Name: polarized translocation of fluorescent proteins in xenopus ectoderm in response to wnt signaling
Uploaded: 2011-05-26T15:00:00
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Sokol प्रयोगशाला में अनुसंधान स्वास्थ्य के राष्ट्रीय institues द्वारा प्रायोजित है.

1. Xenopus अंडे के इन विट्रो में निषेचन <ol><li> महिला मेंढ़क से अंडे कि मानव chorionic gonadotropin (400 इकाई / मेंढक) 12 घंटे के साथ प्रयोग से पहले अंतःक्षिप्त थे प्राप्त करते हैं. </li><li> 1 एक्स मार्क संशोधित घंटी समाधान (एमएमआर) ...

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	<li>Gurdon, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Embryonic+induction+---+molecular+aspects.">Embryonic induction --- molecular aspects.</a> Development. 99, 285-306 (1987).</li><li>Moody, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Principles of Developmental Genetics. , (2007).</li><li>Clevers, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Wnt/beta-catenin+signaling+in+development+and+disease.">Wnt/beta-catenin signaling in development and disease.</a> Cell. 127, 469-480 (2006).</li><li>Klaus, A., Birchmeier, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Wnt+signalling+and+its+impact+on+development+and+cancer.">Wnt signalling and its impact on development and cancer.</a> Nat Rev Cancer. 8, 387-398 (2008).</li><li>Gordon, M. D., Nusse, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Wnt+signaling:+multiple+pathways,+multiple+receptors,+and+multiple+transcription+factors.">Wnt signaling: multiple pathways, multiple receptors, and multiple transcription factors.</a> J Biol Chem. 281, 22429-22433 (2006).</li><li>Schwarz-Romond, T., Asbrand, C., Bakkers, J., Kuhl, M., Schaeffer, H. J., Huelsken, J., Behrens, J., Hammerschmidt, M., Birchmeier, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+ankyrin+repeat+protein+Diversin+recruits+Casein+kinase+Iepsilon+to+the+beta-catenin+degradation+complex+and+acts+in+both+canonical+Wnt+and+Wnt/JNK+signaling.">The ankyrin repeat protein Diversin recruits Casein kinase Iepsilon to the beta-catenin degradation complex and acts in both canonical Wnt and Wnt/JNK signaling.</a> Genes Dev. 16, 2073-2084 (2002).</li><li>Moeller, H., Jenny, A., Schaeffer, H. J., Schwarz-Romond, T., Mlodzik, M., Hammerschmidt, M., Birchmeier, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diversin+regulates+heart+formation+and+gastrulation+movements+in+development.">Diversin regulates heart formation and gastrulation movements in development.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 103, 15900-15905 (2006).</li><li>Itoh, K., Jenny, A., Mlodzik, M., Sokol, S. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Centrosomal+localization+of+Diversin+and+its+relevance+to+Wnt+signaling.">Centrosomal localization of Diversin and its relevance to Wnt signaling.</a> J. Cell Sci. 122, 3791-3798 (2009).</li><li>Itoh, K., Jacob, J., Sokol, Y. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+role+for+Xenopus+Frizzled+8+in+dorsal+development.">A role for Xenopus Frizzled 8 in dorsal development.</a> Mech Dev. 74, 145-157 (1998).</li><li>Newport, J., Kirschner, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+major+developmental+transition+in+early+Xenopus+embryos:+I.+characterization+and+timing+of+cellular+changes+at+the+midblastula+stage.">A major developmental transition in early Xenopus embryos: I. characterization and timing of cellular changes at the midblastula stage.</a> Cell. 30, 675-686 (1982).</li><li>Itoh, K., Brott, B. K., Bae, G. U., Ratcliffe, M. J., Sokol, S. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nuclear+localization+is+required+for+Dishevelled+function+in+Wnt/beta-catenin+signaling.">Nuclear localization is required for Dishevelled function in Wnt/beta-catenin signaling.</a> J Biol. 4, 3-3 (2005).</li></ol>

हम ऊपर प्रोटोकॉल का इस्तेमाल किया है Diversin के subcellular स्थानीयकरण विशेषताएँ है. जानवर पोल explants में, Diversin - आरएफपी नाभिक को बगल में खोजा गया था और जी - ट्यूबिलिन, cryosections (चित्रा 1) में एक centrosomal मार्कर के साथ colocalized. एक बार एक ?...

polarized translocation of fluorescent proteins in xenopus ectoderm in response to wnt signaling

सेल polarity यूकेरियोटिक कोशिकाओं है कि गतिशील रूप से भ्रूण विकास 1, 2 के दौरान दोनों आंतरिक और बाह्य कारकों द्वारा विनियमित की एक मौलिक संपत्ति है. संकेत इस विनियमन में शामिल रास्ते में से एक Wnt मार्ग है, जो embryogenesis दौरान कई बार प्रयोग किया जाता है और मानव रोग 3, 4, 5 के लिए महत्वपूर्ण है. इस मार्ग के एकाधिक आणविक घटकों coordinately एक spatially सीमित ढंग से संकेत विनियमित, लेकिन अंतर्निहित तंत्र को पूरी तरह समझ नहीं रहे हैं Xenopus भ्रूण उपकला कोशिकाओं विभिन्न संकेत प्रोटीन की subcellular स्थानीयकरण का अध्ययन करने के लिए एक उत्कृष्ट सिस्टम है.. प्रतिदीप्त संलयन प्रोटीन शाही सेना microinjection द्वारा Xenopus भ्रूण में व्यक्त कर रहे हैं, बहिर्जनस्तरीय explants तैयार कर रहे हैं और प्रोटीन स्थानीयकरण epifluorescence द्वारा मूल्यांकन किया है. हम इस प्रयोगात्मक प्रोटोकॉल में वर्णन कैसे Diversin है, एक cytoplasmic प्रोटीन है कि संकेत और सेल polarity के दृढ़ संकल्प 6, 7 में फंसा दिया गया subcellular स्थानीयकरण Xenopus बहिर्जनस्तरीय कोशिकाओं में visualized Wnt संकेत पारगमन 8 अध्ययन है . एक Wnt ligand या एक Frizzled रिसेप्टर के Coexpression लाल फ्लोरोसेंट प्रोटीन, आरएफपी के साथ जुड़े हुए Diversin का वितरण बदल, और यह एक polarized 8 फैशन, 9 में कोशिका झिल्ली के लिए रंगरूटों. यह पूर्व vivo प्रोटोकॉल संवर्धित स्तनधारी कोशिकाओं, जिसमें संकेत के स्थानिक नियंत्रण बरकरार ऊतक के उस से अलग और अधिक विश्लेषण करने के लिए मुश्किल है की इन विट्रो अध्ययन में एक के लिए उपयोगी इसके अतिरिक्त होना चाहिए .

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Polarized Translocation of Fluorescent Proteins in Xenopus Ectoderm in Response to Wnt Signaling

Xenopus भ्रूण बाह्य त्वक स्तर सेल polarity के अध्ययन के लिए एक आकर्षक मॉडल बन गया है. एक परख वर्णित है, जिसमें फ्लोरोसेंट प्रोटीन के subcellular वितरण बाह्य त्वक स्तर कोशिकाओं में मूल्यांकन किया है. इस प्रोटोकॉल पता संकेत के स्थानिक नियंत्रण से संबंधित प्रश्नों में मदद मिलेगी.

फ्लोरोसेंट प्रोटीन के Polarized में स्थानान्तरण Xenopus WNT सिगनल उत्तर में बाह्य त्वक स्तर

Cell polarity is a fundamental property of eukaryotic cells that is dynamically regulated by both intrinsic and extrinsic factors during embryonic ...

Research

JoVE Journal

Biology

Polarized Translocation of Fluorescent Proteins in Xenopus Ectoderm in Response to Wnt Signaling

Quantification of &gamma;H2AX Foci in Response to Ionising Radiation

Quantification of ÃƒÅ½Ã‚Â³H2AX Foci in Response to Ionising Radiation

ΓH2AX foci के Ionising विकिरण करने के लिए प्रत्युत्तर में मात्रा का ठहराव

DNA double-strand breaks (DSBs), which are induced by either endogenous metabolic processes or by exogenous sources, are one of the most critical DNA ...

Photoconversion of Purified Fluorescent Proteins and Dual-probe Optical Highlighting in Live Cells

लाइव कक्ष में प्रतिदीप्त प्रोटीन और दोहरी जांच ऑप्टिकल प्रकाश डालते शुद्ध के Photoconversion

Photoconvertible fluorescent proteins (pc-FPs) are a class of fluorescent proteins with "optical highlighter" capability, meaning that the color of ...

Patch Clamp and Perfusion Techniques for Studying Ion Channels Expressed in Xenopus oocytes

Patch Clamp and Perfusion Techniques for Studying Ion Channels Expressed in Xenopus oocytes

पैच और आयन चैनल के अध्ययन के लिए दबाना छिड़काव तकनीक में व्यक्त Xenopus Oocytes

The protocol presented here is designed to study the activation of the large conductance, voltage- and Ca2+-activated K+ (BK) channels. The protocol may ...

Rapid Genetic Analysis of Epithelial-Mesenchymal Signaling During Hair Regeneration

बाल उत्थान के दौरान तेजी से उपकला-mesenchymal संकेतन की आनुवांशिक विश्लेषण

Hair follicle morphogenesis, a complex process requiring interaction between epithelia-derived keratinocytes and the underlying mesenchyme, is an ...

Intravital Microscopy for Imaging Subcellular Structures in Live Mice Expressing Fluorescent Proteins

फ्लोरोसेंट प्रोटीन व्यक्त करते रहते चूहों में इमेजिंग subcellular संरचनाओं के लिए intravital माइक्रोस्कोपी

Here we describe a procedure to image subcellular structures in live rodents that is based on the use of confocal intravital microscopy. As a model organ, ...

Facial Transplants in Xenopus laevis Embryos

Facial Transplants in Xenopus laevis Embryos

में चेहरे प्रत्यारोपण<em&gt; Xenopus laevis</em&gt; भ्रूण

Craniofacial birth defects occur in 1 out of every 700 live births, but etiology is rarely known due to limited understanding of craniofacial development. ...

The Xenopus Oocyte Cut-open Vaseline Gap Voltage-clamp Technique With Fluorometry

The Xenopus Oocyte Cut-open Vaseline Gap Voltage-clamp Technique With Fluorometry

<em&gt; Xenopus</emFluorometry साथ&gt; Oocyte कट खुला वैसलीन गैप वोल्टेज दबाना तकनीक

The cut-open oocyte Vaseline gap (COVG) voltage clamp technique allows for analysis of electrophysiological and kinetic properties of heterologous ion ...

Reconstitution Of &#946;-catenin Degradation In Xenopus Egg Extract

Reconstitution Of ÃƒÅ½Ã‚Â²-catenin Degradation In Xenopus Egg Extract

Β-catenin गिरावट में के पुनर्गठन<em&gt; Xenopus</em&gt; अंडा निकालें

Xenopus laevis egg extract is a well-characterized, robust system for studying the biochemistry of diverse cellular processes. Xenopus egg extract has ...

Quantification of Orofacial Phenotypes in Xenopus

Quantification of Orofacial Phenotypes in Xenopus

Orofacial phenotypes की मात्रा में<em&gt; Xenopus</em

Xenopus has become an important tool for dissecting the mechanisms governing craniofacial development and defects. A method to quantify orofacial ...

Measuring Glutathione-induced Feeding Response in Hydra

हाइड्रा में glutathione प्रेरित दूध पिलाने की प्रतिक्रिया को मापने

Hydra is among the most primitive organisms possessing a nervous system and chemosensation for detecting reduced glutathione (GSH) for capturing the prey. ...