Name: passive administration of monoclonal antibodies against h. capsulatum and others fungal pathogens
Uploaded: 2011-02-14T17:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Passive Administration of Monoclonal Antibodies Against H. capsulatum and Others Fungal Pathogens at JoVE.com

1. H. Büyüme Capsulatum <ol><li> 20 dakika UV ışını ile% 10 çamaşır suyu ile temizlik kabine mantar ile çalışmak için bir biyogüvenlik kabini hazırlayın. H. maya aşamasında kalıp formu BSLIII gerektirir capsulatum, Biyogüvenlik düzeyi (BSL) II uygulamaları gerektirir. Maya formu aşağıdaki adımları kullanın. </li><li> Sonraki 5 ml PBS ile 15 ml konik tüp hazırlamak. Hasat bir koloni H. capsulatum BHI kan agar plaka [şekeri 10 g...

<ol>
	<li>Casadevall, A., Mukherjee, J., Scharff, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monoclonal+antibody+based+ELISAs+for+cryptococcal+polysaccharide.">Monoclonal antibody based ELISAs for cryptococcal polysaccharide.</a> J. Immunol. Methods. 154, 27-35 (1992).</li><li>Guimaraes, A. J., Frases, S., Gomez, F. J., Zancope-Oliveira, R. M., Nosanchuk, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monoclonal+antibodies+to+heat+shock+protein+60+alter+the+pathogenesis+of+Histoplasma+capsulatum.+Infect+Immun+77.">Monoclonal antibodies to heat shock protein 60 alter the pathogenesis of Histoplasma capsulatum. Infect Immun 77.</a> , 1357-1367 (2009).</li><li>Guimaraes, A. J., Hamilton, A. J., de M Guedes, H. L., Nosanchuk, J. D., Zancope-Oliveira, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biological+function+and+molecular+mapping+of+M+antigen+in+yeast+phase+of+Histoplasma+capsulatum.">Biological function and molecular mapping of M antigen in yeast phase of Histoplasma capsulatum.</a> PLoS One. 3, e3449-e3449 (2008).</li><li>Nosanchuk, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protective+antibodies+and+endemic+dimorphic+fungi.">Protective antibodies and endemic dimorphic fungi.</a> Curr Mol Med. 5, 435-442 (2005).</li><li>Nosanchuk, J. D., Steenbergen, J. N., Shi, L., Jr, D. e. e. p. e., &amp;amp, G. S., Casadevall, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antibodies+to+a+cell+surface+histone-like+protein+protect+against+Histoplasma+capsulatum.">Antibodies to a cell surface histone-like protein protect against Histoplasma capsulatum.</a> J Clin Invest. 112, 1164-1175 (2003).</li><li>Nosanchuk, J. D., Steenbergen, J. N., Shi, L., Deepe, G. S., , ., Casadevall, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antibodies+to+a+cell+surface+histone-like+protein+protect+against+Histoplasma+capsulatum.">Antibodies to a cell surface histone-like protein protect against Histoplasma capsulatum.</a> J. Clin. Invest. 112, 1164-1175 (2003).</li><li>Smith, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Responses+of+laboratory+animals+to+some+injectable+anaesthetics.">Responses of laboratory animals to some injectable anaesthetics.</a> Lab Anim. 27, 30-39 (1993).</li></ol>

Burada sunulan protokol mAb H. olduğunu gösteriyor capsulatum deneysel fare histoplazmozis değiştirebilirsiniz. Patojenlerin hücre yüzey antijenleri Mablar bir ana ve bir patojen arasındaki etkileşimi sırasında meydana gelen karmaşık dinamiklerini değiştirebilir. Bu çalışmada, intraperitoneal olarak enjekte görünüz mAbs ölümcül histoplazmozis bir fare modeli koruma arabuluculuk kurar ve aşı geliştirilmesi için aday proteinler, H2B, M antijeni (katalaz yüzey) (3) ve Hsp60 ola...

<table border="1"><tbody><tr><th> Malzeme Adı </th><th> Şirket </th></tr><tr><td> Biyolojik güvenlik kabini (BSL2) </td><td></td></tr><tr><td> 15 ml konik tüpler </td><td> Falcon, BD </td></tr><tr><td> HAM F-12 orta </td><td> Gibco </td></tr><tr><td> 37 ° C çalkalayıcı </td><td></td></tr><tr><td> Girdap </td><td></td></tr><tr><td> 50 ml konik tüpler </td><td> Falcon, BD </td></tr><tr><td> 26G1 / 2 iğne </td><td> BD </td></tr><tr><td> 10 ml şırınga </td><td> BD </td></tr><tr><td> 250 ml şişeler </td><td></td></tr><tr><td> FPLC (Hızlı protein sıvı kromatografisi) sistemi </td><td> GE Helthcare </td></tr><tr><td> ELISA okuyucu </td><td> BioTek </td></tr><tr><td> Anestezi (ketamin ve Xylazine) </td><td></td></tr><tr><td> Sütun duruyor </td><td></td></tr><tr><td> Naylon dize </td><td></td></tr><tr><td> Isı lambası </td><td></td></tr><tr><td> 70μm hücre Strainer&#39;lar </td><td> Falcon, BD </td></tr><tr><td> BHI agar plakaları </td><td> Gibco </td></tr></tbody></table>

passive administration of monoclonal antibodies against h. capsulatum and others fungal pathogens

Bu metodoloji kullanım amacı bireyleri korumak için mantar Histoplasma capsulatum ve 2) tedavi için hedef olarak virülans faktörleri rol incelemek için neden histoplazmozis önlemek veya tedavi etmek için antikor ya da aşı ile kapasitesini ilerletmek için 1). MAb oluşturmak için, fareler aşı, bağışıklık yanıtlarını laboratuvarda geliştirilen bir katı faz ELISA sistemi kullanılarak değerlendirilir ve en iyi cevaplayıcı fareler hibridoma hücreleri ile füzyon için splenositlerin izolasyonu için seçilir. C57BL / 6 farelerin yoğun H. incelemek için kullanılan capsulatum patogenezi ve gerekli verileri elde etmek için en iyi modeli sağlamak. Enfeksiyon mAbs rolünü değerlendirmek amacıyla, fareler H. mAb ya intraperitoneal yolla capsulatum veya izotip ya intravenöz (iv), intraperitoneal (ip), ya da burun içi (in) yolları kontrolü mAb eşlemeli ve daha sonra enfekte . Bilimsel literatürde, farelerde mantar enfeksiyonları için mAbs etkinliği önceki zaman noktalarında koloni formin birim (CFU) değerlendirmeler ile birlikte, bir uç nokta olarak mortalite üzerine dayanır. En iyi insan hastalığı temsil Survival (ölüm) çalışmaları gereklidir. Böylece, bizim müdahale etkinliği yeterince sağkalım eğrileri olmadan kurulacak olmaz. Bu aşının etkinliği veya virülans için mutantlar test kurulması için de geçerlidir. Histoplazmozis, fareler genellikle birkaç saat içinde ölü enerjik olmak gidin. MAb idaresi gibi bir müdahale kapasitesi başlangıçta bir hayvan hastalığı korumak olabilir, ancak hastalığın nüks kısa CFU deneyler gerçekleştirilecek olmaz hangi. Hayatta kalma ve fungal yük testleri yanı sıra, enfeksiyon (histoloji, hücresel işe alım, sitokin yanıtları) inflamatuar yanıtları inceleyin. Farelerin hayatta kalma / ölüm deneylere zaman için, morbidite belirtileri için günde en az iki kez enfekte olan ve takip edilmektedir. Fungal yükü, histopatoloji ve sitokin yanıtları değerlendirmek için, farelerin enfeksiyondan sonra çeşitli zamanlarda ötenazi. Hayvan deneyleri Albert Einstein College of Medicine Hayvan Araştırmaları Enstitüsü&#39;nün kurallarına göre yapılır.

Watch this Scientific Journal Video about Passive Administration of Monoclonal Antibodies Against H. capsulatum and Others Fungal Pathogens at JoVE.com

Passive Administration of Monoclonal Antibodies Against H. capsulatum and Others Fungal Pathogens

C57BL / 6 farelerinde Hc patogenezinde çalışma ve en iyi model sağlamak için kullanılmaktadır. Biz bu mantara karşı sıvısal bağışıklığın potansiyel yararları keşfetmek ve histon H2B ve ısı şoku proteini 60kDa] üretilen çeşitli mAbs intraperitoneal uygulamadan sonra koruyucu etkinlik için test ettiğim.

Karşı Monoklonal Antikorlar Pasif Yönetim H. capsulatum Ve Diğerleri Fungal Patojenler

The purpose of the use of this methodology is 1) to advance our capacity to protect individuals with antibody or vaccine for preventing or treating ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Passive Administration of Monoclonal Antibodies Against H. capsulatum and Others Fungal Pathogens

Quantitative Analyses of all Influenza Type A Viral Hemagglutinins and Neuraminidases using Universal Antibodies in Simple Slot Blot Assays

Tüm Influenza Kantitatif Analiz Basit Slot Blot Tahliller Evrensel Antikorlar kullanarak Viral Hemagglutinins ve nöraminidaz yazın

Hemagglutinin (HA) and neuraminidase (NA) are two surface proteins of influenza viruses which are known to play important roles in the viral life cycle ...

Infection of Zebrafish Embryos with Intracellular Bacterial Pathogens

Hücre içi bakteriyel patojenler ile Zebra balığı Embryolarının Enfeksiyon

Zebrafish (Danio rerio) embryos are increasingly used as a model for studying the function of the vertebrate innate immune system in host-pathogen ...

Assessing Anti-fungal Activity of Isolated Alveolar Macrophages by Confocal Microscopy

Eşodaklı Mikroskopi İzole Alveoler Makrofagların anti-fungal Hareketi değerlendirilmesi

The lung is an interface where host cells are routinely exposed to microbes and microbial products. Alveolar macrophages are the first-line phagocytic ...

Biolistic Transformation of a Fluorescent Tagged Gene into the Opportunistic Fungal Pathogen Cryptococcus neoformans

Biolistic Transformation of a Fluorescent Tagged Gene into the Opportunistic Fungal Pathogen Cryptococcus neoformans

Fırsatçı mantar patojenlere bir Floresan etiketli geninin biyolistik transformasyonu<em&gt; Cryptococcus neoformans</em

The basidiomycete Cryptococcus neoformans, an invasive opportunistic pathogen of the central nervous system, is the most frequent cause of fungal ...

Generation of Recombinant Human IgG Monoclonal Antibodies from Immortalized Sorted B Cells

Ölümsüzleştirilmiştir Sıralama B hücrelerinden Rekombinant İnsan IgG Monoklonal Antikorlarının Üretimi

Finding new methods for generating human monoclonal antibodies is an active research field that is important for both basic and applied sciences, ...

Generation of Murine Monoclonal Antibodies by Hybridoma Technology

Hibridoma teknolojisi ile murin monoklonal antikorlar üretilmesi

Monoclonal antibodies are universal binding molecules and are widely used in biomedicine and research. Nevertheless, the generation of these binding ...

A Robust Pneumonia Model in Immunocompetent Rodents to Evaluate Antibacterial Efficacy against S. pneumoniae, H. influenzae, K. pneumoniae, P. aeruginosa or A. baumannii

A Robust Pneumonia Model in Immunocompetent Rodents to Evaluate Antibacterial Efficacy against S. pneumoniae, H. influenzae, K. pneumoniae, P. aeruginosa or  A. baumannii

Immünkompetan Kemirgenler bir Sağlam Pnömoni Modeli karşı antibakteriyel etkinliğini değerlendirmektir<i&gt; S. pneumoniae</i&gt;<i&gt; H. influenza</i&gt;<i&gt; K. pneumoniae</i&gt;<em&gt; P. aeruginosa</em&gt; ya da<em&gt; A. baumannii</em

Efficacy of candidate antibacterial treatments must be demonstrated in animal models of infection as part of the discovery and development process, ...

Generation of Escape Variants of Neutralizing Influenza Virus Monoclonal Antibodies

Grip virüsü monoklonal antikorları nötralize kaçış türevleri üretimi

Influenza viruses exhibit a remarkable ability to adapt and evade the host immune response. One way is through antigenic changes that occur on the surface ...

Generation of Discriminative Human Monoclonal Antibodies from Rare Antigen-specific B Cells Circulating in Blood

Kanda dolaşan nadir antijen spesifik B hücreleri Discriminative insan monoklonal antikorların üretimi

Monoclonal antibodies (mAbs) are powerful tools useful for both fundamental research and in biomedicine. Their high specificity is indispensable when the ...

Generation of Monoclonal Antibodies Against Natural Products

Doğal ürünler karşı monoklonal antikorların üretimi

The analysis of the bioactive components present in foods and natural products has become a popular area of study in many fields, including traditional ...