезия (кетамин и Ксилазин) </td><td></td></tr><tr><td> Колонка стоит </td><td></td></tr><tr><td> Нейлон строку </td><td></td></tr><tr><td> Тепло лампы </td><td></td></tr><tr><td> 70μm фильтры ячейки </td><td> Сокол, Б. Д. </td></tr><tr><td> Пластины BHI агар </td><td> Гибко </td></tr></tbody></table>

passive administration of monoclonal antibodies against h. capsulatum and others fungal pathogens

Цель использования данной методики является 1) для продвижения нашего потенциала для защиты лиц с антителами или вакцина для профилактики или лечения гистоплазмоз вызванные грибом Histoplasma capsulatum и 2) рассмотреть вопрос о роли факторов вирулентности, как мишени для терапии. Для создания моноклональных антител, мышей сделаны прививки, иммунные реакции оценивались с помощью твердофазного ИФА система, разработанная в нашей лаборатории, и лучший ответчик мышей, выбранных для изоляции спленоцитов для слияния с гибридомных клеток. C57BL / 6 мышей были широко использованы для изучения H. capsulatum патогенеза и обеспечить лучшую модель для получения данных, необходимых. Для того чтобы оценить роль моноклональных антител к инфекции, мышей внутрибрюшинно вводили либо МКА к H. capsulatum или изотипа контрольной МКА, а затем зараженные или внутривенно (IV), внутрибрюшинно (IP), или интраназально (в) маршруты. В научной литературе, эффективность моноклональных антител для грибковых инфекций у мышей зависит от смертности, как конечная точка, в сочетании с колонией Лазэр единиц (КОЕ) оценки на более ранних моментов времени. Выживание (время до смерти) исследования необходимы, поскольку они лучше всего представляют болезни человека. Таким образом, эффективность нашего вмешательства не будет адекватно быть установлено без кривых выживаемости. Это также верно для установления эффективности вакцины или тестирования мутантов для вирулентности. С гистоплазмоз, мышей часто идут от того, энергичными с мертвыми в течение нескольких часов. Мощностью вмешательства, например, администрация МКА может сначала защитить животное от болезни, но болезнь может рецидив, который не был бы реализован в короткие экспериментов КОЕ. В дополнение к выживанию и грибковых анализов бремя, мы исследуем воспалительный ответ на инфекцию (гистология, сотовые найма, цитокинов ответов). Для выживания / время, чтобы смерть экспериментов мышей инфицированных и мониторинг по крайней мере два раза в день за признаками заболеваемости. Для оценки грибковых бремени, гистопатология, и цитокинового ответа, мышей эвтаназии в разное время после заражения. Эксперименты на животных проводятся в соответствии с руководящими принципами, Института защиты животных Исследования Альберт Эйнштейн медицинский колледж.

Watch this Scientific Journal Video about Passive Administration of Monoclonal Antibodies Against H. capsulatum and Others Fungal Pathogens at JoVE.com

Passive Administration of Monoclonal Antibodies Against H. capsulatum and Others Fungal Pathogens

C57BL / 6 мышей были использованы для изучения патогенеза Нс и обеспечивают лучшую модель. Мы изучаем потенциальных выгод от гуморального иммунитета против этого грибка и порожденных нескольких моноклональных антител [к гистонов H2B и тепла 60kDa шока], что мы тестировали их защитной эффективности после внутрибрюшинного введения.

Пассивный Администрации моноклональных антител против H. capsulatum И другие грибным патогенам

The purpose of the use of this methodology is 1) to advance our capacity to protect individuals with antibody or vaccine for preventing or treating ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Passive Administration of Monoclonal Antibodies Against H. capsulatum and Others Fungal Pathogens

Quantitative Analyses of all Influenza Type A Viral Hemagglutinins and Neuraminidases using Universal Antibodies in Simple Slot Blot Assays

Количественный анализ всех гриппа типа Вирусный Hemagglutinins и нейраминидазы использованием универсального антител в простом Анализы Blot Слот

Hemagglutinin (HA) and neuraminidase (NA) are two surface proteins of influenza viruses which are known to play important roles in the viral life cycle ...

Infection of Zebrafish Embryos with Intracellular Bacterial Pathogens

Заражение эмбрионов данио рерио с внутриклеточные бактериальные патогены

Zebrafish (Danio rerio) embryos are increasingly used as a model for studying the function of the vertebrate innate immune system in host-pathogen ...

Assessing Anti-fungal Activity of Isolated Alveolar Macrophages by Confocal Microscopy

Оценка противогрибковое действие изолированных альвеолярных макрофагов с помощью конфокальной микроскопии

The lung is an interface where host cells are routinely exposed to microbes and microbial products. Alveolar macrophages are the first-line phagocytic ...

Biolistic Transformation of a Fluorescent Tagged Gene into the Opportunistic Fungal Pathogen Cryptococcus neoformans

Biolistic Transformation of a Fluorescent Tagged Gene into the Opportunistic Fungal Pathogen Cryptococcus neoformans

Баллистической трансформации флуоресцентного Tagged гена в оппортунистических грибковых возбудителя<em&gt; Cryptococcus neoformans</em

The basidiomycete Cryptococcus neoformans, an invasive opportunistic pathogen of the central nervous system, is the most frequent cause of fungal ...

Generation of Recombinant Human IgG Monoclonal Antibodies from Immortalized Sorted B Cells

Генерация рекомбинантного человеческого IgG моноклональных антител из иммортализованных клеток Сортировка В

Finding new methods for generating human monoclonal antibodies is an active research field that is important for both basic and applied sciences, ...

Generation of Murine Monoclonal Antibodies by Hybridoma Technology

Генерация мышиных моноклональных антител с помощью гибридом технологии

Monoclonal antibodies are universal binding molecules and are widely used in biomedicine and research. Nevertheless, the generation of these binding ...

A Robust Pneumonia Model in Immunocompetent Rodents to Evaluate Antibacterial Efficacy against S. pneumoniae, H. influenzae, K. pneumoniae, P. aeruginosa or A. baumannii

A Robust Pneumonia Model in Immunocompetent Rodents to Evaluate Antibacterial Efficacy against S. pneumoniae, H. influenzae, K. pneumoniae, P. aeruginosa or  A. baumannii

Надежный Пневмония Модель в иммунокомпетентных Грызуны для оценки антибактериальную эффективность против<i&gt; S. Пневмококк</i&gt;,<i&gt; H. гриппа</i&gt;,<i&gt; K. Пневмококк</i&gt;,<em&gt; P. палочки</em&gt; или<em&gt; A. baumannii</em

Efficacy of candidate antibacterial treatments must be demonstrated in animal models of infection as part of the discovery and development process, ...

Generation of Escape Variants of Neutralizing Influenza Virus Monoclonal Antibodies

Поколение побег вариантов нейтрализующих антител моноклональных вирус гриппа

Influenza viruses exhibit a remarkable ability to adapt and evade the host immune response. One way is through antigenic changes that occur on the surface ...

Generation of Discriminative Human Monoclonal Antibodies from Rare Antigen-specific B Cells Circulating in Blood

Поколение дискриминационных человеческих моноклональных антител от редких антиген специфические клетки, циркулирующие в крови

Monoclonal antibodies (mAbs) are powerful tools useful for both fundamental research and in biomedicine. Their high specificity is indispensable when the ...

Generation of Monoclonal Antibodies Against Natural Products

Поколение моноклональных антител против натуральных продуктов

The analysis of the bioactive components present in foods and natural products has become a popular area of study in many fields, including traditional ...