Name: using a pan-viral microarray assay (virochip) to screen clinical samples for viral pathogens
Uploaded: 2011-04-27T14:00:00
Duration: 13 min 45 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Using a Pan-Viral Microarray Assay Virochip to Screen Clinical Samples for Viral Pathogens at JoVE.com

Biz Virochip protokolün ilk geliştirme ve optimizasyonu için David Wang, Anatoly Urisman Amy Kistler, Kael Fischer, Patrick Tang, ve Alexander Greninger teşekkür ederim. Bu çalışma bir NIH K08 hibe ve Abbott Keşif Ödülü (CC) ve Howard Hughes Tıp Enstitüsü (JLD) tarafından desteklenmektedir.

Virochip testinin adımlar (1) klinik örneklerden nükleik asit ekstraksiyon, (2) çıkarılan RNA ters transkripsiyon ve 2. iplikçik cDNA sentezi, rastgele astarlanmalıdır cDNA (3) PCR, (3) Cy3 floresan boya dahil (4) Virochip mikroarray etiketli malzeme hibridizasyon ve (5) tarama ve analizi (Şekil 1). Aşağıda gösterilen protokol grip benzeri bir hastalığa sahip bir çocuğun bir nazal sürüntü örneği Virochip testinin kullanımını göstermek. Primer Diziler Primer bir 5&#39;-GTTTCCCAGTCACGATA-(N 9) -3 &#39; Primer B 5&#39;-GTTTCCCAGTCACGATA-3 &#39; 1. Nükleik Asit Ekstraksiyonu <ol><li> Bu örnekleri potansiyel bulaşıcı olarak klinik örneklerden nükleik asit ekstraksiyon, Biyolojik Güvenlik Seviye 2 (BSL-2) veya daha yüksek koşulları altında yapılmalıdır. </li><li> Nazal sürüntü örneği viral tutarak orta taşınır. 1.5 ml Eppendorf mikrosantrifüj tüp içine örnek kısım 200 mcL. </li><li> İsteğe Bağlı: 0.22 mikron filtre (viral parçacıkların arındırmak için) geçmesine örnek </li><li> İsteğe bağlı: Turbo DNAz kiti (Ambion) kullanarak üreticinin talimatlarına göre DNAz (ana bilgisayar genomik DNA aşağılamak ve arındırmak için korumalı, encapsidated viral nükleik asit) ile ön işlemden örnek </li><li> Zymo ZR viral RNA Ekstraksiyon Kiti veya üreticinin talimatlarına göre Qiagen Ultrasens Virus Kit kullanarak örnek ayıklayın. </li></ol> 2. Ters Transkripsiyon ve 2.-iplikçik cDNA sentezi (&quot;Yuvarlak A&quot;) <ol><li> 4 uL çıkarılan RNA 1 uL 40 mcL / pmol Primer ekleyin. Isı 65 ° C PCR (örneğin GeneAmp PCR Sistemi 9700) ve daha sonra 5 dakika boyunca oda sıcaklığında x 5 dakika soğumasını bekleyin. </li><li> 2 mcL 5X RT tampon, 1 mcL 12.5 mM dNTP, 1 mcL su, 0.5 mcL 0.1M DTT, ve 0.5 mcL SSIII RT (Invitrogen) oluşan bir ana karışımı 5 mcL ekleyin. 42 ° C&#39;de x 60 dakika. </li><li> Programlanabilir bir PCR, ısı 94 ° 10 serin C x 2 dk (iptal etmek için ters transkriptaz reaksiyonu), ° C, nabız santrifüj, ve ardından 1 mcL 5X Sequenase tampon, 3.8 mcL su oluşan 5 mcL Sequenase karışımı ekleyin, 0.15 mcL Sequenase (USB Corporation). 2. iplikçik sentez için, 10 ° C - 37 ° C 8 dk boyunca, 94, 8 dakika sonra, ısı tutun ° C x 2 dk (Sequenase inaktive etmek için) ve 10 ° C (basılı tutun) serin kadar rampa </li><li> İsteğe bağlı: Rd örnek bir cDNA -20 ° C&#39;de bu noktada saklanabilir </li></ol> 3. PCR Amplifikasyon rastgele Astarlı cDNA (&quot;Yuvarlak B&quot;) <ol><li> 5 Rd uL bir örnek, 45 mcL 5 mcL 10X PCR buffer, 1 mcL 12.5 mM dNTP, 1 mcL 100 pmol / mcL astar B, 1 mcL KlenTaq LA (Sigma), ve 37 mcL su oluşan bir ana karışımı ekleyin . </li><li> PCR protokolü aşağıdaki gibi çalıştırın: 94 ° C, 2 dakika → (25 devir 94 ° C, 30 / 50 ° C, 45 s / 72 ° C, 1 dak.) → 72 ° C, 5 dk → 10 ° C ( basılı tutun) </li><li> % 1.5 agaroz elektroforez jel üzerinde Rd B numunesi kontrol edin. A smear yaklaşık 200 - 1000 bp görüntülenmeyecektir gerekir (Şekil 2A) </li></ol> 4. Cy3 Floresan Boya Kuruluş <ol><li> İsteğe Bağlı: Cy5, floresan boya ile başka bir örnek etiketli olabilir ve aynı mikroarray için melezleşmiştir. </li><li> Aa-dNTP birleştirmek için, 5 uL 10X PCR buffer, 1 uL 12.5 mM aa-dNTP (Invitrogen), 1 uL 100 pmol / uL astar Yatak, 1 oluşan bir ana karışımı 45 uL Rd B numunesinin 5 uL 1 uL KlenTaq LA (Sigma), ve 37 uL su. PCR protokolü aşağıdaki gibi çalıştırın: 94 ° C, 2 dakika → (15 döngü 94 ° C, 30 / 50 ° C, 45 s / 72 ° C, 1 dak.) → 72 ° C, 5 dk → 10 ° C ( basılı tutun) </li><li> Rd C örnek üreticinin talimatlarına göre DNA Temiz ve Konsantratörü-5 Seti (Zymo Araştırma) ile temizleyin. 10 mcL Zehir. </li><li> 1M bikarbonat 1 uL (Sigma) ve Rd C Örnek 1 uL Cy5 (GE Healthcare) ekleyin. </li><li> Inkübe x 1 saat karanlıkta. </li><li> Üreticinin talimatlarına göre DNA Temiz ve Konsantratörü-5 Seti (Zymo Araştırma) ile Cy3 etiketli örnek temizleyin. 12 mcL Zehir. </li></ol> 5. Hibridizasyon için Virochip Mikroarray <ol><li> İsteğe bağlı: (numune normalleşmesi için), Nanodrop spektrofotometre dahil cDNA konsantrasyon ve boya miktarını kontrol 1.5 mcL </li><li> 1 mcL 25X parçalanma tampon, 5 mcL 5X engelleme tampon, 9.5 mcL Cy3-etiketli örnek (veya normale miktarı), su ve PCR şeridi tüpü 25 mcL toplam hacmi (Agilent) eklemek </li><li> 2X GEX hibridizasyon tamponu (Agilent) 25 mcL ekleyin. Kabarcıkları kısaca aşağı spin. </li><li> Conta slayt üzerine numune 40 mcL yükleyin. </li><li> Place Agilent baskılı Virochip array (Californi Üniversitesi, San Francisco / Agilent) (aşağı &quot;Agilent&quot; işaretli tarafı) ve conta slayt üst sıkıca vidayı sıkın. </li><li> 65 gecede melezleşme ° C fırında 10 devirde hız ayarı. </li><li> 37 ° C&#39;ye kadar diziler, ön ısıtma ve ön tampon 2 (Agilent) yıkamak için Tampon 1 (Agilent) conta slayt / dizi sandviç sualtı ayrı ele alalım. Tampon 1 x 1 dakika yıkayın. Önceden ısıtılmış tampon 2 x 1 dakika yıkayın. Yavaş yavaş, kabarcıkları önlemek için dikkatli olmak (kimwipe uzakta doğrudan dizi aktif yüzlerine dokunmaktan kaçınmak için dikkatli olmak ekstra nem fitil kullanın), tampon 2 slayt kaldırmak </li><li> Slayt slayt tutucunun içine yerleştirin ve dizi tarayıcı takın. </li></ol> 6. Virochip Tarama ve Analizi <ol><li> Tarama Cy3 etiketli dizi araç standart tarama protokolü (Şekil 2B) göre 5 mm veya 2 mm. </li><li> Virochip mikroarray&#39;ler görsel denetim, kümeleme analizi, ya da otomatik Virochip analiz programı tarafından analiz, 11 E-tahmin edin . Bu üç yöntemin her biri tarafından, grip virüsü burun sürüntü örneği (influenza benzeri hastalığı olan bir çocuk) (Şekil 2C) kolayca tespit </li></ol> 7. Temsilcisi Sonuçlar: Protokol doğru yapıldığında, bir karalama Rd B adım (Şekil 2A) sonra agaroz jel elektroforez görülebilir. Agilent platformu Virochip mikroarray (Şekil 2B) görsel olarak analiz etmek zor olacak, ama bir virüs varsa kolayca görsel denetim, kümeleme analizi, ve / veya E-Tahmin (Şekil 1C) tespit edilmelidir. Tayini için bir pozitif kontrol olarak hizmet; Numuneler bilinen bir virüs (MS2 bakteriyofaj örneğin tütün mozaik virüsü) nükleik asit ölçülen miktarları ile çivili olabilir. <img src="/files/ftp_upload/2536/2536fig1.jpg" alt="Şekil 1" /> Şekil 1. Virochip mikroarray işleme ve analiz şematik klinik örneklerden nükleik asit Çıkarılan rastgele amplifiye floresan boya ile işaretlenmiş ve Virochip mikroarray için melezleşmiştir. Mikroarray&#39;ler 2 mikron çözünürlükte taranır ve E-tahmin de dahil olmak üzere, çeşitli hesaplama araçları kullanılarak analiz edildi. <img src="/files/ftp_upload/2536/2536fig2.jpg" alt="Şekil 2" /> Şekil 2. Virochip tayininde Adımlar amplifikasyon sonra rastgele PCR, bir karalama 200 - 1000 bp jel elektroforezi ile görüntülendi (A) (B) Üç Virochip mikroarray&#39;ler 8 diziler / cam slayt küçük bir bölge ile gösterilir. (C) sağ alt köşesinde, içeride havaya uçurulan bir mikroarray Otomatik mikroarray viral analizi ile klinik örnek, influenza A virüsünün varlığını gösteren E-tahmin edin. Yüksek benzerlik skoru (s = 0.55), bu nedenle bu son derece önemli bir tahmin yapmak, sıfıra yakın bir p-değeri karşılık gelir.

<ol>
	<li>Wang, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microarray-based+detection+and+genotyping+of+viral+pathogens.">Microarray-based detection and genotyping of viral pathogens.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 99, 15687-15692 (2002).</li><li>Chiu, C. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diagnosis+of+a+critical+respiratory+illness+caused+by+human+metapneumovirus+by+use+of+a+pan-virus+microarray.">Diagnosis of a critical respiratory illness caused by human metapneumovirus by use of a pan-virus microarray.</a> J Clin Microbiol. 45, 2340-2343 (2007).</li><li>Chiu, C. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microarray+detection+of+human+parainfluenzavirus+4+infection+associated+with+respiratory+failure+in+an+immunocompetent+adult.">Microarray detection of human parainfluenzavirus 4 infection associated with respiratory failure in an immunocompetent adult.</a> Clin Infect Dis. 43, e71-e76 (2006).</li><li>Chiu, C. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Utility+of+DNA+microarrays+for+detection+of+viruses+in+acute+respiratory+tract+infections+in+children.">Utility of DNA microarrays for detection of viruses in acute respiratory tract infections in children.</a> J Pediatr. 153, 76-83 (2008).</li><li>Kistler, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pan-viral+screening+of+respiratory+tract+infections+in+adults+with+and+without+asthma+reveals+unexpected+human+coronavirus+and+human+rhinovirus+diversity.">Pan-viral screening of respiratory tract infections in adults with and without asthma reveals unexpected human coronavirus and human rhinovirus diversity.</a> J Infect Dis. 196, 817-825 (2007).</li><li>Rota, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+a+novel+coronavirus+associated+with+severe+acute+respiratory+syndrome.">Characterization of a novel coronavirus associated with severe acute respiratory syndrome.</a> Science. 300, 1394-1399 (2003).</li><li>Wang, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Viral+discovery+and+sequence+recovery+using+DNA+microarrays.">Viral discovery and sequence recovery using DNA microarrays.</a> PLoS Biol. 1, e2-e2 (2003).</li><li>Urisman, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+a+novel+Gammaretrovirus+in+prostate+tumors+of+patients+homozygous+for+R462Q+RNASEL+variant.">Identification of a novel Gammaretrovirus in prostate tumors of patients homozygous for R462Q RNASEL variant.</a> PLoS Pathog. 2, 25-25 (2006).</li><li>Kistler, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recovery+of+divergent+avian+bornaviruses+from+cases+of+proventricular+dilatation+disease:+identification+of+a+candidate+etiologic+agent.">Recovery of divergent avian bornaviruses from cases of proventricular dilatation disease: identification of a candidate etiologic agent.</a> Virol J. 5, e25-e25 (2008).</li><li>Chiu, C. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+cardioviruses+related+to+Theiler's+murine+encephalomyelitis+virus+in+human+infections.">Identification of cardioviruses related to Theiler's murine encephalomyelitis virus in human infections.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 105, 14124-14129 (2008).</li><li>Urisman, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=E-Predict:+a+computational+strategy+for+species+identification+based+on+observed+DNA+microarray+hybridization+patterns.">E-Predict: a computational strategy for species identification based on observed DNA microarray hybridization patterns.</a> Genome Biol. 6, R78-R78 (2005).</li></ol>

Virochip protokolü burada açıklandığı gibi karmaşık ve yetenekli ve titiz bir araştırma teknisyeni gerektirir. Doğru reaktif konsantrasyonu ve PCR etiketleme koşulları ve hibridizasyon kritik öneme sahiptir. Virochip protokolü nükleik asit ekstraksiyon TRIzol (Invitrogen) gibi bir doku çıkarma yönteminin kullanımı ile hastalıklı dokuların analizi kolayca uyum sağlamak için değiştirilebilir. Problar eklendi veya istenen spektrumu ve kapsamının genişliği elde etmek için gerekli silinmiş olabilir, örneğin &quot;-the-fly&quot;, bakteri ve mantarlar gibi nonviral hedeflerin saptanması için yoklamaları dizayn edilebilir ve ekledi. Henüz geliştirme aşamasında Virochip testinin bazı uygulamalar, klinik laboratuvar, salgın araştırma, saflık taraması, ilaç ve aşılar ve yeni viral patojen keşif geniş spektrumlu bir viral teşhis içerir.

<table border="1"><tbody><tr><th> Reaktif / malzeme Adı </th><th> Reaktif / malzeme Adı </th></tr><tr><td> Primera </td><td> 5&#39;-GTTTCCCAGTCACGATA (N9) -3 &#39; </td></tr><tr><td> Primer B </td><td> 5&#39;-GTTTCCCAGTCACGATA-3 &#39; </td></tr><tr><td rowspan="5"> RT Master Mix (5 mcL) </td><td> 2 mcL 5X RT tampon </td></tr><tr><td> 1 mcL 12.5 mM dNTP (Invitrogen) </td></tr><tr><td> 1 mcL su </td></tr><tr><td> 0.5 mcL 0.1M DTT </td></tr><tr><td> 0.5 mcL SSIII RT (Invitrogen) </td></tr><tr><td rowspan="3"> Sequenase Mix (5 mcL) </td><td> 1 mcL 5X Sequenase tampon </td></tr><tr><td> 3.8 mcL su </td></tr><tr><td> 0.15 mcL Sequenase (USB Corporation&#39;ın) </td></tr><tr><td rowspan="5"> Rd B PCR Master Mix (45 mcL) </td><td> 5 mcL 10X PCR buffer </td></tr><tr><td> 1 mcL 12.5 mM dNTP (Invitrogen) </td></tr><tr><td> 1 mcL 100 mcL / B pmol astar </td></tr><tr><td> 1 mcL KlenTaq LA (Sigma) </td></tr><tr><td> 37 mcL su </td></tr><tr><td rowspan="5"> Rd C PCR Master Mix (45 mcL) </td><td> 5 uL 10X PCR buffer </td></tr><tr><td> 1 mcL 12.5 mM dNTP (Invitrogen) </td></tr><tr><td> 1 mcL 100 mcL / B pmol astar </td></tr><tr><td> 1 mcL KlenTaq LA (Sigma) </td></tr><tr><td> 37 mcL su </td></tr><tr><td rowspan="4"> Hibridizasyon tamponu (25 mcL) </td><td> 1 mcL 25X parçalanma tampon (Agilent) </td></tr><tr><td> 5 mcL 5X engelleme tamponu (Agilent) </td></tr><tr><td> Cy3-etiketli örnek (veya normale miktarı 9.5 mcL) </td></tr><tr><td> 25 mcL toplam hacim su ekleyin. </td></tr><tr><td> Agilent Virochip mikroarray </td><td> Chiu laboratuvar, UCSF edinilebilir; bekleyen lisans </td></tr></tbody></table>

using a pan-viral microarray assay (virochip) to screen clinical samples for viral pathogens

Virüslerin doğal dizisi çeşitliliği yanı sıra, geleneksel yöntemlerle algılanamaz SARS coronavirüs ve 2009 pandemik H1N1 influenza virüsü gibi roman viral patojenler, devam eden ortaya çıkması nedeniyle, pek çok bulaşıcı hastalıkların viral nedenlerin tanısı zordur. Bu zorlukları ele almak için, daha önce geliştirilmiş ve kapasitesi ile korunmuş sıra homoloji 1 dayanarak, bilinen tüm virüsleri yanı sıra roman varyantları tespit etmek için Virochip denilen bir pan-viral mikroarray platformu valide . Virochip kullanarak, tam spektrum, eşdeğer ya da geleneksel klinik test 2-5 üstün bir hassasiyet ile hastanede yatan hastalarda açıklanamayan kritik hastalık vakaları da dahil olmak üzere, solunum yolu enfeksiyonları ile ilişkili virüs tespit ettik. Virochip ayrıca, SARS coronavirüs 6,7, bir roman rinovirüs dalının 5, XMRV (prostat kanseri ile bağlantılı bir retrovirüs) 8, kuş bornavirus (papağanlar bir israf hastalığı nedeni) 9, dahil olmak üzere, yeni virüsleri tanımlamak için kullanılır olmuştur solunum ve ishal hastalık 10 ile çocuklarda ve yeni bir cardiovirus. Virochip güncel sürümü Agilent mikroarray platforma taşıdık ve ~ 36.000 probları Aralık 2009 itibariyle GenBank ~ üzerinde 1.500 virüslerden kaynaklanan oluşur. Burada örnek nükleik asit ekstraksiyon, rastgele primerler kullanılarak PCR amplifikasyonu, floresan boya dahil, ve mikroarray hibridizasyon, tarama ve analiz de dahil olmak üzere, (~ 24 saat gerçekleştirme süresi) bitirmek için baştan bir Virochip testi işleme dahil adımları ortaya koymaktadır.

Watch this Scientific Journal Video about Using a Pan-Viral Microarray Assay Virochip to Screen Clinical Samples for Viral Pathogens at JoVE.com

Using a Pan-Viral Microarray Assay Virochip to Screen Clinical Samples for Viral Pathogens

Virochip korunmuş dizi homoloji temelinde aynı anda, bilinen tüm virüsleri yanı sıra roman virüsler tespit etmek için tasarlanmış bir pan-viral mikroarray. İşte biz, varlığı bilinen ve bilinmeyen virüslere hem de klinik örnekleri analiz etmek için bir Virochip tahlil nasıl çalıştırılacağını göstermektedir.

Viral Patojenler Klinik Örnekler Ekranına bir Pan-Viral Mikroarray Testi (Virochip)

The diagnosis of viral causes of many infectious diseases is difficult due to the inherent sequence diversity of viruses as well as the ongoing emergence ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Using a Pan-Viral Microarray Assay (Virochip) to Screen Clinical Samples for Viral Pathogens

Determining the Phagocytic Activity of Clinical Antibody Samples

Klinik Antikor Örnekleri fagositik Aktivitesi Belirlenmesi

Antibody-driven phagocytosis is induced via the engagement of Fc receptors on professional phagocytes, and can contribute to both clearance as well as ...

Enumeration of Major Peripheral Blood Leukocyte Populations for Multicenter Clinical Trials Using a Whole Blood Phenotyping Assay

Bir Tam Kan fenotipleme Testi Kullanarak Çok Merkezli Klinik Araştırmalar için Binbaşı Periferik Kan Lökosit Populasyonlarının Numaralama

Cryopreservation of peripheral blood leukocytes is widely used to preserve cells for immune response evaluations in clinical trials and offers many ...

Establishing a Liquid-covered Culture of Polarized Human Airway Epithelial Calu-3 Cells to Study Host Cell Response to Respiratory Pathogens In vitro

Establishing a Liquid-covered Culture of Polarized Human Airway Epithelial Calu-3 Cells to Study Host Cell Response to Respiratory Pathogens In vitro

Polarize İnsan Havayolu bir sıvı kaplı Kültürünün Oluşturulması Solunum Patojenler için Host Hücre Yanıtı Okumak Epitel Calu-3 Hücreler<em&gt; In vitro</em

The  apical and basolateral surfaces of airway epithelial cells demonstrate  directional responses to pathogen exposure in  vivo. Thus, ideal in vitro ...

Using Click Chemistry to Measure the Effect of Viral Infection on Host-Cell RNA Synthesis

Ana-Hücre RNA sentezi üzerinde Viral Enfeksiyon Etkisi Tedbir tıklayın Kimya Kullanımı

Many RNA viruses have evolved the ability to inhibit host cell transcription as a means to circumvent cellular defenses. For the study of these viruses, ...

Using Fluorescent Proteins to Monitor Glycosome Dynamics in the African Trypanosome

Floresan Proteinleri kullanarak Afrika tripanosom içinde Glycosome Dynamics Monitör

Trypanosoma brucei is a kinetoplastid parasite that causes human African trypanosomiasis (HAT), or sleeping sickness, and a wasting disease, nagana, in ...

A Miniaturized Glycan Microarray Assay for Assessing Avidity and Specificity of Influenza A Virus Hemagglutinins

Influenza A Virüsü hemaglutininler aviditesi ve özgünlüğünün değerlendirilmesi için Minyatür Glycan Mikroarray Testi

Influenza A virus (IAV) hemagglutinins recognize sialic acids on the cell surface as functional receptors to gain entry into cells. Wild waterfowl are the ...

A Rapid Strategy for the Isolation of New Faustoviruses from Environmental Samples Using Vermamoeba vermiformis

A Rapid Strategy for the Isolation of New Faustoviruses from Environmental Samples Using Vermamoeba vermiformis

Kullanımı Çevre Örneklerinde Yeni Faustoviruses İzolasyonunda bir Hızlı Stratejisi<em&gt; Vermamoeba vermiformis</em

The isolation of giant viruses is of great interest in this new era of virology, especially since these giant viruses are related to protists. Giant ...

Developing a Salivary Antibody Multiplex Immunoassay to Measure Human Exposure to Environmental Pathogens

Bir Tükürük Antikor Multiplex Immuoassay Gelişmekte Çevre Patojenler İnsan Pozlama&#39;yı Tedbir

The etiology and impacts of human exposure to environmental pathogens are of major concern worldwide and, thus, the ability to assess exposure and ...

Measuring Influenza Neuraminidase Inhibition Antibody Titers by Enzyme-linked Lectin Assay

Enzim-linked Lektin Testi tarafından Grip Nöraminidaz İnhibisyon antikor titreleri Ölçme

Antibodies to neuraminidase (NA), the second most abundant surface protein on influenza virus, contribute toward protection against influenza. Traditional ...

Utilization of Capsules for Negative Staining of Viral Samples within Biocontainment

Viral Örneklerin Negatif Boyanması İçin Kapsüllerin Biyokontainment İçerisinde Kullanımı

Transmission electron microscopy (TEM) is used to observe the ultrastructure of viruses and other microbial pathogens with nanometer resolution. Most ...