Name: studying cell rolling trajectories on asymmetric receptor patterns
Uploaded: 2011-02-13T16:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Studying Cell Rolling Trajectories on Asymmetric Receptor Patterns at JoVE.com

وقد أيد هذا المشروع من قبل المركز ديشباندي الابتكار التكنولوجي في معهد ماساتشوستس للتكنولوجيا (RK وJMK) وجائزة التوظيف لجبهة الخلاص الوطني 0952493 RK خلال الكيميائية والبيولوجية برنامج فصل الألوان. نشكر معهد التكنولوجيا النانوية الجندي (ISN) ومختبر التكنولوجيا مايكروسيستمز (MTL) في معهد ماساتشوستس للتكنولوجيا لاستخدام مرافقها.

1. HL60 الخلية المتداول 1.1. تلفيق ركائز منقوشة. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الطباعة باستخدام microcontact (μCP) 4-7 لجعل التناوب الذاتي تجميعها monolayers (صواريخ سام) من جزيئات الربط على الشرائح الزجاجية المطلية بالذهب :...

<ol>
	<li>Karnik, R., Hong, S., Zhang, H., Mei, Y., Anderson, D. G., Karp, J. M., Langer, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nanomechanical+control+of+cell+rolling+in+two+dimensions+through+surface+Patterning+of+receptors.">Nanomechanical control of cell rolling in two dimensions through surface Patterning of receptors.</a> Nano Lett. 8 (4), 1153-1158 (2008).</li><li>Lee, C. H., Bose, S., Van Vliet, K. J., Karp, J. M., Karnik, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Examining+Lateral+Displacement+of+HL60+Cells+Rolling+on+Asymmetric+P-selectin+Patterns.">Examining Lateral Displacement of HL60 Cells Rolling on Asymmetric P-selectin Patterns.</a> Langmuir. 27 (1), 240-249 (2011).</li><li>Norman, K. E., Moore, K. L., McEver, R. P., Ley, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Leukocyte+rolling+in-vivo+is+mediated+by+p-selectin+glycoprotein+ligand-1.">Leukocyte rolling in-vivo is mediated by p-selectin glycoprotein ligand-1.</a> Blood. 86 (12), 4417-4421 (1995).</li><li>Bernard, A., Delamarche, E., Schmid, H., Michel, B., Bosshard, H. R., Biebuyck, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Printing+patterns+of+proteins.">Printing patterns of proteins.</a> Langmuir. 14 (9), 2225-2229 (1998).</li><li>James, C. D., Davis, R. C., Kam, L., Craighead, H. G., Isaacson, M., Turner, J. N., Shain, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Patterned+protein+layers+on+solid+substrates+by+thin+stamp+microcontact+printing.">Patterned protein layers on solid substrates by thin stamp microcontact printing.</a> Langmuir. 14 (4), 741-744 (1998).</li><li>Mrksich, M., Whitesides, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Using+self-assembled+monolayers+to+understand+the+interactions+of+man-made+surfaces+with+proteins+and+cells.">Using self-assembled monolayers to understand the interactions of man-made surfaces with proteins and cells.</a> Annual Review of Biophysics and Biomolecular Structure. 25, 55-78 (1996).</li><li>Tan, J. L., Tien, J., Chen, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microcontact+printing+of+proteins+on+mixed+self-assembled+monolayers.">Microcontact printing of proteins on mixed self-assembled monolayers.</a> Langmuir. 18 (2), 519-523 (2002).</li><li>Lee, D., King, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microcontact+Printing+of+P-Selectin+Increases+the+Rate+of+Neutrophil+Recruitment+Under+Shear+Flow.">Microcontact Printing of P-Selectin Increases the Rate of Neutrophil Recruitment Under Shear Flow.</a> Biotechnology Progress. 24 (5), 1052-1059 .</li><li>Greenberg, A. W., Hammer, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+separation+mediated+by+differential+rolling+adhesion.">Cell separation mediated by differential rolling adhesion.</a> Biotechnol. Bioeng. 73 (2), 111-124 (2001).</li><li>Higuchi, A., Tsukamoto, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+separation+of+hepatocytes+and+fibroblasts+through+surface-modified+polyurethane+membranes.">Cell separation of hepatocytes and fibroblasts through surface-modified polyurethane membranes.</a> J. Biomed. Mater. Res. Part A. 71A (3), 470-479 (2004).</li><li>Alexeev, A., Verberg, R., Balazs, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Patterned+surfaces+segregate+compliant+microcapsules.">Patterned surfaces segregate compliant microcapsules.</a> Langmuir. 23 (3), 983-987 (2007).</li></ol>

وقد وصفت لنا بروتوكول لدراسة الخلية المسارات المتداول على السطوح مستقبلات منقوشة غير المتماثلة ملفقة باستخدام الطباعة microcontact 2. ويمكن استخدام هذه الصور لسطح المجهر الضوئي منقوشة يظهر التباين واضحا بين المناطق وPEG ف selectin لتأكيد ما إذا ختم بنجاح. ويمكن ملاحظة حا...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Human promyelocytic leukemia cells</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>ATCC</td>
<td>CCL-240</td>
<td>HL60 cells</td>
</tr>
<tr>
<td>Gold-coated glass slides</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>EMF</td>
<td>TA134</td>
<td>Gold slides</td>
</tr>
<tr>
<td>(1-Mercaptoundec-11-yl)tetra(ethylene glycol)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma-Aldrich</td>
<td>674508</td>
<td>PEG</td>
</tr>
<tr>
<td>Recombinant human P-selectin</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>R&amp;D Systems Inc.</td>
<td>ADP3-050</td>
<td>P-selectin</td>
</tr>
<tr>
<td>Bovine serum albumin</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Rockland Immunochemicals, Inc.</td>
<td>BSA-50</td>
<td>BSA</td>
</tr>
<tr>
<td>Dulbecco's phosphate buffered saline </td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Mediatech Inc.</td>
<td>21-030</td>
<td>DPBS</td>
</tr>
<tr>
<td>Sulfuric acid </td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma-Aldrich</td>
<td>339741</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Hydrogen peroxide</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma-Aldrich</td>
<td>316989</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

studying cell rolling trajectories on asymmetric receptor patterns

النزوح الأفقي للخلايا متعامدة مع تدفق سيل من قبل المتداول على أنماط مستقبلات غير المتناظر فرصة لتطوير أجهزة جديدة لفصل التسمية حرة وتحليل الخلايا 1. قد تستخدم مثل هذه الأجهزة التهجير الوحشي المستمر لتدفق الانفصال ، أو أنماط المستقبلات التي تعدل التصاق للتمييز بين الظواهر أو مستويات مختلفة من الخلايا مستقبلات التعبير. فهم طبيعة المسارات المتداول على الخلية المستقبلة للنمط ركائز ضرورية للهندسة من ركائز وتصميم مثل هذه الأجهزة. هنا ، علينا أن نظهر بروتوكول لدراسة مسارات المتداول على أنماط الخلية المستقبلة غير المتماثلة التي تدعم التصاق الخلية المتداول 2. ملفقة واضحة المعالم ، ميكرومتر النطاق أنماط ف selectin الطباعة باستخدام مستقبلات microcontact على الذهب المطلي الشرائح التي تم دمجها في غرفة التدفق. وقد تدفقت HL60 الخلايا معربا عن يجند PSGL - 1 3 عبر حقل من خطوط منقوشة وتصور على مجهر حقل مشرق مقلوب. الخلايا وتدحرجت على طول حواف مجنزرة يميل للأنماط ، مما أدى إلى انحراف الجانبي 1. كل خلية عادة تدحرجت لمسافة معينة على طول حواف نمط (كما هو موضح على حافة طول التعقب) ، فصل من الحافة ، ونمط reattached إلى المصب. رغم أن هذا الانفصال يجعل من الصعب تتبع مسار كامل من خلية من مدخل للخروج في غرفة التدفق ، وكانت تستخدم الجسيمات لتتبع برامج لتحليل والعائد على مسارات المتداول من الخلايا خلال الوقت عندما كانت تتحرك على مستقبل واحد نقوش الخط. ثم تم فحص مسارات للحصول على توزيعات السرعات المتداول الخلية وأطوال حافة تتبع لكل خلية لأنماط مختلفة. هذا البروتوكول هو مفيد لقياس مسارات المتداول على أنماط الخلية المستقبلة وتتعلق هذه المعايير الهندسية لمثل زاوية نمط وإجهاد القص. وسوف تكون هذه البيانات مفيدة لتصميم الأجهزة ميكروفلويديك لتسمية خالية من فصل الخلية وتحليلها.

Watch this Scientific Journal Video about Studying Cell Rolling Trajectories on Asymmetric Receptor Patterns at JoVE.com

Studying Cell Rolling Trajectories on Asymmetric Receptor Patterns

نحن تصف وضع بروتوكول لمراقبة وتحليل الخلية المسارات المتداول على ركائز مستقبلات نقوش غير المتماثلة. البيانات الناتجة هي مفيدة للهندسة من مستقبلات منقوشة ركائز للتسمية خالية من فصل الخلية وتحليلها.

دراسة مسارات المتداول على أنماط الخلية المستقبلة المتناظر

Lateral displacement of cells orthogonal to a flow stream by rolling on asymmetric receptor patterns presents an opportunity for development of new ...

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Microfabrication of Nanoporous Gold Patterns for Cell-material Interaction Studies

التصنيع الدقيق لأنماط ذهب نانوية مسامية للدراسات التفاعل الخلوي المواد

Nanostructured materials with feature sizes in tens of nanometers have enhanced the performance of several technologies, including fuel cells, biosensors, ...

Systematic Analysis of In Vitro Cell Rolling Using a Multi-well Plate Microfluidic System

Systematic Analysis of In Vitro Cell Rolling Using a Multi-well Plate Microfluidic System

التحليل المنهجي لل<em&gt; في المختبر</em&gt; الخليوي المتداول باستخدام نظام ميكروفلويديك لوحة متعددة جيدا

A major challenge for cell-based therapy is the inability to systemically target a large quantity of viable cells with high efficiency to tissues of ...

Cell Patterning on Photolithographically Defined 
Parylene-C: SiO2 Substrates

Cell Patterning on Photolithographically Defined 
Parylene-C: SiO2 Substrates

الزخرفة الخلية على Photolithographically معرفة Parylene-C: شافي<sub&gt; 2</sub&gt; ركائز

Cell patterning platforms support broad research goals, such as construction of predefined in vitro neuronal networks and the exploration of certain ...

Electronic Tongue Generating Continuous Recognition Patterns for Protein Analysis

اللسان الإلكترونية توليد أنماط الاعتراف المستمر لتحليل البروتين

In current protocol, a combinatorial approach has been developed to simplify the design and production of sensing materials for the construction of ...

Fluorescence Biomembrane Force Probe: Concurrent Quantitation of Receptor-ligand Kinetics and Binding-induced Intracellular Signaling on a Single Cell

مضان غشاء حيوي قوة دقق: الكميات المتزامنة من حركية مستقبلات يجند والتي يسببها ملزم بين الخلايا اشارة على خلية واحدة

Membrane receptor-ligand interactions mediate many cellular functions. Binding kinetics and downstream signaling triggered by these molecular interactions ...

Solid Lipid Nanoparticles (SLNs) for Intracellular Targeting Applications

Solid Lipid Nanoparticles SLNs for Intracellular Targeting Applications

الصلبة الدهون النانوية (SLNs) لاستهداف التطبيقات بين الخلايا

Nanoparticle-based delivery vehicles have shown great promise for intracellular targeting applications, providing a mechanism to specifically alter ...

Studying the Stoichiometry of Epidermal Growth Factor Receptor in Intact Cells using Correlative Microscopy

دراسة رياضيات الكيمياء من البشرة عامل نمو مستقبلات في الخلايا السليمة باستخدام الميكروسكوب المتلازم

This protocol describes the labeling of epidermal growth factor receptor (EGFR) on COS7 fibroblast cells, and subsequent correlative fluorescence ...

Human Neural Organoids for Studying Brain Cancer and Neurodegenerative Diseases

الأعضاء العصبية البشرية لدراسة سرطان الدماغ والأمراض العصبية

The lack of relevant in vitro neural models is an important obstacle on medical progress for neuropathologies. Establishment of relevant cellular models ...

A Macrophage Reporter Cell Assay to Examine Toll-Like Receptor-Mediated NF-kB/AP-1 Signaling on Adsorbed Protein Layers on Polymeric Surfaces

فحص خليه الضامة مراسل لفحص الأرقام مثل مستقبلات بوساطة NF-kB/AP-1 إشارات علي طبقات البروتين الممتف علي الأسطح البوليمريه

The persistent inflammatory host response to an implanted biomaterial, known as the foreign body reaction, is a significant challenge in the development ...

A Human 3D Extracellular Matrix-Adipocyte Culture Model for Studying Matrix-Cell Metabolic Crosstalk

A الإنسان 3D مصفوفة-الخلايا الشحمية نموذج ثقافة لدراسة مصفوفة خليه الأيض الأيضي

The extracellular matrix (ECM) plays a central role in regulating tissue homeostasis, engaging in crosstalk with cells and regulating multiple aspects of ...