Name: rejection of fluorescence background in resonance and spontaneous raman microspectroscopy
Uploaded: 2011-05-18T12:00:00
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Este trabajo fue financiado por el premio de la NSF DBI 0852891. Parte de este trabajo también fue financiado por el Centro de Ciencia y Tecnología Biofotónica, uno designado Ciencia NSF y el Centro de Tecnología gestionado por la Universidad de California, Davis, en virtud del Acuerdo de Cooperación No. PHY0120999.

1. Algunos se debe tener cuidado en la preparación y la colocación de una muestra de Raman dentro de este sistema. <ol><li> Debido a que normalmente el sistema hace uso de los objetivos de la apertura numérica muy alta con distancias de trabajo muy corto, las muestras se colocan en un portaobjetos. Las muestras biológicas se colocan normalmente en un cubreobjetos espesor N º 1 montado en una cámara de celular Attofluor (Invitrogen, Carlsbad, CA). </li><li> Las muestras líquidas, en particular los tóxicos para ...

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	<li>Savitzky, A., Golay, M. J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Smoothing+and+differentiation+of+data+by+simplified+least+squares+procedures.">Smoothing and differentiation of data by simplified least squares procedures.</a> Analytical Chemistry. 36, 1627-1639 (1964).</li><li>Lieber, C. 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J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Method+for+automated+background+subtraction+from+Raman+spectra+containing+known+contaminants.">Method for automated background subtraction from Raman spectra containing known contaminants.</a> The Analyst. 134, 1198-1202 (2009).</li><li>De Luca, A. C., Mazilu, M., Riches, A., Herrington, C. S., Dholakia, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Online+fluorescence+suppression+in+modulated+Raman+spectroscopy.">Online fluorescence suppression in modulated Raman spectroscopy.</a> Analytical Chemistry. 82, 738-745 (2010).</li><li>Evans, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemical+imaging+of+tissue+in+vivo+with+video-rate+coherent+anti-Stokes+Raman+scattering+microscopy.">Chemical imaging of tissue in vivo with video-rate coherent anti-Stokes Raman scattering microscopy.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 102, 16807-16812 (2005).</li><li>Jones, W. 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El campo de la espectroscopia Raman biomédica ha visto un creciente interés en los últimos años como resultado de su potencial demostrado para la solución de varios problemas difíciles en el diagnóstico biológico. Por ejemplo, los espectros Raman se ha demostrado que tiene valor diagnóstico en la detección del cáncer de 3, 4, 5, 6. La espectroscopía Raman se ha utilizado también en la cuantificación de bacterias 7, 8 y 9 bacteriana respuesta a los fármacos. Se ha encontrad...

<table border="1"><tbody><tr><th> Nombre </th><th> Empresa </th><th> Número de catálogo </th><th> Comentarios </th></tr><tr><td> Lentes </td><td> Thorlabs </td><td> Varios </td><td> Todos los lentes con recubrimiento de tener pérdidas de transmisión máxima de 1% cada uno </td></tr><tr><td> Ajustable Ti: Sapph láser </td><td> Coherente </td><td> Camaleón </td><td> 30 NJ, 200 fs, 80 MHz </td></tr><tr><td> 40X objetivo de inmersión en aceite </td><td> Olimpo </td><td> UApo/340 </td><td> NA = 1,35 </td></tr><tr><td> Microscopio invertido </td><td> Olimpo </td><td> IX-71 </td><td> Modificado para eliminar todos los objetivos secundarios en el puerto </td></tr><tr><td> La mitad de la placa de onda </td><td> Thorlabs </td><td> AHWP05M-600 </td><td></td></tr><tr><td> Glan-Thompson polarizador </td><td> Thorlabs </td><td> GTH10M </td><td> ~ 10% de pérdida de transmisión </td></tr><tr><td> Espectrómetro </td><td> PI Acton </td><td> SP2300i </td><td></td></tr><tr><td> CCD </td><td> PI Acton </td><td> Pixis 100B </td><td></td></tr><tr><td> Software mathmatical </td><td> The MathWorks </td><td> MATLAB </td><td> versión 2008a </td></tr><tr><td> Faraday aislador </td><td> EOT </td><td> BB8-5I </td><td></td></tr><tr><td> Piezo-eléctrico espejo </td><td> Newport </td><td> AG-M100 </td><td></td></tr><tr><td> BBO cristal </td><td> CASIX </td><td> costumbre </td><td> 1 mm de espesor </td></tr><tr><td> Paso de banda de filtro 1 </td><td> Andover </td><td> 008FC14 </td><td> 808 ± 0,4 nm </td></tr><tr><td> Espejo dicroico </td><td> Semrock </td><td> FF662-FDI01 </td><td> borde de la banda a 662 nm </td></tr><tr><td> Largo del filtro de paso </td><td> Semrock </td><td> BLP01-405R </td><td> borde de la banda a 417 nm </td></tr><tr><td> Paso de banda de filtro 2 </td><td> Semrock </td><td> FF02-447/60 </td><td> 417-447 nm </td></tr><tr><td> CS 2 </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> 335266 </td><td> 99% de pureza </td></tr><tr><td> Cumarina 30 </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> 546127 </td><td> 99% de pureza </td></tr><tr><td> Inmersión en aceite </td><td> Cargille </td><td> 16242 </td><td> Tipo de DF </td></tr></tbody></table>

rejection of fluorescence background in resonance and spontaneous raman microspectroscopy

Espectroscopia Raman es con frecuencia plagados de un fondo fluorescente intensa, particularmente para las muestras biológicas. Si la muestra se excita con un tren de pulsos ultrarrápidos, un sistema que puede separar temporalmente la superposición de señales de espectro en una escala de tiempo de picosegundos puede aislar rápidamente llega la luz Raman dispersada por que llegan tarde de luz fluorescente. Aquí hablamos de la construcción y operación de un complejo sistema no lineal óptico que utiliza todas las ópticas de conmutación en la forma de una puerta ópticas de bajo consumo Kerr para aislar las señales de Raman y de fluorescencia. A solo 808 nm láser con 2,4 W de potencia media y la tasa de 80 MHz se divide la repetición, con aproximadamente 200 mW de luz 808 nm se convierten en &lt;5 mW de luz 404 nm enviado a la muestra para excitar a la dispersión Raman. El resto de la luz convertida nm 808 se envía a un medio no lineal, donde actúa como la bomba para el obturador totalmente ópticas. El obturador se abre y se cierra en 800 fs con la máxima eficiencia de aproximadamente el 5%. El uso de este sistema en el que son capaces de separar con éxito las señales de Raman y de fluorescencia a una velocidad de 80 MHz utilizando la repetición de impulsos y energías potencias medias que permanecen biológicamente seguros. Debido a que el sistema no tiene capacidad de reserva en términos de potencia óptica, que las consideraciones de varios detalles del diseño y la alineación que ayudan a maximizar el rendimiento del sistema. También se analiza el protocolo para la obtención de la superposición espacial y temporal de la señal y las vigas de la bomba en el medio Kerr, así como un protocolo detallado para la adquisición del espectro. Finalmente, se presenta un representante de los resultados de algunos espectros Raman obtenidos en presencia de fuerte fluorescencia utilizando nuestro tiempo-gating sistema.

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Rejection of Fluorescence Background in Resonance and Spontaneous Raman Microspectroscopy

Se discute la construcción y operación de un complejo sistema no lineal óptico que utiliza ultrarrápida totalmente ópticas de conmutación para aislar Raman de las señales de fluorescencia. El uso de este sistema en el que son capaces de separar con éxito las señales de Raman y de fluorescencia utilizando las energías de pulso y potencias medias que permanecen biológicamente seguros.

El rechazo de la fluorescencia de fondo en la resonancia y microespectroscopía Raman espontánea

Raman spectroscopy is often plagued by a strong fluorescent background, particularly for biological samples. If a sample is excited with a train of ...

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