Name: bioluminescence imaging for assessment of immune responses following implantation of engineered heart tissue (eht)
Uploaded: 2011-06-01T12:00:00
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Sonja Schrepfer, Lenard Conradi et Arne Hansen a reçu un financement de la Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG; SCHR992/3-1, SCHR992/4-1, CO 858/1-1, HA 3423/3-1). Le travail a également été soutenue par des subventions de l&#39;Union européenne à Thomas Eschenhagen (EUGeneHeart et Angioscaff).

1. Génération d&#39;ISE et de la Culture Conditions Fabrication de base de fibrine ISE a été réalisée comme décrit par ailleurs 4. En bref, pour produire à base de fibrine ISE à des fins d&#39;implantation, un mélange maître a été préparée contenant des cellules isolées à partir néonatale ROSA / luciférase-LEW coeurs de rats transgéniques, le fibrinogène bovin et Matrigel. Agarose moules ont été préparés en utilisant des entretoises en téflon placés dans d...

<ol>
	<li>Eschenhagen, T., Zimmermann, W. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Engineering+myocardial+tissue.">Engineering myocardial tissue.</a> Circ Res. 97, 1220-1231 (2005).</li><li>van der Bogt, K. E., Schrepfer, S., Yu, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+transplantation+of+adipose+tissue-+and+bone+marrow-derived+mesenchymal+stem+cells+in+the+infarcted+heart.">Comparison of transplantation of adipose tissue- and bone marrow-derived mesenchymal stem cells in the infarcted heart.</a> Transplantation. 87, 642-652 (2009).</li><li>Hakamata, Y., Murakami, T., Kobayashi, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term="Firefly+rats"+as+an+organ/cellular+source+for+long-term+in+vivo+bioluminescent+imaging.">"Firefly rats" as an organ/cellular source for long-term in vivo bioluminescent imaging.</a> Transplantation. 81, 1179-1184 (2006).</li><li>Hansen, A., Eder, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+Drug+Screening+Platform+Based+on+Engineered+Heart+Tissue.">Development of a Drug Screening Platform Based on Engineered Heart Tissue.</a> Circ Res. , (2010).</li></ol>

Avant la mise en œuvre clinique de la technologie d&#39;ISE pour la réparation cardiaque, des questions fondamentales telles que l&#39;immunogénicité de deux composants cellulaires et de la matrice ou de la survie du greffon après l&#39;implantation doivent être évalués dans des modèles expérimentaux. Imagerie par bioluminescence in vivo représente une nouvelle technique utile pour la survie des cellules de suivi après la transplantation . Nous avons réussi à généré à base de fibrine ISE conte...

<ul><li> LEW-Tg (Gt (ROSA) 26Sor-Luc) 11Jmsk rat (Rat Nombre NBPR 0299, http://www.anim.med.kyoto-u.ac.jp/NBR/) </li><li> Fibrinogène bovin (solution stock: 200 mg / ml, plus aprotinine 5 ug / ml dans le fibrinogène NaCl 0,9%, Sigma F4753) </li><li> Matrigel (BD Bioscience 356235) </li><li> DMEM (Biochrome F0415) </li><li> Sérum de cheval (Gibco 26050) </li><li> Pénicilline / streptomycine (Gibco 15140) </li><li> L&#39;insuline (Sigma-Aldrich I9278) </li><li> L&#39;aprotinine (Sigma Aldrich A1153) </li><li> D-luciférine (Biosynth L-8220) </li><li> Immuno-enzymatique plaques spot test (ELISpot) (Hassa Laborbedarf, S2EM004M99) </li></ul>

bioluminescence imaging for assessment of immune responses following implantation of engineered heart tissue (eht)

Diverses techniques d&#39;ingénierie tissulaire cardiaque ont été poursuivis dans les dernières décennies, y compris les stratégies d&#39;échafaudage en utilisant soit natif ou bioartificiel matériaux d&#39;échafaudage, piégeage des myocytes cardiaques dans les hydrogels tels que la fibrine ou de collagène et l&#39;empilement des monocouches myocytes 1. Ces concepts visent à la restauration de la fonction cardiaque compromise (par exemple après un infarctus du myocarde) ou comme modèles expérimentaux (par exemple, la toxicologie prédictive et le dépistage de substances ou de modélisation de la maladie). Un suivi précis de la survie des cellules après l&#39;implantation du tissu cardiaque d&#39;ingénierie (ISE) est désormais possible en utilisant la bioluminescence in vivo d&#39;imagerie (BLI) des techniques 2. Nous décrivons ici la génération de base de fibrine ISE partir d&#39;une souche de rats transgéniques avec expression ubiquitaire de la luciférase de luciole (ROSA / luciférase-LEW Tg; 3). L&#39;implantation est réalisée dans le grand omentum des différentes souches de rats afin d&#39;évaluer la réponse immunitaire de l&#39;organisme receveur après l&#39;implantation d&#39;ISE. Comparaison des résultats générés par BLI et l&#39;enzyme liée Technique spot Immuno (ELISPOT) confirment l&#39;utilité de BLI pour l&#39;évaluation des réponses immunitaires.

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Bioluminescence Imaging for Assessment of Immune Responses Following Implantation of Engineered Heart Tissue EHT

Cette vidéo montre l&#39;utilisation de<em&gt; In vivo</emL&#39;imagerie par bioluminescence&gt; pour étudier les réponses immunitaires après l&#39;implantation du tissu cardiaque d&#39;ingénierie (ISE) chez le rat.

Imagerie par bioluminescence pour l&#39;évaluation des réponses immunitaires après l&#39;implantation du tissu cardiaque d&#39;ingénierie (ISE)

Various techniques of cardiac tissue engineering have been pursued in the past decades including scaffolding strategies using either native or ...

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Bioluminescence Imaging for Assessment of Immune Responses Following Implantation of Engineered Heart Tissue (EHT)

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