Name: immunocytochemistry: human neural stem cells
Uploaded: 2007-08-24T00:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Immunocytochemistry: Human Neural Stem Cells at JoVE.com

<p style=";text-align:right;direction:rtl"> فإن الكتاب أن نعترف الدكتور فيليب H. شوارتز من العصبية الوطنية الجذعية البشرية الموارد خلية في مستشفى للأطفال ، أورانج كاونتي معهد البحوث لتوفير hNSPC الثقافات والدكتور غاري Bassell في جامعة إيموري للتعليم الأولي في تقنية تلوين parafilm. </p>

<p class="jove_title" style=";text-align:right;direction:rtl"> اليوم 1 : خلايا إعداد Coverslips زجاج الألمانية والبذر </p><p class="jove_content" style=";text-align:right;direction:rtl"> <em>ملاحظة</em> : coverslips الزجاج الألماني غالبا ما تكون الأفضل لزراعة الخلايا الجذعية الأولية العصبي والخلايا العصبية. نحن نستخدم بروتوكول التنظيف التالية لتحسين التصاق الخلايا وانتشار...

<ol>
	<li>Flanagan, L. A., Chou, J., Falet, H., Neujahr, R., Hartwig, J. H., Stossel, T. P., Filamin, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Filamin+A,+the+Arp2/3+complex,+and+the+morphology+and+function+of+cortical+actin+filaments+in+human+melanoma+cells.">Filamin A, the Arp2/3 complex, and the morphology and function of cortical actin filaments in human melanoma cells.</a> <em style='font-style: italic'>J. Cell Biol</em>. <b>155</b>, 511-518 (2001).</li><li>Flanagan, L. A., Rebaza, L. M., Derzic, S., Schwartz, P. H., Monuki, E. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulation+of+human+neural+precursor+cells+by+laminin+and+integrins.">Regulation of human neural precursor cells by laminin and integrins.</a> <em style='font-style: italic'>J. Neurosci. Res</em>. <b>83</b>, 845-856 (2006).</li><li>Flanagan, L. A., Ziaeian, B., Palmer, T., Schwartz, P. H., Loring, J. F., Wesselschmidt, R. W., Schwartz, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunocytochemical+analysis+of+stem+cells.">Immunocytochemical analysis of stem cells.</a> <em style='font-style: italic'>In Human Stem Cell Manual: A Laboratory Guide</em>. , (2007).</li><li>Marchenko, S., Flanagan, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Passaging+Human+Neural+Stem+Cells.">Passaging Human Neural Stem Cells.</a> <em style='font-style: italic'>Journal of Visualized Experiments</em>. <b>7</b>, (2007).</li><li>Marchenko, S., Flanagan, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Counting+Human+Neural+Stem+Cells.">Counting Human Neural Stem Cells.</a> <em style='font-style: italic'>Journal of Visualized Experiments</em>. <b>7</b>, (2007).</li></ol>

<p style=";text-align:right;direction:rtl"> يصف هذا البروتوكول إجراء immunostaining hNSPCs لأنه يقلل من حجم الأجسام المضادة الضرورية ويعطي موثوقة تلوين الخلية. الإجراء كما هو موضح هو أفضل لمستضدات الخلايا ، ولكن يمكن تعديلها لطخه جزيئات سطح الخلية أو لتعزيز تلطيخ من الهيكل الخلوي. </p>

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>German glass (Deutsche Spiegelglas) coverslips</td>
<td>Tool</td>
<td>Carolina Biological Supply Company</td>
<td>WW-63-3029</td>
<td>12,15,18, 22, 25 mm coverslips available</td>
</tr>
<tr>
<td>Liquinox phosphate-free detergent</td>
<td>Reagent</td>
<td>Sigma</td>
<td>Z273279</td>
<td>very viscous</td>
</tr>
<tr>
<td>Poly-D-lysine hydrobromide</td>
<td>Reagent</td>
<td>Sigma</td>
<td>P7280</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Laminin, natural mouse</td>
<td>Reagent</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>23017-015</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>EMEM (1X)</td>
<td>Reagent</td>
<td>Mediatech</td>
<td>MT-10-010-CV</td>
<td>Distributed by Fisher under the indicated catalog #</td>
</tr>
<tr>
<td>24 well plate</td>
<td>Tool</td>
<td>Fisher</td>
<td>08-772-1</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Triton X-100</td>
<td>Reagent</td>
<td>Fisher</td>
<td>BP151-500</td>
<td>very viscous</td>
</tr>
<tr>
<td>Paraformaldehyde</td>
<td>Reagent</td>
<td>Sigma</td>
<td>P6148</td>
<td>potential carcinogen, use caution when using it in powder and solution form</td>
</tr>
<tr>
<td>Bovine Serum Albumin, IgG-free</td>
<td>Reagent</td>
<td>Jackson Immunoresearch</td>
<td>001-000-161</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Hoechst 33342</td>
<td>Reagent</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>H-1399</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Vectashield</td>
<td>Reagent</td>
<td>Vector Laboratories</td>
<td>H-1000</td>
<td>viscous</td>
</tr>		</tbody>
		</table>
		</div>
			<div>
					</div>
		

immunocytochemistry: human neural stem cells

<p style=";text-align:right;direction:rtl"> كيمياء سيتولوجية مناعية هو وسيلة قوية للغاية واضحة إلى حد ما لتحديد وجود والتطويع اللغوي التحت خلوية ، والوفرة النسبية للمستضد من الفائدة ، والأكثر شيوعا وهو بروتين في الخلايا المستزرعة. يعرض هذا البروتوكول وسيلة سهلة لمتابعة سلسلة من الخطوات التي من شأنها تمكين الباحثين للحفاظ على الأجسام المضادة الابتدائي والثانوي في حين الحصول على الجودة العالية والنوعية والبيانات الكمية استنساخه من تلوين الخاصة بهم. هناك جانبان لهذا البروتوكول الذي يساعد على الحفاظ على حجم الأجسام المضادة اللازمة للتلوين. لأحد ، وتزرع الخلايا على coverslips الصغيرة الدائرية التي يتم وضعها في الآبار من نسيج لوحة الثقافة. بعد التثبيت ، يمكن إزالة الخلايا على coverslips من الآبار لوحة. لتلوين الأجسام المضادة ، هو مقلوب ساترة مع الخلايا على قطرة صغيرة من المحلول على الضد parafilm ومغطاة بقطعة الثاني من parafilm لمنع جفاف. باستخدام هذا الأسلوب ، وهناك حاجة فقط ~ 25 ميكرولتر من محلول الأجسام المضادة لكل ساترة (أو عينة) ليكون الملون. يصف هذا البروتوكول immunostaining من الخلايا الجذعية البشرية / السلائف العصبي (hNSPCs) ، ولكن يمكن استخدامها لكثير من أنواع الخلايا الأخرى. </p>

Watch this Scientific Journal Video about Immunocytochemistry: Human Neural Stem Cells at JoVE.com

Immunocytochemistry: Human Neural Stem Cells

<p class="jove_content">كيمياء سيتولوجية مناعية قوية هو وسيلة لتحديد وجود والتطويع اللغوي التحت خلوية ، والوفرة النسبية للمستضد من الفائدة في الخلايا المستزرعة. يعرض هذا البروتوكول وسيلة سهلة لمتابعة سلسلة من الخطوات التي من شأنها تمكين أحد الأجسام المضادة للحفاظ على والحصول على أقصى استفادة من تلطيخ واحد.</p>

كيمياء سيتولوجية مناعية : الخلايا الجذعية العصبية البشرية

Immunocytochemistry is a very powerful and fairly straightforward method for determining the presence, subcellular localization, and relative abundance of ...

Research

JoVE Journal

Biology

Propagation of Human Embryonic Stem (ES) Cells

Propagation of Human Embryonic Stem ES Cells

انتشار الخلايا الجنينية البشرية (ES) الجذعية

Transfecting Human Neural Stem Cells with the Amaxa Nucleofector

Transfecting الإنسان الخلايا الجذعية العصبية مع Nucleofector Amaxa

Transfection of primary mammalian neural cells, such as human neural stem/precursor cells (hNSPCs), with commonly used cationic lipid transfection ...

Counting Human Neural Stem Cells

عد الخلايا الجذعية العصبية البشرية

Knowledge of the exact number of viable cells in a given volume of a cell suspension is required for many routine tissue culture manipulations, such as ...

Passaging Human Neural Stem Cells

الركض الخلايا الجذعية العصبية البشرية

The ability to manipulate human neural stem/precursor cells (hNSPCs) in vitro provides a means to investigate their utility as cell transplants for ...

Derivation of Human Embryonic Stem Cells by Immunosurgery

اشتقاق الخلايا الجذعية الجنينية البشرية التي Immunosurgery

The ability of human embryonic stem cells to self-renew and differentiate into all cell types of 
the body suggests that they hold great promise for both ...

Mouse Epidermal Neural Crest Stem Cell (EPI-NCSC) Cultures

Mouse Epidermal Neural Crest Stem Cell EPI-NCSC Cultures

الماوس البشرة الجذعية العصبية خلية كريست (EPI - NCSC) الثقافات

EPI-NCSC are remnants of the embryonic neural crest in an adult location, the bulge of hair follicles. They are multipotent stem cells that have the ...

Chromatin Immunoprecipitation from Human Embryonic Stem Cells

مناعي لونين من الخلايا الجذعية الجنينية البشرية

The functional and structural complexity of the myriad of cells in metazoan organisms arises from a small number of stem cells. Stem cells are ...

Culture and Maintenance of Human Embryonic Stem Cells  

الثقافة والمحافظة على الخلايا الجذعية الجنينية البشرية

Human embryonic stem (hES) cells must be monitored and cared for in order to maintain healthy, undifferentiated cultures. At minimum, the cultures must be ...

Freezing and Thawing Human Embryonic Stem Cells

تجميد والذوبان الخلايا الجذعية الجنينية البشرية

Since James Thomson et al developed a technique in 1998 to isolate and grow hES in culture, freezing cells for later use and thawing and expanding cells ...

Differentiation of Embryonic Stem Cells into Oligodendrocyte Precursors

تمايز الخلايا الجذعية الجنينية في السلائف Oligodendrocyte

Oligodendrocytes are the myelinating cells of the central nervous system. For regenerative cell therapy in demyelinating diseases, there is significant ...