Name: using whole mount in situ hybridization to link molecular and organismal biology
Uploaded: 2011-03-31T11:00:00
Duration: 12 min 50 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Using Whole Mount in situ Hybridization to Link Molecular and Organismal Biology at JoVE.com

המחברים רוצים להכיר את החוג לביולוגיה באוניברסיטת סירקיוז, ד&quot;ר מרילין קר עבור תפקידם בממשל של הקורס החולייתנים השוואתי ביולוגיה. המעבדה Albertson נתמך על ידי מענק R21DE019223 מן המכון הלאומי לבריאות / המכון הלאומי למחקר דנטלי Craniofacial, וכן מענק R01AG031922 מן המכון הלאומי לבריאות / המכון הלאומי להזדקנות.

<ol>
	<li>Albertson, R. C., Yelick, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Roles+for+fgf8+signaling+in+left-right+patterning+of+the+visceral+organs+and+craniofacial+skeleton.">Roles for fgf8 signaling in left-right patterning of the visceral organs and craniofacial skeleton.</a> Dev. Biol. 283, 310-321 (2005).</li><li>Aramaki, M., Kimura, T., Udaka, T., Kosaki, R., Mitsuhashi, T., Okada, Y., Takahashi, T., Kosaki, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Embryonic+expression+profile+of+chicken+CHD7,+the+ortholog+of+the+causative+gene+for+CHARGE+syndrome.">Embryonic expression profile of chicken CHD7, the ortholog of the causative gene for CHARGE syndrome.</a> Birth Defects Res A Clin Mol Teratol. 79, 50-57 (2007).</li><li>Begemann, G., Schilling, T. F., Rauch, G. J., Geisler, R., Ingham, P. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+zebrafish+neckless+mutation+reveals+a+requirement+for+raldh2+in+mesodermal+signals+that+pattern+the+hindbrain.">The zebrafish neckless mutation reveals a requirement for raldh2 in mesodermal signals that pattern the hindbrain.</a> Development. 128, 3081-3094 (2001).</li><li>Brand, M., Heisenberg, C. P., Jiang, Y. J., Beuchle, D., Lun, K., Furutani-Seiki, M., Granato, M., Haffter, P., Hammerschmidt, M., Kane, D. A., Kelsh, R. N., Mullins, M. C., Odenthal, J., van Eeden, F. J., Kane, D. A., N&#252;sslein-Volhard, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mutations+in+zebrafish+genes+affecting+the+formation+of+the+boundary+between+midbrain+and+hindbrain.">Mutations in zebrafish genes affecting the formation of the boundary between midbrain and hindbrain.</a> Development. 123, 179-190 (1996).</li><li>Clark, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> In situ Hybridization: Laboratory Companion. , (2003).</li><li>D'Costa, A., Shepherd, I. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zebrafish+development+and+genetics:+Introducing+undergraduates+to+developmental+biology+and+genetics+in+a+large+introductory+laboratory+class.">Zebrafish development and genetics: Introducing undergraduates to developmental biology and genetics in a large introductory laboratory class.</a> Zebrafish. 6, 169-177 (2009).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Emerging Model Organisms: A Laboratory Manual, Volume 1. , (2008).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Emerging Model Organisms: A Laboratory Manual, Volume 2. , (2010).</li><li>Geetha-Loganathan, P., Nimmagadda, S., Scaal, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Wnt+signaling+in+limb+organogenesis.">Wnt signaling in limb organogenesis.</a> Organogenesis. 4, 109-115 .</li><li>Geetha-Loganathan, P., Nimmagadda, S., Scaal, M., Huang, R., Christ, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Wnt+signaling+in+somite+development.">Wnt signaling in somite development.</a> Ann Anat. 190, 208-222 .</li><li>Huelsken, J., Behrens, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Wnt+signaling+pathway.">The Wnt signaling pathway.</a> J Cell Sci. 15, 3977-3978 (2002).</li><li>Krauss, S., Concordet, J. P., Ingham, P. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+functionally+conserved+homolog+of+the+Drosophila+segment+polarity+gene+hh+is+expressed+in+tissues+with+polarizing+activity+in+zebrafish+embryos.">A functionally conserved homolog of the Drosophila segment polarity gene hh is expressed in tissues with polarizing activity in zebrafish embryos.</a> Cell. 75, 1431-1444 (1993).</li><li>Oates, A. C., Mueller, C., Ho, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cooperative+function+of+deltaC+and+her7+in+anterior+segment+formation.">Cooperative function of deltaC and her7 in anterior segment formation.</a> Dev. Biol. 280, 133-149 (2005).</li><li>Pizard, A., Haramis, A., Carrasco, A. E., Franco, P., L&#243;pez, S., Paganelli, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Whole-mount+in+situ+hybridization+and+detection+of+RNAs+in+vertebrate+embryos+and+isolated+organs.">Whole-mount in situ hybridization and detection of RNAs in vertebrate embryos and isolated organs.</a> Curr Protoc Mol Biol. Chapter 14, (2004).</li><li>Reifers, F., Bohli, H., Walsh, E. C., Crossley, P. H., Stainier, D. Y., Brand, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fgf8+is+mutated+in+zebrafish+acerebellar+(ace)+mutants+and+is+required+for+maintenance+of+midbrain-hindbrain+boundary+development+and+somitogenesis.">Fgf8 is mutated in zebrafish acerebellar (ace) mutants and is required for maintenance of midbrain-hindbrain boundary development and somitogenesis.</a> Development. 125, 2381-2395 (1998).</li><li>Schmoldt, A., Forecki, J., Hammond, D. R., Udvadia, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exploring+differential+gene+expression+in+zebrafish+to+teach+basic+molecular+biology+skills.">Exploring differential gene expression in zebrafish to teach basic molecular biology skills.</a> Zebrafish. 6, 187-199 (2009).</li><li>Schoenwolf, G. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Laboratory Studies of Vertebrate and Invertebrate Embryos: Guide and Atlas of Descriptive and Experimental Development. , (2008).</li><li>Stickney, H. L., Barresi, M. J., Devoto, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Somite+development+in+zebrafish.">Somite development in zebrafish.</a> Dev Dyn. 219, 287-303 (2000).</li><li>Weinberg, E. S., Allende, M. L., Kelly, C. S., Abdelhamid, A., Murakami, T., Andermann, P., Doerre, O. G., Grunwald, D. J., Riggleman, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Developmental+regulation+of+zebrafish+MyoD+in+wild-type,+no+tail+and+spadetail+embryos.">Developmental regulation of zebrafish MyoD in wild-type, no tail and spadetail embryos.</a> Development. 122, 271-280 (1996).</li><li>Yelon, D., Horne, S. A., Stainier, D. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Restricted+expression+of+cardiac+myosin+genes+reveals+regulated+aspects+of+heart+tube+assembly+in+zebrafish.">Restricted expression of cardiac myosin genes reveals regulated aspects of heart tube assembly in zebrafish.</a> Dev. Biol. 214, 23-37 (1999).</li></ol>

אין ניגודי אינטרסים הכריז.

מאחלים שימש קורס החולייתנים השוואתי ביולוגיה מעבדה כדי לסייע לתלמידים להבין את התפקידים של הגנטיקה בפיתוח אנטומי באמצעות ויזואליזציה של דפוסי ביטוי גנים ידועים. בחלק הראשון של הקורס, התלמידים ביצעו והניתוחים על אורגניזמים המייצגים chordate כמה מינים שונים, ומאפשר להם מספיק זמן ללמוד, להבין, להשוות, ו - חוליות האנטומיה הניגוד. כהקדמה לחלק השני של הקורס, הסטודנטים קיבלו הרצאה רשמי המתאר פיתוח דג הזברה אנטומיה. השיטות ואת התוצאות הצפויות של הניסוי מאחלים נדונו גם. הסטודנטים קיבלו אז דג הזברה לחיות somitogenesis ודקדקן-6 שלבים של התפתחות, ועל הפריה ימים 2 ו - 5 לתגובה (DPF) לבדוק תחת מיקרוסקופ לנתח. זה היה כדי לתת לתלמידים הבנה טובה יותר של מה עוברי דג הזברה נראית כמו וסוגי שינויים מורפולוגיים המתרחשות על פני ontogeny. בפגישה הבאה מעבדה, סטודנטים קיבלו עוברי דג הזברה שבה מאחלים נעשו בעבר. הם התבקשו ללמוד לתאר את דפוסי ביטוי גנים עבור כל גן של עניין (riboprobe בשימוש). עוברים המשמש מאחלים נגזרו הזדווגויות בין חברי קו ace/fgf8a הטרוזיגוטיים. על סמך ירושה מנדל, 25% עוברים מן ההזדווגויות ace/fgf8a היו אמורים להיות מוטנטים הומוזיגוטים ו להציג פגמים רבים של מבנים אנטומיים התמקדה בקורס זה. על פי דיווחים שפורסמו ותצפיות פורסם במעבדה Albertson, מומים במוח looping לב לא תקין היו צפויים, כמו גם ליקויים somites (Brand et al, 1996;. Albertson ו Yelick, 2005; תצפיות אישי). הסטודנטים התבקשו לבדוק את כל דגימות, סוג בר (בעלי חיים הטרוזיגוטיים הם נבדלים אחים סוג בר בשלבים המוקדמים של הפיתוח) לבין מוטציות הומוזיגוטים, עבור כל תבנית ביטוי הגן הציגו. לאחר מכן הם התבקשו לכתוב דוחות מעבדה לתאר את התוצאות שלהם, ועל סמך הידע שלהם באנטומיה גנטיקה, ביטוי גנים פגומים איך ייתכן זירז מומים אנטומיים. סטודנטים נראה לקבל את התרגיל מעבדה בהתרגשות ובסקרנות. רובם לא השתמשו מאחלים לפני התעניינו מאוד בחלק הזה של הקורס. הסטודנטים מצאו את דפוסים שונים של ביטוי גנים העוברים דג הזברה מסקרן, חלקם אף תיארו את דפוסי מכתים דמיינו ידי שיוך אותם עם הידוע עיצובים וסמלים, כמו פרצוף מחייך. דוחות מעבדה וכתוצאה מכך הראו התלמידים היו הבנה כללית של פרוטוקול מאחלים ואת הביטוי של גנים במבנים אנטומיים ספציפיים. התלמידים נדרשו גם להבין את פונקציות ספציפיות של גנים שנבדקו באמצעות מאחלים במהלך (Stickney et al, 2000 במעבדה;. Huelsken et al, 2002;. קומאראסינגות-Loganathan et al, 2008a,.. קומאראסינגות-Loganathan et al, 2008b ). היה ברור עם זאת, כי תלמידים מסוימים היה ידע מוגבל רקע של מסלולי איתות וגנים של עניין. מידע נוסף על מושגים אלה, מאחלים הרצאת מבוא עשוי להיות תוספת ברוכה השימוש מאחלים בעתיד קורסים ביולוגיה השוואתי החולייתנים. מאז פרוטוקול בדרך כלל לוקח ארבעה ימים רצופים, תלוי בלוח הזמנים של הקורס, התלמידים יכולים רק להיות מסוגל להשלים חלק בניסוי בכיתה המורה חייב להיות אחראי על שאר. בשיעור ביולוגיה חוליות השוואתי שלנו, התלמידים סיימו את התגובות מכתים במעבדה, ואילו עוזר הוראה לבצע את כל השלבים הקודמים. אם הוא מעדיף את התלמידים לבצע מאחלים בכיתה, פרוטוקול ניתן לחלק את יחידות משנה שניתן לבצע על מפגשי מעבדה מספר, תלוי במסגרת הזמן של הכיתה. אם זה לא ריאלי עבור התלמידים לבצע את הפרוטוקול כולו, כפי שהיה כאן בגלל הפגישה במעבדה רק פעם בשבוע, סטודנטים יכולים להוסיף את הפתרון מכתים בתחילת בכיתה, בהתאם riboprobe בשימוש, יש מכתים המלא בתוך שעה. הזמן שלוקח את הכתם לפתח משתנה מאוד עם כל riboprobe ועוד מגוון של תנאי הניסוי, ויש קבוע מראש לפני השיעור. יש לציין, אם התלמידים יהיה רק ​​לפתח את הכתם במעבדה, מדריכים יהיה אחראי על כל השלבים הקודמים, וזה ידרוש זמן ומאמץ משמעותיים מחוץ לכיתה. אם תרצה, חלופה קצרה לאחל יכול להיות אימונוהיסטוכימיה, באמצעות תוויות נוגדן לדמיין לוקליזציה חלבון, אולם בשלב זה, דג הזברה נוגדנים ספציפיים עבור גנים התפתחותיים אינם זמינים. אפשרות נוספת תהיה לבצע מאחל בעלי החוליות השונותnd יש לתלמידים להשוות את דפוסי הביטוי של אותם גנים באורגניזמים שונים (Pizard et al, 2004;. Aramaki et al, 2007;. אורגניזמים דגם מתעוררים, 2008; אורגניזמים דגם מתעוררים, 2010). מטרת העל של שימוש משאלה קורס החולייתנים השוואתי ביולוגיה היה כדי להדגים לתלמידים איך בשיטות ביולוגיות מולקולריות משמשים במחקר ופיתוח אנטומי. היא גם סיפקה הזדמנות לתלמידים לשער, כיצד שינו ביטוי גנים עשויה להוביל לא רק מומים התפתחותיים, אלא גם שינוי אבולוציוני. פורמלית כמו בביולוגיה התפתחותית אבולוציונית (המכונה לעתים קרובות &quot;Evo-Devo&quot;), שדה זה הולך וגדל במהירות של המחקר נועד לקשר גנוטיפ לבין פנוטיפ באמצעות פיתוח, וכדי להבהיר בסיסים מכניסטית פוטנציאל של שינוי אבולוציוני. עם עלייתו של תחום זה, אקולוגים יותר, ביולוגים האורגניזם, ו פיזיולוגים הם שימוש בטכניקות מולקולריות במחקר שלהם. אנו טוענים כי השימוש משאלה קורס החולייתנים השוואתי ביולוגיה יעזור לשמור על תוכנית הלימודים מעודכן עם ההתקדמות הטכנולוגית והמושגית הנוכחית המחקר, כדי להקל על היישור האופקי יותר קורסים בביולוגיה ברמה העליונה על ידי שילוב של תת תחומים ביולוגיים. יתר על כן, גישה אינטגרטיבית זו תספק לסטודנטים הזדמנות ללמוד מגוון של טכניקות מחקר ביולוגי במהלך אחד, המוביל השכלה מגוונת יותר וקידום המחקר המדעי בעתיד תחומית.

<ul style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> דוד לחץ </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מיקרו צנטריפוגות </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 37 ° C אינקובטור (עם מטרף) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 4 ° C מיקרו צנטריפוגות </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> המים באמבטיה </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מערבולת </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ג&#39;ל אלקטרופורזה מנגנון </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> -20 ° C במקפיא </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> -80 ° C במקפיא </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Rocker / שייקר </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 4 ° C מקרר </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מיקרוסקופ הביתור (רצוי עם מסך הוראה או מצלמה) </li></ul>

using whole mount in situ hybridization to link molecular and organismal biology

הר שלמים הכלאה באתרו (בכך) היא טכניקה נפוצה במעבדות הביולוגיה המולקולרית בשימוש ללמוד ביטוי גנים באמצעות לוקליזציה של תעתיקי mRNA ספציפי בתוך הדגימה הר שלם. טכניקה זו (עיבוד Albertson ו Yelick, 2005) שימש במפלס העליון השוואתי ראשון בכיתה חוליות מעבדה לביולוגיה באוניברסיטת סירקיוז. הראשונה שני שלישים של הקורס החולייתנים השוואתית במעבדה לביולוגיה נתן לסטודנטים הזדמנות ללמוד את אמבריולוגיה ואנטומיה ברוטו של אורגניזמים שונים המייצגים מינים שונים chordate בעיקר באמצעות חתכים המסורתית ושימוש במודלים. החלק הסופי של הקורס מעורב גישה חדשנית ללימוד אנטומיה באמצעות תצפית של התפתחות החולייתנים שימוש בטכניקות מולקולריות שבה מאחלים בוצעה על עוברי דג הזברה. פיברובלסטים הטרוזיגוטיים גורם הגדילה 8 קו (fgf8a) מוטציה, אס, היה בשימוש. בשל ירושה מנדל, אס intercrosses סוג בר הפיק, הטרוזיגוטיים, ו הומוזיגוטים מוטנטים ace/fgf8a ביחס 01:02:01. בדיקות RNA עם דפוסי הביטוי הידוע קו האמצע לבין בפיתוח מבנים אנטומיים כגון הלב, somites, tailbud, myotome, והמוח היו בשימוש. מאחלים בוצעה באמצעות דג הזברה ב somite 13 ו חסודה-6 שלבים, עם התלמידים מבצעים את התגובה מכתים בכיתה. המחקר של עוברי דג הזברה בשלבים שונים של פיתוח נתן לסטודנטים את היכולת לבחון כיצד אלה מבנים אנטומיים השתנה במשך ontogeny. בנוסף, חלק מוטנטים ace/fgf8a מוצג looping לב לא תקין, ועל פגמים somite והתפתחות המוח. הסטודנטים במעבדה זו צפו התפתחות תקינה של מערכות איברים שונים הן באמצעות האנטומיה חיצוניים, כמו גם דפוסי ביטוי גנים. הם זיהו גם ותיאר עוברים הצגת התפתחות אנטומית גן תקין הביטוי (כלומר, מוטציות המשוערת). למדריכים במוסדות כי עדיין אין את הציוד הדרוש או שם כספים עבור המעבדה לחדשנות הלימודים מוגבלים, העלות הכספית של ריאגנטים המנגנון עשוי להיות גורם לשקול, כמו את הזמן והמאמץ הנדרש יהיה על החלק של מאמן ללא קשר להגדרה. עם זאת, אנו טוענים כי השימוש מאחלים זה סוג של הגדרה מעבדה בכיתה יכולים לספק חוליה חשובה בין גנטיקה התפתחותית ואנטומיה. עם התקדמות הטכנולוגיה ואת היכולת ללמוד התפתחות האורגניזם ברמה המולקולרית נעשה קל יותר, זול יותר ויותר פופולרי, ביולוגים אבולוציוניים רבים, אקולוגים, ו פיזיולוגים פונים אסטרטגיות ומחקר בתחום הביולוגיה המולקולרית. שימוש משאלה כיתה חוליות השוואתי ביולוגיה מעבדה היא דוגמה אחת כיצד מולקולות האנטומיה יכול להתכנס בתוך קורס בודד. זה נותן העליון סטודנטים ברמה הזדמנות לתרגל טכניקות מודרניות במחקר ביולוגי, המוביל השכלה מגוונת יותר וקידום המחקר המדעי בעתיד תחומית.

Watch this Scientific Journal Video about Using Whole Mount in situ Hybridization to Link Molecular and Organismal Biology at JoVE.com

Using Whole Mount in situ Hybridization to Link Molecular and Organismal Biology

שלמה הר<em&gt; באתרו</em&gt; הכלאה (בכך) שימש במפלס העליון כמובן השוואתי ראשון בביולוגיה חוליות בנוסף חוליות והניתוחים. זה נתן לסטודנטים הזדמנות ללמוד דפוסי ביטוי גנים כמו גם האנטומיה ברוטו, המקשר את לימודי הביולוגיה המולקולרית בתוך האורגניזם במהלך אחד.

שימוש הר שלם באתרו הכלאה קישור לביולוגיה מולקולרית האורגניזם

Whole mount in situ hybridization (WISH) is a common technique in molecular biology laboratories used to study gene expression through the localization of ...

Research

JoVE Journal

Biology

Using Whole Mount in situ Hybridization to Link Molecular and Organismal Biology

Double Whole Mount in situ Hybridization of Early Chick Embryos

הר שלם כפול באתרו הכלאה של עוברים צ&#39;יק מוקדם

The chick embryo is a valuable tool in the study of early embryonic development. Its transparency, accessibility and ease of manipulation, make it an ...

Method for Whole Mount Antibody Staining in Chick

שיטת מכתים נוגדן שלם הר ב צ&#39;יק

Zebrafish Whole Mount High-Resolution Double Fluorescent In Situ Hybridization

Zebrafish Whole Mount High-Resolution Double Fluorescent In Situ Hybridization

דג הזברה שלמים הר ברזולוציה גבוהה פעמיים פלורסנט באתרו הכלאה

Whole mount in situ hybridization is one of the most widely used techniques in developmental biology.  Here, we present a high-resolution double ...

Whole Mount in Situ Hybridization of E8.5 to E11.5 Mouse Embryos

Whole Mount in Situ Hybridization of E8.5 to E11.5 Mouse Embryos

הר שלם<em&gt; באתר</em&gt; הכלאה של E8.5 לעוברי E11.5 עכבר

Whole mount in situ hybridization is a very informative approach for defining gene expression patterns in embryos. The in situ hybridization procedures ...

High-throughput Physical Mapping of Chromosomes using Automated in situ Hybridization

High-throughput Physical Mapping of Chromosomes using Automated in situ Hybridization

תפוקה גבוהה מיפוי פיזי של הכרומוזומים באמצעות אוטומטי<em&gt; באתרו</em&gt; הכלאה

Projects to obtain whole-genome sequences for 10,000 vertebrate species1 and for 5,000 insect and related arthropod species2 are expected to take place ...

Chromosome Replicating Timing Combined with Fluorescent In situ Hybridization

Chromosome Replicating Timing Combined with Fluorescent In situ Hybridization

עיתוי מעתיק כרומוזום בשילוב עם פלורסנט<em&gt; באתר</em&gt; הכלאה

Mammalian DNA replication initiates at multiple sites along chromosomes at different times during S phase, following a temporal replication program. The ...

Whole Mount RNA Fluorescent in situ Hybridization of Drosophila Embryos

Whole Mount RNA Fluorescent in situ Hybridization of Drosophila Embryos

הר כולו RNA פלורסנט<em&gt; באתר</em&gt; הכלאה של<em&gt; דרוזופילה</em&gt; עוברים

Assessing  the expression pattern of a gene, as well as the subcellular localization  properties of its transcribed RNA, are key features for ...

RNA In situ Hybridization in Whole Mount Embryos and Cell Histology Adapted for Marine Elasmobranchs

RNA In situ Hybridization in Whole Mount Embryos and Cell Histology Adapted for Marine Elasmobranchs

רנ&quot;א<em&gt; באתר</em&gt; הכלאה בעוברי הר שלמים והיסטולוגיה הסלולרית מותאמת לElasmobranchs הימי

Marine  elasmobranchs are valued animal models for biomedical and genomic studies as  they are the most primitive vertebrates to have adaptive immunity ...

Visualization and Analysis of mRNA Molecules Using Fluorescence In Situ Hybridization in Saccharomyces cerevisiae

Visualization and Analysis of mRNA Molecules Using Fluorescence In Situ Hybridization in Saccharomyces cerevisiae

הדמיה וניתוח של מולקולות ה-mRNA באמצעות הקרינה<em&gt; באתרו</em&gt; הכלאה ב<em&gt; Cerevisiae Saccharomyces</em

The Fluorescence in situ Hybridization (FISH) method allows one to detect nucleic acids in the native cellular environment. Here we provide a protocol for ...

High Resolution Whole Mount In Situ Hybridization within Zebrafish Embryos to Study Gene Expression and Function

High Resolution Whole Mount In Situ Hybridization within Zebrafish Embryos to Study Gene Expression and Function

הר שלם ברזולוציה גבוהה<em&gt; באתרו</em&gt; הכלאה בתוך עוברי דג הזברה לחקר ביטוי גנים ותפקוד

This article focuses on whole-mount in situ hybridization (WISH) of zebrafish embryos. The WISH technology facilitates the assessment of gene expression ...