Name: isolation and culture of adult epithelial stem cells from human skin
Uploaded: 2011-03-31T13:00:00
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이 작품은 NIH / NCI 부여 R01CA - 118916에 의해 투자입니다

1. 사람의 피부에서 상피 줄기 세포를 추출 <ol><li> 상피 줄기 세포를 분리의 절차를 시작하기 전에 하나는 각 medias 및 시약을 (table1 참조) 준비해야합니다. </li><li> facelift 절차 또는 펀치 생검에서 신선한 성인 인간의 두피가 수집된 후, 4 DMEM / 10 % FBS / 숙박 Dispase (4 MG / ML) ° C.에 품어 37 2-4 시간을위한 인큐베이션 ° C도 효과적입니다. 피부 조각에 침투하는 효소 수 있도록 1cm의 최대 너비가되어야?...

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	<li>Jones, P. H., Watt, F. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Separation+of+human+epidermal+stem+cells+from+transit+amplifying+cells+on+the+basis+of+differences+in+integrin+function+and+expression.">Separation of human epidermal stem cells from transit amplifying cells on the basis of differences in integrin function and expression.</a> Cell. 73, 713-724 (1993).</li><li>Lyle, S., Christofidou-Solomidou, M., Liu, Y., Elder, D. E., Albelda, S., Cotsarelis, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+C8/144B+monoclonal+antibody+recognizes+cytokeratin+15+and+defines+the+location+of+human+hair+follicle+stem+cells.">The C8/144B monoclonal antibody recognizes cytokeratin 15 and defines the location of human hair follicle stem cells.</a> J. Cell. 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S., Cotsarelis, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bioengineering+the+hair+follicle:+fringe+benefits+of+stem+cell+technology.">Bioengineering the hair follicle: fringe benefits of stem cell technology.</a> Curr Opin Biotechnol. 16, 493-497 (2005).</li><li>Hoeller, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+improved+and+rapid+method+to+construct+skin+equivalents+from+human+hair+follicles+and+fibroblasts.+Exp+Dermatol+10.">An improved and rapid method to construct skin equivalents from human hair follicles and fibroblasts. Exp Dermatol 10.</a> , 264-271 (2001).</li><li>Navsaria, H. A., Ojeh, N. O., Moiemen, N., Griffiths, M. A., Frame, J. 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W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+Correction+of+Type+VII+Collagen+Expression+in+Dystrophic+Epidermolysis+Bullosa.">Functional Correction of Type VII Collagen Expression in Dystrophic Epidermolysis Bullosa.</a> J Invest Dermatol. , (2010).</li><li>Y, H., Kuma, S. M., Kossenko, A. V., Show, L., X, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stem+cells+with+neural+crest+characteristics+derived+from+the+bulge+region+of+cultured+human+hair+follicles.">Stem cells with neural crest characteristics derived from the bulge region of cultured human hair follicles.</a> J Invest Dermatol. 130, 1227-1236 (2010).</li><li>Nishimur, E. K., Grante, S. R., Fishe, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms+of+hair+graying:+incomplete+melanocyte+stem+cell+maintenance+in+the+niche.">Mechanisms of hair graying: incomplete melanocyte stem cell maintenance in the niche.</a> Science. 307, 720-724 (2005).</li></ol>

설명 세포 추출과 문화 방법은 놀라울 정도로 손쉬운하고 재현할 수 있습니다. 우리는 상속 피부 결함 18 환자를 포함하여 넓은 연령 범위에 걸쳐 개인의 수십에서 상피 줄기 세포 문화를 생성합니다. 조직 수확 당일에 과정을 시작하는 것이 좋습니다이지만 전지는 필요한 경우 야간 선적을 촉진시켜, 며칠 동안 얼음 미디어 가능한 상태로 유지됩니다. 폐기 facelift의 피부가 단세포 suspensio...

Keratinocyte 미디어 (KCM) [DMEM과 햄의 F12 (GIBCO, 3시 1분), 아데닌 (시그마, 180 ㎜) 10 % 태아 소 혈청 (GIBCO), 콜레라 독소 (ICN 0.1 NM), 페니실린 / 스트렙토 마이신 (GIBCO, 100 U / ML 각각 100 MG / ML), 하이드로코티손 (시그마, 0.4 MG / ML, 1.1 ㎜), T/T3 (트랜스페린, GIBCO, 5 μg / ML, 649 NM 및 triiodo - L - thyronine, 시그마, 2 NM) , 인슐린 (시그마, 5 MG / ML, 862 NM), 그리고 EGF (시그마, 10 NG / ML, 1.6 NM), 산도 7.2]

isolation and culture of adult epithelial stem cells from human skin

모든 자기 갱신 조직의 항상성은 성인 줄기 세포에 따라 좌우됩니다. undifferentiated 줄기 세포는 비대칭 분열을 받다, 그들은 줄기 세포 표현형, 그리고 줄기 세포 틈새에서 마이 그 레이션 급속한 확산을 받다하고 말기 조직을 repopulate하기 위해 차별화 교통 - 확장 세포를 (TA 세포) 유지 딸 세포를 생성합니다. 상피 줄기 세포는 체외 proliferative 가능성이 높은과 같은 느린 - 자전거 생체내 1-3에서 세포를 레이블 - 유지와 세포로 표피, 머리 뿌리하고, 소장에서 발견되었습니다. 성인, 조직 고유의 줄기 세포들이 정상적인 physiologic 매출 동안뿐만 아니라 스트레스의 4-5 시간 동안 거주하고있는 조직의 재생에 대한 책임이 있습니다. 또한, 줄기 세포는 일반적으로 조직 내에서 여러 셀에 6 타입 야기할 수있는 능력을 보유하고 다중 강력한 것으로 간주됩니다. 예를 들어, 쥐 머리 뿌리의 줄기 세포는 표피, 피지선 땀샘과 모낭 7-9를 생성할 수 있습니다. 우리는 인간의 머리 뿌리의 팽창 지역에서 줄기 세포가 여러 가능성 10 전시 것으로 나타났습니다. 줄기 세포가 발달 생물학, 분화, tumorigenesis과 가능한 치료 유틸리티에 대한 공부를 위해 체외 시스템에 해당하는 유틸리티로 인해 생명 의학 연구에 가치있는 도구가되었습니다. 그것은 성인 상피 줄기 세포는 같은 ectodermal dysplasias, monilethrix, 네더턴 증후군, Menkes 질환, 유전 epidermolysis bullosa 및 alopecias 11-13으로 질병의 치료에 유용하게 사용될 가능성이 높습니다. 또한, 같은 화상 상처, 만성 상처와 궤양 등의 피부 문제 요법 14,15 관련 줄기 세포에서 도움이 될 것입니다. pluripotent 상태 (IPS 세포) 16,17로 성인 세포의 프로그래밍에 대한 잠재력을 감안할 때, 인간의 피부에 쉽게 접근 및 확장 성인 줄기 세포를 포함한 질환의 광범위한 유도 및 다운 스트림 치료를위한 세포의 중요한 원천을 제공할 수 있습니다 당뇨병과 파킨슨병.

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Isolation and Culture of Adult Epithelial Stem Cells from Human Skin

인간의 피부에서 가능한 성인 상피 줄기 세포를 분리의 신속하고 강력한 방법이 설명되어 있습니다. 방법은 모낭과 세포 배양에 대한 단세포 suspensions 또는 조직의 파편의 격리에 따버릴 다음 피부 콜라겐 매트릭스의 효소 소화를 활용합니다.

사람의 피부에서 성인 상피 줄기 세포의 분리 및 문화

The homeostasis of all self-renewing tissues is dependent on adult stem cells. As undifferentiated stem cells undergo asymmetric divisions, they generate ...

Research

JoVE Journal

Biology

Isolation and Large Scale Expansion of Adult Human Endothelial Colony Forming Progenitor Cells

분리 및 성인 인간 내피 콜로니 형성 전구 세포의 대규모 확장

This paper introduces a novel recovery strategy for endothelial colony forming progenitor cells (ECFCs) from heparinized but otherwise unmanipulated adult ...

연구

생물학

Adult and Embryonic Skeletal Muscle Microexplant Culture and Isolation of Skeletal Muscle Stem Cells

성인 및 배아 골격근의 Microexplant 문화 및 골격 근육 줄기 세포의 분리

Cultured embryonic and adult skeletal muscle cells have a number of different uses. The micro-dissected explants technique described in this chapter is a ...

Isolation of Stem Cells from Human Pancreatic Cancer Xenografts

인간 췌장암의 Xenografts에서 줄기 세포의 분리

Cancer stem cells (CSCs) have been identified in a growing number of malignancies and are functionally defined by their ability to undergo self-renewal ...

Isolation of Mammary Epithelial Cells from Three-dimensional Mixed-cell Spheroid Co-culture

세 가지 차원 혼합 셀 회전 타원체 공동 문화에서 Mammary 상피 세포의 분리

While enormous efforts have gone into identifying signaling pathways and molecules involved in normal and malignant cell behaviors1-2, much of this work ...

Isolation and Culture of Individual Myofibers and their Satellite Cells from Adult Skeletal Muscle

성인 골격근의 개인 Myofibers 및 위성 세포의 분리와 문화

Muscle  regeneration in the adult is performed by resident stem cells called satellite  cells. Satellite cells are defined by  their position between the ...

Na&iuml;ve Adult Stem Cells Isolation from Primary Human Fibroblast Cultures

NaÃƒÆ’Ã‚Â¯ve Adult Stem Cells Isolation from Primary Human Fibroblast Cultures

인간의 기본 섬유 아세포 배양에서 순진 성인 줄기 세포 분리

Over the last decade, several adult stem cell  populations have been identified in human skin 1-4.  The isolation of multipotent adult dermal precursors ...

Induction and Analysis of Epithelial to Mesenchymal Transition

간엽 전환을 유도하고 상피의 분석

Epithelial  to mesenchymal transition (EMT) is essential for proper morphogenesis during  development. Misregulation of this  process has been implicated ...

Manual Isolation of Adipose-derived Stem Cells from Human Lipoaspirates

인간 Lipoaspirates에서 지방 유래 줄기 세포를 수동으로 분리

In 2001, researchers at the University of  California, Los Angeles, described the isolation of a new population of adult  stem cells from liposuctioned ...

Isolation, Culture, and Transplantation of Muscle Satellite Cells

근육 위성 세포의 분리, 문화, 및 이식

Muscle satellite cells are a stem cell population required for postnatal skeletal muscle development and regeneration, accounting for 2-5% of sublaminal ...

Isolation and Culture of Dental Epithelial Stem Cells from the Adult Mouse Incisor

성인 마우스 앞니의 치아 상피 줄기 세포의 분리 및 문화

Understanding the cellular and molecular mechanisms that underlie tooth regeneration and renewal has become a topic of great interest1-4, and the mouse ...