Name: thermodynamics of membrane protein folding measured by fluorescence spectroscopy
Uploaded: 2011-04-28T15:00:00
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私たちは、彼女のデータの使用のために北京呉に感謝。この作品は、JEKにNSFのキャリア賞によってサポートされていました

1。膜タンパク質のフォールディングのための〜50 nmの直径小さな単層小胞（SUV車）の調製<ol><li> 1,2 -ジミリストイル- sn -グリセロ-3 -ホスホコリン（DMPC）、クロロホルム中脂質の溶液を保存用バイアルの量あたり20 mgで購入し、清浄なガラスバイアルに小分けされています。窒素ガスの層は、脂質の酸化を防ぐために、各バイアルに添加され、そしてバイアルをキャップし、パラフィ?...

<ol>
	<li>Shirley, B. A., Shirley, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Protein Folding and Stability. , 177-190 (1995).</li><li>Pace, C. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determination+and+Analysis+of+Urea+and+Guanidine+Hydrochloride+Denaturation+Curves.">Determination and Analysis of Urea and Guanidine Hydrochloride Denaturation Curves.</a> Methods Enzymol. 131, 266-279 (1986).</li><li>Lau, F. W., Bowie, J. U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Method+for+Assessing+the+Stability+of+a+Membrane+Protein.">A Method for Assessing the Stability of a Membrane Protein.</a> Biochemistry. 36, 5884-5892 (1997).</li><li>Burgess, N. K., Dao, T. P., Stanley, A. M., Fleming, K. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=&#946;-Barrel+Proteins+that+Reside+in+the+Escherichia+coli+Outer+Membrane+in+Vivo+Demonstrate+Varied+Folding+Behavior+in+Vitro.">&#946;-Barrel Proteins that Reside in the Escherichia coli Outer Membrane in Vivo Demonstrate Varied Folding Behavior in Vitro.</a> J. Biol. Chem. 283, 26748-26758 (2008).</li><li>Booth, P. J., Curnow, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Folding+scene+investigation:+membrane+proteins.">Folding scene investigation: membrane proteins.</a> Curr. Opin. Struct. Biol. 19, 8-13 (2009).</li><li>Hong, H., Tamm, L. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Elastic+coupling+of+integral+membrane+protein+stability+to+lipid+bilayer+forces.">Elastic coupling of integral membrane protein stability to lipid bilayer forces.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 101, 4065-4070 (2004).</li><li>Sanchez, K. M., Gable, J. E., Schlamadinger, D. E., Kim, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+Tryptophan+Microenvironment,+Soluble+Domain,+and+Vesicle+Size+on+the+Thermodynamics+of+Membrane+Protein+Folding:+Lessons+from+the+Transmembrane+Protein+OmpA.">Effects of Tryptophan Microenvironment, Soluble Domain, and Vesicle Size on the Thermodynamics of Membrane Protein Folding: Lessons from the Transmembrane Protein OmpA.</a> Biochemistry. 47, 12844-12852 (2008).</li></ol>

現在のプロトコルは、トリプトファン残基を含む膜関連タンパク質およびペプチドの曲線を展開の生成を説明します。ここでは、トリプトファンの蛍光がタンパク質が折り畳まと合成脂質小胞に挿入、または溶液中で折り畳まれているかどうかを反映することを前提としています。追加のような変性剤濃度との自由エネルギーの二状態フォールディングと線形依存性などの仮定、、現在のレ?...

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<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>DMPC</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Avanti Polar Lipids</td>
<td>850345C</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Urea</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>MP Biochemicals</td>
<td>04821527</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Potassium Phosphate Dibasic</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fisher</td>
<td>P288</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Potassium Phosphate Monobasic</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fisher</td>
<td>P285</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

thermodynamics of membrane protein folding measured by fluorescence spectroscopy

膜タンパク質の折り畳みは、基本的な健康関連の両方の意味を持つ新たなトピックです。細胞の基礎となってタンパク質のこのユビキタス家族の折りたたみの包括的な研究の必要性の膜タンパク質の豊富さ。さらに、ミスフォールドタンパク質に関連する疾患を特徴付けるために我々の能力の進歩は、タンパク質の折り畳みの分野で重要な実験と理論の努力を動機としている。この重要な分野で急速な進歩は、残念なことに、膜タンパク質や折りたたみ機構の複雑さに関連する固有の課題によって妨げられている。ここでは、Eからの代表的な内在性膜タンパク質を、変性剤、ΔG · H 2 Oの存在下で展開のギブス自由エネルギーの熱力学特性を測定するための実験手順の概要を説明大腸菌 。このプロトコルは、変性剤濃度の関数としての折り返しと展開した状態の平衡個体数を決定するために蛍光分光法の応用に焦点を当てています。合成脂質小胞だけでなく、データ解析の手順の重要なステップの準備のための実験的な考慮事項が強調表示されています。この手法は汎用性があり、温度やpH、同様の脂質とミセルの様々な折りたたみ環境などの変性剤の様々なタイプ、と追求されることがあります。現在のプロトコルは、以下に説明する一連の基準を満たす任意の膜または可溶性タンパク質に一般化することができるものです。

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Thermodynamics of Membrane Protein Folding Measured by Fluorescence Spectroscopy

トリプトファン蛍光法による膜タンパク質の折り畳みのギブス自由エネルギーを得るためにこのビデオの記事の詳細は、実験手順。

蛍光分光法により測定膜タンパク質フォールディングの熱力学

Membrane protein folding is an emerging topic with both fundamental and health-related significance.  The abundance of membrane proteins in cells ...

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