Name: silicon microchips for manipulating cell-cell interaction
Uploaded: 2007-08-30T00:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Silicon Microchips for Manipulating Cell-cell Interaction at JoVE.com

<p> Författarna tackar Salman Khetani, Jared Allen, Chris Flaim, och Austin Derfus för bra diskussioner under processen för att utforma denna enhet. Detta arbete stöddes av National Science Foundation fakulteten Early Career Development Program, National Institutes of Health / National Institute of Diabetes and Digestive-och njursjukdomar, och David och Lucile Packard Foundation. EEH stöddes av en Ruth L. Kirschstein National Research Service Award. </p>

<p class="jove_title"> Beredning av cellkulturer: </p><ol><li> Börja med silikon delar belagda med plasma-behandlade polystyren. </li><li> Coat delar med lämpliga extracellulära matrix proteiner för att stödja fastsättning av önskad celltyp. För hepatocyter, inkubera i 50 g / ml Kollagen-1-lösning vid 37 ° C i 45 min. För 3T3 fibroblaster, ingen matris behövs. </li><li> Lås delar med kompletterande delar i kontakt konfiguration. </li><li> Blötlägg i 70% etanol i minst 10 min för att sterilisera. Skölj 2x i DDH <sub>2</sub> O, o...

<ol>
	<li>Hui, E. E., Bhatia, S. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Micromechanical+control+of+cell-cell+interactions.">Micromechanical control of cell-cell interactions.</a> <em style='font-style: italic'>Proceedings of the National Academy of Sciences</em>. <b>104</b>, 5722-5726 (2007).</li><li>Bhatia, S. N., Balis, U. J., Yarmush, M. L., Toner, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+cell-cell+interactions+in+preservation+of+cellular+phenotype:+cocultivation+of+hepatocytes+and+nonparenchymal+cells.">Effect of cell-cell interactions in preservation of cellular phenotype: cocultivation of hepatocytes and nonparenchymal cells.</a> <em style='font-style: italic'>The FASEB Journal</em>. <b>13</b>, 1883-1900 (1999).</li><li>El-Ali, J., Sorger, P. K., Jensen, K. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cells+on+Chips.">Cells on Chips.</a> <em style='font-style: italic'>Nature</em>. <b>442</b>, 403-411 (2006).</li></ol>

<p> Detta system är unikt genom att det möjliggör den rumsliga organisationen av vävnad att vara dynamiskt manipuleras på cellnivå. Därför har denna enhet möjligt för ett antal nya biologiska experiment, som spänner över ämnen som intercellulära signaler dynamik, kontakt-medierad kontra lösliga signalering, cell beslut ödet, toxikologi, och cellulära överhörning. Denna enhet bör ges stor generaliserbara eftersom kulturen substratet är standard vävnadsodling plast, och systemet är kompatibelt med standard kultur metoder oc...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Silicon Comb Substrates</td>
<td>Tool</td>
<td>N/A</td>
<td>N/A</td>
<td>Parts are available for collaborative research projects. Please contact Elliot Hui (eehui @ alum . mit . edu) or Sangeeta Bhatia (sbhatia @ mit . edu).</td>
</tr>		</tbody>
		</table>
		</div>
			<div>
					</div>
		

silicon microchips for manipulating cell-cell interaction

<p class="jove_content"> Roll cellulära mikromiljön redovisas som avgörande för cellens öde och funktion i stort sett alla däggdjursvävnader från utveckling till maligna omvandling. Framför allt har samverkan med angränsande stroma varit inblandad i en uppsjö av biologiska fenomen, men konventionella tekniker begränsa möjligheten att förhöra den rumsliga och dynamiska inslag av sådana interaktioner. </p><p class="jove_content"> I Mikromekaniska Rekonfigurerbara Kultur (RC), använder vi en micromachined kiselsubstrat med rörliga delar för att dynamiskt styra cell-cell interaktioner genom mekanisk ompositionering. Tidigare har denna metod använts för att undersöka kommunikationen mellan i samarbete kulturer av hepatocyter och icke-parenkymceller, vilket visar tidsberoende interaktion och ett begränsat sortiment för lösligt signalering <sup>1.</sup> </p><p class="jove_content"> Här beskriver vi i detalj beredning och användning av RC-systemet. Vi börjar med att visa att hanteringen av enheten delar med pincett, inklusive aktivering mellan gapet och konfigurationer kontakt (cellpopulationer åtskilda av en smal 80-ìm lucka, eller i direkt intim kontakt). Sedan vi detalj förberedelsen av substrat för kulturen, och den i flera steg cell seedning process som krävs för att erhålla confluent cell monolager. Använda bor mikroskopi, illustrerar vi sedan i realtid manipulering av celler mellan de olika möjliga experimentella konfigurationer. Slutligen visar vi de åtgärder som krävs för att regenerera enheten ytan för återanvändning: toluen och Piranha rengöring, polystyren beläggning, och syre plasma behandling. </p>

Watch this Scientific Journal Video about Silicon Microchips for Manipulating Cell-cell Interaction at JoVE.com

Silicon Microchips for Manipulating Cell-cell Interaction

<p class="jove_content">Den här artikeln beskriver en experimentell metod för dynamisk reglering av cell-cell interaktioner mellan anhängare celler på en mikrometer skala. Manipulering av intercellulära kommunikationen mellan hepatocyter och stromaceller cellen visas. Den utvecklade plattformen möjliggör undersökning av cell-cell interaktioner i olika biologiska processer, inklusive utveckling och patogenes.</p>

Silicon mikrochips för Manipulera cell-cell interaktion

The role of the cellular microenvironment is recognized as crucial in determining cell fate and function in virtually all mammalian tissues from ...

Research

JoVE Journal

Biology

Using Laser Tweezers For Manipulating Isolated Neurons In Vitro

Använda Laser pincett för att manipulera enstaka nervceller i Vitro

In this paper and video, we describe the protocols used in our laboratory to study the targeting preferences of regenerating cell processes of adult ...

Bimolecular Fluorescence Complementation (BiFC) Assay for Protein-Protein Interaction in Onion Cells Using the Helios Gene Gun

Bimolecular Fluorescence Complementation BiFC Assay for Protein-Protein Interaction in Onion Cells Using the Helios Gene Gun

Bimolecular Fluorescens komplement (BiFC) analys av protein-protein interaktion i lök celler med Helios Gene Gun

Investigation of gene function in diverse organisms relies on knowledge of how the gene products interact with each other in their normal cellular ...

Automated Hydrophobic Interaction Chromatography Column Selection for Use in Protein Purification

Automatiserad Hydrofob Interaktion kromatografikolonn val för användning i Protein Purification

In contrast to other chromatographic methods for purifying proteins (e.g. gel filtration, affinity, and ion exchange), hydrophobic interaction ...

Avidity-based Extracellular Interaction Screening (AVEXIS) for the Scalable Detection of Low-affinity Extracellular Receptor-Ligand Interactions

Avidity-based Extracellular Interaction Screening AVEXIS for the Scalable Detection of Low-affinity Extracellular Receptor-Ligand Interactions

Aviditet-baserad Extracellulär Interaktion Screening (AVEXIS) för den skalbara Detektion av låg-affinitets extracellulär receptor-ligand-interaktioner

Extracellular protein:protein interactions between secreted or membrane-tethered proteins are critical for both initiating intercellular communication and ...

A Liquid Phase Affinity Capture Assay Using Magnetic Beads to Study Protein-Protein Interaction: The Poliovirus-Nanobody Example

En vätskefas affinitetsinfångning Analys med användning av magnetiska pärlor för att studera protein-proteininteraktion: polioviruset-Nanobody Exempel

In this article, a simple, quantitative, liquid phase affinity capture assay is presented. Provided that one protein can be tagged and another protein ...

Manipulating the Murine Lacrimal Gland

Manipulera Murin tårkörteln

The lacrimal gland (LG) secretes aqueous tears necessary for maintaining the structure and function of the cornea, a transparent tissue essential for ...

Identifying Protein-protein Interaction Sites Using Peptide Arrays

Identifiera protein-proteininteraktion webbplatser Använda peptid Arrays

Protein-protein interactions mediate most of the processes in the living cell and control homeostasis of the organism. Impaired protein interactions may ...

Inducible LAP-tagged Stable Cell Lines for Investigating Protein Function, Spatiotemporal Localization and Protein Interaction Networks

Inducerbara LAP-märkta stabila cellinjer för att undersöka proteiners funktion, Spatiotemporal Lokalisering och proteininteraktioner nätverk

Multi-protein complexes, rather than single proteins acting in isolation, often govern molecular pathways regulating cellular homeostasis. Based on this ...

Luciferase Complementation Imaging Assay in <em>Nicotiana benthamiana</em> Leaves for Transiently Determining Protein-protein Interaction Dynamics

Luciferase Complementation Imaging Assay in Nicotiana benthamiana Leaves for Transiently Determining Protein-protein Interaction Dynamics

Luciferas komplettering Imaging test i <em>Nicotiana benthamiana</em> blad för övergående bestämma Protein-protein interaktioner Dynamics

Protein-protein interactions are fundamental mechanisms for relaying signal transduction in most cellular processes; therefore, identification of novel ...

Visualization of DNA Repair Proteins Interaction by Immunofluorescence

Visualisering av DNA Reparation Proteiner Interaktion genom Immunofluorescens

Mammalian cells are constantly exposed to chemicals, radiations, and naturally occurring metabolic by-products, which create specific types of DNA ...