Name: generation of neural stem cells from discarded human fetal cortical tissue
Uploaded: 2011-05-25T12:00:00
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HD054347와 VLS에 NS063997 - 01 :이 작품은 국립 보건원에 의해 부분적으로 지원되었다. 이 작품은 또한 건강 계약 # C024324 VLS로의 뉴욕 국무부를 통해 엠파이어 스테이트 줄기 세포 기금에 의해 부분적으로 지원되었다. 의견 여기 표현은 전적으로 저자의 견해이며, 반드시 엠파이어 스테이트 줄기 세포위원회, 건강의 뉴욕 국무부, 또는 뉴욕주 분들을 반영하지 않습니다. VLS는 도리스 듀크 임상 과학자 발달 수상자입니다. 또한 안티 - O1, 안티 - O4 항체 자신의 선물을 교수 티모시 Vartanian 감사합니다.

1. 해부 및 신경 줄기 세포 문화의 유지 관리를위한 솔루션 및 자료 준비 <ol><li> 미리 100ml 해부 매체 (넉아웃 DMEM/F12, Invitogen)을 준비하고 냉동. </li><li> Prepare100 ML 문화 매체 (줄기 프로 NSC SFM, Invitrogen)와 37 ° 보관 물을 욕조에 C. </li><li> 세포의 장기 cryopreservation에 대한 셀 - 냉동 매체 (녹아웃 DMEM/F12 +10 % FBS + 5% DMSO)를 준비합니다. </li><li> 원하는 경우, 조직 고정을위한 4 % paraformaldehyde (PFA)를 준비합...

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	<li>Gage, F. H., Ray, J., Fisher, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation,+characterization,+and+use+of+stem+cells+from+the+CNS.">Isolation, characterization, and use of stem cells from the CNS.</a> Annu. Rev. Neurosci. 18, 159-192 (1995).</li><li>Vescovi, A. L., Snyder, E. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Establishment+and+properties+of+neural+stem+cell+clones:+plasticity+in+vitro+and+in+vivo.">Establishment and properties of neural stem cell clones: plasticity in vitro and in vivo.</a> Brain Pathol. 9, 569-598 (1999).</li><li>Schwartz, P., Bryant, P., Fuja, T., Su, H., O'Dowd, D., Klassen, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+characterization+of+neural+progenitor+cells+from+post-mortem+human+cortex.">Isolation and characterization of neural progenitor cells from post-mortem human cortex.</a> J Neurosci Res. 74, 838-851 (2003).</li><li>Martinez-Serrano, A., Rubio, F. 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J., Batiz, L. F., Neal, J., Lian, G., Bundock, E., Lu, J., Hsiao, Y. C., Diamond, R., Mei, D., Banham, A. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Disruption+of+neural+progenitors+along+the+ventricular+and+subventricular+zones+in+periventricular+heterotopia.">Disruption of neural progenitors along the ventricular and subventricular zones in periventricular heterotopia.</a> Hum Mol Genet. 18, 497-516 (2009).</li><li>Esposito, G., Imitola, J., Lu, J., De Filippis, D., Scuderi, C., Ganesh, V. S., Folkerth, R., Hecht, J., Shin, S., Iuvone, T., Chesnut, J., Steardo, L., Sheen, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genomic+and+functional+profiling+of+human+Down+syndrome+neural+progenitors+implicates+S100B+and+aquaporin+4+in+cell+injury.">Genomic and functional profiling of human Down syndrome neural progenitors implicates S100B and aquaporin 4 in cell injury.</a> Hum Mol Genet. 17, 440-457 (2008).</li><li>Esposito, G., Scuderi, C., Lu, J., Savani, C., De Filippis, D., Iuvone, T., Steardo, L. J. r., Sheen, V., Steardo, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=S100B+induces+tau+protein+hyperphosphorylation+via+Dickopff-1+up-regulation+and+disrupts+the+Wnt+pathway+in+human+neural+stem+cells.">S100B induces tau protein hyperphosphorylation via Dickopff-1 up-regulation and disrupts the Wnt pathway in human neural stem cells.</a> J Cell Mol Med. 12, 914-927 (2008).</li><li>Flax, J. D., Aurora, S., Yang, C., Simonin, C., Wills, A. M., Billinghurst, L. L., Jendoubi, M., Sidman, R. L., Wolfe, J. H., Kim, S. U., Snyder, E. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Engraftable+human+neural+stem+cells+respond+to+developmental+cues,+replace+neurons,+and+express+foreign+genes.">Engraftable human neural stem cells respond to developmental cues, replace neurons, and express foreign genes.</a> Nat Biotechnol. 16, 1033-1039 (1998).</li><li>Fults, D., Pedone, C. A., Morse, H. G., Rose, J. W., McKay, R. 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A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+method+for+the+rapid+and+long+term+growth+of+human+neural+precursor+cells.">A new method for the rapid and long term growth of human neural precursor cells.</a> J Neurosci Methods. 85, 141-152 (1998).</li></ol>

문화 신선한 조직 및 생산 인간의 세포 라인에 대한 다양한 접근 방법이 있습니다. 역사적으로, 신선한 조직은 수확되었고 중추 신경계의 여러 세포 유형을 생성하는 즉시 양식. 이 접근법은 그러나 명확하게 얻은 인간 샘플의 경우에는 일반적으로 매우 작은 수있는 샘플의 수에 따라 제한됩니다. 조작의 최소한의 정도로봤을 때, 갓 교양 신경 세포가 확장 culturing에서 잠재적인 유물을 제한함으?...

<table border="1"><tbody><tr><th> 시약의 이름 </th><th> 회사 </th><th> 카탈로그 번호 </th><th> 댓글 (옵션) </th></tr><tr><td> 녹아웃 DMEM/F12 </td><td> Invitrogen </td><td> 12660-012 </td><td> 해리 매체 </td></tr><tr><td> 스템 프로 NSC SFM </td><td> Invitrogen </td><td> A10509 - 01 </td><td> 문화 매체 </td></tr><tr><td> 태아 소 혈청 </td><td> Invitrogen </td><td> 10091-148 </td><td> 냉동 매체 </td></tr><tr><td> 행크스 솔루션 (- CA 2 +, - MG 2 +) </td><td> Invitrogen </td><td> 14175-095 </td><td> 해리 매체 </td></tr><tr><td> DMSO </td><td> 시그마 - 알드리치 </td><td> D2650 </td><td> 냉동 매체 </td></tr><tr><td> EDTA (에틸렌 다이아 민 테트라 초산) </td><td> 시그마 - 알드리치 </td><td> 431788 </td><td> 해리 매체 </td></tr><tr><td> Paraformaldehyde </td><td> 시그마 - 알드리치 </td><td> 158127 </td><td> 고정 솔루션 </td></tr><tr><td> bFGF </td><td> R &amp; D </td><td> 234 - FSE </td><td> 차별화 매체 </td></tr><tr><td> 쉬이잇 </td><td> R &amp; D </td><td> 1845 - SH </td><td> 차별화 매체 </td></tr><tr><td> PDGF - AA </td><td> R &amp; D </td><td> 221 - AA </td><td> 차별화 매체 </td></tr><tr><td> B27 </td><td> Invitrogen </td><td> 17504-044 </td><td> 차별화 매체 </td></tr><tr><td> 마우스 방지 MAP2 </td><td> 시그마 - 알드리치 </td><td> M2320 </td><td> 1:200 </td></tr><tr><td> 토끼 방지 DCX </td><td> 세포 신호 </td><td> 4604s </td><td> 1:200 </td></tr><tr><td> 토끼 방지 GFAP </td><td> DAKO </td><td> Z0334 </td><td> 1:200 </td></tr><tr><td> 토끼 방지 S100B </td><td> DAKO </td><td> Z0311 </td><td> 1:200 </td></tr><tr><td> 토끼 방지 O1 </td><td> 교수 티모시 Vartanian의 선물 * </td><td></td><td> 1시 50분 </td></tr><tr><td> 토끼 방지 O4 </td><td> 교수 티모시 Vartanian의 선물 * </td><td></td><td> 1시 50분 </td></tr><tr><td> 40μm 셀 스트레이너 </td><td> BD 팰컨 </td><td> 352340 </td><td></td></tr></tbody></table> * 티모시 Vartanian, MD, 박사, 신경과 및 신경 과학, 웨일 코넬 메디컬 칼리지, 뉴욕, 미국학과

generation of neural stem cells from discarded human fetal cortical tissue

신경 줄기 세포 (NSCs)은 대뇌 피질 판의 개발 중에 심실 영역 neuroepithelium 함께 거주. 이러한 초기 progenitors 궁극적으로 중급 progenitors을 일으키다 이상, 대뇌 피질을 형성 다양한의 연결 및 glial 세포 subtypes. 폐기 정상 태아 조직에서 인간 NSCs을 (그래서 neurospheres라고도 함) 생성 및 확장하는 능력은 바로 정상적인 인간 NSC 개발 1-5의 기능 측면을 연구하기 위해있는 수단을 제공합니다. 이 접근법은 또한이를 통해 조상의 증식, 이주 및 차별 6-9를 변경 질병 프로세스를 식별할 수있는 기회를 affording, 알려진 신경 질환에서 NSCs의 생성 방향으로 이동하실 수 있습니다. 우리는 빠른 속도로 알츠하이머 질병 표현형 10,11에 기여할 수 있습니다 인간의 다운 증후군의 NSCs의 병리 학적 메커니즘을 식별에 초점을했습니다. 나도 생체내에이나 체외 마우스 모델은 인간의 염색체 21에 위치한 유전자의 동일한 레퍼토리를 복제할 수 없습니다. 여기 중단 인간의 태아 cortices의 증후군의 NSCs 다운 격리와 문화에서 성장하는 간단하고 신뢰할 수있는 메서드를 사용합니다. 방법론이 제한 해부의 명소, 셀 정렬은 도금 인간 NSCs의 passaging과 조직, 절개를 수확의 특정 측면을 제공합니다. 우리는 또한 더 선택적 세포 subtypes에 인간 NSCs의 차별을 유도하는 몇 가지 기본적인 프로토콜을 제공합니다.

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Generation of Neural Stem Cells from Discarded Human Fetal Cortical Tissue

폐기 인간의 태아 대뇌 피질의 조직에서 신경 줄기 세포의 격리와 문화에 대한 간단하고 신뢰할 수있는 방법을 설명합니다. 알려진 인간의 신경 장애에서 파생된 문화가 같은 약리 효능을 평가하기위한 플랫폼을 제공뿐만 아니라, 병적인 세포 및 분자 공정의 특성에 사용될 수 있습니다.

폐기 인간 태아 두피 조직에서 신경 줄기 세포의 생성

Neural stem cells (NSCs) reside along the ventricular zone neuroepithelium during the development of the cortical plate. These early progenitors ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Neural-Colony Forming Cell Assay: An Assay To Discriminate Bona Fide Neural Stem Cells from Neural Progenitor Cells

세포 어세를 형성 신경 콜로니 : 신경 전구 세포로부터 타고난 신경 줄기 세포를 차별 어세이

The neurosphere assay (NSA) is one of the most frequently used methods to isolate, expand and also calculate the frequency of neural stem cells (NSCs). ...

연구

신경과학

Isolation and Culture of Neural Crest Stem Cells from Human Hair Follicles

인간의 모공에서 신경 크레스트 줄기 세포의 분리와 문화

Hair follicles undergo lifelong growth and hair cycle is a well-controlled process involving stem cell proliferation and quiescence. Hair bulge is a ...

The Neuroblast Assay: An Assay for the Generation and Enrichment of Neuronal Progenitor Cells from Differentiating Neural Stem Cell Progeny Using Flow Cytometry

Neuroblast 분석 : 유동세포계측법을 사용하여 차별화 신경 줄기 세포에서 자손의 연결 전구 세포의 생성과 강화에 대한 분석

Neural stem cells (NSCs) can be isolated and expanded in large-scale, using the neurosphere assay and differentiated into the three major cell types of ...

Isolation and Culture of Neural Crest Cells from Embryonic Murine Neural Tube

배아 Murine 신경 튜브에서 신경 크레스트 세포의 분리 및 문화

The embryonic neural crest (NC) is a multipotent progenitor population that originates at the dorsal aspect of the neural tube, undergoes an epithelial to ...

Progenitor-derived Oligodendrocyte Culture System from Human Fetal Brain

인간 태아 뇌에서 전구 - 파생 Oligodendrocyte 문화 시스템

Differentiation of human neural progenitors into neuronal and glial cell types offers a model to study and compare molecular regulation of neural cell ...

A cGMP-applicable Expansion Method for Aggregates of Human Neural Stem and Progenitor Cells Derived From Pluripotent Stem Cells or Fetal Brain Tissue

인간의 신경의 집계의 cGMP-해당 확장 방법은 줄기 및 전구 세포는 다 능성 줄기 세포 또는 태아 뇌 조직에서 파생 된

A cell expansion technique to amass large numbers of cells from a single specimen for research experiments and clinical trials would greatly benefit the ...

Feeder-free Derivation of Neural Crest Progenitor Cells from Human Pluripotent Stem Cells

인간 다 능성에서 신경 능선 세포의 전구 세포의 공급이없는 유도는 줄기 세포

Human pluripotent stem cells (hPSCs) have great potential for studying human embryonic development, for modeling human diseases in the dish and as a ...

Modeling Astrocytoma Pathogenesis In Vitro and In Vivo Using Cortical Astrocytes or Neural Stem Cells from Conditional, Genetically Engineered Mice

Modeling Astrocytoma Pathogenesis In Vitro and In Vivo Using Cortical Astrocytes or Neural Stem Cells from Conditional, Genetically Engineered Mice

모델링 성상 세포종 병인<em&gt; 체외</em&gt;와<em&gt; 생체</em&gt; 대뇌 피질의 성상이나 조건, 유전자 조작 쥐에서 신경 줄기 세포를 사용하여

Current astrocytoma models are limited in their ability to define the roles of oncogenic mutations in specific brain cell types during disease ...

Isolation and Culture of Adult Neural Stem Cells from the Mouse Subcallosal Zone

마우스 뇌량 밑 영역에서의 분리 및 성인 신경 줄기 세포의 문화

Adult neural stem cells (aNSCs) can be used for the regeneration of damaged brain tissue. NSCs have the potential for differentiation and proliferation ...

Development of a Refined Protocol for Trans-scleral Subretinal Transplantation of Human Retinal Pigment Epithelial Cells into Rat Eyes

쥐의 눈으로 인간 망막 안료 상피 세포의 트랜스 scleral Subretinal 이식에 대 한 세련 된 프로토콜의 개발

Degenerative retinal diseases such as age-related macular degeneration (AMD) are the leading cause of irreversible vision loss worldwide. AMD is ...