Name: silicon microchips for manipulating cell-cell interaction
Uploaded: 2007-08-30T00:00:00
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<p> Os autores agradecem Salman Khetani, Jared Allen, Chris Flaim, e Austin Derfus para discussões úteis durante o processo de projetar esse dispositivo. Este trabalho foi financiado pela National Science Foundation Faculdade Early Career Development Program, National Institutes of Health / National Institute of Diabetes e Doenças Digestivas e Renais, e David e Lucile Packard Foundation. EEH foi apoiado por uma Kirschstein Ruth L. Prêmio Nacional de Serviço de Pesquisa. </p>

<p class="jove_title"> Preparação de culturas de células: </p><ol><li> Comece com peças de silício revestido com plasma tratado com poliestireno. </li><li> Revestimento com peças apropriadas proteínas da matriz extracelular para suporte de fixação do tipo de célula desejada. Para hepatócitos, incubar em 50 g / ml Colágeno-1 solução a 37 ° C por 45 min. Para fibroblastos 3T3, nenhuma matriz é necessário. </li><li> Bloqueio peças com partes complementares na configuração de contato. </li><li> Mergulhe em álcool 70% para um m?...

<ol>
	<li>Hui, E. E., Bhatia, S. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Micromechanical+control+of+cell-cell+interactions.">Micromechanical control of cell-cell interactions.</a> <em style='font-style: italic'>Proceedings of the National Academy of Sciences</em>. <b>104</b>, 5722-5726 (2007).</li><li>Bhatia, S. N., Balis, U. J., Yarmush, M. L., Toner, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+cell-cell+interactions+in+preservation+of+cellular+phenotype:+cocultivation+of+hepatocytes+and+nonparenchymal+cells.">Effect of cell-cell interactions in preservation of cellular phenotype: cocultivation of hepatocytes and nonparenchymal cells.</a> <em style='font-style: italic'>The FASEB Journal</em>. <b>13</b>, 1883-1900 (1999).</li><li>El-Ali, J., Sorger, P. K., Jensen, K. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cells+on+Chips.">Cells on Chips.</a> <em style='font-style: italic'>Nature</em>. <b>442</b>, 403-411 (2006).</li></ol>

<p> Este sistema é o único que permite que a organização espacial do tecido a ser manipulada de forma dinâmica a nível celular. Conseqüentemente, este dispositivo permitiu uma série de novas experiências biológicas, abrangendo temas como a dinâmica de sinalização intercelular, entre em contato mediada contra sinalização solúveis, as decisões destino celular, toxicologia e crosstalk celular. Este dispositivo deve ser amplamente generalizável desde o substrato plástico a cultura é a cultura padrão do tecido, eo sistema é com...

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		<div>
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		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
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		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Silicon Comb Substrates</td>
<td>Tool</td>
<td>N/A</td>
<td>N/A</td>
<td>Parts are available for collaborative research projects. Please contact Elliot Hui (eehui @ alum . mit . edu) or Sangeeta Bhatia (sbhatia @ mit . edu).</td>
</tr>		</tbody>
		</table>
		</div>
			<div>
					</div>
		

silicon microchips for manipulating cell-cell interaction

<p class="jove_content"> O papel do microambiente celular é reconhecida como crucial para determinar o destino da célula e função em praticamente todos os tecidos de mamíferos de desenvolvimento para transformação maligna. Em particular, a interação com estroma vizinho tem sido implicado em uma infinidade de fenômenos biológicos, no entanto, as técnicas convencionais limitar a capacidade de interrogar os elementos espaciais e dinâmica de tais interações. </p><p class="jove_content"> Em Cultura Reconfigurável micromecânico (RC), que empregam um substrato de silício microusinados com partes móveis para controlar dinamicamente interações célula-célula através de reposicionamento mecânica. Anteriormente, este método tem sido aplicado para investigar comunicação intercelular em co-culturas de hepatócitos e células não-parenquimatosas, demonstrando interações dependentes do tempo e uma gama limitada de sinalização solúvel <sup>1.</sup> </p><p class="jove_content"> Aqui, descrevemos em detalhes a preparação e utilização do sistema RC. Começamos por demonstrar a movimentação das partes do dispositivo usando uma pinça, inclusive atuando entre a abertura e configurações de contacto (populações de células separadas por um intervalo de 80 mM estreito, ou em contato íntimo direta). Em seguida, detalhamos o processo de preparação dos substratos para a cultura, eo multi-etapa do processo de semeadura de células necessárias para a obtenção de monocamadas de células confluentes. Usando a microscopia ao vivo, nós então ilustrar tempo real manipulação de células entre as diferentes possíveis configurações experimentais. Finalmente, demonstrar os passos necessários, a fim de regenerar a superfície do dispositivo para reutilização: tolueno e limpeza piranha, revestimento de isopor, e tratamento de plasma de oxigênio. </p>

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Silicon Microchips for Manipulating Cell-cell Interaction

<p class="jove_content">Este artigo descreve uma abordagem experimental para a regulação dinâmica de interações célula-célula entre células aderentes em escala micrométrica. Manipulação da comunicação intercelular entre hepatócitos e células do estroma é demonstrada. A plataforma desenvolvida permite a investigação de interações célula-célula em uma variedade de processos biológicos, incluindo o desenvolvimento e patogênese.</p>

Microchips de silício para Manipulação de célula-Interação

The role of the cellular microenvironment is recognized as crucial in determining cell fate and function in virtually all mammalian tissues from ...

Research

JoVE Journal

Biology

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Biologia

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