Name: bioluminescence imaging for assessment of immune responses following implantation of engineered heart tissue (eht)
Uploaded: 2011-06-01T12:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Bioluminescence Imaging for Assessment of Immune Responses Following Implantation of Engineered Heart Tissue EHT at JoVE.com

Sonja Schrepfer, Lenard Conradi och Arne Hansen fått finansiering från Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG, SCHR992/3-1, SCHR992/4-1, CO 858/1-1, HA 3423/3-1). Arbetet har också finansierats med bidrag från Europeiska unionen till Thomas Eschenhagen (EUGeneHeart och Angioscaff).

1. EHT Generation och odlingsbetingelser Tillverkning av fibrin-baserade EHT utfördes som beskrivs på annan plats 4. I korthet, att skapa fibrin-baserade EHT för implantation ändamål, var en mästare blandning beredda, innehållande celler som isolerats från neonatal ROSA / luciferas-LEW transgena hjärtan råtta, nötkreatur fibrinogen och Matrigel. Agarosen gjutformar har sammanställts med teflon distanser placeras i 6-bra kultur rätter. Efter solidifiering av agaros var d...

<ol>
	<li>Eschenhagen, T., Zimmermann, W. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Engineering+myocardial+tissue.">Engineering myocardial tissue.</a> Circ Res. 97, 1220-1231 (2005).</li><li>van der Bogt, K. E., Schrepfer, S., Yu, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+transplantation+of+adipose+tissue-+and+bone+marrow-derived+mesenchymal+stem+cells+in+the+infarcted+heart.">Comparison of transplantation of adipose tissue- and bone marrow-derived mesenchymal stem cells in the infarcted heart.</a> Transplantation. 87, 642-652 (2009).</li><li>Hakamata, Y., Murakami, T., Kobayashi, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term="Firefly+rats"+as+an+organ/cellular+source+for+long-term+in+vivo+bioluminescent+imaging.">"Firefly rats" as an organ/cellular source for long-term in vivo bioluminescent imaging.</a> Transplantation. 81, 1179-1184 (2006).</li><li>Hansen, A., Eder, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+Drug+Screening+Platform+Based+on+Engineered+Heart+Tissue.">Development of a Drug Screening Platform Based on Engineered Heart Tissue.</a> Circ Res. , (2010).</li></ol>

Innan kliniska genomförandet av EHT teknik för hjärt-reparation, grundläggande frågor såsom immunogenicitet av både cellulära och matrix komponenter eller graft överlevnad efter implantation måste bedömas i experimentella modeller. In vivo mareld imaging utgör en användbar ny teknik för övervakning cellöverlevnad efter transplantation . Vi lyckades genererade fibrin-baserade EHT innehåller luciferas positiva (Luc +) hjärtceller i en anpassning av ett fastställt protokoll 4. Dessa E...

<ul><li> LEW-Tg (Gt (Rosa) 26Sor-luc) 11Jmsk råttor (PRS råtta nummer 0299, http://www.anim.med.kyoto-u.ac.jp/NBR/) </li><li> Bovin fibrinogen (stamlösning: 200 mg / ml plus aprotinin 5 mikrogram / ml fibrinogen i NaCl 0,9%, Sigma F4753) </li><li> Matrigel (BD Bioscience 356.235) </li><li> DMEM (Biochrome F0415) </li><li> Häst serum (Gibco 26.050) </li><li> Penicillin / streptomycin (Gibco 15.140) </li><li> Insulin (Sigma-Aldrich I9278) </li><li> Aprotinin (Sigma Aldrich A1153) </li><li> d-luciferin (Biosynth L-8220) </li><li> Immunadsorberande plats (ELISPOT) analys plattor (Hassa Laborbedarf, S2EM004M99) </li></ul>

bioluminescence imaging for assessment of immune responses following implantation of engineered heart tissue (eht)

Olika teknikerna för hjärtvävnad engineering ha skett i de senaste decennierna, inklusive byggnadsställningar strategier med antingen inbyggda eller bioartificial schavotten material, fastnar hjärt myocyter i hydrogel som fibrin eller kollagen och stapling av myocyte monolager 1. Dessa begrepp syftar till restaurering av nedsatt hjärtfunktion (t ex efter hjärtinfarkt) eller som experimentella modeller (t.ex. prediktiva toxikologi och substans screening eller sjukdom modellering). Noggrann kontroll av cellens överlevnad efter implantation av tekniska hjärtvävnad (EHT) har nu blivit möjligt med hjälp av in-vivo (BLI) mareld avbildningstekniker 2. Här beskriver vi den generation av fibrin-baserade EHT från en transgen råtta stam med allestädes närvarande uttryck i Firefly luciferas (Rosa / luciferas-LEW Tg, 3). Implantation sker i större omentum olika råtta stammar för att utvärdera immunsvaret hos mottagarorganismen följande EHT implantation. Jämförelse av resultaten som genereras av BLI och enzymet Linked Immuno Spot Technique (ELISPOT) bekräfta användbarheten av BLI för bedömning av immunsvaret.

Watch this Scientific Journal Video about Bioluminescence Imaging for Assessment of Immune Responses Following Implantation of Engineered Heart Tissue EHT at JoVE.com

Bioluminescence Imaging for Assessment of Immune Responses Following Implantation of Engineered Heart Tissue EHT

Denna video demonstrerar användning av<em&gt; In vivo</em&gt; Mareld avbildning för att studera immunsvaret efter implantation av Engineered hjärtvävnad (EHT) hos råttor.

Bioluminescence Imaging för bedömning av immunsvaret efter implantationen av Engineered hjärtvävnad (EHT)

Various techniques of cardiac tissue engineering have been pursued in the past decades including scaffolding strategies using either native or ...

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Bioluminescence Imaging for Assessment of Immune Responses Following Implantation of Engineered Heart Tissue (EHT)

Magnetic Resonance Elastography Methodology for the Evaluation of Tissue Engineered Construct Growth

Magnetic Resonance elastografi Metodik för utvärdering vävnadstekniska Construct tillväxt

Traditional mechanical testing often results in the destruction of the sample, and in the case of long term tissue engineered construct studies, the use ...

Protocol for Relative Hydrodynamic Assessment of Tri-leaflet Polymer Valves

Protokoll för relativ Hydrodynamisk Bedömning av Tri-broschyr Polymer Ventiler

Limitations of currently available prosthetic valves, xenografts, and homografts have prompted a recent resurgence of developments in the area of ...

Surgical Technique for the Implantation of Tissue Engineered Vascular Grafts and Subsequent In Vivo Monitoring

Surgical Technique for the Implantation of Tissue Engineered Vascular Grafts and Subsequent In Vivo Monitoring

Kirurgisk teknik för implantation av vävnadstekniska kärlimplantat och efterföljande<em&gt; In Vivo</em&gt; Övervakning

The development of Tissue Engineered Vessels (TEVs) is advanced by the ability to routinely and effectively implant TEVs (4-5 mm in diameter) into a large ...

Generation and Grafting of Tissue-engineered Vessels in a Mouse Model

Generation och Nagelvävnadstekniska Fartyg i en musmodell

The construction of vascular conduits is a fundamental strategy for surgical repair of damaged and injured vessels resulting from cardiovascular diseases. ...

Production, Characterization and Potential Uses of a 3D Tissue-engineered Human Esophageal Mucosal Model

Produktion, karakterisering och potentiella användningsområdena för en 3D vävnadstekniska Human Esophageal Mucosal Modell

The incidence of both esophageal adenocarcinoma and its precursor, Barrett&#8217;s Metaplasia, are rising rapidly in the western world. Furthermore ...

Engineered 3D Silk-collagen-based Model of Polarized Neural Tissue

Engineered 3D Silk-kollagenbaserad modell av polariserat Neural Tissue

Despite huge efforts to decipher the anatomy, composition and function of the brain, it remains the least understood organ of the human body. To gain a ...

A Combined 3D Tissue Engineered In Vitro/In Silico Lung Tumor Model for Predicting Drug Effectiveness in Specific Mutational Backgrounds

A Combined 3D Tissue Engineered In Vitro/In Silico Lung Tumor Model for Predicting Drug Effectiveness in Specific Mutational Backgrounds

En kombinerad 3D vävnadstekniska<em&gt; In Vitro</em&gt; /<em&gt; In silico</em&gt; Lungtumör modell för att förutsäga läkemedelseffektivitet i specifika Mutations bakgrunder

In the present study, we combined an in vitro 3D lung tumor model with an in silico model to optimize predictions of drug response based on a specific ...

Automated Contraction Analysis of Human Engineered Heart Tissue for Cardiac Drug Safety Screening

Automatiserad Contraction analys av Human Engineered hjärtvävnad för Cardiac Drug Safety Screening

Cardiac tissue engineering describes techniques to constitute three dimensional force-generating engineered tissues. For the implementation of these ...

Custom Engineered Tissue Culture Molds from Laser-etched Masters

Specialkonstruerade vävnadsodling formar från lasergraverade Masters

As the field of tissue engineering has continued to mature, there has been increased interest in a wide range of tissue parameters, including tissue ...

Seeding and Implantation of a Biosynthetic Tissue-engineered Tracheal Graft in a Mouse Model

Sådd och Implantation av en biosyntetiska vävnadstekniska trakeal transplantat i en musmodell

Treatment options for congenital or secondary long segment tracheal defects have historically been limited due to an inability to replace functional ...