Name: finger-stick blood sampling methodology for the determination of exercise-induced lymphocyte apoptosis
Uploaded: 2011-02-24T17:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Finger-stick Blood Sampling Methodology for the Determination of Exercise-induced Lymphocyte Apoptosis at JoVE.com

Dit onderzoek werd ondersteund door een nieuwe faculteit Grant van de faculteit Scholarship Council van Western Kentucky University.

1. Finger-Stick Blood Sampling <ol><li> Het verzamelen van bloed is die gewoonlijk in rust voor een nulmeting (meestal na 10-15 min gezeten rust), tijdens of onmiddellijk na een oefening bout, en de rest van de post-training periode (over het algemeen van 1-3 uur na de beëindiging van de oefening). </li><li> Met behulp van universele voorzorgsmaatregelen, eerst steriliseren van de vingertop met 70% isopropyl alcohol. </li><li> Vervolgens prikken de site met behulp van een geautomatiseerd lancet of soortgelijk apparaa...

<ol>
	<li>Simpson, R. J., Florida-James, G. D., Whyte, G. P., Black, J. R., Ross, J. A., Guy, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Apoptosis+does+not+contribute+to+the+blood+lymphocytopenia+observed+after+intensive+and+downhill+treadmill+running+in+humans.">Apoptosis does not contribute to the blood lymphocytopenia observed after intensive and downhill treadmill running in humans.</a> Res. Sports Med. 15, 157-174 (2007).</li><li>Steensberg, A., Morrow, J., Toft, A. D., Bruunsgaard, H., Pedersen, B. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prolonged+exercise,+lymphocyte+apoptosis+and+F2-isoprostanes.">Prolonged exercise, lymphocyte apoptosis and F2-isoprostanes.</a> Eur. J. Appl. Physiol. 87, 38-42 (2002).</li><li>Mooren, F. C., Bloming, D., Lechtermann, A., Lerch, M. M., V&#246;lker, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lymphocyte+apoptosis+after+exhaustive+and+moderate+exercise.">Lymphocyte apoptosis after exhaustive and moderate exercise.</a> J. Appl. Physiol. 93, 147-153 (2002).</li><li>Peters, E. M., Eden, M. V. a. n., Tyler, N., Ramautar, A., Chutergoon, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prolonged+exercise+does+not+cause+lymphocyte+DNA+damage+or+increased+apoptosis+in+well-trained+endurance+athletes.">Prolonged exercise does not cause lymphocyte DNA damage or increased apoptosis in well-trained endurance athletes.</a> Eur. J. Appl. Physiol. 98, 124-131 (2006).</li><li>Wang, J. -. S., Huang, Y. -. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+exercise+intensity+on+lymphocyte+apoptosis+induced+by+oxidative+stress+in+men.">Effects of exercise intensity on lymphocyte apoptosis induced by oxidative stress in men.</a> Eur. J. Appl. Physiol. 95, 290-291 (2005).</li><li>Mooren, F. C., Lechtermann, A., V&#246;lker, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exercise-induced+apoptosis+of+lymphocytes+depends+on+training+status.">Exercise-induced apoptosis of lymphocytes depends on training status.</a> Med. Sci. Sports Exerc. 36, 1476-1483 (2004).</li><li>Navalta, J. W., Sedlock, D. A., Park, K. -. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+treatment+influences+the+yield+of+apoptotic+lymphocytes+after+maximal+exercise.">Blood treatment influences the yield of apoptotic lymphocytes after maximal exercise.</a> Med. Sci. Sports Exerc. 37, 369-373 (2005).</li></ol>

Een minimaal invasieve monstername procedure en de daarop volgende analyse is aangetoond voor de analyse van zowel de vroege en late fase van de oefening geïnduceerde apoptose lymfocyten. Het is ook mogelijk om duidelijk uit te sluiten die cellen, die zijn necrotische en apoptotische niet. Deze procedure overwint de nadelen en ongemak dat verbonden is met invasieve venapunctie uit de antecubitale regio op verschillende tijdstippen voor, tijdens en onmiddellijk na de inspanning, of vastzetten van een katheter voor de du...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Flow Cytometry Binding Buffer</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>eBioscience</td>
<td>00-4222-26</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>RBC Lysis Buffer</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>eBioscience</td>
<td>00-4333-57</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Lancet Device</td>
<td>Accu Check Soft Touch</td>
<td>Roche Diagnostics Corp.</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Capillary tubes</td>
<td>Heparinized Capillary Tubes</td>
<td>Chase Scientific Glass, Inc.</td>
<td>501</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Centrifuge</td>
<td>GmC Lab</td>
<td>Gilson</td>
<td>PMS-880</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Annexin V-FITC Conjugated</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Biovision Inc.</td>
<td>K201-400-1</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>CD4-PE Conjugated</td>
<td>Anti-human, clone RPA-T4</td>
<td>eBioscience</td>
<td>12-0049-42</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>CD8-PE Conjugated</td>
<td>Anti-human, clone OKT8</td>
<td>eBioscience</td>
<td>12-0086-73</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>CD19-PE Conjugated</td>
<td>Anti-human, clone HIB19</td>
<td>eBioscience</td>
<td>12-0199-42</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>7-AAD Viability Staining Solution</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>eBioscience</td>
<td>00-6993-50</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>CD45RA-APC Conjugated</td>
<td>Anti-human, clone HI100</td>
<td>eBioscience</td>
<td>17-0458-42</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Flow cytometer</td>
<td>C6</td>
<td>Accuri</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

finger-stick blood sampling methodology for the determination of exercise-induced lymphocyte apoptosis

De oefening is een fysiologische stimulus in staat is het induceren van apoptose in immuuncellen. Tot op heden zijn er diverse beperkingen geïdentificeerd met het meten van dit fenomeen, met name met betrekking tot de hoeveelheid tijd die nodig is om te isoleren en te behandelen een bloedmonster voorafgaand aan de beoordeling van celdood. Vanwege dit, is het moeilijk om vast te stellen of melding van een toename in de immuun cel apoptose kan worden bijgedragen aan het werkelijke effect van de oefening op het systeem, of zijn een weerspiegeling van de tijd en de verwerking noodzakelijk is om uiteindelijk te verkrijgen deze meting. In dit artikel zullen we laten zien een snelle en minimaal invasieve procedure voor de analyse van de oefening geïnduceerde apoptose lymfocyten. In tegenstelling tot andere technieken, is volbloed toegevoegd aan een antilichaam panel onmiddellijk na het verkrijgen van een monster. Na de incubatieperiode, worden de rode bloedcellen gelyseerd en monsters zijn klaar om te worden geanalyseerd. Het gebruik van een vinger-stick sampling procedure vermindert de benodigde hoeveelheid bloed, en minimaliseert het ongemak te onderwerpen.

Watch this Scientific Journal Video about Finger-stick Blood Sampling Methodology for the Determination of Exercise-induced Lymphocyte Apoptosis at JoVE.com

Finger-stick Blood Sampling Methodology for the Determination of Exercise-induced Lymphocyte Apoptosis

De uitoefening in staat is om apoptose in immuuncellen. Er zijn verschillende meet-beperkingen, met name met betrekking tot de hoeveelheid tijd die nodig is om te isoleren en te behandelen een bloedmonster voorafgaand aan de beoordeling. Aangetoond is een snelle en minimaal invasieve procedure voor de analyse van de oefening geïnduceerde apoptose lymfocyten.

Finger-stick Blood Sampling Methode voor de bepaling van lichamelijke oefening geïnduceerde apoptose Lymfocyt

Exercise is a physiological stimulus capable of inducing apoptosis in immune cells. To date, various limitations have been identified with the measurement ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Depletion of Specific Cell Populations by Complement Depletion

Uitputting van specifieke celpopulaties door Complement Uitputting

The purification of immune cell populations is often required in order to study their unique functions.  In particular, molecular approaches such as ...

Purification of Specific Cell Population by Fluorescence Activated Cell Sorting (FACS)

Purification of Specific Cell Population by Fluorescence Activated Cell Sorting FACS

Zuivering van specifieke cel Bevolking naar fluorescentie-geactiveerde Cell Sorting (FACS)

Experimental and clinical studies often require highly purified cell populations.  FACS is a technique of choice to purify cell populations of known ...

Human T Lymphocyte Isolation, Culture and Analysis of Migration In Vitro

Human T Lymphocyte Isolation, Culture and Analysis of Migration In Vitro

Human T-lymfocyt Isolatie, Cultuur en Analyse van de migratie In Vitro</em

The migration of T lymphocytes involves the adhesive interaction of cell surface integrins with ligands expressed on other cells or with extracellular ...

The Use of Carboxyfluorescein Diacetate Succinimidyl Ester (CFSE) to Monitor Lymphocyte Proliferation

The Use of Carboxyfluorescein Diacetate Succinimidyl Ester CFSE to Monitor Lymphocyte Proliferation

Het gebruik van carboxyfluoresceïne diacetaat succinimidylester (CFSE) om lymfocytproliferatie Monitor

Carboxyfluorescein succinimidyl ester (CFSE) is an effective and popular means to monitor lymphocyte division1-3.  CFSE covalently labels long-lived ...

Introducing Shear Stress in the Study of Bacterial Adhesion

Introductie van Shear Stress in de studie van bacteriële hechting

During bacterial infections a sequence of interactions occur between the pathogen and its host. Bacterial adhesion to the host cell surface is often the ...

Antigens Protected Functional Red Blood Cells By The Membrane Grafting Of Compact Hyperbranched Polyglycerols

Antigenen functionele rode bloedcellen die beschermd worden door de membraan enten van Compact Hypervertakte Polyglycerolen

Red blood cell (RBC) transfusion is vital for the treatment of a number of acute and chronic medical problems such as thalassemia major and sickle cell ...

Methodology for the Efficient Generation of Fluorescently Tagged Vaccinia Virus Proteins

Methodologie voor de efficiënte generatie van fluorescerend gelabeld Vaccinia Virus Eiwitten

Tagging of viral proteins with fluorescent  proteins has proven an indispensable approach to furthering our understanding  of virus-host interactions. ...

Assay of Adhesion Under Shear Stress for the Study of T Lymphocyte-Adhesion Molecule Interactions

Assay van Adhesie Under Shear Stress voor de Studie van T-lymfocyten-Adhesie Molecule Interacties

Overall, T cell adhesion is a critical component of function, contributing to the distinct processes of cellular recruitment to sites of inflammation and ...

Detection of Trypanosoma brucei Variant Surface Glycoprotein Switching by Magnetic Activated Cell Sorting and Flow Cytometry

Detection of Trypanosoma brucei Variant Surface Glycoprotein Switching by Magnetic Activated Cell Sorting and Flow Cytometry

detectie van<em&gt; Trypanosoma brucei</em&gt; Variant oppervlakte glycoproteïne Schakelen van Magnetic Activated Cell Sorting en flowcytometrie

Trypanosoma brucei, a protozoan parasite that causes both Human and Animal African Trypanosomiasis (known as sleeping sickness and nagana, respectively) ...

Use of a Monocyte Monolayer Assay to Evaluate Fc&#947; Receptor-mediated Phagocytosis

Use of a Monocyte Monolayer Assay to Evaluate FcÃƒÆ’Ã…Â½Ãƒâ€šÃ‚Â³ Receptor-mediated Phagocytosis

Toepassing van een monocyt monolaag Gehalte aan Fcy receptor-gemedieerde fagocytose evalueren

Although originally developed for predicting transfusion outcomes of serologically incompatible blood, the monocyte monolayer assay (MMA) is a highly ...